豹纹鳃棘鲈抗哈维氏弧菌遗传参数分析

哈维氏弧菌(Vibrioharveyi)是引起豹纹鳃棘鲈(Plectropomusleopardus)患“烂身病”的主要致病菌,每年6―8月发病率极高,严重影响了该品种养殖业的可持续发展。因此,培育抗病良种是豹纹鳃棘鲈养殖业的迫切需求。为评估豹纹鳃棘鲈抗哈维氏弧菌遗传参数,本研究基于高密度单核苷酸多态性位点构建的基因组亲缘关系矩阵,使用4种模型(BLM、BTM、LLM和LTM)拟合了2种抗病表型(测试日性状,TDS;二元死亡存活性状,TS),并用约束最大似然法(REML)估算方差组分。经分析,豹纹鳃棘鲈抗哈维氏弧菌遗传力为0.182~0.486,属中高遗传力性状,加性遗传方差为0.071~0.262。其中,利用线性模型(BLM和LLM)估算的遗传力分别为0.382和0.476,利用阈值模型(BTM和LTM)估算的遗传力分别为0.182和0.207。表明可以通过遗传选育提高豹纹鳃棘鲈抗弧菌能力。对不同模型估算的基因组估算育种值(GEBV)进行相关性分析,不同模型拟合同种抗病表型时,GEBV之间相关系数> 0.9,属于高强度正相关关系,表明使用同种表型定义时,阈值或线性模型对GEBV排名影响很小。对不同模型估算的GEBV与不同表型进行相关性分析的结果显示,纵向模型(LLM和LTM)估算的GEBV与表型TS之间的相关系数高于横截面模型(BLM和BTM),说明表型TDS可能比表型TS更适合作为抗病表型。此外,在线性模型中,使用表型TDS和表型TS估算的GEBV之间的相关系数<0.85,说明采用2种表型定义下估计的豹纹鳃棘鲈抗哈维弧菌GEBV排名不一致。但基于表型TDS估算的GEBV与表型TS之间的相关系数较强(0.824),表明使用表型TDS和纵向模型(LLM)估算豹纹鳃棘鲈抗哈维氏弧菌遗传参数更有优势。本研究补充了豹纹鳃棘鲈抗哈维氏弧菌遗传参数研究,为豹纹鳃棘鲈抗哈维氏弧菌良种选育提供了参考。

精氨酸对豹纹鳃棘鲈肠道发育和饲料蛋白质利用效率的影响

为研究饲料中添加不同水平精氨酸对豹纹鳃棘鲈(Plectropomus leopardus)幼鱼[初始体重(9.30±0.02)g]生长性能、体成分、肠道和肝脏组织发育的影响,在基础饲料中,分别制作精氨酸水平为2.4%(Arg2.4,对照组),2.9%(Arg2.9组),3.4%(Arg3.4组),3.9%(Arg3.9组)和4.4%(Arg4.4组)5组等氮等脂(54%粗蛋白质,9%粗脂肪)饲料。投喂豹纹鳃棘鲈幼鱼试验饲料56 d后,Arg3.4、Arg3.9和Arg4.4组蛋白质效率和蛋白质沉积率分别较Arg2.4组提高9.88%、7.41%、5.56%和17.33%、12.68%、11.99%(P<0.05)。Arg3.4、Arg3.9和Arg4.4组增重率分别较Arg2.4组提高32.03%、20.26%、17.48%(P<0.05)。相较于Arg2.4组,Arg2.9和Arg3.4组粗蛋白质含量分别提高1.62%、1.87%(P<0.05)。饲料精氨酸水平对各组鱼体水分含量、肌肉中风味氨基酸的总量均无显著影响(P>0.05)。相较于Arg2.4组,Arg3.4和Arg3.9组肥满度分别提高8.70%、8.21%(P<0.05)。精氨酸对各组间肝体比、脏体比、肝脏空泡化面积、肠道绒毛宽度和肠壁厚度均无显著影响(P>0.05)。Arg2.9、Arg3.4和Arg3.9组肠道绒毛长度和隐窝深度分别较Arg2.4组提高16.33%、20.13%、17.66%和124.36%、138.09%、110.43%(P<0.05)。基于蛋白质效率进行二元拟合后获得豹纹鳃棘鲈幼鱼饲料精氨酸适宜水平为3.52%。综上所述,精氨酸可以改善肠道组织发育,有效地促进鱼体对饲料蛋白质的利用。

