细胞周期突变体相关蛋白激酶2、P-糖蛋白和谷胱甘肽巯基转移酶-π在宫颈癌中的表达及临床意义

目的检测宫颈癌中细胞周期突变体(NIMA)相关蛋白激酶(Nek2)与耐药蛋白P-糖蛋白(P-gp)、胱甘肽巯基转移酶-π(GST-π)的表达及其与临床病理特征的相关性。方法应用免疫组织化学法检测144例宫颈癌组织和32例慢性宫颈炎非癌组织中Nek2、P-gp、GST-π的表达。结果 1Nek2、P-gp和GST-π在宫颈癌及宫颈炎组织中的阳性表达率分别为(51.4%vs 31.2%)、(55.6%vs 12.5%)和(73.6%vs 53.1%),组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。2Nek2表达与宫颈癌组织学分级、临床分期相关(P<0.05),与年龄、组织学类型、浸润深度、细胞角蛋白(CK)、CK14、癌胚抗原(CEA)、抗癌基因P16、生存时间无关(P>0.05)。P-gp、GST-π在宫颈癌的阳性表达与以上临床病理特征无相关性(P>0.05)。3宫颈癌中Nek2与P-gp、GST-π表达呈正相关(r=0.193和0.207,P<0.05)。结论 Nek2可能介导宫颈癌中P-gp、GST-π的表达。Nek2、P-gp及GST-π蛋白在宫颈癌发生、发展及耐药机制中发挥重要作用。联合检测对宫颈癌治疗方案的合理制定及化疗反应性的评估可能具有积极的临床指导意义。

对乙酰氨基酚致小鼠肝微粒体谷胱甘肽S-转移酶的激活机制

目的 探索大剂量对乙酰氨基酚 (Par)在体内对小鼠肝微粒体谷胱甘肽S 转移酶(mGST)活性的影响及其可能的机制。方法 小鼠饮用 1 0 %乙醇 7d以诱导肝药酶 ,Par90 ,1 5 0 ,2 1 0mg·kg-1ip ,在 6h内测定肝mGST活性及谷胱甘肽 (GSH)含量 ,结合二硫苏糖醇(DTT)逆转与N 乙基马来酰亚胺 (NEM)激活效应来探讨mGST活性变化机制 ,并用SDS PAGE和负染凝胶法评价Par对mGST蛋白分子量及含量的影响。结果 ipPar90～ 2 1 0mg·kg-1,在短时间内引起小鼠mGST活性增加 ,GSH含量减少。mGST活性的改变与Par处理之间存在时效及量效关系。Par引起的mGST的激活效应不被二硫键断裂剂DTT逆转 ,NEM在Par激活的mGST半胱氨酸 49巯基 (Cys 49 SH)上总激活效应降低 ;激活的mGST未见蛋白分子量变迁及蛋白表达增加。结论 大剂量Par引起小鼠体内mGST活性增加 ,其激活机制主要与Cys 49

谷胱甘肽-硫-转移酶M2基因在小鼠生殖器官中的表达

利用半定量RT-PCR和原位杂交的方法检测Gstm2基因在成年雄性和雌性小鼠生殖器官中的表达,并初步评价其在生殖过程中的作用。在雄性小鼠的睾丸、附睾、输精管和雌性小鼠的卵巢、输卵管、子宫、胎盘中,半定量RT-PCR的方法均检测到Gstm2的表达,在胎盘中表达水平较低,其余组织表达水平较高。利用原位杂交的方法在睾丸的间质细胞检测出较强的信号,在附睾中有微弱的信号,而输精管上皮细胞没有检测到信号;在输卵管上皮细胞和妊娠第3d的子宫上皮细胞中检出较强的信号。由于Gstm2在RNA水平在小鼠的生殖器官中广泛表达,因此我们推测Gstm2可能在小鼠精子发生、睾酮合成、精子的成熟和运输、卵子的发生和运输、胚胎着床等生殖过程中发挥作用,此结果为深入研究Gstm2在生殖生理中的功能打下基础。

