豆腐果苷对Aβ_(1-42)诱导阿尔茨海默病模型大鼠认知功能的影响

目的:探究豆腐果苷(HEL)对β淀粉样蛋白1-42(Aβ_(1-42))诱导阿尔茨海默病(AD)大鼠认知功能的影响。方法:24只SPF级健康雄性SD大鼠随机分成生理盐水(NS)组、Aβ_(1-42)+NS组、Aβ_(1-42)+HEL组、HEL组,每组6只。通过脑立体定位双侧海马区注射Aβ_(1-42)(5μg/μL)建立AD模型,注射3 d后Aβ_(1-42)+NS组和Aβ_(1-42)+HEL组分别给予生理盐水和豆腐果苷(50 mg/kg)灌胃治疗4周;作为对照,NS组和HEL组分别给予生理盐水和豆腐果苷(50 mg/kg)灌胃4周。治疗结束后通过Morris水迷宫实验对各组大鼠行为、认知能力进行评估;通过HE染色检测各组大鼠海马CA1区细胞的形态变化;采用免疫组化检测大鼠海马CA1区核因子-κB(NF-κB)表达情况;免疫印迹检测大鼠海马中淀粉前体样蛋白(APP)、NF-κB、肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达水平。结果:(1)与NS组相比,Aβ_(1-42)+NS组大鼠逃逸潜伏期明显延长,穿越原平台次数和停留在原平台象限的时间均显著降低;海马CA1区细胞形态发生明显核固缩;APP、NF-κB、TNF-α表达显著升高(P<0.05)。(2)与Aβ_(1-42)+NS组相比,Aβ_(1-42)+HEL组大鼠逃逸潜伏期明显缩短,穿越原平台次数和原平台所在象限停留时间均明显增多。(3)海马CA1区细胞核固缩得到良好改善;APP、NF-κB、TNF-α表达明显降低(P<0.05)。(4)NS组和HEL组大鼠Morris水迷宫结果无显著差异,APP、NF-κB和TNF-α蛋白在海马CA1区均无明显变化。结论:豆腐果苷能够改善Aβ_(1-42)诱导AD大鼠认知功能,可能与抑制APP、NF-κB及TNF-α的蛋白表达有关。

豆腐果苷对关节失稳模型骨关节炎的作用及机制

目的研究豆腐果苷对关节失稳模型骨关节炎(osteoarthritis,OA)的治疗作用,探讨豆腐果苷治疗OA的作用机制。方法通过切除大鼠膝关节内侧半月板的方法(medial meniscectomy,MMx)建立OA大鼠模型。术后给予豆腐果苷治疗后,通过HE和番红O-固绿染色法观察膝关节软骨组织的组织病理学变化;免疫组化法检测膝关节软骨和滑膜组织中瞬时受体电位香草酸亚型1(Trpv1)表达;Western blot法检测大鼠膝关节滑膜组织中Trpv1蛋白的表达情况。结果HE和番红O-固绿染色法显示,豆腐果苷治疗明显减缓膝关节软骨的退变情况。免疫组化结果显示,豆腐果苷明显降低膝关节软骨和滑膜中Trpv1蛋白的表达水平;Western blot结果证实豆腐果苷下调膝关节滑膜组织中Trpv1蛋白的表达量。结论豆腐果苷能明显抑制MMx诱导的关节软骨的破坏和软骨基质的丢失,从而发挥治疗OA作用。

