脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1在甲状腺癌组织的表达及临床意义

目的探讨脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1在甲状腺癌组织中的变化, 及其表达水平与肿瘤增殖和转移的关系。方法选取2018年8月至2023年8月新乡医学院第一附属医院手术治疗的44例甲状腺癌临床样本作为研究对象, 对应得癌旁组织作为对照, 采用蛋白质免疫印迹分析癌旁组织和甲状腺癌组织中脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1蛋白的表达水平。同时分析细胞增殖标志物(细胞增殖抗原)、迁移标志物(基质金属蛋白酶)和上皮-间充质转化标志物(N-钙黏蛋白和波形蛋白)表达水平。并分析脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1敲降对甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。组间计量数据采用t检验。结果癌旁组织脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1表达水平(0.93±0.11)明显低于甲状腺癌组织(2.02±0.28), 差异有统计学意义(t=24.370, P<0.05)。癌旁组织细胞增殖抗原蛋白表达水平(1.01±0.29)明显低于甲状腺癌组织(2.48±0.12), 差异有统计学意义(t=19.070, P<0.05)。癌旁组织基质金属蛋白酶13表达水平(0.71±0.10)明显低于甲状腺癌组织(1.53±0.19), 差异有统计学意义(t=24.910, P<0.05)。甲状腺癌组织N-钙黏蛋白和波形蛋白表达水平(2.38±0.18、2.35±0.17)明显著高于癌旁组织(1.47±0.23、1.28±0.16), 差异有统计学意义(t=20.790、30.130, P<0.05)。脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1表达水平与细胞增殖抗原、基质金属蛋白酶13、N-钙黏蛋白和波形蛋白表达水平呈正相关(r=0.142、0.251、0.316、0.482, P<0.05)。对照组细胞吸光度值(2.04±0.14)显著高于PELP1 KD组细胞(1.51±0.10), 差异有统计学意义(t=20.790, P<0.05)。对照组迁移能力[(85.46±4.85)%]显著高于PELP1 KD组细胞[(68.84±8.69)%]差异有统计学意义(t=4.723, P<0.05)。对照组细胞侵袭数量[(142.75±14.56)个]显著高于PELP1 KD组细胞[(78.25±12.27)个], 差异有统计学意义(t=9.583, P<0.05)。结论甲状腺癌组织中脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1表达水平显著增加, 下调脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1可抑制甲状腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭等过程。

二甲双胍通过微小RNA-15-脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1对甲状腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨二甲双胍对甲状腺癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法将体外培养甲状腺乳头状癌(TPC-1)细胞(美国ATCC公司)分为对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,分别采用0、3、15和75 mmol/L二甲双胍处理24 h。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)分析细胞增殖;采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)分析细胞凋亡;收集细胞进行RNA测序,分析二甲双胍对微小RNA(miRNA,miR)表达水平的影响;采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析差异表达miRNA的靶蛋白。蛋白质印迹法(Western blot)分析靶蛋白表达水平。计量数据比较采用单因素方差分析。结果对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组吸光度(A)值分别为1.79±0.25、1.34±0.20、1.09±0.13和0.72±0.10,各组间比较差异有统计学意义(t=2.348、2.954、3.185、2.502、2.991、2.647,P<0.05),对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组凋亡率分别为(3.87±1.12)%、(10.34±2.59)%、(25.63±4.65)%和(54.33±7.28)%,各组间比较差异有统计学意义(t=3.089、4.519、6.315、3.817、4.958、5.012,P<0.05),且呈随药物浓度增加,细胞增殖逐渐下降,细胞凋亡逐渐增加的趋势。二甲双胍影响miR-15表达水平,对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组miR-15表达水平分别为1.23±0.21、1.46±0.23、1.89±0.30和2.54±0.34,各组间比较差异有统计学意义(t=2.078、3.114、3.947、3.817、4.958、4.015,P<0.05),且随着药物浓度增加,miR-15表达水平显著增高。PELP1基因是miR-15的靶基因,对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组PELP1蛋白表达水平分别为2.54±0.16、2.16±0.13、1.65±0.11和1.25±0.11,各组间比较差异有统计学意义(t=2.314、2.948、3.289、2.514、3.024、2.921,P<0.05),且随着二甲双胍浓度的增加,PELP1蛋白表达水平逐渐降低。结论二甲双胍通过靶向miR-15/PELP1影响乳头状甲状腺癌细胞的增殖和凋亡。

