前庭性偏头痛患者丘脑谷氨酸-谷氨酰胺复合物代谢和相关因素分析

目的探索前庭性偏头痛(vestibular migraine,VM)患者双侧丘脑谷氨酸-谷氨酰胺复合物(glutamate/glutamine,Glx)代谢状态以及相关危险因素。材料与方法选取VM患者20例和健康对照者20例,用磁共振波谱(magnetic resonance spectroscopy,MRS)成像技术检测VM组和健康对照组的丘脑Glx含量。比较两组相关资料,分析Glx代谢差异及其危险因素。结果健康对照组(n=20)右侧丘脑Glx代谢值为2513.60±998.20,左侧丘脑Glx为2386.50±862.03。VM组(n=20)的右侧丘脑Glx代谢值为3712.00±980.80,左侧丘脑Glx为3350.40±944.20。t检验分析显示,与健康对照组相比,VM组左右侧丘脑Glx含量值差异均有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析显示病程、糖尿病、高血压病、睡眠障碍程度和头痛程度,与VM丘脑Glx含量相关性无统计学意义;Pearson相关分析结果显示,眩晕障碍量表(Dizziness Handicap Inventory,DHI)、焦虑自评量表(Self-rating Anxiety Scale,SAS)和抑郁自评量表(Self-rating Depression Scale,SDS)评分与VM丘脑Glx含量相关性无统计学意义,年龄与左侧丘脑Glx含量相关性有统计学意义(r=0.570,P<0.001)。结论VM患者双侧丘脑Glx含量值高于健康对照者。年龄是左侧丘脑Glx含量升高的相关影响因素。

针刺合谷穴后前额叶脑功能血氧水平依赖信号与神经递质谷氨酸及谷氨酰胺复合物的关系

目的观察针刺右侧合谷穴时前额叶血氧水平依赖(BOLD)信号、较正后谷氨酸谷氨酰胺复合物(GLx+)浓度及其相关性。方法对76名健康受试者采集静息及刺激[手针及纤毛机械刺激针(纤毛针)]合谷穴时BOLD功能MRI(fMRI)及磁共振波谱(MRS)数据,分析BOLD信号定量值与Glx^(+)浓度的相关性。结果手针较纤毛针针刺激发更多负激活,以前额叶内侧皮层(mPFC)及前扣带回(ACC)为著。2组BOLD信号定量值差异和Glx^(+)浓度差异均无统计学意义(P均>0.05)。BOLD定量信号与Glx^(+)浓度均无明显相关(P均>0.05),刺激前后Glx^(+)浓度差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论手针针刺合谷穴诱发边缘叶-旁边缘叶-新皮层网络负激活效应,手针和纤毛针刺激前后Glx^(+)浓度多无明显变化;BOLD信号定量值与Glx^(+)浓度无明显相关。

饲料中谷氨酸、谷氨酰胺和谷氨酸钠对鳜摄食、生长、胃肠及肝功能的影响

为研究谷氨酸(Glu)、谷氨酰胺(Gln)和谷氨酸钠(MSG)对鳜(Siniperca chuatsi)摄食、生长及胃肠功能的影响,以鳜基础饲料为对照组(CON),分别添加0.2%和0.4%的Glu、Gln和MSG,命名为Glu-0.2、Glu-0.4、Gln-0.2、Gln-0.4、MSG-0.2和MSG-0.4六个处理组,饲喂初始体质量为(17.60±0.53)g的鳜56d。同CON相比,结果显示:(1)三种添加剂均显著提高摄食量,其中MSG组最明显;(2)Glu-0.2和Gln-0.2的增重率、饲料转化率显著提高;(3)各添加组的胃蛋白酶活力和Glu-0.2、Glu-0.4、Gln-0.2的胃H+-K+-ATPase活力显著增强;(4)肠道中的胰蛋白酶活力在Glu-0.2显著提高,Na+-K+-ATPase活力在Gln-0.4无促进作用,其他组均显著增强;(5)Glu组、MSG组血浆中D-乳酸、内毒素含量和二胺氧化酶活性均显著降低;(6)Gln组血浆AST和ALT显著升高,且肝细胞肿胀、空泡化明显增多;(7)Glu组和MSG组血浆抗氧化能力显著升高,Gln组显著降低;(8)肠道微生物组成Glu-0.2的门水平软壁菌门(Tenericutes)、属水平索氏鲸杆菌属(Cetobacterium)丰度显著高于CON组。综上,Glu具有促进鳜胃酸分泌和胃肠消化吸收能力,增强肠道物理屏障,改善肠道菌群,促进生长;Gln能提升鳜胃肠功能,而机体抗氧化力、肝功能下降;MSG促进摄食和生长效果最佳,但对饲料转化无改善。

