谷氨酸生产菌S_(9114)中依赖于NADPH谷氨酸脱氢酶的纯化及性质

利用DEAE 纤维素离交柱层析、疏水柱层析和凝胶过滤层析等从谷氨酸棒杆菌S9114 中分离纯化出依赖于NADPH的谷氨酸脱氢酶 (GOH NADPH )。经HPLC测定 ,该酶的分子量为 188ku ;经SDS -PAGE电泳测得该酶的亚基分子量为 3 2ku。提示该谷氨酸脱氢酶由 6个亚基组成。该酶对NADPH具有高度专一性 ,在pH 7 5、3 7℃下 ,以α 酮戊二酸、NH4Cl和NADPH为底物时的米氏常数Km 分别为 9 2 2mmol/L、5 2 7mmol/L和 2 3 1× 10 -3mmol/L。最适反应pH为 7 5 ,最适反应温度为 42℃ ,并对热比较稳定。此外 ,KCl对GDH NADPH的活性具有激活作用。

L-谷氨酸生产菌的选育及其发酵条件的研究

采用黄色短杆菌(Brevibacterium flavum)T1为始发菌株,根据代谢控制发酵原理,利用紫外线、硫酸二乙酯进行诱变,定向选育出具有寡霉素抗性、谷氨酸氧肟酸盐抗性的温度敏感突变株 TM106。然后,以温度敏感突变株 TM106和产酸率高(10.5%以上)的天津短杆 TG961为亲株。通过原生质体融合技术,成功地选育出了产酸率高的融合子CM021,并且该菌株系温度敏感型菌株,可用于谷氨酸强制发酵。在摇瓶条件下,产酸达13.6g/dl;在6m^3发酵罐上进行中试,产酸达14.6g/dl,转化率达62%。

抗噬菌体谷氨酸生产菌的选育——细胞融合技术在细菌育种方面的应用

本文利用紫外线诱变的方法获得了抗噬菌体谷氨酸生产菌株.为提高抗噬菌体菌株的产量,作者对谷氨酸生产菌进行了属间融合试验,结果获得了产酸为5.8—6.0％的抗噬菌体谷氨酸生产菌.在适量青霉素存在下可获得99.9％的原生质体。选用最佳条件再生率达20％。在选择培养基上获得融合子,其融合率达1.15×10^(-(?))量级,其中具噬菌体抗性的菌株占22.2％.

离子注入谷氨酸生产菌D_(110)的选育研究

用15kev,剂量为4×10~14～12×1015N^+的氮离子注入谷氨酸生产菌D_(110),经多次诱变和培养制得存活率曲线,并经摇床发酵筛选出一株产量性状提高15％的变异菌株。

发酵谷氨酸生产中液氨及硫酸的用量

一、浓缩等电点工艺： （一）产酸10％的耗氨量：

谷氨酸生产菌T6-13的噬菌体的血清学和DNA内切酶分析

从13个省市的39家工厂,采集73份土和水标样。从中分离到63份噬菌体,阳性率占86.3％。电镜观察20株噬菌体,形态均属Akermann分类的B1型,即有一直径略有差别的正六角形的头和较长的非收缩弯曲的尾部。所分离的噬菌体均能裂解谷氨酸生产菌T6-13。形成的噬菌斑有4种类型。根据噬菌体形态、噬菌斑类型、对抗性菌株的裂解能力,选择一批制备抗血清,借交叉中和试验将63株噬菌体分成12个血清型。检查12个血清型噬菌体对不同的抗噬菌体突变株的裂解谱,有4种类型菌株,其中4-210菌株为具有抗噬菌体谱广的特性。结合对不同抗性菌株裂解能力的差异,12个血清型噬菌体又可分成15种血清—裂解类群。取其中21株噬菌体DNA用BamHⅠ酶切,出现16种不同电泳谱型。