谷胱甘肽S-转移酶P1基因多态性与散发性结直肠腺癌易感性的关系

背景:谷胱甘肽S-转移酶(GST)属Ⅱ相代谢酶,在人体内参与多种致癌物的解毒作用。目的:探讨GSTP1基因多态性与散发性结直肠腺癌(SCRAC)遗传易感性的关系。方法:118例SCRAC患者和140名健康对照者纳入研究。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测GSTP1基因第5外显子105位密码子单核苷酸多态性,分析两组间GSTP1等位基因和基因型的差异。结果:SCRAC组GSTP1突变型等位基因(Val)频率显著高于健康对照组(57.6%对40.7%,P=0.000);纯合突变基因型(Val/Val)频率亦高于健康对照组,但差异无统计学意义(44.1%对30.7%,P=0.027)。根据临床病理特征对SCRAC患者进行分层分析,Dukes C期和低分化腺癌Val/Val基因型频率分别显著高于Dukes A、B期(P=0.007)和高、中分化腺癌(P=0.002)。结论:GSTP1基因多态性与SCRAC相关,纯合突变基因型携带者对SCRAC的易感性增加。

河北汉族人群谷胱甘肽硫-转移酶Z1的基因多态性研究

目的探讨河北汉族人群谷胱甘肽硫-转移酶Z1(glutathione S-transferase zeta 1,GSTZ1)基因多态性的分布情况。方法应用聚合酶链式反应-限制性酶切片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)方法,对210例河北汉族正常人进行GSTZ1Lys32Glu基因多态性分析。结果河北汉族人群GSTZ1Lys32Glu基因多态性符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律,具有代表性。河北汉族人群GSTZ1Lys32Glu基因型频率分布和等位基因频率分布与伊朗人群、澳大利亚人群、德国人群、美国人群差异有统计学意义(P<0.05);伊朗人群GSTZ1Lys32Glu基因型频率分布和等位基因频率分布与澳大利亚人群、德国人群、美国人群差异有统计学意义(P<0.05);澳大利亚人群、德国人群、美国人群GSTZ1Lys32Glu基因型频率分布和等位基因频率分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论河北汉族人群GSTZ1Lys32Glu基因型频率分布和等位基因频率有其独特性。GSTZ1Lys32Glu的基因多态性在地域和人种中的分布明显不同。

梭鱼草叶片抗氧化酶、抗坏血酸-谷胱甘肽循环与乙二醛酶系统对铅胁迫的响应

为了探明梭鱼草叶片细胞应对Pb^(2+)胁迫的生理机制,研究以液培法考察了不同浓度Pb^(2+)胁迫下梭鱼草叶片丙二醛(MDA)与叶绿素含量,以及抗氧化酶活性、抗氧化剂含量和乙二醛酶系统的变化规律。结果表明,(1)5.0 mg/L Pb^(2+)胁迫第14天和第21天时,梭鱼草叶片叶绿素含量,过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)等抗氧化酶活性,抗坏血酸(AsA)、脱氢抗坏血酸(DHA)、谷胱甘肽(GSH)、非蛋白巯基总肽(NPT)和植物螯合肽(PCs)等抗氧化剂含量没有发生明显变化;第21天时叶片细胞中甲基乙二醛(MG)含量显著增加,而MDA含量无明显增加。(2)10.0 mg/L Pb^(2+)处理至第21天时,梭鱼草叶片MDA、MG、GSH及NPT含量及过氧化物酶(POD)活性明显增加,而脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)、甲基乙二醛酶Ⅱ(GlyⅡ)活性呈相反变化趋势。(3)在15.0 mg/L Pb^(2+)处理期间,梭鱼草叶片MDA含量显著增加,其GSH、NPT、PCs被诱导合成以螯合细胞中过量积累的Pb^(2+);同时叶片POD、SOD、APX活性和AsA含量显著增加。15.0 mg/L Pb^(2+)处理第21天时,乙二醛酶系统已经不能缓解高浓度Pb^(2+)胁迫诱发的羰基胁迫。可见,梭鱼草叶片对5.0 mg/L Pb^(2+)具有良好的耐受性;在较高浓度(≥10.0 mg/L)Pb^(2+)胁迫下,梭鱼草叶片细胞膜脂过氧化作用加剧,此时其主要通过合成非蛋白巯基化合物、增加抗氧化酶活性及AsA含量来减缓氧化损伤;本试验条件下梭鱼草叶片乙二醛酶系统没有表现出明显的解毒作用。

