二苯乙烯苷对谷氨酸致原代培养大鼠海马神经元损伤的保护作用

目的观察二苯乙烯苷对谷氨酸 (Glu)致原代培养大鼠海马神经元损伤的保护作用。方法原代培养大鼠海马神经元细胞与不同浓度的二苯乙烯苷 (5— 10 0 μmol/L)共同孵育 2 4h ,加入工具药Glu(终浓度为 5 0 0 μmol/L)孵育。四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞存活率 ;乳酸脱氢酶 (LDH )漏出率法测定细胞膜损伤 ;使用荧光指示试剂Fluo 3 /AM负载后 ,在激光共聚焦显微镜下观察不同细胞内Ca2 + 的荧光强度。结果不同浓度的二苯乙烯苷与细胞孵育 2 4h后可明显拮抗Glu介导的神经毒性作用 ,细胞存活率明显增加 ,LDH漏出减少 ,细胞死亡率降低 ,并呈明显剂量依赖关系 ;细胞内的Ca2 + 荧光强度降低。结论二苯乙烯苷拮抗Glu诱导的神经毒作用的机制可能为选择性抑制大剂量Glu引起的Ca2 + 浓度异常升高。

步长倍通对血管性痴呆大鼠脑组织丙二醛、谷氨酸及GSH-Px的影响

目的研究步长倍通注射液对血管性痴呆(VD)大鼠的保护作用及其机制。方法成年SD大鼠随机分为假手术组12只;单纯手术组10只;术后步长倍通治疗组11只。采用永久性结扎双侧颈总动脉,建立大鼠VD模型,造模成功5w后用Morris水迷宫测试大鼠学习记忆能力,并测定脑组织丙二醛(MDA)、谷氨酸(Glu)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力。结果水迷宫实验中定位航行试验:单纯手术组较假手术组、步长倍通组逃避潜伏期明显延长(P<0.05);空间探索试验:单纯手术组较假手术组显著缩短(P<0.01)。单纯手术组脑组织MDA、Glu含量均较假手术组、术后治疗组明显升高(P<0.01),单纯手术组脑组织GSH-Px活力较假手术组、术后治疗组明显下降(P<0.01)。结论步长倍通可能通过抑制脂质过氧化反应及兴奋性氨基酸的释放、保护酶活性,达到对VD的一定治疗作用。

尼莫地平对杏仁核点燃鼠模型脑内谷氨酸及海马细胞单位放电的影响

目的：观察尼莫地平对杏仁核电点燃癫癎鼠模型脑内谷氨酸（glutamate，Glu）表达及海马单位细胞放电（unit cell discharge，UCD）的影响。方法：选择健康雄性Wistar大鼠30只制作动物模型，造模成功后随机分为单纯对照组、癫癎模型组和尼莫地平组，各组10只大鼠，均进行海马UCD的记录，然后分别取脑组织，采用免疫组化的方法检测大鼠脑内Glu的表达并进行方差检验分析。结果：①癫癎模型组Glu灰度值在杏仁核、海马、颞叶分别为（92．5582±13．9345）、（94．0579±12．8117）和（100．5922±16．1048），与对照组的相应值（113，1562±36．7147）、（124．4130±29．6738）和（126．5704±35.8527）比较有明显降低（注：灰度值越高Glu的表达越少;灰度值越低Glu的表达越多）（P〈0．05）；尼莫地平组中，Glu灰度值与模型组的比较无明显差异（P〉0．05），②海马UCD频率癫癎模型组（164．55±74．708）较单纯对照组（70．925±44．125）明显增快，尼莫地平组（82．175±35．046）与模型组比较，海马UCD频率明显降低。差异有显著意义（P〈0．05）。结论：尼莫地平不能抑制Glu的表达，但可抑制海马UCD频率。

辣木树不同部位谷氨酸含量的比较

用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)检测辣木树不同部位谷氨酸(glutamic acid,Glu)的含量,结果表明:每100 g样品中,辣木根、果皮、果实、花、籽、叶与茎中的Glu含量分别为113.11、106.44、105.11、89.17、54.86、48.28 mg与0.00 mg。由此可见,辣木树中富含Glu,且幼嫩部位中含量较高,该研究可为辣木产品的质量评价和产品开发提供理论参考。

