HPLC法同时检测血浆中半胱氨酸/胱氨酸和还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽的氧化还原电势

目的本研究拟探讨一种比较敏感、能同时检测血浆中半胱氨酸(cysteine,Cys)/胱氨酸(cystine,CySS)和还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)/氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)含量及相应的氧化还原电势(Eh)的方法。方法取大鼠全血,去除红细胞及蛋白后用碘乙酸封闭自由的巯基,通过丹磺酰氯衍生化后,利用高效液相色谱(highperformance liquid chromatography,HPLC)进行分离,根据能斯特方程计算相应的氧化还原电势。结果本方法可同时测定体内GSH/GSSG和Cys/CySS的含量及相应的氧化还原电势,灵敏度高、准确性强。结论本研究提供了一种简便有效地检测血浆中氧化还原状态的方法,可能为诊断与氧化应激相关疾病提供新的依据。

芹菜素对雄性小鼠肝脏组织总抗氧化能力、还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽值、丙二醛含量影响研究

目的观察不同剂量、不同作用时间芹菜素对雄性小鼠肝脏总抗氧化能力(T-AOC)、还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(GSH/GSSG)、丙二醛(MDA)含量的影响。方法 200只成年SPF级昆明种雄性小鼠随机分为对照组(生理盐水10 mL/kg)、低剂量组(芹菜素252 mg/kg)、中剂量组(芹菜素504 mg/kg)和高剂量组(芹菜素1008 mg/kg)。连续灌胃7、14、21、28、35 d,分批处死,称取肝脏制备匀浆,测定T-AOC、GSH、GSSG及MDA含量。结果高剂量组T-AOC含量[(1.397±0.641)U/mg]显著低于对照组[(1.573±0.781)U/mg](P=0.000);芹菜素灌胃28 d GSH/GSSG值相对对照组升高幅度最大(140.556%);高剂量组灌胃21 d MDA含量[(1.068±0.729)nmol/mg]显著高于对照组[(0.354±0.212)nmol/mg](P=0.000)。结论 1008 mg/kg芹菜素对小鼠肝脏组织T-AOC具有一定的抑制作用,并可增加肝脏脂质过氧化程度。T-AOC可以比较早地反映出机体抗氧化能力的变化。

还原型谷胱甘肽注射液联合高压氧治疗一氧化碳中毒伴心肌损伤的效果及对心肌损伤的保护作用

目的 研究还原型谷胱甘肽注射液联合高压氧治疗一氧化碳中毒伴心肌损伤的效果及对心肌损伤的保护作用。方法 选取2020年1月—2023年1月收治的一氧化碳中毒伴心肌损伤108例,采用随机数字表法分为观察组和对照组各54例。全部患者实施高压氧治疗,观察组患者则加用还原性谷胱甘肽注射液治疗,2组患者均治疗2周。观察2组患者的治疗效果、血清学指标及心肌指标,以及2组患者不良反应情况。结果 观察组患者治疗总有效率(90.74%,49/54)较对照组(79.53%,41/54)高(P<0.05)。治疗后,2组患者超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶水平上升,而脂质过氧化物、丙二醛、肌酸激酶、心肌型肌酸激酶同工酶、天冬氨酸转氨酶、心肌肌钙蛋白T水平下降,且观察组患者上述指标水平改变幅度高于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组患者心电图异常率显著低于对照组(P<0.05)。2组患者不良反应比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 还原型谷胱甘肽注射液联合高压氧治疗一氧化碳中毒伴心肌损伤的效果显著,对于心肌细胞损伤具有显著的改善作用。

还原型谷胱甘肽联合甲巯咪唑治疗甲状腺功能亢进的效果及对氧化应激指标、ICAM-1、IGF-1水平的影响

目的探讨还原型谷胱甘肽联合甲巯咪唑治疗甲状腺功能亢进的效果及对氧化应激指标、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平的影响。方法选取2021年6月至2022年6月我院收治的100例甲状腺功能亢进患者为研究对象,根据治疗方式的差异将其分为对照组和观察组,各50例。对照组采用甲巯咪唑治疗,观察组采用还原型谷胱甘肽联合甲巯咪唑治疗。比较两组的治疗效果。结果观察组的治疗总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组的游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT_(4))水平低于对照组,促甲状腺激素(TSH)水平高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组的丙二醛(MDA)水平低于对照组,超氧化物歧化酶(SOD)、髓过氧化物酶(MPO)水平高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组的ICAM-1、IGF-1水平均低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组的不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论还原型谷胱甘肽联合甲巯咪唑治疗甲状腺功能亢进可提高治疗效果,促进甲状腺功能改善、氧化应激减轻,也能下调ICAM-1、IGF-1水平,且安全性高,值得推广。

