谷胱甘肽S转移酶1和超氧化物歧化酶在外阴鳞状细胞癌和外阴硬化性苔癣中的表达及临床意义

目的探讨谷胱甘肽S转移酶1（GSTP1）和超氧化物歧化酶（SOD）在外阴硬化性苔癣和外阴鳞癌中的表达情况,分析两者与疾病发生发展的关系。方法选取中国医科大学附属第一医院1998—2009年接受手术治疗或活检切除的外阴鳞癌患者30例,外阴硬化性苔藓15例。外阴整形术中去除的正常外阴皮肤组织10例。采用免疫组化方法检测GSTP1和SOD在外阴硬化性苔藓及外阴鳞癌中的表达,并收集外阴鳞癌患者的临床病理资料进行分析。结果 GSTP1和SOD均在正常外阴皮肤表皮基底细胞和真皮层散在的细胞中表达。在外阴鳞状细胞癌中GSTP1和SOD表达均增加（P〈0.05）。GSTP1和SOD在Ⅰ~Ⅱ期外阴鳞状细胞癌组织中表达明显低于Ⅲ~Ⅳ期（P〈0.05）,在高分化中表达明显低于中低分化（P〈0.05）,在有淋巴结转移中明显高于无淋巴结转移。GSTP1和SOD在外阴鳞癌组织中的表达量呈正相关（r2=0.1474,P=0.01）。在外阴硬化性苔癣中GSTP1表达增多,SOD表达减少（P〈0.05）。结论 GSTP1和SOD过表达与外阴鳞癌的发生、发展有关。SOD减少与外阴硬化性苔癣的病变有关。

谷胱甘肽S转移酶P1 Ile105Val多态性与肺癌易感性关系的Meta分析

目的用Meta分析的方法综合评价谷胱甘肽S转移酶P1基因(GSTP1)105氨基酸位点Ile/Val多态性与肺癌易感性的关系。方法检索公开发表的关于谷胱甘肽S转移酶P1基因105氨基酸位点Ile/Val多态性与肺癌易感性关系的文献,把研究人群分为高加索人群及东亚人群,以病例组及对照组比值比(OR值)为效应指标,应用Meta分析软件RevMan 4.2分别计算两种人群及其亚组的合并OR值及95%CI,进行敏感度分析和发表偏倚评估,给出Meta分析森林图和漏斗图。结果共纳入文献24篇,其中高加索人群15篇,纳入病例6 601例,对照6 821例,东亚人群9篇,纳入病例1 822例,对照2 017例,分别计算两组人群及其各亚组的GG+AG/AA合并OR值,两种人群总体OR值及各亚组OR值均未提示有相关性,敏感度分析表明结果稳定,高加索人群研究有发表偏倚,东亚人群研究未见发表偏倚。结论谷胱甘肽S转移酶P1基因(GSTP1)105氨基酸位点Ile/Val多态性与高加索人群和东亚人群肺癌易感性均不具有相关性,但是没有根据吸烟量进行亚组分析。

谷胱甘S肽转移酶P1多态性与慢性阻塞性肺疾病易感性的研究

目的 :探讨谷胱甘S肽转移酶P1(GSTP1)基因外显子 10 5位多态性与慢性阻塞性肺疾病 (COPD)易感性的关系。方法 :应用PCR RFLP技术结合聚丙烯酰胺凝胶电泳及硝酸银染色 ,对 10 4例COPD患者和 44例非COPD人群GSTP1基因外显子 10 5位多态位点进行检测 ,并根据性别、年龄及吸烟史对其易感性进行分析。结果 :( 1)COPD组与对照组GSTP1基因A/A基因型频率分别为 0 62 5、0 5 2 2 ,二者未发现差异有显著性 (P >0 0 5 ) ,两组A/G基因型频率、G/G基因型频率也未发现差异有显著性 (P >0 0 5 )。COPD组与对照组GSTP1基因 10 5位A型等位基因频率分别为 0 78、0 73 ,未发现差异有显著性 (P >0 0 5 )。 ( 2 )根据性别、不同年龄组、不同吸烟史分析 ,COPD组与对照组之间GSTP1等位基因频率的差异均无显著性 (P值均 >0 0 5 )。结论 :GSTP1基因外显子 10