脯氨酸一谷氨酸一亮氨酸富集蛋白1对甲状腺癌细胞增殖和周期的影响及其机制

目的探讨脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1(PRELP1)对甲状腺癌细胞增殖和周期的影响及其机制。方法采用蛋白质印迹法(Western blot)分析人甲状腺正常细胞系NTHY-ORI 3-1、甲状腺癌细胞CAL-62细胞和SW579细胞PRELP蛋白表达水平;采用对照组和PRELP1过表达慢病毒感染甲状腺癌细胞CAL-62细胞,建立对照组和PRELP1组细胞。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、克隆形成实验和体外移植瘤实验分析两组细胞的增殖情况;采用流式细胞数分析两组细胞周期和凋亡变化;采用Western blot分析增殖、周期和凋亡相关蛋白表达水平。组间比较采用t检验。结果甲状腺癌细胞CAL-62细胞和SW579细胞PELP1蛋白表达水平(1.72±0.12、2.24±0.22)明显高于人甲状腺正常细胞系NTHY-ORI 3-1(1.10±0.16),差异有统计学意义(t=7.628、10.390,P<0.05)。对照组细胞48 h吸光度值(1.91±0.05)明显高于PRELP1 KD组(1.22±0.06),差异有统计学意义(t=20.660,P<0.05)。对照组细胞克隆形成数量[(122.17±17.32)个]明显高于PRELP1 KD组[(91.17±10.14)个],差异有统计学意义(t=13.124,P<0.05)。对照组细胞肿瘤体积[(769.33±69.48)mm^(3)]明显高于PRELP1 KD组[(511.17±35.97)mm^(3)],差异有统计学意义(t=8.082,P<0.05)。对照组细胞G_(0)/G_(1)期比例[(35.36±2.02)%]明显低于PRELP1 KD组[(41.14±1.96)%],差异有统计学意义(t=5.019,P<0.05)。对照组细胞S期比例[(31.53±1.59)%]明显低于PRELP1 KD组[(25.81±1.53)%],差异有统计学意义(t=6.328,P<0.05)。对照组细胞G_(2)期比例[(27.91±1.66)%]低于PRELP1 KD组[(23.09±1.72)%],差异有统计学意义(t=4.939,P<0.05)。对照组细胞凋亡比例[(5.75±1.25)%]明显低于PRELP1 KD[(28.67±3.23)%],差异有统计学意义(t=16.180,P<0.05)。对照组细胞细胞核增殖抗原(Ki-67)蛋白和Cyclin D1蛋白表达水平(1.20±0.10、1.24±0.07)明显高于PRELP1 KD组(0.71±0.04、0.75±0.06),差异有统计学意义(t=10.700、12.420,P<0.05)。对照组细胞Caspase-3蛋白(0.90±0.03)明显低于PRELP1 KD组(1.31±0.07),差异有统计学意义(t=13.070,P<0.05)。结论PRELP1在甲状腺癌细胞中呈低表达,并参与了甲状腺癌细胞的增殖、周期和凋亡的发生过程。

我国北方汉族女性乳腺癌中PELP1／MNAR表达特征及其与Ki-67标记指数相关性研究

目的观察我国北方汉族女性乳腺癌患者肿瘤组织中PELP1／MNAR表达特征及其与临床病理参数及Ki-67表达的相关性。方法采用免疫组化法检测98例北方汉族女性乳腺癌患者及22例乳腺良性纤维腺瘤患者肿瘤组织中PELP1／MNAR、Ki-67表达水平，比较PELP1／MNAR在乳腺良恶性肿瘤中的表达差别，就乳腺癌组织中PELP1／MNAR表达水平与临床参数及Ki-67表达水平进行相关性分析。结果乳腺癌组织中PELP1／MNAR表达阳性率显著高于良性乳腺纤维腺瘤组织（100％VS72．7％，P〈0．01）；乳腺癌组织中PELP1／MNAR表达强度与患者年龄、是否绝经、肿瘤病理分型未见相关性（P〉0．05），与临床等级呈显著正相关（r=0．442，P〈0．01）；有淋巴结转移组PELP1／MNAR表达强度显著高于无淋巴结转移组（56．35V843．19，P=0．015）；PELP1／MNAR与Ki-67表达水平呈显著正相关（r=0．247，P=0．014）。结论PELP1／MNAR高表达是我国北方汉族女性原发性乳腺癌的一个特征并且可能成为判断乳腺癌预后的一个重要病理学指标。

