谷胱甘肽S转移酶π与高发、难治性肿瘤关系的研究进展

谷胱甘肽S转移酶π(GST-π)是谷胱甘肽S转移酶的一种,其在正常组织中不表达,而在多种肿瘤组织中表达升高,使个体对致癌物易感,并通过多种机制使肿瘤细胞对药物产生耐药,是影响恶性肿瘤发生、发展的因素之一,其已成为目前肿瘤研究领域的热点。胃癌、食管癌、乳腺癌、肺癌是我国常见的恶性肿瘤,严重影响患者的生命健康。研究发现GST-π的表达水平在这些肿瘤组织中升高,并使肿瘤细胞产生耐药,因此了解GST-π其中的作用机制为肿瘤的治疗和预防提供依据。

巨藻中谷胱甘肽S转移酶基因对细长聚球藻PCC7942耐镉性的影响

谷胱甘肽S转移酶(glutathione S-transferase, GST)是一个较大的基因家族,在生物体生长发育和对环境变化响应中发挥重要的调控作用。本研究从巨藻(Macrocystis pyrifera)配子体中克隆了6个完整的GST基因(mpgst1、mpgst2、mpgst3、mpgst4、mpgst5和mpgst6)。随后将6个巨藻GST基因分别转化至细长聚球藻(SynechococcuselongatusPCC7942)中,提取细长聚球藻转化株基因组DNA作为模板进行PCR验证及测定转化株GST酶活进行基因功能验证,结果显示,6个mpgst基因都分别成功整合到细长聚球藻的基因组中,但只有含mpgst1、mpgst4和mpgst6基因的细长聚球藻转化株(MG1、MG4和MG6)具有耐镉性。在镉离子胁迫下,细长聚球藻转化株MG1、MG4和MG6的生长、光合色素含量和叶绿素荧光参数Fv/Fm值均显著高于野生株(P<0.05)。本研究结果为进一步研究巨藻GST基因的抗重金属胁迫功能奠定了基础。

松材线虫谷胱甘肽S转移酶基因响应阿维菌素胁迫功能研究

【目的】由松材线虫Bursaphelenchusxylophilus引起的松材线虫病严重破坏东亚和欧洲等多个国家和地区的森林生态系统。【方法】本研究从松材线虫基因组中获取Bx-gst12,随后对该基因的全长CDS区域进行基因克隆和序列分析、同时通过生物信息学方法对Bx-gst12所编码的蛋白质Bx-GST12的理化性质、亲疏水性、跨膜区、二级结构和三级结构进行了预测和分析。并通过基因干扰技术对Bx-gst12干扰后,分析该基因在松材线虫对阿维菌素敏感程度的影响。【结果】生物信息学结果显示Bx-GST12蛋白稳定系数为28.96,亲水系数为-0.412,三级结构预测Bx-GST12蛋白具有含有9个α螺旋和5个β折叠,但不具有跨膜结构域。应用基因干扰技术对Bx-gst12基因进行基因干扰,干扰后的Bx-gst12基因表达量变为原来的25.14%。阿维菌素溶液生物测定实验结果表明,Bx-gst12干扰后的松材线虫死亡率明显高于对照组,松材线虫死亡率平均提高了7.12%。【结论】本研究成功克隆Bx-gst12基因并对该基因的dsRNA进行了设计与合成。Bx-gst12基因干扰显著影响了松材线虫对阿维菌素的敏感性,在相同浓度的阿维菌素胁迫相同时间中,干扰组线虫死亡率明显高于对照组,表明Bx-gst12基因在松材线虫药物代谢过程中发挥着显著作用。

顺铂杀伤原代胃癌细胞效应与P-糖蛋白和谷胱甘肽S转移酶表达的关系

目的 :评价顺铂 (CDDP)对原代胃癌细胞的体外杀伤效应 ,及其与胃癌组织P -糖蛋白和谷胱甘肽S转移酶表达的关系。方法 :采用纯化后的人新鲜胃癌细胞 ,用台盼蓝染色法和MTT法检测经顺铂作用后细胞活力及代谢活性的变化 ,用TdT法检测顺铂体外促凋亡效应 ;同时用SABC免疫组化法检测GST -π和P - gp表达 ,以研究其间的关系。结果 :经顺铂作用后 ,体外培养的胃癌细胞出现明显的形态学改变和代谢活性的下降 ;不同个体肿瘤细胞对顺铂敏感性不同 ,低分化胃癌细胞较高分化者更敏感 (4 1.2 5 %vs 33.2 3% )。经顺铂作用后 ,肿瘤细胞凋亡率增加 ,为 33.2 1%。 39例胃癌标本GST -π和P -gp的表达阳性率分别为 6 6 .6 7%和5 8.97% ,前者表达阳性者对CDDP显示了较强的体外耐药性 ,而后者高表达与CDDP体外耐药性无关。结论 :顺铂可能通过包括诱导凋亡在内的多种途径杀伤原代胃癌细胞 ,尤对低分化者显示了明显的肿瘤杀伤效应。GST -π高表达可能影响CDDP对胃癌细胞的杀伤效应。