母鼠妊娠期服用豆腐果苷对仔代的神经行为效应

目的 应用神经行为畸胎学方法评价豆腐果苷对大鼠仔代的神经行为毒性。方法 妊娠 6～ 15 d大鼠采用豆腐果苷 0 ,2 7,2 70 ,135 0 mg/kg· d剂量连续 ig染毒 ,17只孕鼠自然分娩。观察母鼠妊娠期和分娩后的生理、生育指标 ;16 0只仔鼠出生后的体重增长、早期生理发育和神经行为发育指标 ;随机选择 32只仔鼠于 10周龄时进行自动化操作行为测试。此外 ,对 10周龄仔鼠 2 4只进行脑组织的光镜观察和单胺类神经递质 (去甲肾上腺素、多巴胺、5 -羟色胺 )的测定。整个实验采用双盲法。结果 未观察到豆腐果苷对大鼠的母体毒性 ;3个剂量组仔鼠的体重增长、早期生理发育及神经行为发育与对照组相比无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ;操作行为测试中 ,仔鼠学习记忆能力无性别差异 ,3个剂量组仔鼠的学习成绩与对照组相比均无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ;与对照组相比 ,各剂量组仔鼠脑组织均未观察到明显的形态学改变 ,脑神经递质含量也未见异常 (P>0 .0 5 )。结论 未观察到胚胎期服用豆腐果苷对大鼠仔代神经系统的早期发育。

豆腐果苷对大鼠仔代的早期神经行为毒性

目的 :探讨胚胎期豆腐果苷接触对大鼠仔代早期神经行为发育的毒性。方法 :3月龄Wistar大鼠♀ 32只 ,♂ 8只以3∶1交配 ,于孕鼠妊娠第 6～ 15日采用豆腐果苷 0 ,2 7,2 70 ,135 0mg/kg/d剂量经口灌胃染毒。观察母体毒性、16 0只仔鼠出生后生理发育指标 :体重增长、张耳、门牙萌出、开眼、睾丸下降、阴道开启等 ;仔鼠早期神经发育指标 :断崖回避、平面翻正、前肢悬挂、空中翻正、听觉惊愕、视觉定位等。结果 :4个实验组均未观察到母体毒性 ;3个剂量组仔鼠的体重增长、生理发育及早期神经行为发育等指标与对照组相比无差异 (P >0 .0 5 )。结论 :豆腐果苷对大鼠仔代的早期生理发育及中枢神经系统的发育没有影响。

豆腐果苷对人孕烷X受体介导的CYP3A4和MDR1的转录调节作用

目的:建立和验证人孕烷X受体(human pregnant X receptor,hPXR)介导的CYP3A4、MDR1药物诱导剂的体外筛选体系,考察豆腐果苷对hPXR介导的CYP3A4、MDR1的转录调节作用。方法:利用构建的双荧光素酶报告基因系统,将表达载体和报告载体共转染HepG2细胞,以10μmol/L利福平为阳性对照,用不同浓度(0.004、0.04、0.4μmol/L)豆腐果苷处理48h后裂解细胞进行双荧光素酶活性检测。结果:不同浓度的豆腐果苷均不能通过激活hPXR来介导CYP3A4和MDR1表达上调,各浓度处理组的双荧光素酶比活性值与DMSO溶媒组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:成功构建了hPXR介导的CYP3A4和MDR1药物诱导剂的体外筛选体系,并发现豆腐果苷不能通过激活hPXR介导CYP3A4和MDR1的表达上调。

三维打印技术制备豆腐果苷零级控释片研究

目的:应用三维打印技术制备豆腐果苷零级控释片。方法:通过对片剂局部组成及结构进行选择与设计,利用三维打印技术制备了豆腐果苷馅饼型多层控释片,并对所制备的片剂进行常规分析、结构分析及体外释药试验。结果:控释片的各项性能符合相关标准;ESEM显示药片不同部分的结构与组成有差异;体外溶出实验表明三维打印技术制备的控释片中95.29的豆腐果苷在7个小时内能以零级速率释放。结论:三维打印技术能应用于豆腐果苷片研究开发中。

豆腐果苷在大鼠体内代谢的初步研究

豆腐果苷（helicid,对苯甲醛-O-β-D-阿洛吡喃糖苷）是从我国西南少数民族植物药物豆腐渣果中提取的有效成分。基于药效学实验的基础,我们对豆腐果苷进行了动物体内的药动学研究,发现如下问题：（1）物料不平衡：豆腐果苷原药在大鼠尿、粪和胆汁中24 h的总排泄量约为给药量的5%,提示约有95％豆腐果苷在体内代谢消除。