PELP1对人卵巢癌OVCAR3细胞株侵袭能力及MMP-2、MMP-9表达的影响

目的观察脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1(PELP1)对人卵巢癌OVCAR3细胞株侵袭能力及MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白表达的影响。方法体外培养OVCAR3细胞,分为对照组与实验组。对照组转染Flag空载,实验组转染Flag-PELP1。转染24 h后检测转染情况;采用real-time PCR法检测OVCAR3细胞中的MMP-2、MMP-9mRNA,Western blotting法检测其蛋白;Transwell小室侵袭实验检测OVCAR3细胞侵袭能力。结果 OVCAR3细胞中瞬时转染Flag-PELP1,PELP1蛋白表达明显增加。实验组MMP-2、MMP-9 mRNA表达量分别为2.804 8、2.466 6,对照组分别为1、1;实验组MMP-2、MMP-9蛋白表达量分别为0.599 2、0.654 6,对照组分别为0.260 7、0.121 6;实验组与对照组MMP-2、MMP-9 mRNA及蛋白表达量相比,P均<0.05。实验组与对照组自Transwell小室上层移至下层的细胞数分别为774、1 203,两组相比,P<0.05。结论 PELP1可增强人卵巢癌OVCAR3细胞株的侵袭能力,并上调MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白的表达。

PELP1在胃癌中的致瘤作用

目的探讨谷氨酸-脯氨酸-亮氨酸富集蛋白1(proline-,glutamic acid-,and leucine-rich protein 1,PELP1)在胃癌中的生物学功能及临床意义。方法通过生物信息学方法分析PELP1在胃癌中的表达,并在胃癌细胞系和胃癌临床样本中予以验证,Kaplan-Meier生存分析探讨PELP1表达与胃癌患者生存预后的关系。以siRNA敲降胃癌细胞AGS中的PELP1表达,以CCK-8实验、平板克隆形成实验、EdU细胞增殖实验检测细胞增殖活性;流式细胞术测定细胞周期;细胞划痕实验、Transwell小室检测细胞迁移、侵袭能力。Western blot和qRT-PCR检测敲降PELP1表达的AGS细胞中Src-Erk通路信号分子表达情况。结果PELP1在胃癌组织中表达相对较高,生存分析显示PELP1高表达的患者生存期更短;敲降PELP1表达后的胃癌细胞增殖、迁移、侵袭等恶性生物学行为均受到抑制;敲降PELP1表达的AGS细胞,其Src-Erk通路关键信号分子c-Src、PI3K和Erk的表达均降低。结论PELP1在胃癌的发生发展中起致瘤作用,可能是胃癌潜在的治疗靶点。

金线莲苷对二乙基亚硝胺致小鼠肝损伤的保护作用及PELP1/ERK通路的影响

目的探讨金线莲苷(KS)对二乙基亚硝胺(DEN)诱导小鼠肝损伤的保护作用以及PELP1/ERK通路参与作用的分子机制。方法24只雄性C57BL/6小鼠,随机分为Control组、DEN组和KS组,每组8只。石蜡切片和HE染色检查肝脏组织病理学变化;可见分光光度法检测各组小鼠血清中ALT、AST和ALP的含量;qPCR、Western blot分别检测肝脏组织PELP1、ERK mRNA及蛋白表达水平;EL1SA测定肝脏组织TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度。结果与对照组比较,DEN组小鼠肝脏表面粗糙、颜色变深、质地变硬,肝脏组织正常结构被破坏,血清ALT、AST和ALP含量明显升高(P<0.05),肝脏组织PELP1、ERK mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.05),TNF-α、IL-1β和IL-6浓度均显著升高(P<0.05);与DEN组比较,KS组小鼠肝脏形态及细胞损伤性变化明显减轻,血清ALT、AST和ALP含量明显降低(P<0.05),肝脏组织PELP1、ERK mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05),TNF-α、IL-1β和IL-6浓度均显著降低(P<0.05)。结论金线莲苷对DEN诱导的小鼠肝损伤有显著保护作用,其机制与下调PELP1表达,阻断ERK通路活化,进而抑制炎症反应有关。