谷氨酸促进运动疲劳恢复研究进展

谷氨酸作为人体非必须氨基酸之一,起到调控机体基本能量代谢作用,同时在机体运动疲劳恢复中也发挥重要作用。谷氨酸促进运动疲劳恢复机制包括:清除运动过程产生的代谢废物及有毒物质、作为能源替代物延缓能量物质耗竭、调控神经递质的释放及其活性。通过研究发现,运动疲劳可对谷氨酸及其蛋白表达产生不同程度影响,对运动能力水平具有显著作用。据此可断,适量补充谷氨酸及其分支结构可作为运动疲劳恢复的有效手段,且具有良好的应用前景。

9-芴甲基氯甲酸酯柱前衍生反相高效液相色谱法测定大鼠脑内海马组织中谷氨酸与γ-氨基丁酸含量

目的:建立并改良柱前衍生反相高效液相色谱法(RP-HPLC),测定大鼠脑内海马组织中氨基酸类神经递质,研究戊四唑(PTZ)致病大鼠脑内海马组织中谷氨酸(GLu)及γ-氨基丁酸(GABA)的含量变化。方法:通过PTZ皮下注射SD大鼠进行癫痫动物造模,将大鼠随机分为正常对照组(皮下注射生理盐水)、癫痫组(皮下注射PTZ),样品经甲醇及乙腈处理后,采用RedClassical AQ-C18色谱柱(5μm,250 mm*4.6 mm),以9-芴甲基氯甲酸酯(FMOC-CL)为柱前衍生剂,流动相A:50 mmol/L乙酸钠溶液(PH4.8)410 mL+去离子水85 mL+四氢呋喃5 mL;流动相B:乙腈500 mL。流速:1.0mL/min,在柱温30~32℃下采用梯度洗脱程序进行洗脱,检测波长265nm。结果:GLu和GABA在30min内分离完全,在质量浓度为20~200μg/mL范围内有良好的线性关系,线性相关系数均大于0.9995;两种氨基酸加标回收率均大于100%,加标回收率的RSD均小于2%。结论:改良后的FMOC-CL柱前衍生反相高效液相色谱法稳定、简单、反应快速、灵敏度高、特异性及重复性好,能有效分离并检测大鼠脑内海马组织中的GLu与GABA。

谷氨酸促进运动疲劳恢复研究进展

谷氨酸作为人体非必须氨基酸之一，起到调控机体基本能量代谢作用，同时在机体运动疲劳恢复中也发挥重要作用。谷氨酸促进运动疲劳恢复机制包括：清除运动过程产生的代谢废物及有毒物质、作为能源替代物延缓能量物质耗竭、调控神经递质的释放及其活性。通过研究发现，运动疲劳可对谷氨酸及其蛋白表达产生不同程度影响，对运动能力水平具有显著作用。据此可断，适量补充谷氨酸及其分支结构可作为运动疲劳恢复的有效手段，且具有良好的应用前景。

谷氨酸及其受体在局灶性皮质发育不良模型大鼠大脑皮质中的表达

目的观察液氮损伤诱发局灶性皮质发育不良模型大鼠大脑皮质中谷氨酸(Glu)及N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDAR1)、谷氨酸受体2(GluR2)的表达,探讨其表达情况与癫痫发作的关系及可能的发病机制。方法纳入36只大鼠,随机分成正常对照组、假手术组及手术组,创建局灶性皮质发育不良大鼠模型,HE染色,免疫组织化学方法(用SABC法)检测微脑回神经递质及受体变化,使用SAS 8.0统计学软件进行数据分析。结果手术组经液氮铜针处理,在大鼠损伤处形成微脑回畸形,畸形处皮质层Glu及NMDAR1、GluR2免疫阳性着色神经元表达较正常组及假手术组有所增多,光密度值比较差异无统计学意义(P>0.05),然而在微脑回皮质周围见到Glu及NMDAR1、GluR2免疫阳性着色神经元表达较正常组及假手术组有显著增加,光密度值比较差异亦有统计学意义(P<0.05),其他海马及杏仁核等脑区没有明显改变。结论微脑回畸形周围兴奋性神经递质Glu及其受体的增加可能是导致癫痫发生的机制之一。

