P糖蛋白、谷胱甘肽-S-转移酶和拓扑异构酶Ⅱ在胃癌组织中的表达

背景与目的:P糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST-π)和拓扑异构酶Ⅱ(Topo-Ⅱ)等多种细胞内物质是恶性肿瘤产生多药耐药的物质基础,胃癌是比较常见的恶性肿瘤,应用免疫组化方法检测化疗前P-gp、GST-π和Topo-Ⅱ三因素在胃癌中表达的报告还比较少,为此,本文检测P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST-π)和拓扑异构酶II(Topo-Ⅱ)在胃癌组织中的表达,探讨其与胃癌分化、转移的关系。方法:应用免疫组化方法,检测75例术前未进行化疗的胃癌患者癌组织中P-gp、GST-π和Topo-Ⅱ的表达。结果:P-gp、GST-π及Topo-Ⅱ在75例胃癌组织中表达率分别为76.0%、85.3%和68.0%,与患者的年龄、性别、肿瘤发生部位及浸润深度无关,其在胃癌组织中的表达管状腺癌分别与粘液腺癌、印戒细胞癌及未分化癌比较差异均有显著性(P<0.05)。P-gp、GST-π高表达及Topo-Ⅱ低表达与其淋巴结转移有显著相关性。结论:P-gp、GST-π及Topo-Ⅱ的表达与胃癌组织类型有关,其表达可能还与胃癌细胞的分化、转移有关。

乳腺癌组织中雌激素受体、孕激素受体、P-糖蛋白、谷胱甘肽-s-转移酶-π及DNA拓扑异构酶Ⅱ的表达及临床意义

目的探讨乳腺癌组织中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、P-糖蛋白(P-gP)、谷胱甘肽-s-转移酶-π(GST-π)及DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)的表达水平。方法选取淮安市妇幼保健院2010年9月～2014年1月手术切除后经病理诊断为乳腺癌的91例标本,采用免疫组化方法检测ER、PR、P-gP、GST-π、TopoⅡ在91例乳腺癌组织中的表达强度。结果 ER、PR、GST-π、TopeⅡ的表达强度与组织学分级显著相关,TopoⅡ的表达强度与淋巴结转移显著相关,P-gP的表达强度与肿瘤大小差异显著相关。ER和PR表达成正相关(r=0.637,P=0.000)。结论ER、PR、GST-π、P-gP、TopoⅡ的检测对选择化疗方案和评估预后有重要意义。

P-糖蛋白、谷胱甘肽-S-转移酶在肺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨P-糖蛋白、谷胱甘肽-S-转移酶在肺癌组织中的表达和分布特点,初步探讨二者在肺癌多药耐药性方面的作用,为临床治疗提供理论基础。方法采用免疫组化SP法检测了113例肺组织标本。结果①P-糖蛋白、谷胱甘肽-S-转移酶在正常肺上皮组织中无表达;②P-糖蛋白、谷胱甘肽-S-转移酶在肺癌组织细胞胞质中表达明显升高,非小细胞、小细胞肺癌组织中二者的表达与正常组织有显著不同。结论P-糖蛋白、谷胱甘肽-S-转移酶对肺癌多药耐药性的形成及维持有重要的作用。

顺铂杀伤原代胃癌细胞效应与P-糖蛋白和谷胱甘肽S转移酶表达的关系

目的 :评价顺铂 (CDDP)对原代胃癌细胞的体外杀伤效应 ,及其与胃癌组织P -糖蛋白和谷胱甘肽S转移酶表达的关系。方法 :采用纯化后的人新鲜胃癌细胞 ,用台盼蓝染色法和MTT法检测经顺铂作用后细胞活力及代谢活性的变化 ,用TdT法检测顺铂体外促凋亡效应 ;同时用SABC免疫组化法检测GST -π和P - gp表达 ,以研究其间的关系。结果 :经顺铂作用后 ,体外培养的胃癌细胞出现明显的形态学改变和代谢活性的下降 ;不同个体肿瘤细胞对顺铂敏感性不同 ,低分化胃癌细胞较高分化者更敏感 (4 1.2 5 %vs 33.2 3% )。经顺铂作用后 ,肿瘤细胞凋亡率增加 ,为 33.2 1%。 39例胃癌标本GST -π和P -gp的表达阳性率分别为 6 6 .6 7%和5 8.97% ,前者表达阳性者对CDDP显示了较强的体外耐药性 ,而后者高表达与CDDP体外耐药性无关。结论 :顺铂可能通过包括诱导凋亡在内的多种途径杀伤原代胃癌细胞 ,尤对低分化者显示了明显的肿瘤杀伤效应。GST -π高表达可能影响CDDP对胃癌细胞的杀伤效应。

