摄入异烟肼对家蚕幼虫体内谷胱甘肽氧化还原循环和谷胱甘肽S-转移酶活性的影响

为了建立家蚕Bombyx mori的药物筛选和毒性评价模型,以剂量为2 000 mg/kg的抗结核模药异烟肼饲喂家蚕5龄第3天幼虫后检测其中肠和脂肪体的抗氧化解毒相关代谢的变化。结果表明:雌蚕中肠组织中,总谷胱甘肽(GSH+2GSSG)、还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)和氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)含量均呈现迅速上升再缓慢下降趋势;谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)活性升高到较大值后逐渐降低;GSH/GSSG的比值下降表明,在72 min后中肠组织向氧化态转移。脂肪体组织中,总谷胱甘肽、GSH和GSSG含量变化均呈现迅速下降再迅速上升的趋势;GST活性达到最大值后逐渐降低后趋于平稳;GSH/GSSG比值升高表明,在72 min后脂肪体组织向还原态转移。无论雌蚕还是雄蚕,总谷胱甘肽、GSH和GSSG含量以及GST活性均是脂肪体高于中肠。雌蚕的总谷胱甘肽含量、GSH和GSSG含量高于雄蚕,但雄蚕的GST活性高于雌性。结果说明,摄入异烟肼引起了家蚕幼虫体内谷胱甘肽氧化还原状态的改变和酶活性的变化,在这个过程中脂肪体起主要解毒代谢作用。

滞育发动前家蚕滞育性与非滞育性卵的谷胱甘肽氧化还原循环状态分析

为了调查滞育和非滞育性家蚕卵的谷胱甘肽氧化还原循环在滞育发动前是否存在差异,利用分光光度法检测滞育发动前(25℃中蚕卵产下后0～24 h)滞育与非滞育蚕卵的谷胱甘肽含量和相关代谢酶活性。滞育发动前,滞育性家蚕卵中的还原型谷胱甘肽(GSH)含量、氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量、总谷胱甘肽(GSH+2GSSG)含量和GSH/GSSG比值变化不显著,谷胱甘肽S-转移酶(GST)活性变化不显著,但硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)活性下降23%,谷胱甘肽还原酶(GR)活性升高57%;非滞育性家蚕卵中的GSH含量及TPX和GST活性变化不显著,但GSSG含量升高61%,GSH+2GSSG含量升高41%,GSH/GSSG比值下降33%,GR活性下降16%。与非滞育性家蚕卵相比,滞育发动前滞育性家蚕卵中的GSH含量、GSSG含量和GSH+2GSSG含量较低,GSH/GSSG比值较高,TPX活性较低,GST活性无显著差异,GR活性较高。两种蚕卵中都未能检测到谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和硫氧还蛋白还原酶(TrxR)活性。结果表明,滞育发动前滞育性家蚕卵中较低的TPX活性和较高的GR活性共同导致较高的GSH/GSSG比值,使其谷胱甘肽氧化还原循环处于相对还原态。

热胁迫对多化性家蚕5龄雌性幼虫脂肪体谷胱甘肽氧化还原循环的影响

谷胱甘肽氧化还原循环对保障机体的内环境稳定至关重要。对多化性家蚕品种兰溪10的5龄雌性幼虫连续72 h分别以常温25℃和32℃热胁迫处理,测定脂肪体中与谷胱甘肽氧化还原循环相关分子的含量和酶活性变化。在常温和热胁迫处理的雌蚕脂肪体中均检测不到谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性。与常温处理组相比,热胁迫处理组的雌蚕脂肪体中还原型谷胱甘肽(GSH)含量、GSH/氧化型谷胱甘肽(GSSG)比值、谷胱甘肽S-转移酶(GST)活性和硫氧还蛋白还原酶(TrxR)活性均显著降低,H2O2、GSSG、总谷胱甘肽的含量以及硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)活性和TPX编码基因Bmprx的转录水平显著提高,谷胱甘肽还原酶(GR)活性和TPX的另一个编码基因Bmtpx的转录水平则无显著差异。研究结果表明,在热胁迫环境下家蚕脂肪体中的Bmprx基因被诱导上调表达,使TPX活性提高和TrxR活性降低,导致GSH/GSSG比值显著降低,谷胱甘肽氧化还原循环向氧化态转移。