谷胱甘肽S转移酶P1基因多态性与慢性阻塞性肺疾病关系的研究

目的:了解湖北地区健康汉族人群和慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)基因多态性,探讨汉族人GSTP1基因多态性与COPD的关系。方法:用聚合酶链式反应—限制性片段长度多态分析(PCR-RFLP)检测68例健康汉族人和50例COPD患者GSTP1基因型。结果:健康人群和COPD人群中有3种基因型,但以Ile105纯合子基因型为主,两组人群的基因型和基因频率比较均无显著性差异(P>0.05)。结论:GSTP1基因多态性可能与COPD的发生无相关性。

谷胱甘肽S转移酶T1基因多态性与口腔癌易感性的meta分析

目的:通过既往相关研究,综合评价谷胱甘肽S转移酶T1(glutathione S-transferase class Theta-1,GSTT1)基因多态性与口腔癌易感性间的关联。方法:根据系统评价的原理和规范,检索PubMed数据库,纳入GSTT1基因与口腔癌的病例对照研究。根据种族,采用分层Meta分析评估GSTT1基因多态性与口腔癌的关联性,同时评估发表偏倚。结果:Meta分析显示,GSTT1基因多态性与口腔癌总的效应为OR=1.17(95%CI:0.87～1.58)。进一步亚组分析显示,亚洲人种OR=0.99(95%CI:0.71～1.36);高加索人种OR=1.07(95%CI:0.69～1.64);混合人种OR=1.89(95%CI:0.76～4.67)。结论:尚不能认为GSTT1基因多态性能影响口腔癌的易感性,这一结论尚需要大规模、多种族的流行病学或功能学研究验证。

谷胱甘肽S转移酶M1基因多态性与直肠癌的相关性的初步探讨

目的探讨谷胱甘肽S转移酶M1基因多态性与直肠癌的关系。方法以聚合酶链反应方法,分析了56个直肠癌病人和性别、年龄配对的143个正常对照的谷胱甘肽S转移酶M1基因型及其对直肠癌的相关性。结果GSTM1基因缺失频率在病例组和对照组之间无有显著差异。结论GSTM1基因缺失可能不是结直肠癌发生的易感基因型。

76例重庆地区汉族正常人谷胱甘肽S转移酶P1基因多态性研究

目的 探讨重庆地区正常人谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1) 5号外显子 10 5位氨基酸基因型频率分布情况。方法 用聚合酶链反应 (PCR)技术和限制性片段长度多态性 (RFLP)技术检测 76例重庆地区汉族正常人GSTP15号外显子 10 5位氨基酸基因型和等位基因分布。结果 重庆地区汉族正常人GSTP15号外显子 10 5位点氨基酸基因型分布以野生型纯合子Ile(异亮氨酸 ) 10 5Ile基因型为主 ,占 93.4 2 % ,而杂合子Ile 10 5Val(颉氨酸 )和突变型纯合子Val 10 5Val基因型均较少 ,仅占3.95 %和 2 .6 3%。GSTP15号外显子 10 5位点氨基酸等位基因分布以Ile 10 5等位基因为主 (95 .39% ) ,而Val 10 5等位基因极少 (4 .6 % )。结论 中国重庆地区汉族正常人GSTP15号外显子 10 5位点氨基酸基因型频率和基因频率分布与国外其它民族分布情况有显著性差异 ,与国内其它地区的报道结果也有差异 ,提示在中国汉族人群内部其不同的地区GSTP1基因多态性可能不一致。