黄芪煎剂联合还原型谷胱甘肽治疗急性肾损伤的疗效

目的探讨黄芪煎剂联合还原型谷胱甘肽(GSH)治疗急性肾损伤(AKI)的疗效。方法选取2020年3月至2021年12月100例AKI患者,采用随机法分为对照组和观察组,每组各50例。对照组应用GSH治疗,观察组在对照组基础上联合中药黄芪煎剂口服。检测治疗前及治疗7 d、14 d时血清尿酸、肌酐、尿素氮、肾小球滤过率估计值(eGFR)及尿金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)、胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7)水平,比较两组病情控制时间、住院时间、多尿期时间、少尿期时间、血肌酐恢复时间、不良反应及临床预后。结果治疗7d、14d,两组血清SUA、Scr、BUN、eGFR及尿TIMP-2、IGFBP7水平差异有统计学意义(P<0.05)。两组总有效率、病情控制时间、住院时间、多尿期时间、少尿期时间与Scr恢复时间比较差异有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应率及28 d死亡率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论黄芪煎剂联合GSH治疗AKI能够提高临床疗效,降低血清SUA、Scr、BUN水平及尿中TIMP-2、IGFBP7水平,保护肾功能,且不增加不良反应发生率。

冬季低温寡照胁迫下叶面喷施氧化型谷胱甘肽对日光温室草莓生长的影响

为减轻入冬后持续低温寡照天气对日光温室草莓生长的影响,以红颜草莓为试验材料,研究在入冬后低温寡照阶段,在常规施肥的基础上叶面喷施氧化型谷胱甘肽(300 mg/L)对草莓生长的影响。结果表明:在草莓定植后30 d开始喷施氧化型谷胱甘肽,每隔15 d喷施1次,共喷施7次,可以较对照显著提高草莓植株叶面积30.16%,显著提高SPAD值10.47%;在喷施氧化型谷胱甘肽第3天光合速率显著提高24.11%,喷施后第15天光合速率显著提高25.60%,第21天光合速率显著提高30.09%,但对草莓现蕾率和开花率没有显著影响;可通过显著提升草莓果个数实现草莓667 m^(2)产量显著提升23.83%;对草莓可溶性糖含量提升效果显著,可显著提升草莓的糖酸比21.20%。因此,叶面喷施氧化型谷胱甘肽方案是冬季低温寡照期实现草莓高产、优质、安全、高效生产的有效技术途径。

还原型谷胱甘肽联合核苷类似物治疗乙肝肝硬化的临床分析

目的探究乙型肝炎(简称乙肝)肝硬化患者应用还原型谷胱甘肽联合核苷类似物治疗的效果。方法随机选取2020年2月—2023年2月南通市第三人民医院收治的60例乙肝肝硬化患者为研究对象,采用盲摸双色球法分为研究组、参照组,各30例。参照组行常规治疗,研究组采用还原型谷胱甘肽联合核苷类似物治疗。比较两组临床疗效、肝纤维化程度、肝功能及不良反应发生情况。结果干预前,两组肝纤维化程度、肝功能水平比较,差异无统计学意义(P均>0.05)。干预后,研究组临床治疗总有效率(96.67%)高于参照组(80.00%),差异有统计学意义(χ^(2)=4.043,P<0.05)。干预后,研究组肝纤维程度中层粘连蛋白(Laminin,LN)、透明质酸(Hyaluronic,HA)及Ⅳ型胶原(Ⅳ-collagen,Ⅳ-C)水平均低于参照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。干预后,研究组肝功能水平中总胆红素(Total Bilirubin,TBIL)、白蛋白(Albumin,ALB)、谷丙转氨酶(Glutamic Pyruvic Transaminase,GPT)及谷草转氨酶(Glutamic Oxaloacetic Transaminase,GOT)水平均优于参照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。两组不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论乙肝肝硬化患者应用还原型谷胱甘肽联合核苷类似物治疗能够提高其治疗效果,改善肝纤维化程度及肝功能水平,且安全性较高。