电针对大鼠神经病理痛SNI模型脊髓背角传入神经末梢Glu的影响

目的观察电针对大鼠神经病理痛SNI(spared nerve injury)模型机械痛阈、脊髓背角微透析液中Glu含量,以及脊髓背角传入神经Glu阳性终末的影响,探讨电针镇痛的机制。方法 SD大鼠随机分成对照、模型、和电针组,每组10只。制备大鼠SNI模型。于造模前一天、造模后7 d和14 d,测定大鼠损伤侧机械痛阈;d 8开始,电针组2 Hz,1 mA,30min电针环跳和委中穴进行干预,1次/日,共7 d。d14用微透析收集脊髓背角游离Glu,用HPLC(OPA柱前衍生)测定Glu含量(μmol/μL);免疫组化法观察脊髓L4、L5节段背角Glu阳性终末的平均光密度。结果电针可显著显著扭转SNI模型大鼠机械痛阈下降(P<0.01);经电针干预显著减少因SNI引起的脊髓透析液中高Glu(P<0.01);电针组脊髓背角Glu阳性终末平均光密度显著高于模型组(P<0.01),表明电针干预可显著抑制Glu的异常释放。结论电针对神经病理痛SNI模型有显著镇痛作用,该作用与电针显著抑制脊髓背角传入神经末梢释放Glu密切相关。

乙体氯氰菊酯致小鼠脑组织Glu-Gln环路紊乱的实验研究

将健康成年小鼠按体重随机分成1个对照组及3个染毒组,每组10只,雌雄各半。染毒组小鼠以灌胃方式分别给予20、40、80 mg/kg剂量的乙体氯氰菊酯。以食用色拉油稀释受试物质,对照组给予等量色拉油。3 h后处死小鼠,采用分光光度法检测各组小鼠脑组织谷氨酰胺酶(PAG)和谷氨酰胺合成酶(GS)活性。结果80 mg/kg剂量组小鼠于染毒后2 h陆续出现明显的兴奋症状,其中2只雌鼠出现濒死状态;40 mg/kg剂量组个别小鼠于染毒后2 h出现轻微兴奋症状;20 mg/kg剂量组小鼠在整个受试期间未见异常。各组小鼠脑组织PAG活性随染毒剂量的增加而递增,GS活性随染毒剂量的增加而逐渐降低,其中80 mg/kg剂量组小鼠脑组织PAG活性明显高于对照组(P<0.01),80、40 mg/kg剂量组小鼠脑组织GS活性明显低于对照组(分别为P<0.001、P<0.01)。提示乙体氯氰菊酯使小鼠脑组织谷氨酰胺合成酶活性降低、谷氨酰胺酶活性升高。

补肾强肝活血法对缺血再灌注大鼠脑损伤颅内Glu、SOD、MDA的影响

目的:探讨补肾强肝活血法对缺血再灌注大鼠脑组织谷氨酸(glutamate,Glu)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)的影响。方法:采用线栓法复制大脑中动脉阻塞(MCAO)再灌注大鼠模型,以尼莫地平为对照,用补肾强肝活血法经验方"回春偏瘫方"治疗14天后观察其对缺血再灌注大鼠脑组织Glu、SOD和MDA含量的影响。结果:与假手术组比较,模型组大鼠脑组织出现明显Glu和MDA含量升高(P<0.05),SOD含量降低(P<0.05);与模型组比较,西药组和回春偏瘫方中、高剂量组脑组织Glu有不同程度的下降,SOD均有不同程度的上升(P<0.05),但从MDA水平看,西药组和回春偏瘫方中、高剂量组有明显下降(P<0.05),但回春偏瘫方低剂量组与模型组比较没有明显差别(P>0.05)。结论:补肾强肝活血法可通过降低Glu和MDA水平,提高SOD含量,减轻兴奋性谷氨酸所致细胞毒性和自由基损伤作用,可有效减轻缺血性损伤。