GSTP1通过调控STAT3信号通路促进乳腺癌细胞增殖与阿霉素耐药

目的 探讨谷胱甘肽S-转移酶P1(GSTP1)对人乳腺癌MCF-7细胞增殖与阿霉素耐药性的影响及其作用机制。方法 Western blotting检测野生型乳腺癌细胞MCF-7和阿霉素耐药乳腺癌细胞MCF-7/ADR中的GSTP1表达量,通过在MCF-7细胞中转染Flag-GSTP1质粒过表达GSTP1,在MCF-7/ADR细胞中转染GSTP1敲低慢病毒(shGSTP1)干扰GSTP1表达;平板克隆形成实验、CCK-8法和流式细胞术检测转染后乳腺癌细胞的增殖能力、阿霉素耐药性及凋亡水平的变化。Western blotting检测GSTP1表达水平的变化对STAT3通路激活的影响。结果 GSTP1在MCF-7细胞中表达量极低,且显著低于MCF-7/ADR细胞系。GSTP1过表达的MCF-7/ADR细胞克隆形成数量显著多于野生型MCF-7细胞(P<0.05)。过表达GSTP1显著提升了MCF-7细胞的增殖能力,而在MCF-7/ADR细胞系干扰GSTP1表达水平后显著抑制了细胞增殖能力(P<0.05)。CCK-8结果显示,在0.1、1、10、50μmol/ml不同浓度的阿霉素处理下,GSTP1表达水平与MCF-7细胞对阿霉素的耐药性呈正相关(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示,GSTP1过表达组(Flag-GSTP1)和对照组(Flag)的凋亡率分别为(11.41±1.16)%和(21.1±1.72)%,GSTP1过表达显著抑制了阿霉素诱导的细胞凋亡(P<0.05)。Western blotting检测结果显示,GSTP1的过表达激活了STAT3信号通路,同时在MCF-7/ADR细胞系中抑制STAT3显著降低了GSTP1的表达水平(P<0.05)。结论 GSTP1通过上调STAT3表达调节乳腺癌细胞MCF-7的增殖能力和对阿霉素的耐药性。

外周血谷胱甘肽S转移酶M1和T1基因多态性与乙型肝炎肝硬化易感性及肝功能的关联

目的 探讨外周血谷胱甘肽S转移酶M1(GSTM1)和T1基因(GSTT1)与乙型肝炎肝硬化易感性及肝功能的关系。方法 选取2018年3月-2021年3月医院收治的乙型肝炎肝硬化患者110例(研究组)、乙型肝炎患者45例(对照组)为研究对象,检测患者外周血GSTM1和GSTT1基因分型,Child Pugh分级标准评估患者肝功能,并检测血清肝功能指标[谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBiL)、谷草转氨酶(AST)],比较两组外周血GSTM1、GSTT1基因型分布情况,分析不同临床特征乙型肝炎肝硬化患者GSTM1及GSTT1基因暴露水平,明确GSTM1和GSTT1与乙型肝炎肝硬化易感性及肝功能的关系。结果 研究组肝功能指标、肝功能分级较对照组高(P<0.05)。研究组GSTM1空白基因占比、GSTT1非空白基因占比高于对照组(P<0.05)。乙型肝炎肝硬化患者Child Pugh分级为C级的GSTM1空白基因分布频率较GSTM1非空白基因高,GSTT1非空白基因分布频率较GSTT1空白基因高(P<0.05)。多因素非条件Logistic回归结果显示GSTM1空白基因、GSTT1非空白基因是乙型肝炎肝硬化及肝功能的影响因素(P<0.01)。结论 具备GSTM1空白基因、GSTT1非空白基因的个体,乙型肝炎肝硬化风险更高,且易出现肝功能损害,两者对乙型肝炎肝硬化的早期诊治有指导意义。

