基于网络药理学探究豨桐丸治疗痛风性关节炎的多靶点作用机制研究

目的基于网络药理学方法,分析豨桐丸治疗痛风性关节炎的物质基础及分子作用机制。方法借助中药系统药理学分析平台(TCMSP)并结合文献挖掘方法,预测豨桐丸的主要活性成分和作用靶点,利用uniprot数据库查询靶点对应的基因,运用Cytoscape 3.8.0软件构建“药物-活性成分-靶点基因”多维网络图,通过Genecards、DisGeNET、DrugBank、OMIM数据库查询痛风性关节炎相关靶点基因;并运用Cytoscape中Bisogenet插件分别构建药物和疾病的靶点蛋白互作(PPI)网络,运用“Merge”工具取交集网络图并用CytoNCA插件做中央网络拓扑分析。运用Metascape数据库对豨桐丸和痛风性关节炎的共同靶点进行基因本体(GO)功能富集分析和基于京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果从豨桐丸中共筛选到22个活性成分,包括槲皮素(quercetin)、芹菜素(apigenin)、木犀草素(luteolin)、冠狗牙花定碱(Coronaridine)、金合欢素(acacetin)等,作用于226个靶点,得到具有治疗痛风性关节炎功能的候选关键靶标55个,GO和KEGG通路富集分析发现豨桐丸治疗痛风性关节炎可能与癌症信号通路(Pathways in cancer)、PI3K-Akt信号通路(PI3K-Akt signaling pathway)、糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路(AGE-RAGE signaling pathway in diabetic complications)、MAPK信号通路(MAPK signaling pathway)等有关,推测其可能为豨桐丸治疗痛风性关节炎的相关分子作用机制。结论网络药理学方法初步计算了豨桐丸多靶点、多途径的抗痛风机制,为相关实验研究提供思路。

豨桐丸对尿酸钠晶体诱导巨噬细胞NF-κB活化的影响

目的探讨豨桐丸对尿酸钠晶体诱导巨噬细胞NF-κB活化的影响。方法巨噬细胞RAW264.7随机分为对照组、模型组(200μg/mL)、秋水仙碱组(0.4μg/mL)及豨桐丸低、中、高剂量组(100、200、400μg/mL)。预给药2 h后,加入尿酸钠晶体诱导RAW264.7细胞,ELISA法检测IL-1β水平,Western blot法检测IκBα、p65表达,试剂盒法检测NF-κB与DNA的结合活性。结果尿酸钠晶体刺激RAW264.7细胞18 h后,IL-1β水平显著升高,30 min后细胞内IκBα表达显著降低,2 h后细胞核中p65表达、NF-κB与DNA的结合活性显著升高(P<0.01);200、400μg/mL豨桐丸作用后,IL-1β水平、p65表达、NF-κB与DNA的结合活性显著降低,IκBα表达显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论豨桐丸通过抑制尿酸钠晶体诱导巨噬细胞NF-κB活化,从而降低IL-1β水平。

豨桐丸联合甲氨蝶呤治疗类风湿性关节炎的有效性与安全性探讨

目的:探究类风湿性关节炎采用豨桐丸联合甲氨蝶呤治疗的临床疗效和安全性。方法:选取某三甲医院2015年12月31日~2016年12月31日收治类风湿性关节炎患者124例作为研究对象,随机分为观察组和对照组,每组62例。观察组给予豨桐丸联合甲氨蝶呤治疗,对照组仅给予甲氨蝶呤治疗,观察两组血清中RF和C反应蛋白指数以及临床疗效。结果:治疗后,观察组RF(17.44±1.84)IU/m L及C反应蛋白指数(10.25±2.35)mg/L均优于对照组(21.05±8.49)IU/m L、(12.41±4.91)mg/L,差异存在统计学意义(P<0.05);观察组总有效58例,有效率为93.55%优于对照组(50例,80.65%),差异存在统计学意义(P<0.05)。结论:豨桐丸联合甲氨蝶呤治疗类风湿性关节炎可改善RF和C反应蛋白指数,提高临床疗效,值得临床推广。

豨桐丸对大鼠痛风性关节炎的影响及机制

目的：观察豨桐丸对尿酸钠晶体诱导的大鼠痛风性关节炎的影响及其药理机制。方法：分别给予大鼠豨桐丸（200,400,800 mg·kg^-1）及秋水仙碱（4 mg·kg^-1）灌胃用药7 d。第5天大鼠踝关节腔注射尿酸钠晶体诱导痛风性关节炎模型。检测大鼠足肿胀和步态评分,苏木素-伊红（HE）染色法检测关节组织学评分,抗酒石酸酸性磷酸酶染色法检测破骨细胞形成,免疫组化法分析关节组织中肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）-α,白细胞介素（interleukin,IL）-1β和IL-6表达,蛋白免疫印迹法（Western blot）分析NLRP3炎性体表达。结果：注射尿酸钠晶体导致了大鼠明显的足肿胀,并使步态评分和组织学评分均明显增高,关节组织中的破骨细胞数量及TNF-α,IL-1β,IL-6和NLRP3炎性体表达也都明显增加（（P〈0.05,P〈0.01）。给予400,800 mg·kg^-1豨桐丸治疗后,大鼠足肿胀显著减轻,步态评分和组织学评分均显著减少,同时关节组织中的破骨细胞数量及TNF-α,IL-1β,IL-6和NLRP3炎性体表达也都显著降低（P〈0.05,P〈0.01）。结论：豨桐丸可抑制尿酸钠晶体诱导的大鼠痛风性关节炎的发展,其机制与抑制炎性介质的表达密切相关。

