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基于电子顺磁共振技术的谷胱甘肽检测方法
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作者 王志文 邝健 +3 位作者 刘傲锟 魏若彤 于璐 田长麟 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2024年第11期3034-3045,共12页
目的谷胱甘肽(GSH)是细胞中巯基(―SH)含量最丰富的非蛋白质化合物,在提供还原当量、直接中和有毒反应物质以及维持细胞氧化还原平衡等方面发挥着至关重要的作用,因此,准确检测组织中的GSH含量具有重要意义。鉴于电子顺磁共振(EPR)技术... 目的谷胱甘肽(GSH)是细胞中巯基(―SH)含量最丰富的非蛋白质化合物,在提供还原当量、直接中和有毒反应物质以及维持细胞氧化还原平衡等方面发挥着至关重要的作用,因此,准确检测组织中的GSH含量具有重要意义。鉴于电子顺磁共振(EPR)技术在GSH检测方面的应用报道相对较少,本文提出了一种基于EPR技术的GSH检测方法。方法首先,将ABTS(2,2'-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)溶液与K_(2)S_(2)O_(8)溶液混合并在避光条件下反应12~16 h制备ABTS∙^(+)溶液,借助UV-Vis对ABTS∙^(+)溶液进行浓度测定。然后,基于ABTS∙^(+)的EPR信号变化来检测GSH浓度,在此基础上探究最适的反应时间和温度,建立ABTS∙^(+)的EPR信号强度和GSH浓度之间的标准方程。最后,采用计算得到的标准曲线对C57BL/6J小鼠全血的GSH浓度进行定量分析,并与文献结果进行比较,验证方法的准确性。结果实验结果显示,本方法对GSH的检测范围(50 nmol/L~15μmol/L)分布超过两个数量级,检测限(LOD)低至0.50 nmol/L,检测到的小鼠全血中GSH含量为(10660±706)nmol/g(每克血红蛋白所含GSH纳摩尔数),与文献报道结果((11200±237)nmol/g)接近。此外我们还使用类似的方法进一步发展了对GSSG的检测方法。结论本文提出了一种基于EPR技术,使用ABTS∙^(+)快速检测GSH的方法。得益于EPR技术的独特优势,相比于传统的比色法,本方法具有更高的检测灵敏度,更宽的线性范围。我们进一步拓展了其在血液样品中的检测应用,可以快速准确地检测全血中GSH的含量,为衡量组织中氧化还原平衡状态提供数据支持,具有重要意义。 展开更多
关键词 谷胱甘肽检测 电子顺磁共振 ABTS
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利用新型荧光银纳米团簇实现谷胱甘肽的快速精确检测 被引量:2
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作者 黄科翰 秦翠芳 +5 位作者 曹潇丹 杨太群 陈瑜婷 张三军 潘海峰 徐建华 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2016年第12期3973-3977,共5页
谷胱甘肽(GSH)是一种含有巯基的三肽分子,参与许多细胞内生化过程,具有抗氧化和整合解毒功能,在生物体内以及医学,食品等领域有着极为重要的作用。GSH参与细胞内、体液中的许多重要生化反应,其在人体内含量的变化,相应地提示了人体的健... 谷胱甘肽(GSH)是一种含有巯基的三肽分子,参与许多细胞内生化过程,具有抗氧化和整合解毒功能,在生物体内以及医学,食品等领域有着极为重要的作用。GSH参与细胞内、体液中的许多重要生化反应,其在人体内含量的变化,相应地提示了人体的健康问题。目前对GSH的检测手段有表面增强拉曼光谱(SERS)、电化学分析、高效液相色谱(HPLC)等,这些方法大都操作复杂、耗时较长或者需要昂贵的仪器。利用一种新型荧光银纳米团簇(Ag NCs)作为探针,通过同时分析银纳米团簇的荧光强度变化以及荧光峰位置移动实现了GSH的高精度快速检测。在检测过程中,GSH分子与荧光探针发生化学反应,改变了荧光探针的光化学特性,其荧光强度因发生猝灭而减弱,且其荧光峰位置因配体的改变也发生移动。通过对照组实验,我们进一步证明了所发展的检测方法对GSH目标具有很好的特异性,综合考察荧光强度和波长的变化数据可以很好地区分GSH以及其他结构类似的分子,同时探针对于多种盐离子及氨基酸等不敏感,能够很好地保证检测的准确性。我们报导的荧光探针合成步骤简单,过程绿色环保,GSH检测的响应速度快、光谱波动较小、相对误差小。进一步的研究有望实现细胞内的GSH高精度检测及成像。 展开更多
关键词 荧光光谱分析 谷胱甘肽检测 荧光探针 银纳米团簇
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Fabrication of ferrocenyl glutathione modified electrode and its application for detection of cadmium ions
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作者 王芳斌 范美意 +3 位作者 刘又年 王建秀 曾冬铭 黄可龙 《Journal of Central South University of Technology》 EI 2008年第1期44-48,共5页
l'-cysteaminecarbonyl-1-glutathionecarbonyl-ferrocene (Fc-GSH) was synthesized from ferrocene dicarboxylic acid and reduced glutathione (GSH) with 4 steps. IR and 1^H-NMR were used to characterize the products. T... l'-cysteaminecarbonyl-1-glutathionecarbonyl-ferrocene (Fc-GSH) was synthesized from ferrocene dicarboxylic acid and reduced glutathione (GSH) with 4 steps. IR and 1^H-NMR were used to characterize the products. Then Fc-GSH was immobilized on the surface of gold electrode. Cyclic votammetry (CV) was adopted to investigate the electrochemical properties of this Fc-GSH modified electrode in the absence and presence of Cd^2+ aqueous solutions. The peak oxidation potential (Ea) and reduction potential (Ec) of Fc-GSH modified electrode were observed at Ea= 0.74 V and Ec= 0.64 V (vs Ag/AgCl) before the accumulation of Cd^2+. This redox process is a monoelectron chemical reaction. The anodic shift is about 80 mV in the presence of 20 nmol/L of Cd^2+ aqueous solution. Moreover, this shift is in proportion to the concentration of Cd^2+ when the concentration of Cd^2+ is lower than 20 nmol/L. So the modified electrode can be used as probes to detect cadmium ions with the limit of 0.1 nmol/L by cyclic voltammetry. 展开更多
关键词 self-assembled monolayers synthesis modified electrode cadmium detection ferrocene-glutathione
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