重复经颅磁刺激对帕金森睡眠障碍患者血浆Glu和GABA水平的影响

目的研究重复经颅磁刺激(r TMS)对帕金森睡眠障碍患者血浆谷氨酸(Glu)和γ氨基丁酸(GABA)水平的影响。方法方便选取该院2016年8月—2018年2月收治的84例帕金森病合并睡眠障碍患者作为研究对象,随机分两组,每组42例。A组采用r TMS 5 Hz高频刺激患者双侧额叶背外侧区,B组采用假刺激治疗相同区域,疗程2周。记录治疗前后两组患者的帕金森病睡眠量表(PDSS)、匹兹堡睡眠质量指数评分(PSQI)、血浆Glu和GABA水平。结果治疗前,两组患者PDSS、PSQI、Glu、GABA等水平差异有统计学意义(t=0.645、0.762、0.863、0.643,P>0.05); A组患者治疗后PDSS评分为(104.73±11.39)分,血浆Glu含量为(52.46±10.58)mol/L,GABA含量为(268.43±19.52)mol/L,与治疗前相比明显升高(t=2.835、3.147、3.612,P<0.05),PSQI评分为(7.05±1.0),较治疗前明显降低(t=2.641,P<0.05);B组治疗后患者PDSS评分为(84.25±10.56)分,PSQI评分为(9.83±1.1)分,Glu含量为(40.86±11.52)mol/L,GABA含量为(205.36±15.48)mol/L,较治疗前差异无统计学意义(t=0.842、0.881、0.774、0.725,P>0.05)。治疗后,A组各项指标与B组同时间点的指标相比,差异有统计学意义(t=2.724、2.128、3.259、3.219,P<0.05)。结论 rTMS 5 Hz高频刺激帕金森睡眠障碍患者的双侧额叶背外侧区能升高血浆Glu和GABA水平,改善患者的睡眠障碍。

丙烯酰胺对人神经母细胞瘤NB-1细胞一氧化氮、一氧化氮合酶、谷氨酸水平的影响

为研究丙烯酰胺(ACR)对NB-1细胞一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)及谷氨酸(Glu)表达水平的影响,将NB-1细胞诱导分化成熟后,用不同浓度ACR(0、40、80、120μg/ml)对NB-1细胞染毒48 h,检测细胞内外NO、NOS及Glu的含量。结果显示,ACR可以降低和减少细胞内NOS活性和NO分泌,细胞内、外Glu含量降低,其机制可能与ACR抑制Ca^(2+)/CaM的合成有关。

低温条件下钼对冬小麦叶绿素合成前体的影响

目的探讨低温缺钼条件下冬小麦叶绿素合成受阻位点。方法采用土培试验、微区试验、营养液培养试验,设不施钼(CK,土壤有效钼0.112mg·kg-1)和施钼(+Mo,施钼水平为0.13mg·kg-1)处理,及δ-氨基酮戊酸(ALA)转化抑制剂乙酰丙酸(LA)处理,研究了缺钼对冬小麦品种叶绿素几种重要合成前体的影响。结果低温时叶绿素a与叶绿素b的比值(Chla/Chlb)上升,而不施钼时比值不变,表明低温抑制Chla向Chlb的转化,而缺钼不影响它们的转化。叶绿素合成前体原叶绿素酸(酯)(Pchl)、镁原卟啉Ⅸ(Mg-ProtoⅨ)、原卟啉Ⅸ(protoⅨ)、尿卟啉原Ⅲ(UroⅢ)不施钼时显著下降,其中UroⅢ急剧下降,ALA、谷氨酸(Glu)显著累积,表明从Glu或ALA向UroⅢ的转化可能受阻;加入ALA转化抑制剂LA后,ALA含量逆转为不施钼小于施钼,表明缺钼条件下ALA向UroⅢ的转化受阻。结论缺钼影响ALA向UroⅢ的转化,导致叶绿素合成受阻,含量下降。