两阶段pH控制和碳氮源协同补加促进谷氨酸棒杆菌高产L-谷氨酰胺

为提高谷氨酸棒杆菌发酵产L-谷氨酰胺产量、糖酸转化率、生产强度等技术指标,该文通过响应面法优化了摇瓶发酵培养基中葡萄糖、(NH_(4))_(2)SO_(4)和玉米浆含量,并利用50 L发酵罐进行分批发酵,构建了菌体生长、底物消耗和产物生成动力学模型,进而在50 L发酵罐中采用两阶段控制pH策略,并通过补加葡萄糖和(NH_(4))_(2)SO_(4),协同控制发酵液中碳氮源浓度,促进菌体高效合成L-谷氨酰胺。结果表明,优化后发酵培养基中葡萄糖、(NH_(4))_(2)SO_(4)和玉米浆含量分别为167、61、31 g/L,摇瓶发酵L-谷氨酰胺产量达到38.13 g/L,较优化前提高了34.12%;50 L发酵罐分批发酵80 h后L-谷氨酰胺产量达42.06 g/L,糖酸转化率达到25.85%,生产强度为0.53 g/(L·h);在50 L发酵罐中基于两阶段pH控制的碳氮源协同补加策略,显著促进了谷氨酸棒杆菌高产L-谷氨酰胺,发酵周期缩短至52 h,L-谷氨酰胺产量达68.01 g/L,糖酸转化率达33.93%,生产强度为1.31 g/(L·h)。该研究对促进L-谷氨酰胺的工业化生产具有重要参考价值。

胎盘胎儿复合体谷氨酸-谷氨酰胺循环和交换的生理作用及其调控

氨基酸是胎儿生长发育、蛋白质生物合成和核酸代谢以及神经发育等的重要前体物质,氨基酸从母体到胎儿的转运及其代谢对生命活动具有极其重要的意义。谷氨酸(Glu)和谷氨酰胺(Gln)是胎盘组织中最丰富,也是妊娠后期猪胎儿中沉积最多的氨基酸;而Glu是由胎儿血浆净输出的唯一氨基酸,Gln转运到胎儿循环中速率最高。母体、胎盘和胎儿之间Glu-Gln循环、交换和代谢对胎儿生长发育具有关键的作用,可能是母体与胎儿发育之间的主要介导途径。本文综述了胎盘胎儿复合体Glu-Gln代谢规律、生理功能及其可能的调控机制,探讨了N-氨甲酰谷氨酸对胎盘胎儿复合体中Glu-Gln循环的影响及其调控机制,为Glu-Gln在胎盘胎儿复合体的代谢及其调控的研究提供参考。

谷氨酰胺酶在10 t规模酱油发酵中应用研究

鲜味是反映酿造酱油品质的一项重要指标。谷氨酰胺酶可以催化谷氨酰胺生成谷氨酸和γ-谷氨酰肽,从而提高酱油的鲜味。文章研究了在10 t规模酱油发酵过程中添加谷氨酰胺酶对酱油中谷氨酸、谷氨酰胺、γ-谷氨酰肽、氨基酸态氮和全氮等指标的影响,并对添加谷氨酰胺酶的酱油进行了HS-SPME-GC-MS分析和感官评定。结果表明,添加谷氨酰胺酶可明显提高酱油原油的谷氨酸含量、氨基酸态氮含量、全氮含量并调节γ-谷氨酰肽的种类及含量。添加谷氨酰胺酶对酱油原油的pH值和总酸含量有小幅度影响。HS-SPME-GC-MS分析表明,添加谷氨酰胺酶的酱油的挥发性风味物质发生了一定变化,醇类、醛类、酮类化合物的种类和含量都有所增加,使酱油的滋味和气味更加丰富。感官评价显示添加谷氨酰胺酶可较大幅度提升酱油的鲜味强度,小幅度减弱酱油的苦味和增加酱油的酸味,对咸味、甜味的影响较小。该研究结果为谷氨酰胺酶在酱油酿造中的应用提供了理论支持。

