GABA_B受体在中枢听觉通路中分布及其意义

γ-氨基丁酸（γ-Aminobutyric acid，GABA）是成年哺乳动物体内一种重要的抑制性神经氨基酸递质，由谷氨酸在谷氨酸脱羧酶作用下脱羧形成，在体内广泛分布，绝大多数存在于中枢神经系统（central nervous system，CNS）中，在多种神经调节中发挥着重要作用。

伤害性杏仁核中mGluR5对芬太尼诱导痛觉过敏大鼠杏仁核神经通路兴奋性突触传递的影响

目的探讨伤害性杏仁核(CeLC)中代谢型谷氨酸受体5(mGluR5)对阿片诱导痛觉过敏(OIH)大鼠杏仁核神经通路兴奋性突触传递的影响。方法实验一:取SD雄性大鼠18只,随机分为对照组(C组)、痛觉过敏+DMSO组(OIH+DMSO组)和痛觉过敏+mGluR5选择性拮抗剂组(OIH+MTEP组),每组6只。三组大鼠均接受右侧CeLC置管,恢复1周后OIH+DMSO组和OIH+MTEP组经皮下注射芬太尼造OIH模型,芬太尼剂量为60μg/kg,4次,间隔时间15 min,C组皮下注射等容量生理盐水。6.5 h后OIH+DMSO组大鼠CeLC区注射10%二甲基亚砜(DMSO)0.5μl;C组和OIH+MTEP组大鼠CeLC区注射MTEP 15μg。观察造模前(T0)、造模后(T1)和给药后(T2)大鼠机械缩足阈值(WMT)和热缩足反射潜伏期(TWL)。实验二:另取10只大鼠随机分为正常组(N组)和痛觉过敏组(OIH组),OIH组注射芬太尼造OIH模型,N组注射等容量生理盐水。使用双电极膜片钳技术分别记录使用MTEP前后两组大鼠基底外侧杏仁核(BLA)-CeLC神经通路刺激诱发的兴奋性突触后电流(eEPSCs)的幅值。结果实验一:与T0时比较,T1时OIH+DMSO组与OIH+MTEP组大鼠WMT明显降低、TWL明显缩短(P<0.05);与T1比较,T2时OIH+MTEP组大鼠WMT明显升高、TWL明显延长(P<0.05);T2时OIH+MTEP组WMT明显高于OIH+DMSO组,TWL明显长于OIH+DMSO组(P<0.05),T2时OIH+MTEP组和C组WMT及TWL差异无统计学意义。实验二:与OIH组使用MTEP前比较,OIH组使用MTEP后eEPSCs幅值明显降低。N组使用MTEP前和N组使用MTEP后eEPSCs幅值差异无统计学意义。OIH组使用MTEP前eEPSCs幅值明显高于N组使用MTEP前(P<0.05)。结论激活CeLC中mGluR5可通过增强BLA-CeLC神经通路的兴奋性突触传递来参与调控芬太尼诱导的痛觉过敏。

谷氨酸与NO—cGMP信号通路在近视发病中的作用

谷氨酸是视觉通路中分布最广泛的兴奋性神经递质。NO-cGMP信号传导通路是一条代表细胞间和细胞内信息传递以及细胞功能调节的经典信号通路，与视网膜视觉信号的传递密切相关。研究发现，谷氨酸及其受体通过调控NO—cGMP信号通路共同影响近视的发生发展。视网膜NMDAR1的蛋白及mRNA的表达水平在形觉剥夺性近视豚鼠眼中明显上调，伴随ncNOS的mRNA上调和cGMP含量升高，而通过玻璃体腔注射NMDA1受体拮抗剂MK801会抑制这种上调作用，进而延缓眼轴过度增长，抑制近视。现就谷氨酸、谷氨酸受体以及NO．cGMP信号通路对近视的调控作用机制进行综述，从而更深层次地探讨近视的发病机制，为预防和治疗近视提供思路。