豆腐果苷对慢性应激小鼠行为学的影响

目的:研究豆腐果苷对慢性应激抑郁小鼠行为学的影响。方法:连续28d给予小鼠慢性不可预见性的刺激与孤养,建立小鼠抑郁模型,同时给予豆腐果苷(40、20、10mg/kg,i.g.)或盐酸氟西汀(2.6mg/kg,i.g.),采用敞箱试验、蔗糖饮水实验及情绪性行为评分等观察豆腐果苷的抗抑郁行为效应。结果:豆腐果苷可逆转慢性应激小鼠自发活动减少,糖水偏爱度降低,情绪性行为评分及体重的降低。结论:豆腐果苷对慢性应激小鼠具有抗抑郁作用。

豆腐果苷在大鼠小肠吸收动力学研究

目的研究豆腐果苷小肠吸收动力学及吸收促进剂对吸收的影响。方法以紫外分光光度法、高效液相色谱法分别测定酚红和豆腐果苷质量浓度,采用大鼠在体肠灌注实验研究吸收过程。结果4.464、13.393、40.179μg/mL不同质量浓度豆腐果苷小肠吸收速率常数(ka)分别为0.059 7、0.057 7、0.058 3 h-1;加入促进剂0.5%牛胆盐、1.0%牛胆盐、十二烷基硫酸钠、卡波姆、冰片时,豆腐果苷小肠(ka)分别为0.113、0.163、0.060 2、0.124、0.072 5 h-1。结论不同药物质量浓度对豆腐果苷大鼠小肠吸收无显著影响,药物吸收属于一级动力学过程,吸收机制为被动扩散;豆腐果苷在大鼠肠道吸收较差,吸收促进剂促吸收能力为:1.0%牛胆盐>卡波姆>0.5%的牛胆盐>冰片>十二烷基硫酸钠。

HPLC法测定豆腐果苷片中豆腐果苷的含量

目的:建立 HPLC 法测定豆腐果苷片中豆腐果苷含量。方法:采用 C_(18)柱(5μm,4.6mm×250mm),以水-冰醋酸-乙腈(94:1:5)为流动相,流速为1.0mL·min^(-1),柱温30℃,检测波长270nm。结果:豆腐果苷在0.5～60μg·mL^(-1)范围内线性关系良好,r=0.9999。方法的精密度、重复性、回收率、稳定性均较为理想。结论:方法简单灵敏、重复性好,可作为豆腐果苷片的含量测定方法。

豆腐果苷在大鼠体内的药动学研究

目的：建立RP-HPLC测定大鼠血浆中豆腐果苷（helicid，HD）浓度的方法，研究HD在大鼠体内的药动学。方法：Wistar雄性大鼠15只，随机分为3组，尾静脉注射HD（0．223，0．496，0．67mg·kg-1），不同时间点尾静脉取血，血浆样品用6％高氯酸沉淀蛋白后，上清液进样，采用反相C18色谱柱，检测波长270nm。结果：HD在43．8—43800μg·L^-1呈良好线性关系（r=0．9998），日内和日间精密度RSD均小于6％，提取回收率大于87％。静注3个剂量的药-时曲线符合二室模型，分布半衰期分别为4．582，5．097和4．727min，消除半衰期分别为23．945，26．508和25．396min，分布容积分别为36．1，35．1，35．0mL。AUC与剂量之间线性相关。结论：在考察浓度范围内，HD在大鼠体内符合线性动力学过程。

豆腐果苷磷脂复合物的制备及理化性质研究

目的制备豆腐果苷磷脂复合物并考察其理化性质。方法以豆腐果苷与磷脂的复合率为评价标准,通过正交设计考察反应初始浓度、投料比例和反应时间对复合率的影响;研究豆腐果苷磷脂复合物的理化性质包括晶体特征、相变特征1、H-NMR及溶解性能等。结果确定了豆腐果苷磷脂复合物的最佳制备工艺即在室温下以四氢呋喃为反应溶剂,豆腐果苷质量浓度为5 g.L-1,投料质量比例为1∶5,反应时间为2 h。X-射线衍射分析显示复合物呈现无定型特征;差热扫描显示复合物的相变温度改变;1H-NMR谱图显示豆腐果苷的羟基参与氢键的结合。磷脂复合物明显改善了豆腐果苷在水及正辛醇中的溶解性能。结论确定了制备豆腐果苷磷脂复合物的最佳工艺,并且其磷脂复合物明显的改变了原药的理化性质。