小鼠谷胱甘肽S转移酶K1启动子荧光素酶报告基因的构建及功能鉴定

目的:构建小鼠谷胱甘肽S转移酶K1(mGSTK1)启动子荧光素酶报告基因质粒,并分析其活性。方法:根据GeneBank中mGSTK1基因序列设计引物,应用PCR技术扩增mGSTK1启动子片段,插入pGL3-basic载体,获得mGSTK1启动子报告基因质粒pGL3-mGSTK1-2046。再以pGL3-mGSTK1-2046为模板,进一步构建了2个5’端部分缺失的报告基因质粒:pGL3-mGSTK1-936和pGL3-mGSTK1-76。将构建的报告基因质粒瞬时转染不同的细胞株3T3-L1和人胚肾(HEK)293,48 h后检测荧光素酶的活性。结果:所构建的质粒经酶切、测序鉴定正确。pGL3-mGSTK1-2046在3T3-L1和HEK293中均有不同程度的转录活性。将pGL3-mGSTK1-2046、pGL3-mGSTK1-936和pGL3-mGSTK1-76转染HEK293细胞,结果显示pGL3-mGSTK1-936转录活性最高,而pGL3-mGSTK1-76转录活性显著降低。结论:成功构建mGSTK1启动子荧光素酶报告基因质粒;翻译起始点上游的-971～-111 bp片段是mGSTK1启动子的重要区域。为深入了解mGSTK1启动子的调控机制以及今后对代谢性疾病的治疗提供一定的实验基础。

谷胱甘肽S转移酶A1基因多态性与子癇前期发病的相关性

目的研究谷胱甘肽S转移酶A1（Glutathinoe S-transferase A1,GSTA1）基因多态性与无锡地区汉族妇女中子癇前期发病的相关性。方法随机抽取就诊于无锡市妇幼保健院产科的子癇前期产妇90例作为实验组,正常妊娠产妇90例作为对照组,采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应（polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP）检测两组产妇血液中位于GSTA1基因启动子区的SNP位点rs3957357（GSTA1-69C/T）的等位基因型及基因型。结果 GSTA1-69C/T中T等位基因在实验组和对照组中的频率分别为12.2%及13.3%,两组差异无统计学意义（χ~2=0.0997,P=0.752）;同样,该多态性位点的三种基因型CC、CT、TT在实验组中的分布频率为77.8%、20.0%、2.2%,在对照组中的分布频率分别为74.5%、24.4%、1.1%,差异无统计学意义（χ~2=0.7990,P=0.691）。结论GSTA1基因多态性与无锡地区汉族妇女子癇前期的发病无相关性。

稳定过表达人MGST1基因抑制肺腺癌细胞SPC-A-1的凋亡

目的:建立稳定过表达微粒体谷胱甘肽S转移酶1(microsomal glutathione S-transferase 1,MGST1)基因的肺腺癌SPC-A-1细胞系,探讨MGST1在肺腺癌中的作用及其机制。方法:重组质粒pcDNA3-MGST1和空载体pcDNA3以脂质体介导的方法转染至SPC-A-1细胞中,经过G418筛选稳转细胞系,标记为pcDNA3-MGST1细胞和空载体pcDNA3细胞。实时荧光定量PCR及Western blotting鉴定稳转细胞中MGST1 mRNA和蛋白的表达情况。MTS法检测稳转细胞的活力;流式细胞仪和Western blotting检测H_2O_2诱导下稳转细胞的凋亡率和下游凋亡相关蛋白水平变化。结果:酶切鉴定和测序结果显示pcDNA3-MGST1重组质粒构建成功,并获得具有G418抗性的稳转细胞株。pcDNA3-MGST1细胞中MGST1在mRNA和蛋白水平表达均显著升高(P<0.01),且细胞活力明显增加(P<0.05)。H_2O_2诱导下,pcDNA3-MGST1细胞的早期凋亡率明显低于pcDNA3组[(3.30±0.40)%vs(6.50±0.95)%,P<0.05];pcDNA3-MGST1细胞凋亡相关蛋白caspase 9、caspase 3、PARP表达增多,cleaved-caspase 9、cleaved-caspase 3、cleaved-PARP表达明显减少。结论:本研究成功构建了稳定过表达MGST1的SPC-A-1肺腺癌细胞系,MGST1可能通过调节caspase凋亡通路抑制肺腺癌细胞的凋亡。