九株谷氨酸生产菌的生物学特性研究

【目的】研究九株谷氨酸生产菌的生物学特性,为具有广域pH耐受性的谷氨酸高产菌筛选提供实验依据。【方法】考察九株菌的低pH生长、高pH产酸特性;对磺胺胍、酮基丙二酸、丙二酸和香豆素的耐受性以及发酵特性。【结果】Corynebacterium glutamicumS9114、Corynebacterium glutamicumATCC13761、Corynebacterium glutamicumT613-85均能在pH3·9下生长,而在pH10·5时S9114、Corynebacterium acetoacidophilum ATCC13870、T613-85依然能够产酸;抗性平板上具有明显生长优势的菌株如下:磺胺胍:S9114;酮基丙二酸:S9114、ATCC13870;丙二酸:ATCC13761、ATCC13870、Microbacterium ammoniaphilumATCC15354;香豆素:除ATCC13761和Corynebacterium melassecolaATCC17966,其他耐受程度相似;九株菌中产酸能力最强的是S9114,其次是T613-85。【结论】以S9114为出发菌株进行改造,确定筛选平板为含磺胺胍2%、酮基丙二酸0·25%、丙二酸1·6%、香豆素0·2%的低pH梯度(pH3·6～4·0)平板和高pH梯度平板(pH10·5～11·2)。

谷氨酸生产菌菌体蛋白在对虾饲料中的应用

在对虾配合饲料中用菌体蛋白取代动物蛋白 (5 %、 10 %、 15 % ) ,通过 2 0d的饲养试验显示 。

谷氨酸生产菌原生质体形成及再生最佳条件的研究

本文通过不同前处理、不同高渗缓冲液、不同酶量、温度及酶解时间对原生质体形成和再生的影响试验,确定了最佳酶解工艺条件,并采用简便的蔗糖美兰染色液进行原生质体释放及形态学的观察。

谷氨酸生产菌原生质体制备及其融合

前言细胞工程是生物工程的一个重要方面,细胞融合则是细胞工程所涉及的主要技术领域。而原生质体融合法育种,已经应用到工农业生产上。作为一种新的基因重组手段,原生质体融合杂交频率较高,较易获得杂种,遗传物质传递较为完整,因而在提高菌株产量方面具有较大潜力。

谷氨酸生产菌的原生质体诱变育种

谷氨酸生产菌在繁殖过程中,经0.4μg/ml浓度青霉素预处理2h后,加入1mg/ml浓度蜗牛酶酶解1.5h,可制得99%以上的原生质体。该原生质体在高渗培养基上再生率可达96%以上。原生质体经15w紫外光60s、20cm照射诱变,致死率87%,得诱变菌株97#、98#。新诱变菌可提高产酸3%。

谷氨酸生产菌分纯后怎样挑选菌落

谷氨酸生产菌分纯后首先要挑选菌落形态正常、生长丰富的单个菌落；也要挑选大小、颜色、形态等不同的单个菌落；特别要挑选小而完整、表面光滑、淡黄色或乳白色的隆起高的菌落。

用生物图谱技术筛选谷氨酸生产菌的原理和要点是什么?

用生物图谱技术筛选谷氨酸生产菌的原理是：用完全培养基平板培养被筛选的菌，培养完毕用牙签同时对应接到两个补充培养基的平板上，待菌体生长后，在其中一个平板上再倒人混有谷氨酸缺陷型菌的基本培养基（加纯化琼脂）。如在被筛选的菌种周围长出谷氨酸缺陷型菌来，就证明该菌是谷氨酸生产菌，即可从另一个平板上挑出对应的菌落。

大米与淀粉用于谷氨酸生产的比较

一、概述目前市面上木薯淀粉、玉米淀粉的价格已涨至2200～2600元/t,用淀粉作原料生产味精势必成本高,没有市场竞争力。而玉米、大米(陈)的价格较低,陈大米价约1500元/t,能用于生产,则将降低成本。

怎么应用生物工程新技术选育谷氨酸生产菌?

应用细胞融合、转导、转化、基因工程技术是今后定向育种的发展方向，近年来已有不少报道。现分述如下：

怎样应用生物工程新技术选育谷氨酸生产菌？

应用细胞融合、转导、转化、基因工程技术是今后走向育种的发展方向，近年来已有不少报道。现分述如下：