不同流速对豹纹鳃棘鲈摆尾频率和血液生理的影响

水流是影响鱼类生理和生长的重要生态因子之一,探究豹纹鳃棘鲈(Plectropomus leopardus)受流速胁迫呈现的应激水平变化,掌握其耐受的最大流速,可为网箱养殖选址、集约化流水养殖和深远海工船养殖提供理论基础。以体长(11.38±1.48)cm、体质量(34.71±11.57)g的豹纹鳃棘鲈为研究对象,通过自制鱼类游泳实验装置,设计静水对照组[0 cm·s^(−1)或0 BL·s^(−1)(体长·秒^(−1))]和3组实验组(11.4、22.8和34.2 cm·s^(−1)对应1、2和3 BL·s^(−1)),探究40 min水流刺激对豹纹鳃棘鲈摆尾频率变化、血糖、血液中乳酸和皮质醇含量的影响。结果显示,摆尾频率与水流速度之间呈线性正相关关系;血糖和血液中皮质醇含量随摆尾次数增多呈线性增长趋势,乳酸随摆尾次数增多呈非线性增长趋势。超过2 BL·s^(−1)流速会导致豹纹鳃棘鲈血液中皮质醇含量显著升高(P<0.05)。当流速达3 BL·s^(−1)时,血液中乳酸和血糖含量显著升高(P<0.05)。综上,豹纹鳃棘鲈对流速的耐受上限为2 BL·s^(−1)。当养殖水体流速高于2 BL·s^(−1)时,应激水平和代谢负荷显著增加(P<0.05),出现胁迫效应。研究结果可为养殖工船制荡和网箱养殖水域选址提供参考。

来曲唑对豹纹鳃棘鲈提前性反转的诱导效果

【目的】探究来曲唑诱导豹纹鳃棘鲈(Plectropomus leopardus)发生性反转的效果及性反转后性别相关基因的表达变化。【方法】取性腺已分化为II期卵巢的1龄豹纹鳃棘鲈,投喂含200 mg/kg来曲唑的饲料,分别在处理后45、90及120 d通过石蜡切片、HE染色检查性腺发育情况,统计生长指标及性反转比例,采用ELISA及实时定量PCR方法检测来曲唑处理120 d后对照组及处理组血清中11-酮基睾酮(11-Ketotestosterone,11-KT)含量和性腺中性别相关基因的相对表达量。【结果】来曲唑处理45 d时体长显著增长,处理90 d时体质量显著增长。90 d后的样本开始出现含少量精子细胞的间性性腺(55.56%),120 d时33.33%的实验鱼性腺发生性反转,出现大量精母细胞、精子细胞及精子及少量退化的卵母细胞。与对照组相比,处理后120 d性反转个体中血清中11-KT的浓度显著上升,性腺中dmrt1、cyp11b2及gsdf的表达显著高于对照组,cyp19a1a和foxl2的表达显著低于对照组。【结论】来曲唑可通过降低体内雌激素水平诱导性腺已分化为II期卵巢的豹纹鳃棘鲈性腺提前性反转为精巢。