硒对甜樱桃叶片褪黑素和谷胱甘肽氧化还原循环的影响

【目的】研究不同价态和浓度硒对甜樱桃叶片褪黑素含量以及谷胱甘肽(GSH)氧化还原循环的影响,为探究外源硒、内源褪黑素和GSH氧化还原循环间的关系提供参考。【方法】2015年在四川广元进行田间试验,以两年生甜樱桃‘红蜜’和‘布鲁克斯’为试验材料,试验包括清水处理(CK)、单施Se^(6+)(来源于Na_2SeO_4)、单施Se^(4+)(来源于Na_2SeO_3)、Se^(6+)+褪黑素和Se^(4+)+褪黑素5个处理,30 d后采取叶片,测量叶片硒含量和褪黑素的含量。2016年以重庆綦江两年生甜樱桃‘布鲁克斯’叶片为试验材料进行离体试验,将甜樱桃离体叶片放置在2 mg·L^(-1) Se^(6+)处理0、1、2、3和4 d,以清水处理为对照,每天上午10:00采取叶片;将离体叶片分别置于0、0.5、1.0、2.0、4.0 mg·L^(-1) Se^(6+)溶液24 h后采取叶片,离体试验分别测量叶片硒和褪黑素的含量以及GSH氧化还原循环的物质和酶活性。【结果】田间试验中,2.0 mg·L^(-1) Se^(4+)和Se^(6+)处理显著降低了‘红蜜’和‘布鲁克斯’甜樱桃叶片褪黑素含量,且两种甜樱桃叶片褪黑素含量在Se^(6+)+褪黑素和Se^(4+)+褪黑素处理下分别比单施Se^(6+)和单施Se^(4+)处理高。离体试验中,硒处理第1天‘布鲁克斯’离体叶片褪黑素含量高于对照,之后低于对照且随着时间延长而逐渐降低。硒处理第1天迅速降低了GSH氧化还原循环的物质和酶活性,即GSH、氧化性谷胱甘肽(GSSG)、GSH+GSSG和GSH/GSSG比值低于对照,谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和谷胱甘肽还原酶(GR)活性也低于对照,之后随着时间的延长,GSH氧化循环效率升高并超过对照。在不同浓度Se^(6+)处理24 h下,Se^(6+)处理增加了叶片褪黑素的含量,且随着浓度的增加而增加,GSH氧化循环效率则呈下降的趋势。【结论】外源硒处理提高了甜樱桃叶片硒含量,且六价硒的效果显著高于四价硒。外源硒处理影响甜樱桃褪黑素的含量和GSH氧化还原循环。

镁补充对儿童变应性哮喘谷胱甘肽过氧化系统的影响

目的调查连续12周口服补充镁剂对4～16岁稳定、持久、中度严重哮喘患儿红细胞氧化还原系统的作用,实验为随机双盲,并有安慰剂对照。方法检测治疗前后氧化型谷胱甘肽和还原型谷胱甘肽、氧合血红蛋白、高铁血红蛋白、高铁血色原、胆红素的水平,并检测还原型谷胱甘肽的稳定性。结果治疗结束时镁治疗组还原型谷胱甘肽浓度较安慰剂组有显著升高。研究结束时镁治疗组血浆高铁血红蛋白和高铁血色原水平的降低与血浆血红蛋白浓度的降低呈正相关。结论既定剂量的镁发挥了抗氧化的活性并影响了谷胱甘肽氧化还原系统。

家蚕卵中间感温过程中谷胱甘肽氧化还原代谢的变化

家蚕越年蚕种的初春中间感温是复式冷藏法的一个技术环节,而谷胱甘肽氧化还原代谢与家蚕胚胎滞育诱导和解除密切相关。为了解中间感温期间蚕卵中谷胱甘肽氧化还原代谢的生理生化变化,以菁松×皓月(JS×HY)杂交种为材料,对其初春中间感温过程中的谷胱甘肽含量与谷胱甘肽氧化还原循环相关酶活性进行测定和比较分析。结果发现:GSH(还原型谷胱甘肽)相关酶活性变化对抵抗温度伤害有一定作用,蚕卵解除滞育需要高GR(谷胱甘肽还原酶)活性,GR活性显著降低是GSH/GSSG(氧化型谷胱甘肽)比值显著降低的主要原因之一。推测家蚕越年蚕种在初春中间感温中借助谷胱甘肽氧化还原代谢指标的变化抵抗温度变化,并为解除滞育做准备。这对于阐明蚕卵滞育解除和胚胎活化的生化机制具有一定理论意义。