豨桐丸调控尿酸盐晶体诱导的巨噬细胞白细胞介素-1β成熟表达机制研究

目的研究豨桐丸对尿酸钠(MSU)晶体诱导的巨噬细胞白细胞介素(IL)-1β成熟表达的影响,并从调节NLRP3炎性体活化途径探讨其机制。方法小鼠巨噬细胞RAW264. 7分组如下:对照组、MSU组(200μg/ml)、秋水仙碱组(0. 4μg/ml)及豨桐丸不同浓度组(100,200,400μg/ml)。豨桐丸或秋水仙碱与MSU共同作用于RAW264. 7细胞24 h。酶联免疫吸附法检测细胞培养液中IL-1β含量,Western blot法分析细胞内IL-1β前体(pro-IL-1β)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)-1、和caspase-1前体(pro-caspase-1)的表达。结果 MSU刺激导致RAW264. 7细胞培养液中IL-1β含量明显升高(P <0. 01),给予豨桐丸处理后IL-1β含量明显降低(P <0. 05或P <0. 01)。与此同时,MSU刺激导致RAW264. 7细胞内pro-IL-1β、pro-caspase-1和caspase-1明显高表达(P <0. 001),而豨桐丸则使RAW264. 7细胞内pro-IL-1β、pro-caspase-1和caspase-1的表达显著减少(P <0. 05或P <0. 01)。结论豨桐丸可通过抑制MSU诱导的巨噬细胞NLRP3炎性体活化而降低IL-1β的成熟表达。

豨桐丸的本草考证及组方药物化学成分和药理作用研究进展

豨桐丸最早记载于乾隆五十六年(1791年)毛世洪的《济世养生集》中,具有清热燥湿、疏风止痛的功效,适用于风湿热痹,临床常用于治疗痛风、风湿性关节炎等疾病。豨桐丸仅有豨莶草和臭梧桐2味中药组成,因其药简力专、配伍精当、疗效突出等特点,既可单独使用也可与其他经典方剂合方使用,临床应用十分广泛。通过查阅本草古籍和现代国内外文献,对豨桐丸其组方药物进行本草考证,梳理其历史沿革及临床应用情况,并对其化学成分和现代药理作用研究进展进行归纳分析,以期为豨桐丸的现代临床应用及药理作用机制的深入研究提供参考。

豨桐丸治疗类风湿性关节炎的分子作用机制研究

目的:基于分子对接与网络药理学探究豨桐丸治疗类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis, RA)的潜在生物学机制。方法:运用中药系统药理学数据库与分析平台结合文献挖掘,收集豨桐丸所含有的活性成分,并进行口服利用率、血脑屏障透过率和药物相似性等参数筛选;选择与RA相关的靶蛋白建立受体分子库;应用分子对接进行药物成分的初步筛选并通过50 ns的分子动力学验证对接结果的可靠性;通过化学成分靶点预测和靶点注释,采用Cytoscape 3.6.1软件进行活性成分靶点网络和靶点-疾病网络的构建及拓扑分析,验证了重要的成分与靶点;运用DAVID数据库对豨桐丸的靶点进行GO分析和KEGG富集分析。结果:豨桐丸中化学成分豆甾醇、羽扇醇、谷甾醇、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷丁酯主要通过疏水作用与相关靶蛋白结合发挥药效;豨桐丸治疗RA的机制涉及细胞过程、炎症反应过程等生物过程,涉及细胞膜、突触前膜、膜筏等细胞组分,白蛋白、肿瘤坏死因子、血管内皮生长因子A、丝裂原激活的蛋白激酶、前列腺素G/H合成酶2等多种物质;涉及的信号通路有神经活性配体受体相互作用通路、癌症蛋白多糖通路、人巨细胞病毒感染通路、JAK信号通路、乙肝通路等。结论:豨桐丸治疗RA的分子机制可能是通过多成分、多靶点、多通路的协同作用来发挥疗效,其主要生物学机制可能与神经活性配体-受体相互作用等信号通路有关,这为豨桐丸的推广及RA新药的研发奠定了研究基础。

豨桐丸治疗膝骨性关节炎120例临床观察

目的:观察豨桐丸治疗膝骨性关节炎的临床疗效。方法:将120例膝骨性关节炎患者随机分成治疗组和对照组,治疗组采用豨桐丸口服治疗,对照组采用硫酸氨基葡萄糖治疗。结果:总有效率治疗组为91.7%,对照组为85.0%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:豨桐丸治疗膝骨性关节炎的疗效显著。

豨桐丸治疗膝骨性关节炎40例临床观察

目的:观察豨桐丸治疗膝骨性关节炎的临床疗效。方法:将膝骨关节炎患者80例随机分成2组各40例。治疗组给予口服豨桐丸治疗,对照组给予口服骨康胶囊治疗,两组均治疗4周。治疗结束后,观察2组患者治疗前后VAS评分及膝关节液中TNF-α、NO含量的变化。结果:总有效率治疗组为95.0%,对照组为87.5%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后两组VAS评分及关节液中TNF-α、NO的含量较治疗前比较,差异均有统计学意义,但治疗组疗效优于对照组(P<0.05)。结论:采用豨桐丸治疗KOA能有效缓解症状、改善患膝功能,疗效满意。