星形胶质细胞和神经元之间谷氨酸-谷氨酰胺的代谢偶联

谷氨酸 谷氨酰胺循环是星形胶质细胞和神经元代谢偶联最重要的途径之一。在中枢神经系统中葡萄糖经糖酵解和三羧酸循环 ,合成三羧酸循环的中间产物。神经元因缺乏丙酮酸羧化酶 ,不能由葡萄糖直接合成谷氨酸 ,而必须依赖于星形胶质细胞的三羧酸循环来产生作为谷氨酸前体的三羧酸循环中间代谢产物。星形胶质细胞的谷氨酸载体从突触间隙摄取谷氨酸 ,在星形胶质细胞中转变成谷氨酰胺并释放到细胞外 ,然后重新被神经元摄取 ,转变成谷氨酸进入新一轮的循环。本文介绍了该循环 ,以及星形胶质细胞谷氨酸载体的功能。

谷氨酸和谷氨酰胺对大鼠学习记忆的影响

为了观察谷氨酸(Glu)和谷氨酰胺(Gln)对大鼠学习记忆的影响并探讨其机理,选用Wistar大鼠36只,随机分为3组:对照组、Glu 组和Gln 组,分别给予普遍饲料、补充2% Glu 和2% Gln 的饲料喂养2周后,以穿梭箱实验作为学习记忆的行为模型对大鼠进行训练,记录主动回避反应次数和被动逃避时间,并用氨基酸自动分析仪、双波长比色法、放射性配基结合法分别测定了脑中游离氨基酸含量、一氧化氮合酶(NOS)活性和海马N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDA-R)的数目及亲和力。结果显示补充Gln 后,大鼠的主动回避反应率显著增加,被动逃避时间缩短,脑中Glu、天门冬氨酸Gln、精氨酸含量显著增高,NOS活性和海马NMDA-R数目亦增加,而补充Glu 组未观察到上述作用。结果提示:Gln 对大鼠的学习记忆具有促进作用,而Glu 则无此作用,推测其机理可能与脑中兴奋性氨基酸含量。

利用透明颤菌血红蛋白基因在谷氨酸棒杆菌中的表达提高谷氨酸和谷氨酰胺的产量

为了降低谷氨酰胺 (glutamine,Gln)生产过程中所需要的高溶氧水平对设备的要求 ,在谷氨酸棒杆菌 C.glutamicum ATCC14 0 6 7中表达增强摄氧的透明颤菌血红蛋白基因 (Vitreoscilla hemoglobin gene,vgb) ,以此提高细胞的摄氧能力及能量的供给水平 .对得到的重组菌和野生菌进行了发酵实验 .在溶氧只有 5 %的条件下 ,重组菌比野生菌细胞干重提高了 1.2倍 ,单位细胞谷氨酸的生产能力提高了 6 .5倍 ,单位细胞谷氨酰胺的生产能力提高了 1.4倍 .对比结果显示 ,含有 vgb基因的重组菌比野生菌在细胞生长。

谷氨酸和谷氨酰胺转运系统的研究进展

谷氨酸作为幼年动物重要的氨基酸,是肠内能量生成的最大贡献者,它不能由机体自身合成,需额外添加或通过谷氨酸前体物谷氨酰胺转化而成。谷氨酸是谷胱甘肽合成的重要底物,对动物肠道抗氧化剂的提供有重要作用,其转运依靠谷氨酸转运载体完成。因此,本文就谷氨酸和谷氨酰胺转运系统的分类及作用机制做一综述。