多药耐药基因、谷胱甘肽-S-转移酶-π、胸苷酸合成酶在胃癌中的表达及意义

目的 检测多药耐药基因（P-gp）、谷胱甘肽-s-转移酶-π（GST-π）、胸苷酸合成酶（TS）在胃癌中的表达及其临床指标和预后关系。方法采用SP免疫组化法检测P-gP、GST-π、TS在62例胃癌患者中的表达。结果62例胃癌患者中P-gP、GST-π、TS表达率分别为77．4％、67．7％、12、9％。P-gP、GST-π表达率明显高于TS。结论P-gP、GST-π在原发性胃癌中有较高的表达率，P-gp的表达与分化程度和淋巴结转移有一定关系，可作为治疗和提示预后的指标。GST-π与肿瘤分化程度有一定相关性。P-gP、GST-π过表达导致胃癌化疗失败。鸭表达率低，提示5-FU可作为治疗原发性胃癌化疗的首选药物。

谷胱甘肽-S-转移酶M_1空白基因型和吸烟与食管癌危险性的Meta分析

目的对谷胱甘肽-S-转移酶M 1基因空白基因型与吸烟在食管癌发生中的相互作用进行Meta分析.方法按吸烟与否进行分层合并分析,以OR值作为每个研究结果的效应测定指标,若各研究结果之间无显著异质性则采用固定效应模型(FEM),否则使用随机效应模型(REM)进行合并,同时给出Meta分析森林图.基因-环境交互作用分析采用单纯病例分析法进行.结果共收集国内外相关资料5篇,积累病例560例,对照743例,吸烟组合并OR为1.523(95%CI:1.099～2.109);不吸烟组合并OR为0.933(95%CI:0.469～1.855);单纯病例合并分析显示,GSTM 1空白基因型与吸烟交互作用合并OR值为1.363(0.954～1.949).结论吸烟可能会增加GSTM 1空白基因型个体患食管癌的危险性,即携带GSTM 1空白基因型的吸烟者其患癌的危险性可能会增加,GSTM 1空白基因型与吸烟之间在食管癌的发生方面可能存在一定的交互作用.

谷胱甘肽硫-转移酶研究进展

Glutathione S-transferases(GSTs) are a family of soluble detoxification enzymes which use reduced glutathione(GSH) in conjugation and reduction reactions.Toxic electrophiles,including a variety of carcinogens,are substrates for the GSTs and are more easily excreted into bile or urine after conjugation or reduction .The three-dimensional structures of GSTs from several species,including humans,have been determined.GST activity has been found to present in all human tissues,and expression of the various GST isoenzymes differs in degree in the various tissues. Glutathione S-transferases may play a role in the protection of cells against toxic electrophiles and in the resistance to cancer chemotherapeutic agants.The polymorphisms of GSTs genes are one of the important factors that exercise influence on individual susceptibility to cancer.