GluRs介导的神经突触内级联反应对视神经元可塑性调节机制的研究进展

谷氨酸(Glu)是视觉传导通路上神经元轴突末梢主要的兴奋类神经递质,借助不同亚型的谷氨酸受体(GluRs)广泛参与视神经元的生长、发育、分化和成熟等过程,在视觉信号传递和维持正常视功能方面具有至关重要的作用。在视功能可塑性调控机制中,突触后膜上的离子型谷氨酸受体(iGluRs)被激活,产生兴奋性突触后电位(EPSC)以提升视神经元的突触传递效率。代谢型谷氨酸受体(mGluRs)通过与不同类型的G蛋白偶联而激活神经突触内的级联反应过程,借助细胞内离子水平改变、信号通路增强和特定基因的转录表达途径,发挥对突触结构和功能重塑的间接调控作用。上述不同亚型的GluRs共同参与调节了视觉信号传递的长时程增强(LTP)和长时程抑制(LTD)过程。现结合近年来国内外相关研究进展,从大脑视皮层神经元突触膜上不同亚型的GluRs入手,阐述视觉剥夺后基于不同亚型GluRs介导的视觉可塑性级联反应机制,以期为今后弱视中枢发病机制的研究和有效的靶点治疗药物的开发指明新的方向。

人参二醇对APP-SH-SY5Y细胞中Tau蛋白磷酸化及Fyn/GluN2B信号通路的影响

目的:研究人参二醇(PD)对转染APP基因的人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y(APP-SH-SY5Y)中Tau蛋白磷酸化的影响及其作用机制。方法:采用分子对接技术验证PD与非受体酪氨酸激酶Fyn的靶向性。在体外培养SH-SY5Y细胞,构建APP-SH-SY5Y细胞模型和绿色荧光蛋白(GFP)-SH-SY5Y细胞模型(对照细胞),通过检测细胞中β淀粉样蛋白(Aβ1-42)的表达来验证APP-SH-SY5Y细胞模型是否构建成功。以GFP-SH-SY5Y细胞为对照,采用CCK-8法检测5、10、20、30、40μmol/L的PD和125、250、500、1000、2000 nmol/L的PP2(Fyn抑制剂,阳性对照)作用24 h对APP-SH-SY5Y细胞存活率的影响,以确定最佳给药浓度。以APP-SH-SY5Y细胞为对象,分别检测最佳浓度PD、PP2作用24后细胞中Ca2+浓度及磷酸化Tau蛋白(p-Tau)/Tau、磷酸化非受体酪氨酸激酶Src(p-Src)/Fyn、磷酸化谷氨酸受体2B(p-GluN2B)/GluN2B比值。结果:分子模拟对接结果显示,PD可靶向结合Fyn蛋白。与GFP-SH-SY5Y细胞比较,APP-SH-SY5Y细胞中Aβ1-42蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。PD和PP2的最佳作用浓度分别为20μmol/L和500 nmol/L。20μmol/L PD、500 nmol/L PP2均可显著升高细胞的存活率,显著降低细胞中Ca2+浓度以及p-Tau/Tau、p-Src/Fyn、p-GluN2B/GluN2B比值。结论:PD可通过抑制Fyn/GluN2B信号通路来降低APP-SH-SY5Y细胞中Ca2+浓度及Tau蛋白的磷酸化水平。

以兴奋性毒性机制为靶点的神经保护策略研究进展

兴奋性毒性是最早发现并被广泛认可的脑缺血卒中后损伤的分子机制之一,当大脑处于缺血缺氧状态,由于代谢障碍,导致兴奋性神经递质释放增加与重摄取出现障碍,最终导致大脑缺血区域兴奋性神经递质的水平迅速升高[1]。随后谷氨酸受体的激活导致钙内流和神经元去极化,进而导致大脑中许多钙依赖通路的异常激活和坏死、凋亡和自噬过程的启动[2]。研究表明由谷氨酸介导的兴奋性毒性是导致缺血性脑卒中、癫痫、阿尔茨海默病、精神疾病、帕金森病、肌萎缩侧索硬化病等神经系统疾病神经元损伤的重要作用机制[3]。自上世纪50年代兴奋性毒性的概念提出以来,关于谷氨酸释放、转运体功能改变、受体表达及其引起的下游细胞死亡信号的激活等已成为脑缺血损伤机制的研究重点。本文综述了近几十年以兴奋性毒性机制中的重要环节为靶点的神经保护策略,并对新一代兴奋性毒性抑制剂如何在上一代药物失败的情况下获得成功进行分析,以期为兴奋性毒性机制的研究和神经保护药物的研发提供帮助。