外源性谷氨酰胺和谷氨酸对早期断奶仔猪肠粘膜形态、结构和小肠吸收功能及骨骼肌中DNA、RNA浓度的影响

74头 2 8日龄健康二元杂交断奶仔猪分成 3组 ,用于研究外源性谷氨酰胺 (glutam ine,Gln)和谷氨酸 (glutamate,Glu)对断奶仔猪小肠粘膜形态、结构和功能及骨骼肌中 DNA、RNA合成的影响。结果表明 :与对照组相比 ,添加 1%谷氨酰胺或 1%谷氨酸可防止断奶后 1周内空肠绒毛萎缩 ,减少断奶后 2周内空肠固有膜内未成熟细胞数 ;显著改善断奶后 1周内小肠吸收功能 ,并促进肌肉中 RNA合成。这些结果为利用 Gln、Glu缓解仔猪断奶应激 ,改善生产性能提供了实验基础。

阻断谷氨酸-谷氨酰胺循环对大鼠脑缺血-再灌注损伤的神经保护作用

目的探讨阻断星形胶质细胞内谷氨酸-谷氨酰胺循环在脑缺血-再灌注损伤中的神经保护作用。方法采用大脑中动脉栓塞（MCAO）线栓法制备脑缺血-再灌注损伤动物模型,首次Longa神经功能评分1-3分者为模型建立成功。采用随机数字表法,将清洁级健康雄性SD大鼠30只完全随机分为空白对照组、假手术组、MCAO模型组、再灌注0 h和1 h给药组,每组各6只。MCAO模型组为栓线穿过大脑中动脉起始段并达大脑前动脉近端;假手术组为栓线至颈总动脉内,不阻断大脑中动脉血流;再灌注0 h给药组为拔出栓线后立即腹腔注射L-蛋氨酸砜亚胺（MSO）50 mg/kg;再灌注1 h给药组为拔出栓线再灌注1 h后,腹腔注射MSO 50 mg/kg。拔出栓线24 h后,行神经功能评分检测、脑梗死体积测定、谷氨酰胺合成酶（GS）活性和凋亡细胞检测。结果空白对照组和假手术组神经功能评分正常,脑组织内均未见梗死灶及凋亡细胞,GS酶活性差异无统计学意义（P〉0.05）;MCAO模型组GS活性低于空白对照组和假手术组,差异均有统计学意义[（176.7±2.8）×10^3U/g比（1 9 8.8±1.2）×10^3U/g和（1 9 6.1±2.6）×10^3U/g,均P〈0.0 1]。再灌注0 h和1 h给药组神经功能评分、脑梗死体积比、GS活性、凋亡细胞百分比分别与MCAO模型组比较,差异均有统计学意义[（1.2±0.4）分和（1.3±0.8）分比（2.5±0.6）分,（10.0±2.0）%和（20.9±1.1）%比（26.8±1.5）%,（22.2±1.2）×10^3U/g和（22.0±1.2）×10-3U/g比（176.7±2.8）×10^3U/g,（2.35±0.23）%和（4.36±0.30）%比（7.85±0.27）%,均P〈0.05];再灌注1 h给药组神经功能评分、脑梗死体积比、GS活性与再灌注0 h给药组比较,差异均无统计学意义（均P〉0.05）;再灌注0 h和1 h给药组凋亡细胞百分比差异有统计学意义（P〈0.01）。结论抑制GS酶活性,可阻断星形胶质细胞内谷氨酸-谷氨酰胺循环,发挥神经保护作用。