谷胱甘肽S-转移酶基因多态性与特发性男性不育患者氧化应激水平的关系

目的:分析特发性男性不育患者谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)基因GSTT 1、GSTM 1及GSTP 1基因多态性与氧化应激水平及精子DNA氧化损伤的关系。方法:收集246例特发性男性不育患者的静脉血,提取全血基因组DNA,采用聚合酶链反应(PCR)对GSTT 1及GSTM 1基因进行分型,采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)对GSTP 1基因进行分型;采集患者精液,酶联免疫吸附法(ELISA)检测精浆中丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)水平及总抗氧化能力(T-AOC),同法检测精子DNA中8-羟基脱氧鸟苷(8-OH-dG)水平。结果:GSTM 1(-)及GSTT 1(-)组中精浆NO及精子DNA中8-OH-dG水平分别显著高于GSTM 1(+)及GSTT 1(+)组(P<0.01),GSTM 1/GSTT 1(-/-)组精浆MDA、NO及精子DNA中8-OH-dG水平高于GSTM 1/GSTT 1(+/+)组(P<0.05),而精浆T-AOC低于GSTM 1/GSTT 1(+/+)组(P<0.05),GSTP 1(A/G+G/G)组中NO及精子DNA中8-OH-dG水平高于GSTP 1(A/A)组(P<0.05),而T-AOC显著低于GSTP 1(A/A)组(P<0.01)。结论:GSTs的GSTT 1、GSTM 1及GSTP 1基因突变可增加特发性男性不育患者精浆氧化应激水平,降低精浆总抗氧化能力,导致精子DNA氧化损伤。

卵磷脂对花尾胡椒鲷幼鱼谷胱甘肽-硫-转移酶,谷胱甘肽过氧化物酶和DNA完整性的影响

采用不同卵磷脂添加量的配合饲料投喂花尾胡椒鲷(Plectorhyncchuscinctus)幼鱼,同步测定幼鱼的谷胱甘肽-硫-转移酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性以及DNA完整程度。结果表明,谷胱甘肽-硫-转移酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性随着饲料中卵磷脂含量的增加而提高,而DNA单链断裂程度随着饲料中卵磷脂含量的增加而减少。这提示卵磷脂能够提高鱼体的抗氧化防御系统的机能。

谷胱甘肽硫-转移酶与疾病和化疗

目的综述谷胱甘肽硫-转移酶(GSTs)的多态性与疾病发病的相关性以及GSTs基因突变对化疗效果的影响。方法对近年来此领域有代表性的文献进行整理、归纳。结果GSTs的多态性对疾病的发生,特别是恶性肿瘤的发生有较大的相关性;GSTs表达水平的升高可影响化疗效果,是引起化疗耐药的又一途径,利用GSTs逆转剂逆转化疗耐药是一种可考虑的方法。结论GSTs作为某些疾病早期发现的蛋白标记、用逆转剂逆转GSTs引起的化疗药物耐药以及实现化疗药物给药个体化尚需进行大量的多因素分析。

家蚕谷胱甘肽硫-转移酶的组织分布及发育期变化规律

为明确家蚕谷胱甘肽硫-转移酶(GSTs)的生物学信息,对家蚕不同发育阶段GSTs的变化规律、5龄幼虫主要组织及不同品种间的GSTs活性差异进行了研究。家蚕GSTs在中肠、脂肪体、血淋巴、表皮、头部等组织中都有分布,脂肪体中GSTs活性最高,其次是中肠,头部最低。各发育阶段中,在由一种虫态变为另一种虫态的初始期GSTs活性较高,以后逐渐降低。在幼虫主要组织中GSTs活性5龄第3天最高,以后逐渐下降,至吐丝前达到较低的水平。抗性较强的夏秋蚕品种的GSTs活性高于春用蚕品种,杂交种的GSTs活性高于原种。研究结果提示家蚕GSTs活性与其组织器官的生理功能、品种抵抗性等相关联。