蛋清源活性肽对过氧化氢诱导的HEK293细胞谷胱甘肽抗氧化系统的影响

研究了蛋清源活性肽WNWAD、WNW、WAD、WN、AD的体外氧自由基吸收能力(ORAC活性),以及其对过氧化氢诱导的HEK293细胞还原型谷胱甘肽(GSH)含量、氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量、GSH/GSSG比值以及γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)表达的影响。结果表明,浓度为5.0μmol/L的蛋清源活性肽WNWAD、WNW、WAD、WN的ORAC活性均强于Trolox,AD没有ORAC活性。过氧化氢诱导的HEK293细胞氧化损伤模型组细胞中GSH含量由(173.52±2.87)μmol/L降至(115.85±2.03)μmol/L(P<0.01),GSSG含量由(0.90±0.08)μmol/L升至(33.23±0.68)μmol/L(P<0.01);细胞中加入不同浓度的蛋清源活性肽,GSH含量与损伤组相比,显著升高(P<0.05),GSSG含量与损伤组相比明显降低(P<0.01),在0.5μmol/L WNWAD作用下GSSG含量由(33.23±0.68)μmol/L降至(0.96±0.02)μmol/L (P<0.01),接近对照组细胞中GSSG含量;GSH/GSSG比值由损伤组的3.49±0.68提至174.22±0.13(P<0.01)。蛋清源活性肽处理过的细胞中γ-GCS mRNA表达量相对于损伤组有不同程度增加,其中5.0μmol/L WN处理过的细胞中γ-GCS m RNA表达量最大,为8.53±0.06。以上研究结果表明,蛋清源活性肽能有效清除活性氧,减少GSH消耗,从而使细胞内γ-GCS含量减少。蛋清源活性肽能促进γ-GCS mRNA的表达,使GSH的合成增加,起到氧化应激抑制作用。

还原型和氧化型谷胱甘肽在磁性Fe_3O_4纳米粒子上的吸附组装

研究了Fe3O4磁性纳米粒子在水溶液中对还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)的吸附。分别测定了两种物质在不同温度下的吸附等温线,比较了研究结果,并用Freundlich吸附等温式对数据进行拟合,根据公式计算出相关的吸附热力学函数值,研究了碳化二亚胺含量和pH对吸附结果的影响,并从吸附量和脱附实验结果探讨了其可能的吸附机理。结果表明,还原型谷胱甘肽和氧化型谷胱甘肽在Fe3O4表面的吸附是不可逆的,加入强电解质基本不能够脱附,两者间形成了部分共价键。

还原型谷胱甘肽对慢性阻塞性肺疾病急性发作期患者血气指标的影响

目的:探讨还原型谷胱甘肽对慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期患者血气指标的影响。方法:将40例符合入选标准的COPD急性发作期患者,随机均分为治疗组和对照组,治疗组患者除给予常规治疗外,加用注射用还原型谷胱甘肽2.4g·d-1,加入到5%葡萄糖溶液250mL中静脉滴注,qd,连用10d;对照组仅给予常规治疗。观察治疗前后2组患者动脉血气指标、6min步行试验及主观感觉的变化。结果:治疗10d后,2组患者动脉血氧分压(PaO2)均较治疗前有显著提高,动脉血二氧化碳分压(PaCO2)均较治疗前显著降低(P<0.05),且2组间PaO2、PaCO2改善情况比较,差异均有统计学意义(P<0.05),治疗组显著优于对照组。结论:COPD患者体内存在氧化-抗氧化失衡,治疗中加用还原型谷胱甘肽可对抗机体氧化损伤,改善患者缺氧状况。

氧化抗氧化失衡与动脉粥样硬化

目的探讨氧化抗氧化失衡与动脉粥样硬化的关系。方法对采用高分辨超声检测技术筛选出的79例颈总动脉斑块形成患者(A组)、52例内膜中层增厚患者(B组)和36例内膜中层厚度正常患者(C组)进行静脉血浆还原型谷胱甘肽(GSH)与氧化型谷胱甘肽(GSSG)、还原型辅酶Ⅱ(NADPH)与氧化型辅酶Ⅱ(NADP+)、氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)和丙二醛(MDA)检测。结果A组与B组相比,B组与C组相比,GSH、GSH/GSSG减低(P<0.05),GSSG、GSH/GSSG氧化还原电位升高(P<0.05);A组与C组相比,NADPH、NADH/NADP+减低(P<0.05),NADPH/NADP+氧化还原电位升高(P<0.05);A组与B组相比,B组与C组相比,oxLDL、MDA增加(P<0.05);GSH/GSSG氧化还原电位与oxLDL呈正相关(r=0.817,P<0.001),随着动脉内膜增厚斑块形成,氧化还原电位逐渐升高,向氧化方向偏移。结论动脉粥样硬化与氧化还原态失衡向氧化方向偏移相关。