水相Cr(Ⅲ)和Cr(Ⅵ)对豹纹鳃棘鲈(Plectropomu leopardus)肝脏抗氧化指标影响

将体质量(16.5±2.1)g的豹纹鳃棘鲈(Plectropomus leopardus)幼鱼驯养在实验室0.8 m×0.6 m×0.6 m水族箱后,暴露于水相Cr(Ⅲ)(氯化铬CrCl_(3)·6H_(2)O,纯度≥99%)和Cr(Ⅵ)(重铬酸钾K_(2)Cr_(2)O_(7),纯度≥99.5%)14d和21 d,浓度分别为对照组、0.05 mg/L、0.1 mg/L和0.2 mg/L,测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性和谷胱甘肽(GSH)含量,采用半静态法研究了水相Cr(Ⅲ)和Cr(Ⅵ)对豹纹鳃棘鲈肝脏抗氧化指标的影响。结果显示,14 d时,Cr(Ⅲ)处理下,SOD和CAT活性显著低于对照组(P<0.05),21 d时Cr(Ⅲ处理与对照组无显著差异(P>0.05);14 d和21 d时,POD活性和GSH含量都显著高于对照组(P<0.05),且随着Cr(Ⅲ)浓度的升高而升高。14 d和21 d时,Cr(Ⅵ)处理下,SOD和CAT活性被显著抑制(P<0.05),尤其是CAT活性随着处理浓度的升高而显著下降(P<0.05);14 d和21 d时,0.2 mg/L浓度下POD活性和GSH含量显著低于对照组(P<0.05)。Cr(Ⅲ)与Cr(Ⅵ)处理组相比,SOD、CAT、POD活性和GSH含量大多高于Cr(Ⅵ)处理下的活性,特别是在21 d时0.2 mg/L浓度组差异极显著(P<0.01)。结果表明,14 d时,0.05 mg/L、0.1 mg/L和0.2mg/L浓度暴露下Cr(Ⅲ)和Cr(Ⅵ)都会抑制肝脏抗氧化能力,但是,21 d时,0.05 mg/L、0.1 mg/L和0.2 mg/L浓度暴露下Cr(Ⅲ)增强了肝脏抗氧化能力,Cr(Ⅵ)仍为抑制作用且在较低的浓度下也会对豹纹鳃棘鲈幼鱼肝脏抗氧化能力产生一定程度的抑制影响,其毒性大于Cr(Ⅲ)。本研究结果可为准确评价不同价态水相铬对水生生物的毒性生理影响提供一定的理论基础。

豹纹鳃棘鲈肌肉营养成分分析与品质评价

豹纹鳃棘鲈Plectropomus leopardus俗称东星斑,隶属于鲈形目、鲈亚目、科、石斑鱼亚科、鳃棘鲈属,属暖水性岛礁鱼类,主要分布于西太平洋至印度洋海区,其中日本、澳洲、斐济等地也有少量分布[1]。关于其他经济鱼类肌肉营养成分的研究报道较多,谭德清等[2]对黑尾近红鲌、尹洪斌等[3]对山女鳟、王建新等[4]对梭鱼、樊佳佳等[5]对大口黑鲈、张升利等[6]对长吻、庄平等[7]对舌虾虎鱼、程波等[8]对七带石斑鱼。