谷胱甘肽S转移酶与三氧化二砷耐药性的相关研究

目的探讨谷胱甘肽S转移酶π(GSTπ)与三氧化二砷(As2O3)耐药之间的关系。方法选用30例急性早幼粒细胞白血病(APL)患者及10例正常对照组的外周血或骨髓,用RT-PCR方法检测GSTπ的表达。结果APL细胞的GSTπ表达率为36.7%。其中应用As2O3治疗的初治组GSTπ表达率为25%,治疗后复发和耐药的APL的GSTπ表达率为60%,复发或耐药组表达较初治组GSTπ表达明显增高(P<0.05),GSTπ表达较高者临床缓解率低(P<0.05)。结论GSTπ高表达与As2O3耐药密切相关,GSTπ的高表达可作为治疗APL耐药的一个标志。

谷胱甘肽S转移酶л在脑原发性胶质瘤中表达的临床意义

目的 探讨谷胱甘肽 S转移酶л (GST-л)在脑原发性胶质瘤中的表达及其临床意义 ,以进一步深入研究原发性脑胶质瘤多药耐药 (MDR)的机制。方法 利用免疫组化技术 S- P法检测 10 1例原发性脑胶质瘤及 2 5例正常脑组织中 GST-л的表达。结果 GST-л在正常脑组织中没有表达 ;原发性脑胶质瘤中 GST-л的表达率为6 4 .3% (6 5 / 10 1) ,阳性表达位于肿瘤细胞浆 ;GST- л在原发性脑胶质瘤中的表达强度与病理分级呈正相关。结论 GST- л在原发性脑胶质瘤中的不同表达与胶质瘤 MDR的产生密切相关 ,检测胶质瘤细胞 GST- л的表达可预示不同的化疗敏感性及肿瘤恶性度 ,有利于指导临床更加合理地选择化疗方案及进行个体化化疗。

原发性肺癌^(99)Tc^m-MIBI显像与谷胱甘肽S转移酶π及DNA拓朴异构酶Ⅱa表达的关系

目的探讨原发性肺癌99Tcm-甲氧异丁基异氰(99Tcm-MIBI)显像与肺癌组织中谷胱甘肽S转移酶π(GST-π)、DNA拓扑异构酶Ⅱa(TopoⅡa)表达的关系。方法对34例原发性肺癌患者术前行早期与延迟99Tcm-MIBI显像,应用免疫组织化学方法检测术后标本中多药耐药蛋白GST-π、TopoⅡa的表达水平。比较早期摄取比值(EUR)、晚期摄取比值(DUR)及放射性清除指数(WR)与GST-π、TopoⅡa表达的关系。结果99Tcm-MIBI早期、延迟显像阳性率分别为89.5%、82.4%,GST-π、TopoⅡa表达阳性率分别为78.5%、61.7%,GST-π、TopoⅡa表达阳性组和阴性组间EUR、DUR、WR差异均无统计学意义(P>0.05)。结论99Tcm-MIBI显像与肺癌组织中GST-π、TopoⅡa表达无相关性,不具有检测肺癌患者肿瘤组织中GST-π、TopoⅡa表达的价值。

棉花恢复系的恢复力与花药谷胱甘肽S转移酶活性的关系

转gst基因棉花恢复系“浙大强恢”克服了传统恢复系的恢复力不够强的缺陷 ,用此种恢复系配制的杂种F1 ,其花粉育性强 ,杂种优势明显。进一步研究的结果表明 :在造孢细胞增殖、小孢子减数分裂和花粉成熟 3个时期 ,转基因恢复系花药中谷胱甘肽S转移酶 (GST)活性比受体恢复系花药中的都有极显著提高。与受体恢复系配制的F1 相比 ,转基因恢复系配制的F1 花药中GST酶活性也有极显著提高。相关性分析表明 ,以“浙大强恢”和“DES HAF2 77”为父本配制的F1 ,其可育花粉率与其小孢子减数分裂时期和花粉成熟时期花药中GST酶活性呈极显著正相关 。