P-糖蛋白和谷胱甘肽硫转移酶在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的观察谷胱甘肽硫转移酶(GST)和多药耐药基因产物P-糖蛋白(P-gp)在胃癌中的表达,探讨两者与胃癌化疗耐药之间的关系。方法应用免疫组化方法定量分析P-gp和GST在75例胃癌标本中的表达,分析两者是否有相关性。结果P-gp和GST在75例胃癌组织中阳性表达率分别为43%和63%,化疗耐药组P-gp和GST阳性表达率与不耐药组比较,差别有显著性意义(P<0·05)。P-gp与GST表达水平呈正相关(r=0·378,P<0·05)。结论P-gp和GST-参与胃癌化疗耐药的机制,可作为多药耐药的标志物。

P-糖蛋白、谷胱甘肽-s转移酶的表达与胃癌细胞耐药的关系研究

目的初步探索胃癌多药耐药细胞系SGC7901／VCR的耐药机制。方法间歇诱导法，胃癌细胞系SGC7901经长春新碱（VCR）短时间诱导后，对长春新碱产生耐药。MTT法检测对VCR、5-氟尿嘧啶、表阿霉索的耐药性。Western blot检测P-糖蛋白（P—glucoprotein，P—gp）、谷胱甘肽-s转移酶（ghtathione—s transferring enzyme，GST—s）的表达。结果耐药细胞SGC7901／VCR对长春新碱耐药提高16．56倍，此耐药株同时对5-氟尿嘧啶、表阿霉素呈交叉耐药，耐药指数分别达6．9、13．05。SGC7901／VCR的P—gP、GST—s出现表达增强。结论长春新碱短时间诱导后，SGC7901产生多药耐药性（multi—drug resistance，MDR），且P—gp、GST—s表达增强。反之，抑制P—gP、GsT—s蛋白的表达，则有可能降低细胞耐药从而逆转胃癌MDR。

卵巢肿瘤中P-糖蛋白、谷胱甘肽S转移酶-π的表达及临床意义

目的研究P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽S转移酶π(GST-π)在卵巢肿瘤中的表达及其临床意义。方法采用S-P免疫组化方法,检测57例卵巢恶性肿瘤、8例正常卵巢与4例良性肿瘤中P-gp、GST-π的表达。结果P-gp在卵巢恶性肿瘤与正常卵巢及良性肿瘤中的表达有显著性差异,P-gp表达与恶性肿瘤分期、分级无关,而与组织学类型及化疗有关。GST-π的表达在卵巢恶性肿瘤与正常卵巢及良性肿瘤中的表达有显著性差异,与化疗有关,而与组织学类型、分期、分级无关。结论卵巢恶性肿瘤中存在着原发耐药,P-gp及GST-π的表达与化疗耐药高度相关。

胃癌P-糖蛋白和谷胱甘肽S转移酶表达及其与化疗药物敏感性的关系

目的 :评价谷胱甘肽S转移酶π(GST π)和P 糖蛋白 (P glycoprotein ,P gp)在胃癌组织中的表达及其与体外化疗药物敏感性的关系。方法 :对 39例胃癌新鲜手术标本 ,用SABC免疫组化法分别检测GST π和P gp表达 ,同时用MTT法检测原代胃癌细胞对 5 FU、CDDP、ADM和MMC四种化疗药物的体外敏感性 ,以研究其间的关系。结果 :在 39例胃癌标本中GST π和P gp的表达阳性率分别为 66 .67%和 58.97% ;对GST π表达阳性者 ,CDDP和MMC均显示了较强的体外耐药性 ,而对后者表达阳性者 ,ADM显示了较强的体外耐药性。GST π和P gp的高表达与肿瘤细胞对 5 FU的体外耐药性未显示相关关系。结论 :胃癌对CDDP、MMC和ADM等药物的耐药性与其GST π和P gp的高度表达相关 。