重组日本血吸虫谷胱甘肽-硫-转移酶单克隆抗体在急性血吸虫病临床诊断中的应用

目的研究重组抗原26 ku日本血吸虫谷胱甘肽-硫-转移酶(SjGST)及其单克隆抗体在血吸虫患者分子诊断中的应用。方法用已纯化的重组SjGST抗原免疫近交系(BALB/c)小鼠,数周后取免疫鼠脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,选择性培养基筛选出杂交瘤细胞,经有限稀释法克隆化,扩大培养制备针对重组SjGST抗原的单克隆抗体细胞株。亲和层析法纯化单克隆抗体。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测急性血吸虫病患者和非流行区正常人血清。结果成功获得重组蛋白26 ku SjGST,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示与预期相对分子质量大小相符的蛋白条带。成功获得能够长期分泌抗重组SjGST单克隆抗体的杂交瘤细胞株,ELISA与蛋白质印迹试验均显示杂交瘤细胞培养上清中含有重组SjGST抗体。ELISA检测患者血清结果表明,26 ku SjGST用于急性血吸虫病患者血清中抗体检测的阳性率为90.6%,26 ku SjGST抗体用于急性血吸虫病患者血清中循环抗原检测的阳性率为59.4%。结论该重组蛋白用于急性血吸虫病患者血清中抗体的检测具有良好的免疫反应性,26 ku SjGST抗体对循环抗原的检测可作为抗体检测的有效补充。

环磷酰胺激活小鼠肝微粒体谷胱甘肽S-转移酶Ⅰ的机制研究

目的探讨环磷酰胺(CP)在体内对小鼠肝微粒体谷胱甘肽S-转移酶Ⅰ(mGST-Ⅰ)活性的影响及其可能的机制。方法用苯巴比妥75 mg·kg-1诱导小鼠CYP2B后,ip CP,测定9 h内mGST-Ⅰ酶活性,观察二巯基丁二醇(DTT)对酶激活的逆转作用和巯基烷化剂N-乙基马来酰亚胺(NEM)对酶再激活效应,用SDS-PAGE和负染凝胶法评价CP对mGST-Ⅰ蛋白表达的影响。结果 CP引起小鼠微粒体中mGST-Ⅰ活性增加;NEM在mGST-Ⅰ半胱氨酸-49-巯基(cys-49-SH)上的活化效应减弱,而CP引起的mGST-Ⅰ激活效应不被二硫键还原剂DTT逆转。激活的mGST-Ⅰ电泳图谱未见蛋白分子量变迁及蛋白表达增加。结论大剂量CP致mGST-Ⅰ激活效应机制主要是酶分子cys-49-SH上单个巯基的修饰作用。

谷胱甘肽S-转移酶-π在膀胱移行细胞癌的表达及其临床意义

目的：探讨谷胱甘肽Ｓ－转移酶－π（Ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ－Ｓ－Ｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ π、ＧＳＴ－π、）在膀胱移行细胞癌的表达情况及临床意义。方法：采用免疫组化ＳＰ法，检测１０７例未经化疗的原发性膀胱移行细胞癌中ＧＳＴ－π、Ｐ糖蛋白（Ｐ－ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ， Ｐｇｐ）表达情况。结果： ＧＳＴ－π染色分胞浆、胞核、胞浆与胞核共染三种情形，总阳性率为 ７２．９％；ＧＳＴ－π浆染色（单独胞浆、胞浆与胞核共染）阳性率为５８．９％，ＧＳＴ－π核染色（单独胞核、胞浆与胞核共染）阳性率为４６．７％，其中ＧＳＴ－π总体染色阳性和浆染色阳性与膀胱癌的病理分级、分期和术后腔内化疗复发有关，并与Ｐｇｐ表达密切相关；ＧＳＴ－π核染色阳性与膀胱癌的分级、术后腔内化疗复发无关，而与病理分期有关。结论：ＧＳＴ－π表达情况是预测原发性膀胱移行细胞癌腔内化疗疗效的有效标志物，ＧＳＴ－π浆染色较核染色更能预测膀胱癌的耐药性，ＧＳＴ－π核染色可能与膀胱癌进展有关。