二氧化硫气体对小鼠雄性生殖细胞的毒性作用研究

目的 研究二氧化硫对小鼠雄性生殖细胞的损伤效应。方法 采用二氧化硫动式熏气装置对小鼠进行气体吸入染毒 ,测定二氧化硫对小鼠睾丸匀浆上清液谷胱甘肽氧化还原系统的影响 ;用单细胞凝胶电泳技术 (SCGE)测定二氧化硫对小鼠雄性生殖细胞DNA的损伤作用。结果 二氧化硫熏气使小鼠睾丸匀浆上清液还原性谷胱甘肽含量显著减少 ,谷胱甘肽硫转移酶活性、葡萄糖 6 磷酸脱氢酶活性显著降低 ,脂质过氧化产物丙二醛含量显著升高 ;睾丸细胞DNA受到损伤 ,且有剂量 -效应关系。结论 二氧化硫气体能够显著影响小鼠雄性生殖细胞谷胱甘肽氧化还原系统和造成雄性生殖细胞DNA的损伤。

葱蝇非滞育、夏滞育和冬滞育蛹体内抗氧化酶活性的比较分析（英文）

【目的】通过测定并比较分析抗氧化酶活性及谷胱甘肽氧化还原状态,探讨葱蝇Delia antiqua非滞育、夏滞育和冬滞育蛹体内抗氧化系统的差异。【方法】取葱蝇非滞育、夏滞育和冬滞育蛹,分别测定铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)、锰超氧化物歧化酶(Mn SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和谷胱甘肽还原酶(GR)活性及还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化性还原型谷胱甘肽(GSSG)含量及GSH/GSSG比随发育时间的变化;并对各抗氧化因子进行了典型判别分析。【结果】5种抗氧化酶的活性在整个蛹期是动态变化的。与非滞育蛹和夏滞育蛹相比,处于滞育前期的冬滞育蛹具有较高的Cu/Zn-SOD酶活性,但处于夏滞育及冬滞育的维持期和滞育后期的滞育蛹体内Cu/Zn-SOD酶活性则明显低于同一发育时期的非滞育蛹。在整个蛹期,非滞育蛹体内Mn SOD酶活性显著高于夏滞育和冬滞育蛹,而在夏滞育和冬滞育蛹之间则无明显差异。比较两种酶活性则发现同一发育时期的Mn SOD平均酶活性明显高于Cu/Zn-SOD酶活性。在头外翻之前,滞育蛹体内CAT酶活性高于非滞育蛹,但处于滞育维持期和后期的蛹体内CAT酶活性则低于非滞育蛹。无论在非滞育蛹还是滞育蛹中,GPx和GR酶活性变化基本上呈相反的趋势。典型判别分析进一步表明葱蝇蛹体内的抗氧化系统具有发育时期和滞育类型特异性。【结论】非滞育蛹与夏滞育和冬滞育蛹体内的氧化还原状态存在明显差异。滞育前期和滞育后期的蛹体内较高的抗氧化酶活性和较低的GSH/GSSG比提示氧化状态的变化与高的呼吸速率及发育过程密切相关。

高糖环境下锰超氧化物歧化酶转染间充质干细胞促进抗氧化酶类表达

目的研究锰超氧化物歧化酶(MnSOD)转染间充质干细胞(MSC)发挥抗自由基的细胞保护作用,并分析其机制。方法利用pcDNA3.1-MnSOD质粒转染MSC作为MnSOD-MSC实验组,仅转染pcDNA3.1为空白质粒组,未转染者为MSC对照组,在正常或高糖(含250 mmoL葡萄糖)培养条件下,MTT法观察MSC增殖情况,使用试剂盒检测各组MSC中谷胱甘肽氧化还原酶(GSHPX)、超氧化物歧化酶(SOD)表达情况。结果高糖环境下,与MSC对照组相比,MnSOD-MSC实验组MSC增殖OD值增高(P<0.01);与空白质粒组GSHPX相比,MnSOD-MSC实验组GSHPX含量明显增高(P<0.01),MnSOD-MSC实验组SOD含量在高糖条件下比空白质粒组增高(P<0.01)。结论 MnSOD转染MSC可以促进抗氧化酶类表达增高,对抗自由基,对MSC具有保护作用。