非小细胞肺癌中肺耐药蛋白、酸性谷胱甘肽-S-转移酶的协同表达及其临床意义

目的 探讨肺耐药蛋白 (LRP) 和酸性谷胱甘肽- S- 转移酶 (GST-π) 在非小细胞肺癌 (NSCLC) 中的协同表达及其临床意义。方法 用SP免疫组化方法检测62例术前均未进行化疗的NSCLC组织中LRP、GST- π蛋白的表达情况。结果 在NSCLC中LRP、GST-.π蛋白表达的阳性率分别为75. 8% (47/62); 66. 1% (41/62)。LRP蛋白表达与肿瘤分化程度相关。GST -π蛋白表达与肿瘤组织类型、分化程度、有无淋巴结转移相关。LRP与 GST π阳性表达之间存在正相关关系。结论 LRP、GST -π在不同类型的NSCLC中均可表达, 但水平不同。

P-糖蛋白和谷胱甘肽S转移酶在胆囊癌的表达及临床意义

目的:探讨P-糖蛋白(P-gp)和谷胱甘肽S转移酶(GST-Pi)在胆囊癌的表达及临床应用价值。方法:对42例胆囊癌及10例慢性结石性胆囊炎手术标本进行免疫组化检测,肿瘤病人术后随访2年,收集数据进行统计分析。结果:P-gp和GST-Pi在胆囊癌中的阳性率为76.2%和64.3%,均高于在慢性结石性胆囊炎中的表达水平30%和20%,有显著性差别(P=0.014和P=0.035)。P-gp和GST-Pi均与胆囊癌Nevin分期有关,P-gp和GST-Pi阳性的肿瘤患者2年生存率低于阴性患者(55.6%vs11.1%,P=0.013;45.5%vs12%,P=0.036)。结论:P-gp和GST-Pi可作为胆囊癌的预后指标。

木纳格葡萄谷胱甘肽-S-转移酶VvGST1基因克隆与序列分析

【目的】克隆木纳格葡萄果实中谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione-S-transferase,GST)基因VvGST1全长并研究其序列特征,为该基因在葡萄果实抗病作用和功能的研究奠定基础。【方法】根据已有的基因序列,设计3'和5'端RACE引物,利用RT-PCR和RACE技术克隆VvGST1基因cDNA全长。【结果】该基因序列全长719 bp,均为开放阅读框(ORF),共编码221个氨基酸。该基因编码蛋白相对分子质量为25.55 kDa;理论等电点pI值为6.32;分子式为C_(1178)H_(1799)N_(293)O_(321)S_(11);不稳定指数为39.22;该蛋白质是稳定的亲水性蛋白,不含跨膜结构域,没有预测到信号肽,可能存在于细胞基质中,是典型的基质蛋白。VvGST1氨基酸序列与棉花、桃、西梅、樱桃、李子、板栗等植物聚为一类,其中与棉花属亲缘关系最近。【结论】获得了木纳格葡萄谷胱甘肽-S-转移酶VvGST1基因全长编码序列,探明了该序列的结构特征。

多药耐药基因1和P糖蛋白及谷胱甘肽S转移酶在难治性癫痫中的表达研究

目的通过对难治性癫痫患者外周血中多药耐药基因1(MDR1)、P糖蛋白(P-gp)及谷胱甘肽S转移酶(GST-pi)的检测探讨难治性癫痫的发病机制;检测在不同发作类型、V-EEG中癫痫样放电部位及用药方式的患者中此3项指标的水平。方法选取2012年3月—2013年3月贵州医科大学附属医院临床确诊的散发性的难治性癫痫患者31例(难治性癫痫组),另选择同期在本院接受抗癫痫药物控制良好的癫痫患者33例(治疗有效组),荧光定量法检测外周血MDR1、GST-pi基因相对表达量,采用流式细胞术检测外周血MDR1的表达产物P-gp的表达。结合临床特点与长程视频脑电图研究癫痫患者的发作类型、异常放电部位及用药方式,比较不同类型癫痫患者以上3项指标的表达情况。结果难治性癫痫组MDR1、GST-pi基因相对表达量和白细胞P-gp高于治疗有效组,差异均有统计学意义(P<0.01)。无论是治疗有效组还是难治性癫痫组,不同发作类型患者MDR1、GST-pi基因相对表达量及白细胞P-gp比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。不同V-EEG异常放电患者MDR1、GST-pi基因相对表达量及白细胞P-gp比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。不同用药方式患者MDR1基因相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同用药方式患者GST-pi基因相对表达量和白细胞P-gp比较,差异均有统计学意义(P<0.05),其中2种和3种用药方式GST-pi基因相对表达量均高于1种用药方式,3种用药方式白细胞P-gp高于1种和2种用药方式,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论癫痫患者外周血中GST-pi、P-gp或可成为难治性癫痫联合用药的耐药指标之一;癫痫患者外周血中MDR1、GST-pi及P-gp与癫痫发作类型、癫痫样放电在V-EEG中的各种分布情况无明显相关性。