PELP1/MNAR:一种新的核受体辅助调节因子

脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1/雌激素受体非基因组活性辅助调节因子(proline-,glutamic acid-,leucine-rich protein 1/modulator of nongenomic activity of estrogen receptor,PELP1/MNAR)是一种新近发现的核受体辅助活化因子,具有较为复杂的分子结构,在多种组织中广泛表达。与先前发现的核受体辅助调节因子不同的是:作为一种支架蛋白,PELP1/MNAR既参与核受体调控靶基因转录的基因组作用,又参与了核受体激活激酶信号系统的非基因组作用,并且可能在核受体信号与生长因子信号串话(cross talk)中发挥重要作用。近年的研究表明,PELP1/MNAR在乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、前列腺癌等激素依赖性肿瘤中均有异常表达和分布,在激素依赖性肿瘤的发生、发展、转移、耐药形成过程中可能具有重要意义,可望成为内分泌依赖性肿瘤治疗的一个新的靶点。

PELP1在二乙基亚硝胺诱导糖尿病小鼠肝癌形成中的表达及意义

目的探讨谷氨酸-脯氨酸-亮氨酸富集蛋白1(PELP1)在二乙基亚硝胺(DEN)诱导糖尿病小鼠肝癌形成中的表达及意义。方法6~8周龄雄性C57BL/6小鼠32只,随机分为4组:正常对照组(Control组),糖尿病组(DM组),二乙基亚硝胺组(DEN组),糖尿病联合二乙基亚硝胺组(DM+DEN组),每组8只。采用高脂饲料饲养构建糖尿病小鼠模型,并通过DEN诱导糖尿病小鼠肝癌形成。实验末,观察各组小鼠肝脏的大小、颜色、质地以及结节形成状况,记录肝脏质量、肝脏癌变只数和表面癌结节数,计算肝脏指数及癌变率;采用可见分光光度法检测各组小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)的含量;实时荧光定量PCR(qPCR)检测肝脏PELP1 mRNA转录水平。结果DEN组和DM+DEN组小鼠在造模12周后肝脏表面均出现结节。与Control组比较,DM组、DEN组和DM+DEN组小鼠肝脏指数和血清ALT和AST的含量明显升高(P<0.05);DM+DEN组与DM、DEN组比较,小鼠肝脏指数、肝脏癌变率、肝表面癌结节数和血清ALT、AST含量均显著升高(P<0.05);与Control组比较,DM+DEN组和DM组小鼠血清TG、TC含量明显升高(P<0.05)。与Control组比较,DM+DEN、DEN组小鼠肝脏组织中PELP1 mRNA表达显著升高(P<0.05),且DM+DEN组与DM、DEN组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论糖尿病小鼠的肝脏功能出现损伤,DEN使糖尿病小鼠的肝功能进一步恶化,并诱发癌变,PELP1可作为肝癌发生的标志因子,在DEN诱导糖尿病小鼠肝癌形成中起重要作用。

PELP1在Ⅱ型子宫内膜癌组织中的表达及其与ER相关性研究

目的:探讨脯氨酸、谷氨酸和亮氨酸富集蛋白1(PELP1)在II型子宫内膜癌中的表达及其与雌激素受体(ER)的相关性。方法:免疫组化法检测84例子宫内膜癌及40例正常子宫内膜组织中PELP1和ER表达水平并对其进行相关性分析。结果:I型子宫内膜癌及增殖期子宫内膜组织中PELP1、ER阳性表达率高于II型子宫内膜癌及分泌期子宫内膜组织,差异均有统计学意义(P<0.05);II型子宫内膜癌与分泌期子宫内膜组织比较,差异均无统计学差异(P>0.05)。Pearson相关分析提示,PELP1与ER在I型子宫内膜癌组织中表达量呈正相关(rs=0.348,P=0.01),而在II型子宫内膜癌组织中无相关性(rs=0.268,P=0.144)。结论:PELP1在II型子宫内膜癌组织中的表达较少,且与ER表达无明显相关性。

siRNA沉默PELP1基因对结肠癌Lovo恶性生物学行为影响的实验研究

目的:明确雌激素受体共调节因子脯氨酸,谷氨酸,亮氨酸富集蛋白1(PELP1)在结肠癌Lovo中的作用及其机制。方法:使用siRNA沉默结肠癌Lovo中的PELP1基因,并观察沉默前后结肠癌Lovo恶性生物学行为的变化。结果:PELP1的沉默效率可达80%,沉默后Lovo的增殖能力、克隆形成能力、迁移和侵袭能力均下降。结论:在结肠癌Lovo中沉默PELP1可以降低Lovo的恶性程度,提示PELP1在Lovo中起癌基因的作用。