GSTP1、XPG基因多态性与晚期非小细胞肺癌患者铂类药物化疗疗效及生存期的关系

背景与目的:本文旨在探讨谷胱甘肽S转移酶P1(glutathione S-transferase P1,GSTP1)基因A105G和人着色性干皮病G组(xeroderma pigmentatosum group G,XPG)基因C46T多态性与晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者对以铂类药物为主方案的化疗疗效及生存期的关系。方法:经病理学确诊的晚期NSCLC患者85例,化疗前取静脉血采用DNA测序法检测GSTP1 A105G和XPG C46T多态性,给予以铂类药物为主方案的化疗,2个周期后进行临床疗效评价(RECIST标准)并统计疾病进展时间(time to progression,TTP)和总生存时间(overall survival,OS),分析GSTP1 A105G和XPG C46T多态性与化疗疗效及生存期的关系。结果:85例晚期NSCLC患者中,GSTP1 A/G+G/G基因型和A/A基因型患者化疗有效率分别为43.59%和19.57%,差异有统计学意义(χ2=5.738,P<0.05);XPG C/C基因型和C/T+T/T基因型患者化疗有效率分别为42.86%和18.60%,差异有统计学意义(χ2=5.886,P<0.05);联合多态性分析显示,同时携带GSTP1 A/G+G/G和XPG C/C基因型患者化疗有效率最高为44.74%,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。至随访结束,81例患者中位TTP为6.5个月,其中GSTP1 A/G+G/G基因型为8.0个月,A/A基因型为6.0个月,差异有显著统计学意义(χ2=14.688,P<0.01);XPG C/C基因型为7.5个月,C/T+T/T基因型为6.0个月,差异有显著统计学意义(χ2=10.897,P<0.01);联合多态性分析显示,同时携带GSTP1 A/G+G/G和XPG C/C基因型患者的中位TTP最长为8.0个月,组间比较差异有显著统计学意义(P<0.01)。78例患者中位OS为9.0个月,其中GSTP1 A/G+G/G基因型为11.0个月,A/A基因型为9.0个月,差异有显著统计学意义(χ2=14.522,P<0.01);XPG C/C基因型为10.5个月,C/T+T/T基因型为9.0个月,差异有显著统计学意义(χ2=12.136,P<0.01);联合多态性分析显示,同时携带GSTP1 A/G+G/G和XPG C/C基因型患者的中位OS最长为11.0个月,组间比较差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论:GSTP1 A105G和XPG C46T多态性可单独及联合用于预测晚期NSCLC患者对以铂类药物为主方案的化疗疗效及生存期,初步提示可以根据患者基因型来指导个体化治疗。

DPYD、GSTP1、MTHFR基因多态性对5-FU类基础化疗结直肠癌患者疗效的影响

目的探讨二氢嘧啶脱氢酶基因(DPYD)、谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)和亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)与接受以5-FU类为基础的化疗方案治疗的结直肠癌(CRC)患者疗效的关系。方法选择晚期CRC患者90例,其中接受FOLFOX方案34例、接受CapeOX方案56例,化疗至少3周期后评价疗效,应用荧光染色原位杂交测序法检测患者外周血DPYD(rs3918290、rs55886062)、GSTP1(rs1695)、MTHFR(rs1801133、rs1801131)基因型,分析各基因型与CRC患者近期疗效的关系。结果90例CRC患者中,DPYD 2个位点(rs3918290、rs55886062)均为野生型,该样本不符合Hardy-Weinberg遗传平衡检验;携带GSTP1(rs1695)AA、AG+GG基因型的患者化疗后有效率分别为18.9%(17/90)和21.1%(19/90),AG+GG基因型患者化疗失败的可能性是AA型的3.193倍(OR=3.193,95%CI:1.307~7.804,P<0.05);携带MTHFR(rs1801133)CC、TC+TT基因型的患者化疗后有效率分别为6.7%(6/90)和26.7%(24/90),TC+TT基因型患者化疗失败的可能性是CC型的4.000倍(OR=4.000,95%CI:1.431~11.180,P<0.05);携带MTHFR(rs1801131)AA、AC+CC基因型的患者化疗后有效率分别为30.0%(27/90)和10.0%(9/90),二者比较差异无统计学意义(P<0.05)。结论GSTP1(rs1695)及MTHFR(rs1801133)基因多态性与5-FU类药物的疗效有关,而MTHFR(rs1801131)基因多态性与5-FU类药物的疗效无关,检测GSTP1(rs1695)、MTHFR(rs1801133)单核苷酸多态性可以成为预测晚期CRC患者接受以5-FU类为基础的化疗方案疗效的指标。