雏菊叶龙胆酮对缺血性脑损伤保护作用的实验研究

[目的]研究雏菊叶龙胆酮(Bellidifolin)对小鼠永久性完全性全脑缺血性脑损伤和大鼠弥散性不完全性全脑缺血性脑损伤的保护作用,并探讨其作用机制。[方法]采用两种方法制备两种动物全脑缺血模型,观察不同剂量Bellidifolin对小鼠断头后张口喘息时间;对大鼠脑缺血后的脑指数,脑SOD(超氧化物歧化酶)活力,脑MDA(丙二醛)含量及脑兴奋性氨基酸-Glu(谷氨酸)和抑制性氨基酸-GABA(γ-氨基丁酸)含量,脑细胞病理组织学变化的影响。[结果](1)与模型组相比:Bellidifolin 50 mg.kg-1、75 mg.kg-1和100 mg.kg-1组分别延长小鼠断头后张口喘息时间7.78%(P>0.05),13.34%(P<0.01)和10.73%(P<0.05)。(2)与假手术组相比,大鼠模型组脑指数升高14.0%(P<0.01),MDA含量升高80.54%(P<0.01),SOD活力下降25.37%(P<0.01),Glu含量升高15.91%(P<0.01),GABA含量升高26.83%(P<0.01)。(3)与大鼠模型组相比,Bellidifolin 25 mg.kg-1、50mg.kg-1、75 mg.kg-1组分别降低脑指数1.75%(P>0.05)、8.77%(P<0.01)、10.53%(P<0.01),降低MDA含量5.31%(P>0.05)、33.46%(P<0.01)、10.93%(P>0.05),增加SOD活力1.92%(P>0.05)、15.41%(P<0.05)、19.46%(P<0.01),降低Glu含量3.92%(P>0.05)、9.80%(P<0.01)、11.76%(P<0.01),降低GABA含量3.85%(P>0.05)、11.54%(P<0.01)、13.46%(P<0.01)。[结论]Bellidifolin具有脑保护作用,其脑保护作用可能与其抗氧化作用和抗兴奋毒性损伤作用有关。

醒脑静注射液对酒精性昏迷大鼠外侧下丘脑区(LHA)谷氨酸和γ-氨基丁酸的影响

目的:研究醒脑静注射液对酒精性昏迷大鼠外侧下丘脑区(LHA)谷氨酸和γ-氨基丁酸的影响。方法:腹腔注射乙醇制作酒精性昏迷大鼠模型,20min后侧脑室给药,微透析技术收集透析样品(每30 min收集一次),OPA柱前衍生化法处理样品,高效液相色谱(Synergi Hydro-RP C18,150 mm×4.6 mm,4μm),荧光检测脑脊液中谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)的含量。结果:与模型对照组比较,醒脑静注射液0.34 mg/kg、0.68 mg/kg、1.37 mg/kg外侧下丘脑区(LHA)Glu、GABA恢复到正常水平的时间更短。结论:醒脑静注射液能够通过调节酒精性昏迷大鼠外侧下丘脑区(LHA)Glu、GABA的含量,使其恢复到正常水平从而促进觉醒。

清心开窍方含药脑脊液对谷氨酸致PC12细胞损伤的保护机制

目的:从细胞水平研究清心开窍方含药脑脊液对谷氨酸(glutamate,Glu)损伤的PC12细胞的保护作用,为该方剂的临床应用提供依据。方法:SD大鼠灌胃给予清心开窍方水煎液(7.9 g.kg-1),每天分2次灌服,连续3.5 d,以制备清心开窍方含药脑脊液。PC细胞分为正常组、模型组、尼莫地平组、10%正常脑脊液组、10%含药脑脊液组、20%正常脑脊液组、20%含药脑脊液组,除正常组外,其余各组采用PC12细胞和终浓度20 mmol.L-1的Glu共培养,造成神经细胞损伤模型。除模型组和正常组外,其余各组分别采用尼莫地平、正常脑脊液、10%和20%含药脑脊液进行干预,以RT-PCR方法检测各组Bax,Bcl-2,Caspase-3 mRNA表达水平,MTT法检测PC12细胞活性。结果:清心开窍方含药脑脊液组PC12细胞活性明显高于模型组,Bax,Caspase-3 mRNA表达水平降低,Bcl-2 mRNA表达增高,与模型组比较差异显著(P<0.01),20%含药脑脊液组疗效优于10%含药脑脊液组(P<0.01)。结论:清心开窍方对Glu损伤的PC12细胞有明显的保护作用。