家蚕谷胱甘肽-S-转移酶E4基因的组织表达和序列特征及重组蛋白的酶活性分析

昆虫体内的谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)主要行使对异生或内源有毒物质进行代谢解毒的功能。选择家蚕谷胱甘肽-S-转移酶E4的编码基因Bmgste4为靶标,研究其组织表达谱、序列结构特征及原核表达重组蛋白的酶活性。RT-PCR检测不同组织表达特征的结果显示,Bmgste4基因在家蚕5龄第3天幼虫的头部、触角、下颚须、表皮、脂肪体、丝腺以及雄性个体的马氏管和雌性个体的卵巢中均有表达,而在血细胞、中肠以及雄性个体的精巢和雌性个体的马氏管中不表达。多序列比对结果显示BmGSTE4具有完整和保守的GST二级结构特征,N端氨基酸残基保守,特别是谷胱甘肽结合位点。构建插入Bmgste4基因开放阅读框片段的重组表达质粒p28-Bmgste4,并转化E.coli Rosetta(DE3)感受态细胞进行原核表达后,利用分光光度法测定重组蛋白对通用底物1-氯-2,4-二硝基苯的酶活参数:Km=0.58 mmol/L,Vmax=24.55μmol/(mg.min)。这些结果为进一步研究家蚕体内解毒和抗药性机制以及开发鳞翅目害虫新型生物防治药剂提供了基础信息。

膀胱癌P糖蛋白、谷胱甘肽S转移酶-π、DNA拓扑异构酶Ⅱ-α表达及其意义

目的 :探讨膀胱癌中 P糖蛋白 (Pgp)、谷胱甘肽 - S-转移酶 -π(GST-π)、DNA拓扑异构酶 -α(Topo -α)表达情况及其临床意义。方法 :采用免疫组织化学 SP法 ,检测 10 7例原发性膀胱移行细胞癌中 Pgp、GST-π、Topo - α的表达情况。结果 :Pgp、GST- π总阳性表达率分别为 6 3.6 %、72 .9% ,二者的表达与该肿瘤的病理分级、临床分期和术后腔内化疗的复发密切相关。所有膀胱癌细胞均有不同程度的 Topo - α表达降低 ,其中 Topo - α指数 、 、 、 级分别为 45 .0 %、36 .3%、12 .5 %、6 .3% ,Topo - α指数与病理分级有关、但与临床分期和术后腔内化疗的复发无关。 Pgp与 GST- π、GST- π与 Topo - α指数密切相关 ,Topo - α指数与 Pgp表达无关联。结论 :Pgp、GST-π表达情况和 Topo -α指数是判定原发性膀胱移行细胞癌恶性程度的客观指标 ;在预测以塞替派和丝裂霉素为主的术后腔内化疗敏感性方面 ,Pgp、GST-π表达情况较 Topo -α指数更为有效。

癫痫耐药患者血清和脑脊液中P-糖蛋白、转化生长因子-β1及谷胱甘肽S转移酶的表达

目的观察难治性癫痫患者血清和脑脊液中P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、转化生长因子(transforming growth factor,TGF)β1及谷胱甘肽S转移酶(glutathione S-transferase,GST)的表达。方法选取2018年2月~2020年11月期间解放军联勤保障部队第983医院规范治疗2年以上的癫痫耐药患者79例作为耐药组,同期接受抗癫痫治疗控制良好的患者60例作为敏感组。比较敏感组和耐药组脑脊液、血清中P-gp、GST、TGF-β1水平差异,分别计算同组患者脑脊液和血清中P-gp、GST、TGF-β1的相关性。结果耐药组脑脊液中P-gp、GST、TGF-β1水平均高于敏感组,两组间差异均有统计学意义(P<0.05)。耐药组血清中P-gp、GST水平高于敏感组,两组间差异均有统计学意义(P<0.05);TGF-β1水平差异无统计学意义(P>0.05)。耐药组和敏感组的血清和脑脊液中P-gp和GST表达正相关,耐药组P-gp的相关系数为0.873,GST相关系数为0.891。耐药组和敏感组脑脊液和血清TGF-β1表达无相关性。结论癫痫耐药患者脑脊液中P-gp、GST、TGF-β1水平升高,外周血P-gp、GST水平升高,监测外周血的P-gp、GST变化可能为癫痫药物治疗方案制定提供参考。