豆腐果苷口腔崩解片的制备

目的以微晶纤维素(MCC),交联聚乙烯吡咯烷酮(PVPP)和泡腾剂(碳酸氢钠与枸橼酸比例为1∶1.2)为崩解剂制备豆腐果苷口腔崩解片。方法采用粉末直接压片法制备,运用星点设计-效应面法进行处方优化,并对药物体外溶出进行评估。结果以MCC,PVPP和泡腾剂含量为自变量,体外崩解时间为因变量进行二次多项式拟合,结果表明,拟合的效果较好,较优处方为MCC 5.4%、PVPP 5.8%、泡腾剂12%。与市售普通片比较,口腔崩解片具有明显速释效果。结论将豆腐果苷制成口腔崩解片能显著提高其体外溶出速度。

平衡透析法考察豆腐果苷血浆蛋白结合率:种属差异研究（英文）

糖苷类化合物豆腐果苷在人与大鼠体内处置过程存在种属差异。药物血浆蛋白结合率是决定药物整体分布、排泄、活性及毒性的重要决定过程。本文旨在应用平衡透析法评价蛋白结合率差异在豆腐果苷种属差异中的作用。研究采用HPLC-ESI-MS方法进行检测,并对试验中的一些影响因素进行了优化。在试验中的四个浓度下,大鼠血浆蛋白结合率在10.33%-11.03%,人血浆蛋白结合率在10.60%-10.98%。结果表明人与大鼠药代动力学参数的差异不是由蛋白结合率的差异所导致。这是有关豆腐果苷蛋白结合率相关研究的首次报道。

豆腐果苷对慢性神经病理性疼痛大鼠热痛觉过敏及脊髓背角p-CREB表达的影响

目的：观察豆腐果苷（helicid）对坐骨神经慢性压迫伤（CCI）后大鼠热痛觉过敏的影响及对脊髓背角磷酸化cAMP反应元件结合蛋白（phosphorylated cAMP response element binding protein,p-CREB）表达的影响。方法：32只180～220 g Wistar雄性大鼠随机分为4组（n=8）;分别为Sham组（假手术组）、CCI组（CCI模型组）、H1组（CCI 10天后豆腐果苷,25 mg·kg^-1·d^-1×10 d灌胃）和H2组（CCI 10天后豆腐果苷,50 mg·kg^-1·d^-1×10d灌胃）。4组分别于CCI手术前1天、CCI手术后1、3、5、7、9、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20天进行热板实验、测后肢回缩时间（PWL）。CCI后20天取L4、5脊髓,免疫组织化学染色,计数p-CREB免疫反应阳性（p-CREB-IR）神经元数量。结果：第一部分：CCI手术后第9天,Sham组、CCI组、H1组、H2组分别与术前PWL基础值比较,Sham组无差异（P〉0.05）,CCI组、H1组、H2组均有差异（P〈0.05）,且下降达30（以上;CCI手术后第9天,CCI组、H1组、H2组分别做PWL值组间两两比较均无差异（P〉0.05）,证实CCI模型制作成功。给药后第1～10天,H1组、H2组分别与CCI组做组间比较,PWL值增高,H2组第3天已有差异,H1组第5天开始有差异,两组PWL值增高至第7天达峰值,后一直保持稳定,H2组较H1组保持较高水平。第二部分：脊髓背角p-CREB免疫反应阳性神经元细胞计数比较：与Sham组比较,CCI组、H1组和H2组计数明显升高,有差异（P〈0.01）;H1组和H2组分别与CCI组比较,数量较之为少（P〈0.01）;H1组计数稍大于H2组,但无差异;即CCI〉H1〉H2〉Sham组。结论：口服豆腐果苷能剂量依赖性提高CCI大鼠热痛阈值,降低热痛觉过敏,并与影响脊髓背角p-CREB的表达有关。