4种检测柠条种子活力技术的比较分析

种子保存是当前植物种质资源保存的最有效、最安全的方式之一,快速、微量、准确检测种子库中种子活力的变化是当前植物种质设施保存技术研究的热点与重点。本文利用谷胱甘肽氧化还原电位(EGSSG/2GSH)、差示扫描量热分析(DSC)、电子自旋共振(EPR)和非损伤微检测(NMT)4种目前较为先进的方法,研究柠条种子在人工老化下的活力变化规律。结果表明,柠条种子在50℃、相对湿度(RH)为50%的老化条件下,其活力指数的下降速率要快于发芽率的下降速率;通过建立回归模型发现,在检测发芽率变化方面,4种检测方法的优越性依次为EPR>NMT>DSC>EGSSG/2GSH;在检测活力指数变化方面,4种检测方法的优越性依次为NMT>EGSSG/2GSH=EPR>DSC。综合对检测柠条种子发芽率和活力指数拟合度情况,以及对种子非损伤的性质,认为NMT最适合用来跟踪监测贮藏种子的活力。

高糖对人肾系膜细胞GSH-PX和PDGF-B表达影响及茶多酚干预作用

目的探讨高糖条件下系膜细胞氧化失衡与血小板源性生长因子B(PDGFB)表达之间的关系,通过抗氧化剂茶多酚证实氧化应激在早期糖尿病中的作用。方法将培养的系膜细胞分为正常对照组、高糖组、茶多酚对照组和茶多酚干预组,分别在0、12、24、36、48h采用分光光度法检测上清液还原型谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)活性,以及免疫细胞化学法和RTPCR法检测0、12、36h的PDGFBmRNA和蛋白的表达情况。结果①高糖条件下GSHPX活性下降,抗氧化能力下降,氧化失平衡;茶多酚可增加抗氧化酶GSHPX的活性。②高糖组系膜细胞PDGFBmRNA和蛋白的表达比正常对照组均增加(P<0.05);茶多酚干预组比高糖组有明显下降(P<0.05)。结论高糖能促进系膜细胞活性氧和PDGFB的表达增加,茶多酚可抑制该作用。

铁死亡与肿瘤的研究进展

肿瘤发展至中晚期,预后较差,常采用以手术切除为主,术后辅以放、化疗的综合治疗。化疗药物抑癌机制主要是干预癌细胞的生长,诱导癌细胞的死亡,目前研究发现部分患者对针对细胞凋亡所研制的抗肿瘤药物出现凋亡逃逸及化疗耐受,于是设想,是否存在其它形式的细胞死亡,来克服肿瘤细胞耐药? 2012年在研究erastin杀死RAS突变的肿瘤细胞作用机制时发现一种铁依赖性的细胞死亡形式——铁死亡,其主要是细胞内"铁"依赖脂质氧自由基异常增高、氧化还原稳态失衡而致。该文就细胞铁死亡的定义和特点,所参与的通路及铁死亡在肿瘤演变中发挥的作用进行综述。

连花清瘟胶囊对吸烟大鼠Clara细胞和氧化应激的影响

目的观察连花清瘟胶囊对吸烟大鼠Clara细胞和氧化应激的影响。方法将24只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、吸烟组、连花清瘟胶囊小剂量和大剂量治疗组，每组6只。电镜观察Clara细胞超微结构改变，免疫组化方法检测肺组织CC16蛋白表达，荧光测定法测定血浆和肺组织还原型谷胱甘肽（GSH）及氧化型谷胱甘肽（GSSG）含量。结果吸烟3周后，吸烟组大鼠Clara细胞胞浆内分泌颗粒减少，细支气管CC16阳性细胞、血浆GSH浓度及GSH／GSSG比值降低（P值均〈0．05）。与吸烟组相比，连花清瘟胶囊小剂量治疗组Clara细胞分泌颗粒增加，呼吸性细支气管CC16阳性细胞比例和血浆GSH浓度增加（P〈O．05）；大剂量治疗组呼吸性细支气管CC16阳性细胞比例增加（P〈0．05），血浆GSH浓度无差异。相关性分析表明，Clara细胞阳性指数评分与血浆GSH浓度呈正相关（r=0．617，PdO．01）。结论小剂量连花清瘟胶囊可减轻吸烟所致大鼠Clara细胞结构及功能的损害和全身氧化应激反应。