茵陈蒿汤联合还原型谷胱甘肽治疗慢性乙型肝炎临床观察

目的探究茵陈蒿汤联合还原型谷胱甘肽对慢性乙型肝炎(CHB)患者的临床疗效。方法选取2020年5月—2022年5月宜丰县人民医院收治的CHB患者60例,依据不同治疗方式分为两组,观察组采用茵陈蒿汤联合还原型谷胱甘肽治疗,对照组采用还原型谷胱甘肽治疗。比较两组肝功能、生活质量评分、临床疗效、不良反应发生率、肝纤维化指标水平等。结果治疗后,两组总胆红素(TBil)比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)低于对照组(P<0.05);观察组社会、环境、躯体、心理评分高于对照组(P<0.05);观察组的Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、透明质酸(HA)指标均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗总有效率96.67%(29/30)高于对照组的66.67%(20/30)(P<0.05);观察组不良反应低于对照组(P<0.05)。结论茵陈蒿汤联合还原型谷胱甘肽治疗CHB患者,对提升临床疗效、改善肝纤维化指标水平、提升生活质量的意义重大,同时能够改善肝功能指标,降低不良反应。

还原型谷胱甘肽联合益生菌辅助治疗对2型糖尿病患者糖脂代谢、炎症以及氧化应激指标的影响

目的探讨还原型谷胱甘肽联合益生菌辅助治疗对2型糖尿病患者糖脂代谢指标、炎症指标以及氧化应激指标的影响。方法将2021年1月至2022年9月于该院就诊的96例2型糖尿病患者纳入研究。按随机数字表法将其分为对照组和研究组各48例。对照组给予二甲双胍+那格列奈降糖治疗,研究组在给予二甲双胍+那格列奈降糖治疗的基础上给予还原型谷胱甘肽+益生菌辅助治疗,比较两组患者治疗前后糖脂代谢相关指标、炎症指标以及氧化应激指标水平。结果两组糖脂代谢相关指标比较显示,研究组患者治疗后总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、空腹血糖(FBG)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、糖化血红蛋白(HbA1c)均较治疗前下降(P<0.05),并且低于对照组(P<0.05)。血清炎症指标比较显示,研究组患者治疗后肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8及C反应蛋白(CRP)较治疗前下降(P<0.05),并且明显低于对照组(P<0.05);研究组患者治疗后IL-10较治疗前明显上升(P<0.05),并且明显高于对照组(P<0.05)。氧化应激指标比较显示,研究组患者治疗后丙二醛(MDA)较治疗前明显下降(P<0.05),并且明显低于对照组(P<0.05);研究组患者治疗后超氧歧化物酶(SOD)以及总抗氧化能力(TAOC)较治疗前明显上升(P<0.05),并且明显高于对照组(P<0.05)。两组患者治疗期间不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论还原型谷胱甘肽联合益生菌辅助治疗明显改善2型糖尿病患者糖脂代谢、炎症以及氧化应激指标。