PELP1表达与胃癌演进及预后相关性分析

目的探讨脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1(Proline,glutamate and leucine rich protein 1,PELP1)表达与胃癌演进及预后的关系及意义。方法采用免疫组化检测39例正常胃组织、48例低级别不典型增生胃组织、28例高级别不典型增生胃组织、77例胃癌组织中PELP1蛋白表达水平,观察胃癌不同演进阶段PELP1表达变化;分析胃癌患者PELP1表达水平与临床病理参数关系;通过在线癌症生存分析工具Kaplan-Meier Plotter分析胃癌PELP1表达与患者总生存期、首次进展前生存期和进展后生存期之间的关系。结果胃癌演进过程中,PELP1表达水平逐渐升高,差异具有统计学意义(P<0.05);胃癌组织中PELP1表达与淋巴结转移、低肿瘤分化、高临床分期有关(P<0.05);PELP1高表达组患者总生存期、首次进展前生存期和进展后生存期均显著低于PELP1低表达组患者(P<0.05)。结论高表达PELP1参与胃癌演进并且提示患者预后不良。

胃腺癌组织PELP1表达变化及其与患者临床病理特征的关系

目的观察胃腺癌组织脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1(PELP1)表达变化,并分析其表达与患者临床病理特征的关系。方法选择初诊胃腺癌患者80例,取手术切除的胃腺癌组织及其配对的癌旁正常组织,采用免疫组化法检测PELP1表达。分析胃腺癌组织PELP1表达与患者临床病理特征的关系。结果胃腺癌组织PELP1高表达率明显高于癌旁正常组织(P<0.05)。胃腺癌组织PELP1表达与患者血清CEA水平、肿瘤最大径及淋巴结转移有关(P均<0.05),与患者性别、年龄、组织分化程度无关(P均>0.05)。结论胃腺癌组织PELP1高表达,其表达变化与肿瘤进展有关。

子宫内膜样腺癌组织PELP1/MNAR表达及其与雌激素受体相关性

目的探讨脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1/雌激素受体非基因组活性辅助调节因子(PELP1/MNAR)和雌激素受体(ER)在子宫内膜样腺癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组化PV二步染色法,对40例正常子宫内膜组织、60例子宫内膜增生过长组织和60例子宫内膜样腺癌组织中PELP1/MNAR、ER进行测定。结果子宫内膜样腺癌及不典型增生组织腺上皮细胞核中PELP1/MNAR阳性表达率高于正常子宫内膜及单纯性、复杂性增生组织(χ2=6.25～16.90,P<0.05);子宫内膜样腺癌绝经后组织间质中PELP1/MNAR阳性表达率低于未绝经组织(χ2=7.17,P<0.05);子宫内膜样腺癌及增生期内膜腺上皮细胞核中ER阳性表达率高于分泌期及增生过长组织(χ2=5.208～12.907,P<0.05)。子宫内膜样腺癌组织中ER与PELP1/MNAR的阳性表达率呈正相关(r=0.315,P<0.01)。结论 PELP1/MNAR在子宫内膜各个时期的表达异常可能与子宫内膜样腺癌的发生发展有关。

PELP1在肝癌中的作用及分子机制研究

目的探讨脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1(PELP1)参与肝癌发生发展的驱动作用及机制。方法通过使用Oncomine数据库进行数据挖掘分析PELP1在肝癌细胞株或组织中的表达状态,Western blot予以验证。设计并合成3对siRNA沉默肝癌中PELP1的表达,采用Western blot检测转染成功与否。使用成功转染PELP1-siRNA后的细胞株HepG2进行细胞活力实验、平板克隆形成实验、细胞划痕实验、Transwell小室侵袭和迁移实验。Western blot实验检测敲除PELP1后STAT3信号通路表达水平的变化。结果PELP1在肝癌中呈现高表达,通过siRNA沉默PELP1后显著抑制了肝癌细胞的生长活力、侵袭和迁移能力,降低了其恶性程度。Western blot显示将肝癌中PELP1沉默后,降低了磷酸化STAT3的表达。结论PELP1可能参与肝癌的发生发展,具有作为肝癌治疗靶点的潜在价值,参与调控STAT3的激活,从而促进肝癌细胞的生长。