谷胱甘肽S转移酶M1、T1和P1基因多态与肝癌易感性研究

目的 探讨谷胱甘肽S转移酶M 1、T1和P1基因多态与肝癌的关系。方法 应用PCR技术对 84例肝癌患者和 14 4例健康对照的谷胱甘肽S转移酶M 1、T1和P1基因多态进行检测。结果 病例组GSTM 1和GSTT1空白基因型频率分别为 6 6 6 7%和 4 0 4 8% ,对照组则分别为 4 7 92 %和 2 5 0 0 % ,两组差别均有统计学意义 (P <0 0 5 ) ;病例组GST13种基因型频率分别为 6 4 2 9% ,33 33%和 2 38% ,对照组分别为 6 1 80 % ,34 0 3%和 4 17% ,两组差别无统计学意义。平衡性别因素后其比值比分别为 2 2 0 ,1 93和 0 94。同时携带GSTM 1空白基因型和GSTT1空白基因型的个体患肝癌的危险性显著增加。结论 GSTM

卵巢肿瘤中P-糖蛋白、谷胱甘肽S转移酶-π的表达及临床意义

目的研究P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽S转移酶π(GST-π)在卵巢肿瘤中的表达及其临床意义。方法采用S-P免疫组化方法,检测57例卵巢恶性肿瘤、8例正常卵巢与4例良性肿瘤中P-gp、GST-π的表达。结果P-gp在卵巢恶性肿瘤与正常卵巢及良性肿瘤中的表达有显著性差异,P-gp表达与恶性肿瘤分期、分级无关,而与组织学类型及化疗有关。GST-π的表达在卵巢恶性肿瘤与正常卵巢及良性肿瘤中的表达有显著性差异,与化疗有关,而与组织学类型、分期、分级无关。结论卵巢恶性肿瘤中存在着原发耐药,P-gp及GST-π的表达与化疗耐药高度相关。

胃癌P-糖蛋白和谷胱甘肽S转移酶表达及其与化疗药物敏感性的关系

目的 :评价谷胱甘肽S转移酶π(GST π)和P 糖蛋白 (P glycoprotein ,P gp)在胃癌组织中的表达及其与体外化疗药物敏感性的关系。方法 :对 39例胃癌新鲜手术标本 ,用SABC免疫组化法分别检测GST π和P gp表达 ,同时用MTT法检测原代胃癌细胞对 5 FU、CDDP、ADM和MMC四种化疗药物的体外敏感性 ,以研究其间的关系。结果 :在 39例胃癌标本中GST π和P gp的表达阳性率分别为 66 .67%和 58.97% ;对GST π表达阳性者 ,CDDP和MMC均显示了较强的体外耐药性 ,而对后者表达阳性者 ,ADM显示了较强的体外耐药性。GST π和P gp的高表达与肿瘤细胞对 5 FU的体外耐药性未显示相关关系。结论 :胃癌对CDDP、MMC和ADM等药物的耐药性与其GST π和P gp的高度表达相关 。

谷胱甘肽S转移酶基因多态性与NSCLC化疗疗效的关系

59例非小细胞肺癌(NSCLC)患者,均采用以顺铂为基础的化疗方案治疗,用聚合酶链反应—连接酶检测反应(PCR-LDR)检测其GSTM1、GSTPi A313G基因多态性,并分析其与化疗疗效的关系。结果本组患者GSTM1基因缺失28例,基因未缺失31例;GSTP1基因A/G、G/G和A/A型分别有20、7、32例。GSTM1基因缺失者化疗有效率为42.86%,明显高于基因未缺失者的32.26%,P<0.05。携带GSTPi A/A基因型者化疗有效率为31.25%,明显低于携带A/G、G/G基因型者的40.00%和51.74%,P均<0.05。认为GSTM、GSTPi基因多态性与铂类药物治疗NSCLC的化疗疗效相关,可作为预测其化疗疗效的指标。

谷胱甘肽S转移酶P1基因多态性与新疆维吾尔族慢性阻塞性肺疾病易感性的关系

目的 探讨谷胱甘肽S转移酶P1（glutathione S-transferase P1,GSTP1）基因多态性与新疆维吾尔族慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease,COPD）易感性的关系.方法 通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）的方法对新疆维吾尔族150例COPD患者和150例健康体检者的GSTP1基因型进行检测;利用SPSS 17软件分析该多态性位点与COPD易感性的关系,并与其他种族的基因型分布进行比较.结果 在COPD组和对照组中均以AA基因型为主,两组之间的AA、AG和GG基因型分布有统计学差异（P=0.001）,等位基因A和G之间亦有统计学差异（P=0.001）;经调整年龄、性别和吸烟史后,分析结果表明G等位基因是COPD发病的危险因素（P=0.001,OR=2.525,95％ CI=1.525～4.171）.结论 在维吾尔族人群中GSTP1第5外显子105位G等位基因可能是COPD发病的危险因素.

