豫杂一号泡桐体细胞同源四倍体诱导及其体外植株再生

在含不同质量浓度秋水仙素固液双层培养基上,以叶片为外植体进行了豫杂一号泡桐同源四倍体的诱导,同时建立了其体外植株再生系统。结果表明,秋水仙素质量浓度和处理时间对豫杂一号泡桐同源四倍体诱导率影响显著,外植体预培养时间影响不显著。在含20 mg.L-1秋水仙素MS培养基上处理48 h,未经预培养叶片四倍体诱导率最高达21.2%。同源四倍体幼苗叶片及其单气孔器较二倍体变大,气孔密度变小,叶绿素含量和SOD活性升高,MDA含量和POD活性降低。此外,叶片是同源四倍体豫杂一号泡桐体外植株再生的最佳外植体,MS+0.5 mg.L-1NAA+16 mg.L-1BA和1/2MS+0.1 mg.L-1NAA分别是其芽诱导和根诱导的最适培养基。

土霉素对豫杂一号泡桐丛枝病幼苗形态和DNA甲基化水平的影响

The effects of oxytetracycline on the morphology of the seedling with witches’ broom and global DNA methylation level of Paulownia tomentosa × Paulownia fortunei were investigated.The results indicated that the infected seedlings by phytoplasma recovered to normal morphology of the healthy seedlings after being treated with more than 20 mg L-1 oxytetracycline,and the pathogen could not be detected with PCR in the seedlings.The global DNA methylation level of diseased seedlings was lower than that of healthy one.The oxytetracycline treatment was able to increase the DNA methylation level,and the methylation level of the diseased seedlings increased with the dose of applied oxytetracycline.However the increased methylation of infected seedlings with oxytetracycline treatment could still not reach to level of healthy seedling（CK）,even the seedlings treated with lethal oxytetracycline concentration.

甲基磺酸甲酯处理的豫杂一号泡桐丛枝病幼苗的生长及SSR分析

DNA甲基化在基因表达、细胞分化以及系统发育中起着重要的调节作用（陆光远等,2005;Meyeret al.,1994;Ulian et al.,1996;Rossi et al.,1997）。在植物生长发育过程中,DNA甲基化水平过高或过低,都会导致植物形态发生异常。

硫酸二甲酯处理豫杂一号泡桐丛枝病幼苗的形态变化及其SSR分析

以豫杂一号泡桐丛枝病幼苗为材料,研究了硫酸二甲酯处理对其幼苗形态和基因组DNA的SSR扩增位点的影响。结果表明,质量浓度为15 mg.L-1的硫酸二甲酯处理3 h幼芽形成的幼苗仍呈现丛枝病幼苗症状,而质量浓度等于15 mg.L-1、处理5 h或大于25 mg.L-1、处理超过3 h的幼芽形成的幼苗形态上均呈现健康状态,但15 mg.L-1硫酸二甲酯处理5 h的幼苗内仍有植原体存在。此外,豫杂一号泡桐丛枝病幼苗、健康幼苗、15、125 mg.L-1硫酸二甲酯处理幼苗的DNA在SSR水平上扩增位点相同。

豫杂一号泡桐二倍体及其同源四倍体的AFLP和MSAP分析

植物多倍化既是对自然环境适应的结果,也是推动其进化和物种形成的重要因素。自然界大约70%的被子植物在进化史中经历过一次或多次多倍化过程（Masterson,1994;Wendel,2000）。多倍体植物具有器官和生物量增大的特征及较强适应生物和非生物胁迫的能力（Hilu,1993;Liu et al.,2002）。植物多倍化过程中,在染色体结构（Swapna et al.,

豫杂一号泡桐耐盐突变体诱导及SSR分析

以叶片愈伤组织为材料,先分别在质量浓度为40,80,120,160,200 mg.L-1的MMS和质量分数分别为0.1%,0.2%,0.4%,0.6%的NaCl的MS增殖培养基中培养,确定愈伤组织的MMS半致死浓度和NaCl致死浓度,然后进行豫杂一号泡桐耐盐突变体的诱导及SSR分析.结果表明,MMS和NaCl处理对豫杂一号泡桐愈伤组织存活率的影响存在明显差异,叶片愈伤组织的MMS半致死剂量为120 mg.L-1,NaCl致死浓度为0.6%,连续10次继代培养,从263株筛选出的16株豫杂一号泡桐耐盐突变体的DNA碱基序列在SSR水平上呈现出显著差异.