还原型谷胱甘肽对DR大鼠细胞凋亡、氧化应激及Akt蛋白的作用及机制

目的探究还原型谷胱甘肽(GSH)对糖尿病视网膜病变(DR)大鼠细胞凋亡、氧化应激及蛋白激酶B(Akt)蛋白的影响。方法40只正常大鼠平均分成正常组、模型组、GSH组、Akt抑制剂组各10只,除正常组外其余均建立DR大鼠模型,建模成功后正常组与模型组不进行用药,GSH组给予GSH干预,Akt抑制剂组采用抑制剂干预,连续干预30 d,分别检测各组氧化应激指标,血糖、血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)指标,病理组织苏木素-伊红(HE)染色,视网膜细胞凋亡,蛋白表达等指标。结果模型组丙二醛(MDA)水平升高,GSH水平降低,与正常组比较存在显著差异(P<0.05),GSH组MDA水平降低,GSH水平升高,与模型组比较存在显著差异(P<0.05);病理HE染色比较,正常组内、外核层细胞排布紧凑且有规律,且视网膜组织表面光滑平整;模型组视网膜内界出现明显水肿,内外核层细胞排列不整齐,可见较多的血管内皮细胞突出内界膜;Akt抑制剂组与GSH组视网膜内界水肿明显减轻,且血管内皮细胞突出内界膜情况有所好转,内核层细胞排列疏松,血管异常情况改善。模型组血糖、TC、TG水平升高,与正常组比较存在显著差异(P<0.05),GSH组上述指标降低,与模型组存在显著差异(P<0.05),其余组别比较无统计学意义(P>0.05);与正常组比较,模型组视网膜细胞凋亡指数升高,组间比较存在显著差异(P<0.05),GSH组以上指标降低,与模型组比较有显著差异(P<0.05),其余组别比较无统计学意义(P>0.05);模型组视网膜Akt、PI3K蛋白水升高,与正常组比较存在显著差异(P<0.05),GSH组以上指标下降,与模型组比较有显著差异(P<0.05),其余组别比较无统计学意义(P>0.05)。结论GSH作为抗糖、抗氧化一类药物,对改善DR的氧化应激水平,降低血清、血糖,抑制视网膜组织细胞凋亡和降低蛋白表达等方面具有一定效用。

增液八珍汤对慢传输型便秘大鼠超氧化物歧化酶、谷胱甘肽和一氧化氮的影响

目的观察增液八珍汤对慢传输型便秘大鼠结肠匀浆及血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)及一氧化氮(NO)的影响。方法2022年7—11月将由徐州医科大学实验动物中心供应的72只SPF级Wistar大鼠按随机数字表法分为六组,每组12只,包括空白组(A),模型组(B)、麻仁软胶囊组(C)、增液八珍汤低(D)、中(E)、高剂量组(F)。C组给予麻仁软胶囊内容物:6.2 mL·kg^(-1)·day-1,D、E、F组分别给予17、34、68 g·kg^(-1)·d^(-1)的增液八珍汤灌胃,共给药14 d,A、B组给等量的0.9%氯化钠溶液。末次给药后,检测各组大鼠血清和结肠匀浆中SOD、GSH、NO的含量。结果增液八珍汤低剂量组血清SOD、GSH,结肠组织SOD、GSH表达水平[(2.90±0.28)µmol/L、(8.43±1.56)µmol/L、(0.93±0.32)µmol/L、(6.62±0.48)µmol/L]、中剂量组[(4.02±0.55)µmol/L、(11.75±2.46)µmol/L、(1.76±0.25)µmol/L、(8.92±0.86)µmol/L]、高剂量组[(4.67±0.86)µmol/L、(13.43±1.49)µmol/L、(1.84±0.60)µmol/L、(10.32±1.64)µmol/L]相较于模型组[(1.98±0.21)µmol/L、(5.78±1.98)µmol/L、(0.56±0.47)µmol/L、(4.36±1.58)µmol/L]均明显升高(P<0.05)。增液八珍汤低、中、高剂量组血清NO、结肠组织NO表达水平相较于模型组均明显降低(P<0.05)。与B组比较,C、D、E、F组均能明显增加便秘大鼠血清和结肠匀浆中SOD、GSH的含量;E、F组增加便秘大鼠血清和结肠匀浆中SOD、GSH优于C、D组。与B组比较,C、D、E、F组均能明显减少便秘大鼠血清和结肠匀浆中NO的含量;E、F组减少便秘大鼠血清和结肠匀浆中NO优于C、D组。结论增液八珍汤能够通过调节便秘大鼠SOD、GSH及NO在血液及肠壁组织中的含量水平,达到减少过氧化反应,减轻氧自由基及一氧化氮对机体的损害,达到促胃肠动力的作用。

