免疫印迹法测定GADA在糖尿病分型诊断中的应用

目的探讨免疫印迹法测定谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)在糖尿病分型诊断中的应用价值。方法对糖尿病患者102例利用抗原、抗体特异性结合原理,采用免疫印迹法定性测定抗谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)。结果典型1型糖尿病(IDDM)6例,GADA阳性率为83.3%;病史小于1年的2型糖尿病(NIDDM)96例,GADA阳性率为14.6%;健康对照30例,GADA阳性率为0。IDDM组GADA阳性率高,与另外两组有统计学差异(P<0.01)。结论采用免疫印迹法测定GADA在诊断与鉴别IDDM与NIDDM方面有重要意义。

大剂量维生素B_6治疗雷米封中毒1例

马某,女,25岁,因口服雷米封100片(每片0.1),于1995年6月20日19:00入院。入院前4小时与家人生气,自服雷米封100片,约1.5小时后出现燥动,继而出现四肢抽搐,双眼上吊,口吐白沫,而后昏迷,小便失禁。查体,体温37.5℃。

糖尿病因新说

美国研究人员说,他们已查明可能引起胰岛素依赖型糖尿病的病因。 据认为这种糖尿病的罪魁祸首是免疫系统,它袭击胰,而不是袭击细菌和病毒之类的外来入侵者。

双峰驼源天然噬菌体纳米抗体展示库的构建及抗GDH纳米抗体筛选

目的构建噬菌体天然纳米抗体展示库,以期用于筛选不同抗原分子的纳米抗体筛选平台,并用艰难梭菌谷氨酸脱氢酶(GDH)抗原筛选靶向GDH的纳米抗体,对所构建的噬菌体天然纳米抗体展示库进行验证。方法采用OligoDT提取双峰骆驼脾脏总RNA进行反转录,通过巢氏PCR获取全套重链可变区基因,将其构建到噬菌粒pCANTAB5E载体,经多次电转化至E.coilTG1构建初级噬菌体抗体库,经辅助噬菌体拯救后构成噬菌体展示库,并对噬菌体展示库的库容及多样性进行分析和鉴定。同时以GDH为靶向抗原对文库进行淘筛,计算淘筛回收率,并对第三轮淘筛后平板的单克隆进行ELISA鉴定。结果构建的天然噬菌体纳米抗体库的插入率为95%左右,随机挑取的9个克隆氨基酸同源性为66.17%,经MEGA分析后具有较好的多样性,同时经辅助噬菌体拯救后,得到的噬菌体展示库滴度为4×1012CFU/ml。在三轮淘筛过程中,回收率逐步升高,噬菌体得到了有效的富集,同时对阳性克隆进行测序及分析,最终得到2条抗GDH纳米抗体序列。结论成功构建了双峰驼源天然噬菌体纳米抗体展示文库且多样性良好,为后续筛选其他的靶向抗原奠定了基础,同时筛选获得两条抗GDH纳米抗体序列,为制备艰难梭菌谷氨酸脱氢酶诊断抗体提供技术支撑。

丹麦单卵和双卵双胞胎中胰岛素依赖型糖尿病患者胰岛细胞自身抗体的流行

据《BMJ》1997年314卷第7094期报道为比较与胰岛素依赖型糖尿病相关的胰岛细胞自身抗体形成中环境因素与遗传背景的重要性,Petersen等在丹麦进行了以人口为基础的患糖尿病双胞胎的研究。纳入研究的对象为18对单卵和36对双卵双胞胎,其父母一方或双方均患有胰岛素依赖型糖尿病。主要结果测定包括胰岛细胞抗体,胰岛素自身抗体。