消化道恶性肿瘤组织中P糖蛋白、DNA拓扑异构酶Ⅱ及谷胱甘肽转移酶π亚型的表达

目的:检测P糖蛋白(P-gp)、DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)和谷胱甘肽转移酶π亚型(GsTπ)在消化道恶性肿瘤组织中的表达,并初步探讨其临床意义。方法:用免疫组化法检测P-gp、TopoⅡ和GSTπ在47例消化道恶性肿瘤(食管癌15例,胃癌12例,结直肠癌15例,肝癌4例,胆囊癌1例)组织中的表达,并对其与病理参数的关系进行了研究。结果:(1)在食管癌、胃癌及结直肠癌组织中,P-gp表达阳性率分别为0、16.7％和66.7％;TopoⅡ表达阳性率分别为86.7％、91.7％和100％;GSTⅡ表达阳性率分别为20.0％、25.0％和48.9％。(3)P-gp和GSTπ表达有明显相关性(r=0.979,P<0.05)。(2)P-gp和GSTπ表达的阳性率在胃癌肠型与弥漫型、高和中分化型腺癌与低分化型腺癌之间均无统计学差异(P>0.05);而结直肠癌高分化型腺癌组织中P-gp的表达阳性率显著高于中分化型腺癌(P<0.05)。结论:P-gp、TopoⅡ与GSTπ在食管癌和胃癌的多药耐药表型中的作用有限;结直肠癌的耐药表型与P-gp表达密切相关。

辣椒碱对小菜蛾的驱避活性及其体内谷胱甘肽-S-转移酶和Na^+,K^+-ATP酶活性的影响

采用常规生测方法和酶活力测定方法,初步研究了辣椒碱对小菜蛾Plutella xylostella L.的产卵忌避和拒食作用,及其对小菜蛾体内谷胱甘肽-S-转移酶、Na+,K+-ATP酶活性的影响,以期阐明辣椒碱对害虫的作用机制。结果表明,辣椒碱对小菜蛾表现出较强的产卵忌避活性和拒食活性。在6.25×104mg/L浓度下,处理24h辣椒碱对小菜蛾的非选择性产卵忌避率达96.55%,选择性产卵忌避率为84.30%;在相同浓度下,处理48h辣椒碱对小菜蛾的非选择性拒食率达81.47%,选择性拒食率为69.69%。另外,经1.25×105mg/L辣椒碱不同时间处理后,小菜蛾体内的谷胱甘肽-S-转移酶酶活力和Na+,K+-ATP酶活力与对照相比均产生了波动,处理18h时小菜蛾体内GSTs活力最高,为152.01U·mg-1pro·min-1,处理1h时小菜蛾体内Na+,K+-ATP酶活力最高,为19.99U·mg-1pro·min-1。结果说明辣椒碱能够影响小菜蛾产卵和取食行为,并且对其体内的酶系也产生了影响。

溴氰菊酯在罗非鱼组织中的累积及对谷胱甘肽-S-转移酶的影响

以罗非鱼Tilipia为试验鱼类,研究了其暴露于不同浓度溴氰菊酯后其组织中溴氰菊酯的含量和谷胱甘肽-S-转移酶GST活性的动态变化。结果表明,罗非鱼肌肉和肝脏组织中的GST的正常值分别为(4.39±0.2)U.mg.prot-1和(13.3±0.3)U.mg.prot-1。采用不同浓度的溴氰菊酯处理罗非鱼25 d,除了1.0μg.L-1浓度组罗非鱼体内无明显累积,GST与对照组相比无显著差异外,其余各浓度组均有一定的累积,同时GST发生了明显的变化。GST的变化规律为先升高后降低,即溴氰菊酯对罗非鱼体内的GST是先诱导后抑制,且这种变化幅度肝脏比肌肉大。2.0￣10.0μg.L-1浓度组经15￣20 d可在肌肉和肝脏中达到累积-释放的动态平衡,最大累积系数分别为1.85和2.20。溴氰菊酯在罗非鱼组织中达到累积平衡时,其累积量与GST活性呈较明显的负相关。研究表明,1.0μg.L-1以下的溴氰菊酯对罗非鱼没有生化毒性影响,罗非鱼组织中的溴氰菊酯累积量和GST可用来评价农药对鱼类的毒性效应。