芍药苷对血虚肝郁证模型大鼠海马谷氨酸及其不同类型受体mRNA表达的影响

目的:研究血虚肝郁证大鼠海马谷氨酸(Glu)及不同类型受体NR1、NR2A、NR2B、GluR1、mGluR5 mRNA的表达及芍药苷的干预作用。方法:正常组、模型组、20mg/kg芍药苷组、40mg/kg芍药苷组,造模第1天开始给药,正常组给等量超纯水,其余各组灌胃予以相应浓度药物,共造模21d。治疗结束后,取脑组织,剥离海马,采用邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生HPLC荧光检测法测定Glu含量,采用实时荧光定量聚合酶链反应法(RTqPCR)检测NR1、NR2A、NR2B、GluR1、mGluR5等5种受体亚单位mRNA的表达。结果:血虚肝郁证候模型大鼠海马组织中Glu含量显著升高(P<0.05),且不同Glu受体亚基表达不同,其中NR2A和GluR1 mRNA的表达显著升高(P<0.01),NR1、NR2B mRNA表达有升高的趋势,而mGluR5表达无明显变化,给予芍药苷可使海马组织中Glu含量显著降低(P<0.05),可下调NR2A、GluR1、mGluR5 mRNA表达(P<0.01,P<0.05)。结论:血虚肝郁证模型大鼠脑内存在Glu能神经调节异常,白芍的养血柔肝作用,能够通过调节NO/cGMP信号通路上个的多个靶点发挥效果。

代谢型谷氨酸受体在肿瘤发生和发展中的作用

代谢型谷氨酸受体（mGluRs）在神经系统中发挥着重要作用.谷氨酸受体及其介导的下游信号通路在神经系统中研究较成熟.近年来,人们逐渐将视角转向外周组织和器官中.研究发现代谢型谷氨酸受体不仅存在于脑组织中,而且在多种外周组织和器官等中均有不同程度的表达,并且调控其相应的生理及病理学功能.激活或阻断谷氨酸受体可影响多种肿瘤细胞的生长或迁移,但是目前关于mGluR5在肝癌发生、发展中的作用及其机制尚不清楚.目前代谢型谷氨酸受体对肿瘤的影响已成为研究热点.现就近年代谢型谷氨酸受体在神经系统中的作用及其与肿瘤的关系综述如下.

左归降糖解郁方调控Glu-mGluR_(2/3)-PI3K信号通路在糖尿病并发抑郁症海马NVU神经元凋亡中的保护作用

目的:探讨左归降糖解郁方调控Glu-mGluR_(2/3)-PI3K信号通路在糖尿病并发抑郁症(DD)海马神经血管单元(NVU)中神经元凋亡的保护作用及其机制。方法:原代分离、纯化和培养SD大鼠海马神经元(Ne)、星形胶质细胞(As)与脑微血管内皮细胞(Bm),并对其进行免疫细胞化学染色鉴定;采用Transwell小室及高糖联合皮质酮干预构建DD海马NVU细胞模型;实验设正常对照组、模型对照组、10%空白血清对照组、mGluR_(2/3)激动剂5μmol/L组、PI3K阻断剂2μmol/L组、左归降糖解郁方32.8 g/kg 10%含药血清组。造模及给药18 h后,采用CCK8法检测NVU中海马神经元细胞存活力,采用ELISA法检测NVU中海马神经元细胞上清液谷氨酸(Glu)含量;采用免疫荧光联合高内涵细胞成像(HCA)分别检测NVU中AS细胞内代谢型谷氨酸受体2/3(mGluR_(2/3))蛋白表达水平和海马神经元细胞内的细胞外调节蛋白激酶(ERK)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、半胱天冬酶-9(Caspase-9)蛋白表达水平;采用Tunel染色NVU中海马神经元细胞凋亡水平。结果:与正常对照组比较,模型对照组海马神经元细胞存活率显著降低(P<0.01),细胞上清液中Glu含量显著升高(P<0.01),AS细胞内mGluR_(2/3)蛋白表达显著上调(P<0.01),Ne细胞内ERK、Casepase-9蛋白表达明显上调、PI3K蛋白表达明显下调(P<0.05或P<0.01),海马神经元细胞凋亡显著增加(P<0.01);与模型对照组比较,左归降糖解郁方32.8 g/kg 10%含药血清组海马神经元细胞存活力显著增加(P<0.05),Glu含量显著降低(P<0.05),mGluR_(2/3)、ERK、Casepase-9蛋白表达显著下调,PI3K蛋白表达明显上调(P<0.05或P<0.01),海马神经元细胞凋亡数量显著下降,且核固缩、染色质浓染等阳性特征明显减轻。结论:左归降糖解郁方可调控mGluR_(2/3)活化介导的Glu-mGluR_(2/3)-PI3K信号通路异常,这可能是其抑制糖尿病并发抑郁症海马神经元凋亡的重要机制。