豫杂一号泡桐茎尖的玻璃化法超低温保存方法研究

以豫杂一号泡桐健壮组培苗为研究材料,从低温锻炼时间、预处理时间、装载液处理时间、玻璃化液处理时间及液氮保存时间5个方面研究其茎尖玻璃化法超低温保存方法。结果表明,豫杂一号泡桐茎尖玻璃化法超低温适宜的保存方法为,2 cm的茎尖在附加0.4 mol·L-1甘油和0.3 mol·L-1蔗糖的MS培养基上预培养2天,然后剥取2～3 mm的茎尖,用装载液(MS+2 mol·L-1甘油+0.4 mol·L-1蔗糖)装载60 min,再用玻璃化溶液(PVS2)于0℃下处理1.5 h,换1次玻璃化溶液后迅速投入液氮,保存l h后于40℃水浴中化冻70 s,再转到室温下用去装载液(MS+1.2 mol·L-1蔗糖)洗涤2次,每次10 min。以TTC法检测,豫杂一号泡桐茎尖成活率最高可达85.74%,保存效果较好。

豫杂一号泡桐花粉超低温保存技术研究

采用直接冻存法和程序冻存法对豫杂一号泡桐花粉进行超低温保存研究。结果表明,脱水方法和时间是决定豫杂一号泡桐花粉超低温保存成败的关键因素,脱水至30%左右的含水量能够保证超低温保存花粉的生活力。直接冻存法比程序冻存法更能保存花粉的生活力。

豫杂一号泡桐花药愈伤组织的诱导

以豫杂一号泡桐花药为材料,开展了其花药愈伤组织诱导的研究.结果表明,外植体的消毒方式以体积分数70%乙醇处理30 s后再用体积分数0.1%HgCl2消毒60 s最为理想;4℃预处理有利于花药愈伤组织的诱导,以低温处理7 d的花药愈伤组织诱导率为最高;30 g.L-1蔗糖质量浓度诱导花药愈伤组织的效果较好,诱导率达58.76%;诱导愈伤组织以MS培养基附加30 g.L-1蔗糖+2 mg.L-1NAA+3 mg.L-16-BA为最佳.

干旱胁迫对豫杂一号泡桐基因表达谱的影响

为深入了解豫杂一号泡桐响应干旱胁迫的分子机制,以豫杂一号泡桐为材料,利用RNA-Seq测序技术对干旱胁迫后的豫杂一号泡桐的基因表达变化进行分析。通过比对分析,共鉴定出21911个差异表达基因,对这些差异基因进行GO功能分类,结果显示差异基因共参与了53个类别,集中在细胞、细胞过程、催化等功能类别。KEGG代谢通路分析结果显示,差异表达基因主要参与了“代谢通路”“次生代谢物生物合成”“光合作用”和“苯丙基生物合成”。其中,水通道蛋白、糖转运蛋白、热休克蛋白70和胚胎发育晚期丰富蛋白差异表达量显著,这些基因可能是潜在的干旱胁迫响应基因。采用qRT-PCR技术验证了随机挑选的8个差异表达基因,结果与转录组测序数据趋势一致。

‘豫杂一号’泡桐叶绿体基因组序列及特征分析

泡桐是中国重要的速生树种,对我国经济发展有着重要作用。以‘豫杂一号’泡桐为材料,IlluminaHiseq2000测序,对其全基因组序列基本结构特征、密码子偏好性和重复序列进行统计分析。结果表明,‘豫杂一号’泡桐为典型的四分体结构,全长序列为154615bp,编码114个基因,含4个rRNA,30个tRNA和80个蛋白质编码基因。该叶绿体全基因组测序的成功促进了叶绿体分子生物学的研究,也为泡桐以及其他物种的遗传育种和创制种质资源奠定了一定的理论基础。