MTHFR、GSTP1和GSTM1基因多态性与Ⅲ期结肠癌术后辅助化疗敏感性及疗效的关系研究

目的探讨Ⅲ期结肠癌术后辅助化疗敏感性、疗效与亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)、谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)、谷胱甘肽S转移酶M1(GSTM1)基因多态性的关系。方法选择65例行结肠癌切除并接受术后XELOX方案化疗的Ⅲ期结肠癌患者,采血检测MTHFR-rs1801131、GSTP1-rs1695、GSTM1基因多态性,同时回顾性分析患者临床资料及5年生存回访资料,分析不同位点基因多态性与术后辅助化疗敏感性及疗效关系。结果65例患者基因型分布频率均符合Hardy-Weinberg平衡定律。GSTP1-rs1695携带G等位基因,以及GSTM1基因未缺失型患者的化疗敏感率明显较高(P<0.05)。MTHFR-rs1801131携带C等位基因患者的中位无病生存时间和中位总生存期明显较短(P<0.05)。结论MTHFR-rs1801131基因突变可影响Ⅲ期结肠癌患者术后辅助化疗的疗效,GSTP1-rs1695和GSTM1基因突变则与术后辅助化疗敏感性有关。

人前列腺癌组织中DNMT1、GSTP1和APC的表达

目的:检测人前列腺癌(PCa)组织中DNA甲基转移酶1(DNMT1)、谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)和结肠腺瘤性息肉病基因(APC)的表达。方法:采用免疫组织化学方法检测56例前列腺癌(高分化癌9例、中分化癌17例、低分化癌30例)组织和10例良性前列腺增生(BPH)组织中DNMT1、GSTP1和APC的表达。结果:4种组织中3指标的比较,差异均有统计学意义。BPH,高、中、低分化癌组织中DNMT1的阳性表达率分别为30.0%、55.6%、70.6%和86.7%(P=0.005),GSTP1的阳性表达率分别为90.0%、44.4%、29.4%和13.3%(P<0.001),APC的阳性表达率分别为70.0%、55.6%、47.6%和23.3%(P=0.037)。PCa组织中DNMT1的表达与GSTP1表达的列联系数为0.874,P<0.001,与APC表达的列联系数为0.797,P<0.001。结论:DNMT1的表达增高和GSTP1、APC的表达降低可能在PCa的发生发展中起促进作用。

晚期非小细胞肺癌GSTP1、XRCC1基因多态性与铂类药物疗效的关系

目的探讨谷胱甘肽S转移酶P1（GSTP1）和X线修复交叉互补基因1（XRCC1）基因多态性与晚期非小细胞肺癌（NSCLC）患者化疗疗效的关系。方法经病理学确诊的晚期NSCLC患者94例,化疗前取静脉血采用DNA测序法检测GSTP1和XRCC1基因多态性,给予铂类为主方案化疗（顺铂75mg/m2,d1）,2~3周期后评价疗效,记录疾病进展时间（TTP）,分析GSTP1和XRCC1基因多态性与化疗疗效的关系。结果在94例晚期NSCLC患者中,携带GSTP1 A/A基因49例,G/A基因34例,G/G基因11例;携带XRCC1 G/G基因52例,G/A基因35例,A/A基因7例,均符合Hardy-Weinberg遗传平衡规律。携带GSTP1 G/A＋G/G基因型的有效率为44.44%,显著高于A/A基因型的20.41%（P〈0.05）;携带XRCC1 G/G基因型与G/A＋A/A基因型的有效率差异无统计学意义（P〉0.05）;两基因多态性的联合分析显示,同时携带GSTP1 G/A＋G/G和XRCC1 G/A＋A/A基因型的有效率最高,为66.67%,但未见统计学意义（P〉0.05）。94例患者中有5例失访,89例患者的中位TTP为6.5个月,携带GSTP1 G/A＋G/G基因型的中位TTP为8.0个月,A/A基因型为6.0个月,两者差异有统计学意义（P〈0.01）;携带XRCC1 G/G基因型的中位TTP为7.0个月,G/A＋A/A基因型为6.5个月,两者差异无统计学意义（P〉0.05）;联合分析显示同时携带GSTP1 G/A＋G/G和XRCC1G/A＋A/A基因型的中位TTP最长,为9.5个月,各组间差异有统计学意义（P〈0.01）。结论 GSTP1基因多态性与晚期NSCLC患者接受铂类为主化疗方案的疗效及预后有关,同时携带GSTP1 G/A＋G/G和XRCC1 G/A＋A/A基因型患者的化疗有效率高,预后好,但因样本量较小,需要扩大样本进一步验证。