谷胱甘肽过氧化酶4在胃肠道肿瘤中的作用与治疗

胃肠道肿瘤发病率逐年上升,其病死率在我国癌症中位居前列,严重危害国民健康。只有提前预防加有效治疗双管齐下,才能更好地降低癌症负担。铁死亡是一种铁依赖的,区别于细胞凋亡、坏死、自噬的细胞程序性死亡方式。近几年,肿瘤耐药性的增加引起了学者对诱导癌细胞铁死亡的兴趣,因为铁死亡固有的生理功能之一就是肿瘤抑制。铁死亡受到氧化系统和抗氧化系统的平衡调节,谷胱甘肽过氧化酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)是抗氧化系统的核心因子之一,在多种恶性肿瘤中异常表达,与肿瘤的不良生物学行为相关。在胃肠道肿瘤中,GPX4表达异常,并参与肿瘤的发生发展、治疗和耐药。作为胃肠道肿瘤中许多分子的作用靶点(例如小分子化合物、miRNA和纳米反应器等),GPX4在多个水平上受到调节,并参与调控多种复杂的信号通路。以GPX4为靶点的策略有望成为治疗胃肠道肿瘤的新途径。本文就GPX4在胃肠道肿瘤中的国内外研究进展进行综述,阐明其分子调控机制和目前的药物研究进展,为胃肠道肿瘤的研究及防治提供新的思路。

氧化型谷胱甘肽有机水溶肥对冬马铃薯生长及产量的影响

为明确现蕾期叶面喷施氧化型谷胱甘肽有机水溶肥对冬马铃薯生长及产量的影响,设3个处理,即在冬马铃薯现蕾期分别叶面喷施含15%氧化型谷胱甘肽有机水溶肥、100%氧化型谷胱甘肽有机水溶肥和清水,开展了田间试验,观测记录马铃薯生育期、农艺性状、经济性状、产量等指标,分析各处理对冬马铃薯各指标的影响。结果表明,喷施氧化型谷胱甘肽有机水溶肥处理对马铃薯生育期和农艺性状影响不明显,喷施含15%氧化型谷胱甘肽有机水溶肥处理商品率95.19%,较喷清水处理商品率提高6.74百分点;喷施含15%氧化型谷胱甘肽有机水溶肥折合产量较喷清水处理显著增加3 900 kg/hm^(2),商品薯产量提高7 466.59 kg/hm^(2),商品薯产值增加17 173.15元/hm^(2)。喷施含15%氧化型谷胱甘肽有机水溶肥和100%氧化型谷胱甘肽有机水溶肥处理间折合产量差异不显著。可见,含15%氧化型谷胱甘肽有机水溶肥可作为节本增效投入品在冬马铃薯生产中大面积推广应用。

共包埋姜黄素和还原型谷胱甘肽的纳米脂质体的制备、修饰与表征

以大豆卵磷脂为壁材,制备共包埋姜黄素(curcumin,CUR)和还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)的纳米脂质体,通过静电自组装将壳聚糖和海藻酸钠修饰到纳米脂质体表面,采用激光粒度仪、透射电镜、傅里叶变换红外光谱仪等设备对脂质体的包埋率、体外释放、微观形貌、稳定性等进行表征,测定纳米脂质体同时递送CUR和GSH的能力。结果表明,CUR的包埋率为100%,与GSH共包埋及多糖修饰均没有影响CUR的包埋率;而与CUR共包埋时,GSH的包埋率从7.90%增加到27.03%,经多糖修饰后,进一步增加到41.22%。共包埋纳米脂质体对CUR的释放没有显著影响,但使GSH的释放率由51.2%减小至23.6%;经多糖修饰后,单包埋和共包埋纳米脂质体对CUR和/或GSH的缓释作用都增强。另外,共包埋使脂质体的平均粒径从(95.02±1.93)nm增加到(132.47±18.14)nm,Zeta电位从(-22.47±1.96)mV增加到(-14.70±0.46)mV;经壳聚糖和海藻酸钠双层修饰后,共包埋脂质体的平均粒径进一步增加到(161.97±5.58)nm,而Zeta电位减小到(-40.87±1.79)mV,并且具有更高的热稳定性。本研究可为生物活性物质共包埋的新型功能食品或药品的开发提供参考。