RNAi沉默PELPI/MNAR基因对子宫内膜癌细胞增殖和细胞周期的作用

【目的】构建脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1(PELP1)基因慢病毒表达载体,研究沉默PELP1/雌激素受体非基因组活性辅助调节因子(PELP1/MNAR)基因表达对子宫内膜癌细胞增殖和周期的作用及机制。【方法】构建合成靶向PELP1/MNAR RNAi慢病毒表达载体,并转染子宫内膜癌Ishikawa细胞,Real-time PCR和western blot检测PELP1/MNAR mRNA和蛋白水平的表达。使用普通培养基和加入E2的培养基培养各组细胞,MTT检测各组细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞生长周期情况;Western blot检测ER下游靶基因c-fos,cyclin D1的蛋白表达水平。【结果】成功构建合成靶向PELP1/MNAR RNAi慢病毒表达载体,转染子宫内膜癌Ishikawa细胞,转染后PELP1/MNAR mRNA的表达和蛋白的表达分别下降86%和65%(P<0.05)。转染后Ishikawa细胞与对照组相比增殖抑制(P<0.05),细胞周期G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少(P<0.05)。加入雌激素后,三组细胞的生长速度加快,细胞S期的比例增加,转染组增殖抑制明显(P<0.05),S期比例降低(P<0.05)。转染组ER下游基因c-fos、cyclin-D1蛋白水平均显著降低(P<0.05)。【结论】在子宫内膜癌细胞中沉默PELP1/MNAR的表达能能抑制细胞生长、使细胞阻滞在G1期,下调ER靶基因蛋白表达,PELP1/MNAR有望成为子宫内膜癌治疗的潜在靶点。

乳腺癌细胞中PELP1基因表达与启动子区CpG岛甲基化相关性

目的建立针对PELP1基因启动子区CpG岛的甲基化特异性PCR(Methylation specific PCR,MSP)检测方法,分析乳腺癌细胞中PELP1基因表达与启动区CpG岛甲基化的相关性。方法设计针对PELP1基因启动子区的MSP引物组,以甲基化和非甲基化DNA为模板验证MSP引物的特异性,建立针对PELP1基因启动子区的MSP检测方法。以DNA甲基转移酶抑制剂5'-氮杂-脱氧胞苷磷酸(5'-Aza-d C)分别处理MCF-7乳腺癌细胞、MCF-10正常乳腺导管上皮细胞,采用MSP检测PELP1基因启动子区甲基化状态变化,采用Western blot检测蛋白表达。结果针对PELP1基因启动子区设计的MSP引物组特异性良好,甲基化特异性引物仅在甲基化DNA模板获得阳性扩增条带,非甲基化引物仅在非甲基化DNA模板获得阳性条带。MCF-7乳腺癌细胞中PELP1基因启动子区呈非甲基化状态,MCF-10正常乳腺导管上皮细胞中PELP1基因启动子区呈甲基化状态,MCF-10细胞中PELP1蛋白表达水平为MCF-7细胞的1/16(P<0.05)。采用5'-Aza-dC去除MCF-10细胞PELP1基因启动子区甲基化后,PELP1蛋白表达水平上升了9.7倍(P<0.05)。结论所建立的PELP1基因启动子区MSP检测方法特异性良好,去甲基化可能是导致乳腺癌细胞中PELP1基因过表达的重要机制。

PELP1、SETDB1在卵巢癌组织中的表达及意义

目的探讨脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1(PELP1)及SET结构域分支型组蛋白赖氨酸甲基转移酶1(SETDB1)在卵巢癌组织中的表达及意义。方法收集2016年7月至2022年5月该院妇产科行手术治疗且临床病理资料完整的35例卵巢癌患者组织标本,另选取同期收治因子宫肌瘤行子宫及双侧附件切除术的17例患者的正常卵巢组织作为对照。采用实时荧光定量逆转录PCR检测PELP1、SETDB1 mRNA在卵巢癌细胞系(A2780、OVCAR3、SKOV3)及人正常卵巢上皮细胞系(IOSE80)中的相对表达水平,免疫组织化学检测PELP1、SETDB1蛋白的表达水平,分析PELP1、SETDB1蛋白表达情况与患者临床病理特征的关系。结果卵巢癌细胞系A2780、OVCAR3、SKOV3中PELP1、SETDB1 mRNA相对表达水平均明显高于正常卵巢上皮细胞系IOSE80(P<0.05)。与正常卵巢组织比较,卵巢癌组织PELP1蛋白表达水平明显增高(P<0.05),但SETDB1蛋白表达无明显差异(P>0.05)。不同国际妇产科联盟(FIGO)分期、淋巴结转移情况的PELP1蛋白阳性表达比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PELP1在卵巢癌组织中表达水平异常升高,PELP1可能对SETDB1有一定的调控作用。