应用膜片钳技术研究豆腐果苷对hERG钾通道电生理功能的影响

目的:探讨豆腐果苷对hERG钾离子电流的影响及潜在心脏毒性。方法:使用稳定转染hERG基因的CHO细胞,通过全细胞膜片钳技术检测不同浓度豆腐果苷对hERG通道电流活动的作用。结果:豆腐果苷对hERG钾通道的IC50约为47μmol/L,比临床常规剂量下人体内峰浓度高1 000倍以上。结论:临床常用剂量下,豆腐果苷发生与hERG通道抑制作用相关的心脏安全性问题的可能性非常小。

豆腐果苷衍生物W0620实验性抗抑郁作用量效关系研究

目的:观察豆腐果苷衍生物W0620对悬尾小鼠不动时间的影响并初步探讨其剂量与效应关系。方法:应用行为绝望抑郁模型——小鼠悬尾实验研究不同剂量W0620对实验小鼠不动时间的影响,同时应用小鼠自主活动实验观察不同剂量W0620对中枢兴奋作用的影响。结果:5.91、17.73、53.20、159.60 mg/kg 4个剂量组对小鼠自主活动均无影响(P>0.05),17.73、53.20、159.60 mg/kg3个剂量组能明显缩短悬尾实验中小鼠的不动时间(P<0.01)。W0620的对数剂量与抗抑郁药效呈现S型量效关系,药效动力学参数如下:Emax80.79 s、Ebase12.13 s、K9.16mg/kg、H3.38、ED509.16 mg/kg、E5046.46 s、ED8013.81 mg/kg、E8067.05 s、ED9017.56 mg/kg、E9073.92 s。结论:W0620有明显抗抑郁作用,其量效关系符合S型曲线,无明显中枢抑制作用。

豆腐果苷素胶囊对大鼠自主活动影响的初步观察

目的:观察豆腐果苷素胶囊对实验大鼠自主活动的影响,从而了解该药对中枢神经系统的作用。方法:采用生理实验信号采集分析系统MP-100型对小鼠自主活动性进行观察。结果:本实验观察了豆腐果苷素胶囊口服给药对SD大鼠自主活动的影响。结论:豆腐果苷素胶囊连续4d给大鼠灌胃后,对大鼠的自主活动与对照组相比具有减弱的趋势,但无统计学意义。

大鼠在体肠灌流模型对豆腐果苷在体吸收的初步研究

目的应用大鼠在体肠灌流模型对豆腐果苷吸收机制进行研究。方法该实验在建立豆腐果苷在Krebs-Ringer缓冲液中的检测方法,及应用752紫外分光光度计测定Krebs-Ringer缓冲液中酚红溶液浓度的基础上,应用大鼠肠灌流模型研究豆腐果苷的吸收情况。结果通过该模型对豆腐果苷在大鼠十二指肠上部至回肠下部肠段中2 h内吸收情况的研究发现,豆腐果苷吸收迅速,15～20 min吸收即可达到平台。结论该实验建立了大鼠小肠灌流模型,并且将该模型用于豆腐果苷吸收情况的初步研究,为揭示豆腐果苷体内处置情况奠定了基础。

豆腐果苷研究进展

豆腐果苷（helicid，对甲醛苯O-β—D阿咯吡喃糖苷）又名昆明神衰果素，为云南野生植物山龙眼科萝卜树（Heliciaerratica Hook．f）的果实（俗称豆腐渣果）中提得的单体成分，其化学结构类与天麻素（gastrodin，对羟甲基苯-O-β-D-吡喃葡萄糖苷）相似。药理和临床研究表明，豆腐果苷对中枢神经系统的作用与天麻素相似，但其镇静、止痛作用较天麻素强，对神经官能症引起的头痛、头昏、睡眠障碍的治疗作用显效快，