外源谷胱甘肽对白粉菌胁迫下草地早熟禾抗氧化系统的影响

草地早熟禾(Poa pratensis L.)白粉病的发生严重影响其观赏价值和使用年限。谷胱甘肽(Glutathione,GSH)作为植物体内关键的抗氧化剂在植物抵御病原菌侵染过程中起重要作用。为探讨外源GSH调控下植物抗氧化系统在草地早熟禾抗白粉病中的角色,本研究以草地早熟禾中抗品种‘太行’和极感品种‘探险家’为材料,通过喷施0.1 mmol·L^(-1)和1.6 mmol·L^(-1)外源GSH,测定接种白粉菌后3 d和7 d植物抗氧化系统相关指标。结果表明在白粉菌侵染早期施用0.1 mmol·L^(-1) GSH后草地早熟禾的超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)活性与抗病性呈负相关关系,过氧化物酶(Peroxidase,POD)活性与抗病性呈正相关关系;谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GPX)和谷胱甘肽巯基转移酶(Glutathione S-transferase,GST)活性显著提高(P<0.05),0.1 mmol·L^(-1) GSH处理下草地早熟禾抗病能力更强。本研究明确了外源GSH通过调控草地早熟禾抗氧化系统增强白粉病抗性的生理生化机制,为防治草地早熟禾白粉病提供了理论依据。

还原型谷胱甘肽对西门塔尔牛精液低温保存效果的影响

本实验旨在探究还原型谷胱甘肽(GSH)对西门塔尔牛精液低温保存(0℃)的影响。在精液稀释液中分别添加0(对照组)、1、2、4、6 mmol/L的GSH,在0℃条件下保存24、72、120、168、216 h时检测精子活力、顶体完整率和质膜完整性等指标;保存72 h和168 h时检测精子的丙二醛(MDA)水平、三磷酸腺苷(ATP)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活性。结果表明:在精液低温保存72 h时,4 mmol/L GSH添加组的精子活力、顶体完整率、质膜完整性、CAT活性、ATP含量和GSH-Px活性高于对照组(P<0.05);在精液低温保存168 h时,4 mmol/L GSH添加组的精子活力、顶体完整率、质膜完整性、CAT活性、ATP含量和GSH-Px活性高于对照组与其他GSH添加组(P<0.05),MDA水平低于其他组(P<0.05)。因此,在本实验条件下,在精液稀释液中添加4 mmol/L GSH可以有效提高精液品质和精子的抗氧化能力,延长精子的保存时间。

猪肺血管紧张素转化酶提取纯化及还原型谷胱甘肽对其活性抑制作用研究

血管紧张素转化酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)在血压调控系统中起到关键作用。该文通过优化盐析、离子交换层析和超滤等步骤从猪肺中分离纯化ACE并研究其酶学性质。以食源ACE抑制肽Ala-Gly-Pro(AGP)为对照抑制剂,研究了还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)对猪肺ACE活性的影响。当猪肺匀浆液蛋白质量浓度在30 mg/mL时,在35℃的条件下进行离子交换层析纯化ACE,酶活回收率分别达75.6%和61.9%,超滤液流速为5.0 mL/min进行超滤,最终ACE的比活为1.9 U/mg,纯化倍数为475倍,酶活回收率为43.4%。在不增加成本的基础上减少了ACE分离纯化过程中的酶损失,提高ACE分离纯化效率,凝胶电泳结果显示猪肺ACE分子质量为160 kDa,酶学性质分析表明纯化后ACE的最适反应温度为37℃,最适反应pH值为7.5,米氏常数K_(m)为2.05 mmol/L,最大反应速率V_(max)为4.64 nmol/L。体外活性实验表明AGP和GSH均能够抑制猪肺ACE的活性,且AGP和GSH对ACE的IC_(50)值分别为564.0、26.2μmol/L,对其抑制类型分别为竞争型抑制和非竞争性抑制,抵制常数K_(i)分别为127.0、15.5μmol/L。该研究为从抗氧化物质中筛选可能对预防高血压有效的降血压肽提供了可能。