典型光活化毒素α-三噻吩对棉铃虫和亚洲玉米螟谷胱甘肽S-转移酶的影响

研究了典型光活化毒素α-三噻吩(简称α-T)对棉铃虫Helicoverpaarmigera和亚洲玉米螟Ostriniafurnacalis谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)的影响。结果表明:近紫外光照(300～400nm)对棉铃虫和亚洲玉米螟幼虫GSTs活性无显著影响,但两种昆虫GSTs对α-T的反应不同。无光照条件下,α-T对亚洲玉米螟离体GSTs活性没有影响,而高浓度α-T能抑制棉铃虫离体GSTs活性;高剂量α-T可使两种昆虫活体GSTs活性升高。光照条件下,高浓度和高剂量α-T抑制棉铃虫GSTs活性,而不影响亚洲玉米螟离体GSTs活性,但低剂量α-T抑制其活体活性,而高剂量α-T则诱导其活性增加。棉铃虫和亚洲玉米螟GSTs对α-T反应的差异,可能与它们对药剂的敏感性以及药剂在两者体内的穿透、运转、贮藏、代谢等生理特性上的差异有关。

生物功能化纳米SiO_2微球的构建及对谷胱甘肽S-转移酶的捕获分离

采用巯基丙基三甲氧基硅烷(MPS)一步水解法制备了表面带有巯基(—SH)的纳米SiO2微球(nSiO2-SH),探讨了水/醇体积比、反应温度、MPS初始浓度及反应时间对nSiO2-SH微球形貌的影响,并分析了反应机理.制备的nSiO2-SH微球进一步与还原型谷胱甘肽(GSH)中的—SH反应生成双硫键(—S—S—),在微球表面键合上GSH分子,得到了生物功能化的纳米nSiO2-GSH微球.通过扫描电子显微(SEM)、透射电子显微镜(TEM)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)和热重分析仪(TG)对样品的表面形貌、尺寸和组成等进行了表征.利用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)检测样品对谷胱甘肽S-转移酶(GST)的分离效果,结果表明,nSiO2-GSH微球能从混合蛋白中特异性吸附GST,达到了分离GST的目的.

甘草酸二铵对博来霉素致肺纤维化大鼠血清中谷胱甘肽、基质金属蛋白酶-2含量的影响

目的观察甘草酸二铵对博莱霉素致大鼠肺纤维化血清中谷胱甘肽(GSH)、基质金属蛋白酶(MMP)-2的影响。方法将30只雄性Wistar大鼠按体重随机分成3组:博来霉素致肺纤维化模型组,甘草酸二铵治疗组,生理盐水对照组。采用博莱霉素复制肺纤维化模型,造模第28天开始,治疗组每天同一时间段给予甘草酸二铵75 mg·kg-1·d-1腹腔注射,对照组及模型组分别给予生理盐水(10 ml/kg)连续给药14 d。给药后第15天全部处死。取所有动物左下肺行HE染色和Masson三联染色观察肺组织病理变化,用比色法测肺泡灌洗液中GSH含量、ELISA法测血清中MMP-2含量。结果对照组肺组织大致正常,模型组肺纤维化改变明显,甘草酸二铵组肺纤维化程度较轻。甘草酸二铵组肺泡灌洗液中GSH高于模型组,低于对照组(P<0.05);甘草酸二铵组MMP-2含量低于模型组,但高于对照组(P<0.05)。结论甘草酸二铵可以减轻博来霉素致大鼠肺纤维化程度。

微粒体谷胱甘肽S-转移酶与药物代谢

目的 阐明微粒体谷胱甘肽S 转移酶 (mGST)的研究新进展及其在药物代谢中的作用。方法 综述了近年来对mGST的生物学特性及在肝脏药物代谢中的研究进展。结果 膜结合型mGST超基因家族在药物经肝微粒体解毒代谢、防止脂质过氧化以及抗癌药物耐药性中起到重要的作用。结论 mGST具有重要的药理与毒理学意义 ,具有深入研究的广阔前景。