单酶水解豆芽蛋白及其产物的潜在致敏性

目的优化豆芽蛋白酶水解的条件,并探讨其致敏性的变化。方法利用Alcalase 2.4L碱性蛋白酶水解豆芽蛋白,以水解度为评价指标,根据单因素实验优化豆芽蛋白的酶水解条件,并通过IgG、IgE的结合实验评估酶解产物潜在致敏性的变化。结果酶水解豆芽蛋白的优化工艺条件:底物浓度为8%、酶与底物比(E/S)为1:20(m:m)、酶解时间为4 h。豆芽蛋白酶水解产物的抗原性低于大豆蛋白酶解产物的抗原性,但豆芽蛋白水解产物的IgE结合能力高于大豆蛋白酶解产物的IgE结合能力。结论大豆经过发芽处理后再用Alcalase2.4L轻度水解能有效降低大豆蛋白的潜在致敏性。

双酶水解对豆芽蛋白潜在致敏性和理化性质的影响

以豆芽蛋白水解度为指标,探讨双酶水解条件对豆芽蛋白水解度的影响,同时采用体外IgE结合力评估酶解产物的潜在致敏性,并检测水解产物的部分理化性质。结果表明:不同蛋白酶对豆芽蛋白的水解能力不同,其中,碱性蛋白酶、中性蛋白酶依次分步水解时水解度最高。该双酶分步水解条件为:底物浓度为8%,第一步水解采用碱性蛋白酶,酶与底物比为1:20,酶解4 h后灭酶;然后加入中性蛋白酶,酶与底物比为1:10,继续水解4 h后终止反应。豆芽蛋白酶解产物几乎无潜在致敏性,与大豆蛋白和豆芽蛋白相比,酶解产物中分子量低于2 000 Da的肽含量升高,乳化性增强,溶解性明显增大,而乳化稳定性降低。

纳豆芽孢杆菌蛋白酶对大豆分离蛋白凝胶性的影响

利用纳豆芽孢杆菌发酵所产微生物蛋白酶对大豆分离蛋白进行酶法改性,以提高其凝胶性,并通过测定凝胶体系的流变学性质、水解程度和分析电泳图谱来探究纳豆芽孢杆菌蛋白酶对大豆分离蛋白凝胶性的影响。结果表明,体系凝胶强度受酶浓度和酶解温度的影响,酶浓度为1.072U/mL在40℃条件下形成的凝胶最稳定;同时凝胶强度与水解度有关,50℃时水解度超过12%,则不能形成稳定的凝胶。经微生物蛋白酶作用后,大豆分离蛋白的7s和11s均发生不同程度的水解。