拟南芥谷氨酸-tRNA合成酶(AtGluRS)不能取代酵母GluRS(英文)

将拟南芥细胞质谷氨酸-tRNA合成酶(AtGluRS)引入酵母细胞,研究其与酵母GluRS进行功能互补的可能性.无功能的酵母GluRS会导致酵母细胞死亡.将携带AtGluRS的pACT2-AtGluRS或pBridge(dNLS)-AtGluRS表达载体转化到含有能表达酵母谷氨酸-tRNA合成酶的pRS316-yGluRS载体的gluRS缺陷型酵母菌株中,若拟南芥GluRS能取代酵母中的该同源蛋白,酵母细胞中的载体pRS316-yGluRS在非选择性培养条件下将会很快丢失.然而,在经过3 d的非选择性培养后,发现酵母细胞没有因拥有AtGluRS而失去提供GluRS功能的载体pRS316-yGluRS.可见,不同物种的GluRS之间,即使其具有很高的同源性,它们在演化过程中可能已形成了各自不同的特性,导致了拟南芥AtGluRS不能对酵母GluRS起功能互补作用.提示一些同源蛋白在异源生物体中不能发挥其正常功能.

地塞米松对重症急性胰腺炎肝损伤大鼠EPRS的影响

目的:探讨谷氨酸-酰胺酸-tRNA合成酶(glutamyl-prolyl-tRNA synthetase,EPRS)mRNA及其蛋白在重症急性胰腺炎(sever acute pancreatitis,SAP)起病早期肝脏中的表达及其作用.方法:96只SD大鼠随机分为SAP组、假手术组(SO组)、地塞米松(dexamethasone,DEX)组,于2、6、12、24 h时间点分别处死8只.用牛黄胆酸钠诱导大鼠建立SAP模型,DEX组大鼠下肢肌注0.5 mg/100g地塞米松治疗,其余两组不干预.HE染色观察肝脏病理损伤,碘比色法测血清淀粉酶(serum amylase,AMS)含量,ELISA法检测肝脏组织核因子κB(nuclear factor KB,NF-κB)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)表达量,RT-PCR法检测肝小叶中EPRS mRNA表达量,免疫组织化学SP法半定量检测EPRS蛋白表达量.比较3组大鼠不同时段上述指标的差异.结果:肝脏HE染色结果见SAP组较SO组炎症渗出严重,DEX组较SAP组出血、渗出有所改善,病理评分下降(P=0.025);DEX组较SAP组降低(P=0.0013);各组肝脏NF-KB在6h时间点相应升高,但6h DEX组较6hSAP组低(P=0.047);而肝脏IFN-γ含量在6h DEX组较6h SAP组增加(P=0.038);6h SAP组血清肿瘤坏死因子-α、白介素-1β较6hSO组升高,而6hDEX组较6hSAP组降低(P<0.05);免疫组织化学结果示6h SAP组较SO组高(P=0.007),6h DEX组较6h SAP组升高明显(P=0.007).结论:SAP大鼠经地塞米松治疗后EPRS升高,提示EPRS在SAP并发肝损伤过程中可能有重要作用.