硝态氮对黄瓜子叶谷氨酰胺合成酶和谷氨酸脱氢酶活性的影响

在硝态氮存在或缺乏的条件下,测定了黄瓜(CucumissativusL.)种子萌发和子叶发育过程中子叶可溶性蛋白质含量以及谷氨酰胺合成酶(GS)和谷氨酸脱氢酶(NAD(H)-GDH)活性的变化。在子叶发育初期,无论外源氮存在与否,每对子叶可溶性蛋白质含量和GS、NADH-GDH、NAD+-GDH活性随发育上升。在外源氮存在下,第4d后,可溶性蛋白质含量虽有所下降,但基本保持恒定;第6d后,GS和NADH-GDH活性逐渐降低,NAD+-GDH却相反增高。但在无外源氮条件下,于第4d后,可溶性蛋白质水平以及GS、NADH-GDH和NAD+-GDH活性都逐渐降低。在子叶发育的整个过程中,外源氮对GS和NAD+-GDH活性有促进作用,尤其是在子叶发育的后期对NAD+-GDH活性的促进更为明显。

毛细管电泳法检测转化液中谷氨酰胺和谷氨酸

建立了适用于发酵液、微生物/酶法氨基酸转化液、食品及血液样品中谷氨酰胺和谷氨酸分离分析的芴甲基氯甲酸酯(Fmoc-Cl)衍生、毛细管电泳方法。采用通过优化得到的最佳衍生条件,以扁桃酸为内标,0.1mol/L硼酸/硼砂缓冲液(pH8.0)为电泳缓冲液,在分离电压15kV下,于16min实现了内标、两种氨基酸的良好分离;谷氨酰胺和谷氨酸保留时间RSD分别为0.81%和1.14%,峰面积RSD分别为0.71%和0.79%;检测线分别为86μmol/L和169μmol/L。应用该法测定微生物转化液中谷氨酰胺和谷氨酸的加样回收率分别为96.7%～99.3%和95.9%～97.9%。

在日粮中添加谷氨酰胺和谷氨酸对断奶仔猪生产性能的影响

１４７ 头二元杂交仔猪进行饲养试验，探讨外源性谷氨酰胺和谷氨酸对２８ 日龄断奶仔猪生产性能的影响。试验结果显示：添加１ ％ 的谷氨酰胺可提高断奶后第１ 周的平均日增重（ Ｐ＜ ０ ．０５） ，但添加量与生产性能无正相关；添加１ ％ 的谷氨酸可提高断奶后第２ 周的平均日增重（ Ｐ＜ ０．０１） ，降低仔猪腹泻频率（ Ｐ＜ ０ ．０１） 并提高饲料效率。

反相高效液相色谱法测定血浆和组织中的谷氨酸及谷氨酰胺

反相高效液相色谱法测定血浆和组织中的谷氨酸及谷氨酰胺ＴｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＧｌｕａｎｄＧｌｎｉｎｐｌａｓｍａａｎｄｔｉｓｓｕｅｂｙＲＰ－ＨＰＬＣ尤忠义，余斌，雷政宏，赵云（第三军医大学西南医院烧伤研究所）６３００３８近年来，随着肠道营养...

亚慢性砷暴露对小鼠脑谷氨酸—谷氨酰胺循环通路的影响

目的探讨亚慢性饮水砷暴露对小鼠脑谷氨酸-谷氨酰胺循环通路的影响及其可能的机制。方法将32只健康雌性昆明种小鼠随机分为4组,每组8只。3个染砷组以自由饮水方式分别暴露于水砷浓度为25、50和100mg/L的亚砷酸钠水溶液,连续染砷6周。对照组饮蒸馏水。分别检测小鼠血和脑中无机砷(inorganic arsenic,iAs)、一甲基胂(monomethylarsonic acid,MMA)和二甲基胂(dimethylarsenic acid,DMA)的含量及脑中谷氨酰胺合成酶(glutaminesynthetase,GS)、谷氨酰胺酶(phosphate activated glutaminase,PAG)和超氧化物歧化酶(superoxide dimutase,SOD)的活力与谷氨酸(glutamate,Glu)和脂质过氧化物(lipidperoxide,LPO)的含量。结果小鼠血和脑中iAs、MMA和DMA含量均随染砷剂量的增加而升高。各染砷组小鼠脑中GS和PAG活力及Glu含量与对照组比较均升高,50mg/L染砷组GS活力、25和50mg/L染砷组PAG活力及100mg/L染砷组Glu含量与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),25mg/L染砷组PAG活力与100mg/L染砷组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。各染砷组小鼠脑中SOD活力与对照组比较也升高,且50mg/L染砷组的SOD活力与对照组和25mg/L染砷组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。各染砷组的LPO含量与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论血中的各形态砷化物均可透过成年鼠的血脑屏障进入脑组织。血和脑中的砷形态构成均以有机砷为主,但与血中砷形态的构成不同,脑中砷形态构成以DMA为主,iAs次之,MMA极少。砷暴露可引起脑中谷氨酸-谷氨酰胺循环通路中两个关键代谢酶GS和PAG活力的异常,并导致Glu代谢的异常。另外,本研究结果提示,砷暴露可引起超氧阴离子的含量升高,并导致了SOD活力的代偿性升高。