DNMT1基因沉默对前列腺癌细胞增殖、凋亡及GSTP1、SHOX2、DAPK甲基化状态的影响

目的探讨siRNA技术沉默DNA甲基转移酶1(DNMT1)基因表达对前列腺癌细胞(LNCap)增殖、凋亡的影响,初步分析其对谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)、矮小同源盒基因2(SHOX2)、凋亡相关蛋白激酶(DAPK)甲基化状态的影响。方法体外培养人前列腺癌细胞LNCap、正常前列腺上皮细胞RWPE-1,采用实时荧光定量PCR(qRTPCR)及蛋白印迹(WB)检测细胞中DNMT1 mRNA及蛋白表达水平。实验分为3组:空白对照组(未经任何处理LNCap细胞); si-NC组(转染DNMT1阴性对照质粒的LNCap细胞); si-SH2B1组(转染si-DNMT1的LNCap细胞)。采用CCK-8法检测三组细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡水平。采用甲基化特异性PCR (MSP)检测GSTP1、SHOX2、DAPK基因甲基化状态; qRT-PCR与WB法分别检测各组LNCap细胞DNMT1、GSTP1、SHOX2、DAPK mRNA及蛋白表达情况。结果与正常组细胞相比,前列腺癌组细胞中DNMT1 mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P <0. 05);si-DNMT1组DNMT1 mRNA及蛋白表达水平均显著低于空白对照组、si-NC组(P <0. 05);与空白对照组、si-NC组相比,si-DNMT1组LNCap细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、GSTP1、SHOX2、DAPK mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0. 05);与空白对照组、si-NC组相比,si-DNMT1组GSTP1、DAPK、SHOX2基因甲基化水平均显著降低(P <0. 05)。结论沉默DNMT1基因后可明显抑制LNCap细胞增殖并促使其凋亡,其可能通过逆转GSTP1、DAPK、SHOX2甲基化状态并上调其表达而发挥作用。

晚期结直肠癌GSTP1基因多态性与奥沙利铂化疗效果关系

目的探讨谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)基因Ile105Val(A→G)多态性与晚期结直肠癌对以奥沙利铂为主方案化疗效果的关系。方法Ⅳ期结直肠癌病人102例,化疗前取静脉血应用TaqMan-MGB探针等位基因分型技术检测GSTP1基因Ile105Val的多态性。给予病人以奥沙利铂为主的方案化疗,2～3个周期后进行临床疗效评价并统计疾病进展时间(TTP),分析GSTP1基因型与化疗敏感性及生存期的关系。结果102例晚期结直肠癌病人中,A/A基因型54例(52.94%),G/G基因型10例(9.80%),G/A基因型38例(37.25%)。G/G+G/A基因型病人的化疗有效率为62.5%,A/A基因型病人的化疗有效率为25.9%,两者之间差异有显著性(χ2=14.21,P<0.01;OR=4.741,95%CI=1.556～13.207)。102例病人中位TTP为7.9个月,G/G+G/A基因型为9.7个月,A/A基因型为6.4个月,两者比较差异有显著性(χ2=35.001,P<0.01)。结论GSTP1 Ile105Val基因多态性可能与晚期结直肠癌病人对奥沙利铂化疗的敏感性及生存时间相关。