谷胱甘肽S转移酶P1和4-HNE在前列腺癌中的表达及其临床意义

目的:探讨谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)和四羟基壬烯(4-HNE)在前列腺癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化方法检测40例前列腺癌组织及42例BPH组织中GSTP1和4-HNE的表达,分析GSTP1和4-HNE的表达与Gleason分级之间的关系。结果:GSTP1在BPH组织中为高表达(92.9%),40例前列腺癌组织中GSTP1表达率在高、中、低分化癌中分别为58.3%、20.0%、16.7%,呈下降趋势,两组GSTP1表达差异有统计学意义(P<0.01)。4-HNE在前列腺增生组织中阳性表达率较低,仅为5.0%。40例前列腺癌组织中4-HNE高表达,在高、中、低分化癌中分别为91.6%、100.0%、100.0%,呈明显上升趋势,两组4-HNE表达差异有统计学意义(P<0.01)。前列腺癌组织中GSTP1和4-HNE阳性表达呈负相关(r=-2.73,P<0.01)。结论:GSTP1表达缺失和4-HNE的高表达,可能在前列腺癌的进展中起重要作用。

葡萄风信子谷胱甘肽S转移酶基因克隆与表达分析

以亚美尼亚葡萄风信子为材料,利用本课题组前期获得的葡萄风信子转录组数据库,根据已经获得的葡萄风信子GST基因片段,通过PCR技术克隆得到葡萄风信子GST基因的c DNA序列,命名为Ma GST。Ma GST的c DNA全长为711 bp,开放阅读框为666 bp,编码221个氨基酸,推测蛋白质分子量为54.1 k D,理论等电点p I为5.13。利用生物信息分析软件对Ma GST基因进行同源性比对和系统进化分析表明,结果显示该基因编码的氨基酸具有谷胱甘肽S转移酶典型的C端与N端双结构域,属于GST Tau家族蛋白;与洋葱和小麦GST基因的一致性分别为76.72%和62.50%。实时定量PCR结果显示Ma GST在葡萄风信子各组织器官表达强度相似,属于组成型表达;水杨酸(SA)可以明显诱导Ma GST表达,Ma GST对氯化钠(Na Cl)应答不是很明显,甚至表达量有稍微的下调。

三氧化二砷对耐药MR_2细胞谷胱甘肽S转移酶作用的研究

目的 :探讨三氧化二砷 (As2 O3 )对耐药急性早幼粒细胞白血病 (APL)MR2 细胞谷胱甘肽S转移酶的作用。 方法 :以耐维甲酸 (RA)早幼粒细胞白血病细胞株MR2 为研究对象 ,以非耐药早幼粒细胞白血病NB4 为对照组 ,用免疫组化法观察谷胱甘肽S转移酶 (GST)的表达。 结果 :MR2 细胞GSTπ表达 (6 0 .4± 4.0～ 6 6 .5± 4.4)较NB4 细胞(2 8.3± 5 .6～ 31.2± 5 .1)明显增强 (P <0 .0 5 )。 0 .5～ 2 .0 μmol/LAs2 O3 能显著降低MR2 细胞GSTπ表达 (P <0 .0 5 ) ,而对GSTα、GSTμ无影响。 结论 :GSTπ表达的下调 ,可能是As2 O3 克服耐药的敏感性指标 ,而GSTα、GSTμ则否。全反式维甲酸 (ATRA)可能是GSTπ催化作用的底物。

谷胱甘肽S转移酶P1 Ile105Val多态性与肺癌易感性关系的Meta分析

目的用Meta分析的方法综合评价谷胱甘肽S转移酶P1基因(GSTP1)105氨基酸位点Ile/Val多态性与肺癌易感性的关系。方法检索公开发表的关于谷胱甘肽S转移酶P1基因105氨基酸位点Ile/Val多态性与肺癌易感性关系的文献,把研究人群分为高加索人群及东亚人群,以病例组及对照组比值比(OR值)为效应指标,应用Meta分析软件RevMan 4.2分别计算两种人群及其亚组的合并OR值及95%CI,进行敏感度分析和发表偏倚评估,给出Meta分析森林图和漏斗图。结果共纳入文献24篇,其中高加索人群15篇,纳入病例6 601例,对照6 821例,东亚人群9篇,纳入病例1 822例,对照2 017例,分别计算两组人群及其各亚组的GG+AG/AA合并OR值,两种人群总体OR值及各亚组OR值均未提示有相关性,敏感度分析表明结果稳定,高加索人群研究有发表偏倚,东亚人群研究未见发表偏倚。结论谷胱甘肽S转移酶P1基因(GSTP1)105氨基酸位点Ile/Val多态性与高加索人群和东亚人群肺癌易感性均不具有相关性,但是没有根据吸烟量进行亚组分析。