logistic回归及ROC曲线综合评价基础血清谷氨酸、GABA和谷氨酰胺在癫痫诊断中的应用

目的探讨logistic回归及ROC曲线综合评价检测基础血清谷氨酸、GABA和谷氨酰胺对癫痫诊断的应用价值。方法选取2017年6月-2018年6月来我院就诊的癫痫患者142例作为试验组,同期入院体检健康者133例作为对照组,用RP-HPLC法测定基础血清谷氨酸、GABA及谷氨酰胺的浓度。采用logistic回归分析筛选诊断癫痫的指标,然后得出通过相关危险因素预测癫痫的回归方程,最后采用ROC曲线评价回归方程的相关因素的诊断效能并找到最佳诊断分界值。结果两组年龄、性别、身体质量指数(BMI)差异均无统计学意义(P>0.05),血清谷氨酸、GABA和谷氨酰胺差异均有统计学意义(P<0.001,P<0.01,P<0.01),多因素logistic结果显示谷氨酸和谷氨酰胺与癫痫的相关性分别为1.03和1.005,均有统计学差异(P<0.001,P<0.05),新变量P的AUC为0.819,此时诊断效能最好,敏感性为69%,特异性为83.5%。结论联合基础血清谷氨酸、谷氨酰胺水平的回归模型能够提高对癫痫的诊断效能,可提高其诊断敏感性和特异性,具有较高的临床应用价值。

温度对水稻谷氨酰胺合成酶和NADH-谷氨酸合酶表达的影响

测定了不同温度（32℃和23℃）培养下水稻幼苗根和叶的谷氨酰胺合成酶（GS）同工酶以及依赖于NADH的谷氨酸合酶（NADH-GOGAT）的活性变化.结果表明,温度对水稻根和叶的GS活性具有相反的作用.23℃下生长的水稻根的GS活性明显高于32℃下生长的活性,而23℃下生长的叶的GS活性显著低于生长在32℃下的叶的活性.Native-PAGE和活性染色以及蛋白质印迹表明,根和叶的GS活性变化主要是由于GSrb和GS2活性及其相应蛋白质水平变化所致.23℃下生长的水稻根的NADH-GOGAT活性显著高于32℃下生长的活性,而叶的活性则基本保持恒定.

2，4-二硝基氯苯衍生高效液相色谱法测定血清中的谷氨酸和谷氨酰胺

[目的]建立测定血清中谷氨酸(glutamic acid,Glu)和谷氨酰胺(glutamine,Gln)的高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)。[方法]血清经三氯乙酸沉淀蛋白,2,4-二硝基氯苯(2,4-dini-trochlorobenzene,DNCB)衍生其中的氨基酸后进行HPLC分离测定。[结果]谷氨酸和谷氨酰胺的检出限分别为0.005μg/ml和0.054μg/ml,线性范围上限分别5g/ml和20g/ml,谷氨酸和谷氨酰胺标准测定的相对标准偏差(rela-tive standard derivatizations,RSDs)分别为2.2%和3.9%,样品测定的RSD分别为3.7%和4.7%,平均加标回收率分别在94.2%～106.0%和80.6%～116.0%之间。[结论]所建立的HPLC法灵敏、快速,2,4-二硝基氯苯的衍生产物稳定,适用于血清样品中谷氨酸和谷氨酰胺的测定。