麻黄-桂枝药对中桂枝对麻黄碱诱导兴奋性变化的抑制作用

目的采用药动学-药效学(PK-PD)模型拟合法考察麻黄-桂枝药对配伍中桂枝对麻黄碱诱导的兴奋性变化的抑制作用。方法 SD大鼠分别灌胃给予生理盐水、麻黄碱、麻黄和麻黄-桂枝药对(3∶2)水煎液。借助微透析采样技术,以麻黄碱在脑脊液中的质量浓度变化为PK观察指标,以氨基酸类神经递质谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)的动态变化为PD指标。结果最佳药效动力学模型为Sigmoid-Emax模型。各组Glu的药物浓度-效应(E-C)曲线均呈顺时针环,各组GABA的E-C曲线均呈逆时针环。结论麻黄碱易于产生耐受性,桂枝可以抑制麻黄碱引起的兴奋性变化。

慢性汞中毒大鼠海马立体定向脑电图特征与谷氨酸含量变化的相关性

为探讨慢性汞中毒大鼠海马立体定向脑电图(SEEG)特征与谷氨酸(Glu)含量变化在中枢神经损伤机制的相关性,将40只Wistar大鼠随机分为对照组及氯化汞低、中、高剂量染毒组,染毒90 d。与对照组相比,低剂量染毒组(α+β)/(δ+θ)功率比值升高,中、高剂量染毒组降低。各染毒组Glu含量增加,谷氨酰胺合成酶(GS)活力下降,呈剂量相关性(P<0.05)。提示汞中毒所致谷氨酸-谷氨酰胺循环通路障碍引起的神经兴奋毒性是大鼠海马SEEG发生低频改变的可能分子机制。

通络Ⅳ号联合西药治疗脑梗死急性期随机平行对照研究

[目的]观察通络Ⅳ号联合西药治疗脑梗死急性期疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将80例住院患者按随机数字表法随机分为两组。对照组40例血栓通注射液175mg+生理盐水250mL,静滴,1次/d;胞二磷胆硷钠注射液0.5g+生理盐水250mL中,静滴,1次/d;阿司匹林肠溶片100mg,1次/d。颅内高压20%甘露醇125mL,静滴,1～4次/d,随颅内高血压缓解逐渐减量至停用;合并高血压、糖尿病、冠心病对症治疗。治疗组40例通络Ⅳ号[①黄芪30kg,杜仲15kg,当归12kg,桑寄生15kg,第1次10倍水量浸泡30min后煎煮2h,第2次8倍水量煎煮1.5h,合并2次煎液,30目筛网滤过,滤液浓缩至密度为1.02～1.08(80°C)备用。②水蛭1kg,丹参15kg研磨成细粉,过120目筛,拌匀。③将丹参、水蛭粉加入浓缩液中拌匀,泛成小丸,80℃干燥,分装6g/袋],6g/次,3次/d,必要时鼻饲给药。西药治疗同对照组。连续治疗14d为1疗程。观测神经功能缺损评分、谷氨酸(Glu)、S100β蛋白、不良反应。连续治疗1疗程,判定疗效。[结果]神经功能缺损评分均有改善(P<0.05),治疗组改善优于对照组(P<0.05);Glu变化均有改善(P<0.05),治疗组改善优于对照组(P<0.05);S100β蛋白变化均有改善(P<0.05),治疗组改善优于对照组(P<0.05)。[结论]通络Ⅳ号联合西药治疗脑梗死急性期,减少了缺血再灌注损伤,有较好的脑保护作用。