长期注射水杨酸钠大鼠ABR及下丘谷氨酸脱羧酶-67表达的变化

目的观察长期注射水杨酸钠对大鼠听性脑干反应(ABR)及下丘谷氨酸脱羧酶-67(GAD67)表达的影响。方法将18只成年健康Wistar大鼠随机分为水杨酸钠组、生理盐水组、对照组,每组6只。水杨酸钠组肌肉注射10%水杨酸钠175mg/kg,2次/天,连续28天;生理盐水组每天相同时间注射等量生理盐水;对照组不注射任何药物。造模结束后,使用美国TDT系统对三组大鼠进行ABR反应阈及波Ⅲ潜伏期检测,然后将大鼠断头处死并取脑,剥离下丘。采用蛋白质印迹(Western blot)方法检测下丘GAD67蛋白表达的变化。结果①水杨酸钠组、生理盐水组、对照组ABR反应阈分别为61.67±4.08、33.33±2.58、35.83±2.04dB SPL,波Ⅲ潜伏期分别为3.97±0.28、3.51±0.11、3.52±0.09ms。水杨酸钠组较生理盐水组、对照组ABR反应阈明显升高,波Ⅲ潜伏期明显延长(P<0.01),而生理盐水组与对照组差异无统计学意义(P>0.05);②水杨酸钠组下丘GAD67蛋白表达水平明显高于生理盐水组、对照组(P<0.01),而生理盐水组与对照组下丘GAD67蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论长期注射水杨酸钠可导致大鼠下丘GAD67蛋白表达水平升高,GAD67蛋白表达的上调可能作为一种负反馈以代偿去抑制所引起的兴奋与抑制的失衡状态,促进抑制性效应的产生,该蛋白表达的改变极有可能作为机体对水杨酸钠耳毒性的抑制性代偿反应和调节机制之一。

减重平板训练对脊髓损伤大鼠神经病理性疼痛及脊髓后角谷氨酸脱羧酶-65/67表达的影响

目的探讨减重平板训练对脊髓损伤大鼠神经病理性疼痛及脊髓后角内谷氨酸脱羧酶-65/67(GAD-65/67)表达的影响。方法将24只Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组(Sham组)、脊髓损伤-不运动组(SCI-Sed组)和脊髓损伤-运动组(SCI-Ex组),每组8只。采用Allen法制作T10不完全性脊髓损伤模型。在脊髓损伤后7 d对SCI-Ex组进行减重平板训练。于脊髓损伤前,脊髓损伤后7 d、14 d、21 d、28 d和35 d,分别采用von Frey细丝和热刺激痛觉测试仪进行机械性痛阈和热痛阈评估。痛阈评估结束后,采用Western blotting和免疫组化染色检测所有大鼠腰髓GAD-65和GAD-67。结果脊髓损伤后21 d、28 d和35 d,SCI-Ex组机械性痛阈和热痛阈均明显高于SCI-Sed组(P<0.01)。与Sham组相比,SCI-Sed组和SCI-Ex组GAD-65和GAD-67表达减少(P<0.05);与SCI-Sed组相比,SCI-Ex组GAD-65和GAD-67表达量升高(P<0.05)。结论减重平板训练可增加不完全性脊髓损伤大鼠损伤远端脊髓后角GAD-65/67的合成,并改善大鼠后肢痛阈。

核因子-κB介导氯胺酮所致微清蛋白阳性中间神经元表型缺失

目的微清蛋白(parvalbumin,PV)阳性中间神经元的表型缺失在众多心理精神改变中起重要作用。文中研究观察在体外神经元培养中,核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)是否参与了氯胺酮所致PV阳性中间神经元表型缺失过程。方法采用0.5μmol/L氯胺酮(氯胺酮组)、0.5μmol/L氯胺酮复合5μmol/LNF-κB转录抑制剂SN50(SN50组)及单纯培养基(对照组)处理体外原代培养21d的神经元,24h后检测神经元NF-κB活性、活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成及PV阳性中间神经元PV和谷氨酸脱羧酶-67(glutamic acid decarboxylase-67,GAD67)的表达。结果氯胺酮组NF-κB活性是对照组的1.5倍(P<0.05),ROS生成是其2.1倍(P<0.05),PV阳性中间神经元PV及GAD67表达分别是其67.6%和63.0%(P<0.05)。与对照组比,SN50组NF-κB的活性、ROS生成、PV阳性中间神经元PV及GAD67表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论在体外神经元培养中,NF-κB活化介导了氯胺酮所致PV阳性中间神经元PV及GAD67表达下降过程。