一氧化氮处理对杏果实采后抗坏血酸-谷胱甘肽循环及贮藏品质的影响

为探究NO对杏果实采后贮藏期间的抗氧化作用,实验以吊干杏为试材,采用外源NO处理,测定了杏果实采后硬度、呼吸强度、可溶性固形物(soluble solids,TSS)、可滴定酸(titratable acid,TA)和H_(2)O_(2)含量,抗坏血酸-谷胱甘肽(ascorbic acid-glutathione,AsA-GSH)循环中抗坏血酸(ascorbic acid,AsA)、还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)的含量,脱氢抗坏血酸(dehydroascorbic acid,DHA)、氧化型谷胱甘肽(glutathione oxidized,GSSG)含量,抗坏血酸过氧化物酶(ascorbic acid peroxidase,APX)、谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase,GR)、单脱氢抗坏血酸还原酶(monodehydroascorbate reductase,MDHAR)以及脱氢抗坏血酸还原酶(dehydroascorbate reductase,DHAR)的变化。结果表明,NO处理可延缓杏果实采后硬度下降,降低了呼吸强度和TA含量,提高TSS含量,较好地维持杏果实贮藏品质。同时,NO处理降低了杏果实、果皮和果肉中H_(2)O_(2)含量,增强了APX、GR、MDHAR和DHAR的活性,提高了AsA和GSH的含量,降低了DHA和GSSG含量。此外,NO处理后果皮抗氧化酶活性和H_(2)O_(2)含量均高于果肉。NO处理通过激活AsA-GSH循环关键抗氧化酶活性,提高了清除H_(2)O_(2)的效率,调节杏果实采后AsA-GSH循环,从而维持了杏果实采后贮藏品质,且果皮的响应快于果肉。

外源谷胱甘肽对镉胁迫下4种紫花苜蓿光合作用和抗氧化酶活性的影响

试验旨在探究在镉污染严重牧区添加外源谷胱甘肽(GSH)对紫花苜蓿的光合作用和抗氧化酶的影响。试验以中苜1号、WL525HQ、甘农3号、甘农9号为试验材料,设置对照组(CK组,Hoagland培养液)、镉处理组(Cd组,Hoagland+15 mg/L Cd)和混合处理组(Cd+GSH组,Hoagland+15 mg/L Cd+25 mg/L GSH)进行水培试验。测定叶片相对含水量(RWC)、叶绿素含量(SPAD)、气孔导度(Gs)、净光合速率(Pn)、胞间CO_(2)浓度(Ci)、蒸腾速率(Tr)以及丙二醛(MDA)含量、脯氨酸(Pro)含量和抗氧化酶活性。结果表明:与Cd组相比,Cd+GSH组各品种紫花苜蓿的RWC、SPAD、Gs、Pn、Ci、Tr均有一定程度的提高。与Cd组相比,Cd+GSH组各品种的MDA含量显著降低(P<0.05),WL525HQ、甘农3号、中苜1号添加外源GSH后Pro含量显著降低(P<0.05)。与Cd组相比,Cd+GSH组各品种过氧化物酶(POD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性显著降低(P<0.05),甘农9号和甘农3号超氧化物歧化酶(SOD)活性显著降低(P<0.05),WL525HQ、甘农9号、甘农3号过氧化氢酶(CAT)的活性显著提高(P<0.05)。研究表明,添加外源GSH后可缓解镉污染严重牧区紫花苜蓿受到的镉的毒害作用,降低氧化损伤,提高其适应能力,且紫花苜蓿各生理指标间具有一定的相关关系。

谷胱甘肽过氧化酶4及铁蛋白重链1在甲状腺乳头状癌组织中的表达

目的探讨甲状腺乳头状癌(PTC)组织中谷胱甘肽过氧化酶4(GPX-4)和铁蛋白重链1(FTH-1)的表达情况,分析二者在PTC发生发展中的生物学意义。方法采集2019年6月至2023年8月合肥市第三人民医院40例PTC病人的手术切除标本,分别为癌组织和癌旁组织。应用免疫组织化学染色检测PTC组织和癌旁组织中GPX-4和FTH-1的表达情况,然后利用SPSS 22.0软件进行统计分析。结果GPX-4在PTC组织与癌旁组织中的阳性表达率分别为80.00%(32/40)和15.00%(6/40),GPX-4在癌组织中的阳性表达率显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(χ^(2)=18.38,P<0.001)。同样,FTH-1在PTC组织和癌旁组织中的阳性表达率分别为72.50%(29/40)和10.00%(4/40),FTH-1在癌组织中的阳性表达率也显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(χ^(2)=18.58,P<0.001)。GPX-4和FTH-1在PTC组织中的表达与PTC的TNM分期及淋巴结转移具有相关性(P<0.05)。结论GPX-4和FTH-1在PTC组织中均呈阳性高表达,与PTC的TNM分期和淋巴结转移有关,提示其与PTC的发生发展密切相关,二者检测可作为评估PTC临床预后的辅助指标,也为PTC的分子靶向治疗提供新的方向。