豹纹鳃棘鲈(Plectropomus leopardus)早期形态与色素变化及添加剂对其体色的影响

为研究豹纹鳃棘鲈色素变化过程以及添加剂对其产生的影响,本研究在室内工厂化养殖条件下,对豹纹鳃棘鲈的早期色素积累、转变过程进行描述,并采用螺旋藻粉和虾青素两种添加剂对其仔、稚、幼鱼的生长及体色变化的影响进行观察。结果显示,从2 d仔鱼开始,眼点色素增多,并由透明转为黑色,摄食明显;3 d仔鱼其背部鳍褶上的树枝状黑色素扩大,脊椎下方出现1列黑色素细胞丛;22 d的鱼体脊椎上方出现1排黑色素斑点,下方黑色素斑点数量减少,此时口、各鳍基部及沿脊椎两侧黄色素增加;28 d的稚鱼体表黄色素与红色素进一步增多,各鳍沿鳍条均有红色素斑点分布,鱼体呈橘红色,颜色鲜艳;30–33 d的幼鱼体表两侧布满黑色与橘红色斑点,脊椎下方斑点消失,仅在尾椎下方存有1块黑色素斑点。增色剂实验结果显示,实验15 d时,螺旋藻粉组与虾青素组全长、体重差异不显著,但均显著高于对照组(P<0.05),各实验组内梯度之间差异不显著(P>0.05)。30 d时,3%和6%螺旋藻粉组较对照组的体重值高,但差异不显著(P>0.05),9%螺旋藻粉组显著低于对照组(P<0.05);虾青素组均高于对照组,除与0.6%组差异不显著(P>0.05)外,其他组均差异显著(P<0.05)。0.1%实验组体重高于对照组和螺旋藻粉组,并高于组内其他梯度组。经过15 d添加虾青素的幼鱼体色红色素有明显增加,与对照组差异显著;30 d时,螺旋藻组没有达到增色效果。结果表明,螺旋藻粉对幼鱼生长初期有促进作用,随着添加浓度与养殖时间的增加其效果不明显,出现负效应;添加浓度为0.1%的虾青素可使全长、体重增长率最高并具有明显增色效果。

环境光色对工业化养殖豹纹鳃棘鲈幼鱼生长、肤色及生理指标的影响

为探究环境光色对工业化养殖豹纹鳃棘鲈(Plectropomus leopardus)幼鱼生长、肤色和生理指标的影响,本试验设计了红色光、蓝色光、黑暗和昼夜4种养殖光照环境处理,进行豹纹鳃棘鲈幼鱼(64.2g±1.1g)94 d动物实验及其相关指标检测。结果表明:1)试验鱼增重率,昼夜组较黑暗组和红光组分别显著和极显著提高28.6%和39.2%(P<0.05,P<0.01),与蓝光组差异不显著;而蓝光组比红光组显著提高31.2%(P<0.05)。2)试验鱼皮肤胡萝卜素含量,昼夜组分别显著高于蓝光组和黑暗组45.7%和68.5%(P<0.05),与红光组的差异不显著。同时新发现,各处理组试验鱼皮肤胡萝卜素和黑色素含量出现增减同时进行,但增减量前者较大后者较小的"同步异幅"现象。3)昼夜组试验鱼胃蛋白酶活性较其他组显著提高48.0%~88.5%(P<0.05),血清SOD和LZM活力极显著提高20.4%~39.7%和140.4%~161.2%(P<0.01);蓝光组试验鱼胰蛋白酶活力显著高于红光组和昼夜组(P<0.05);红光组试验鱼Na^+,K^+-ATP酶活力极显著高于蓝光组和黑暗组(P<0.01)。总之,豹纹鳃棘鲈幼鱼在昼夜组光照下,生长、肤色及生理等指标都表现出显著优势;蓝色光提高蛋白质消化能力、促进生长;红色光提高皮肤胡萝卜素含量和吸收能力;"同步异幅"新发现,对调控和优化鱼类肤色具有重要价值。

豹纹鳃棘鲈胚胎发育的初步观察

2008年5月20日，对海水网箱养殖的豹纹鳃棘鲈（Plectropomus leopardus Lacepede）亲鱼进行人工催产试验，并对获得的受精卵进行胚胎发育观察，描述其发育各期的形态特征及发育速度。豹纹鳃棘鲈的受精卵呈浮性，透明圆球形，卵径为816．5μm±15．9μm，具一直径约145．5μm的大油球，有些受精卵还含有数个（1～6）小油球。在自然海区水温30．0～31．2℃条件下，胚胎发育时间为16h32min。

豹纹鳃棘鲈致病性哈维氏弧菌的分离鉴定与系统发育分析

为探明养殖豹纹鳃棘鲈体表溃疡症的病因,从患病豹纹鳃棘鲈血液及内脏、体表溃疡处分离到2株优势菌,其中编号为1031的菌株经人工感染证实能够引起被感染鱼的死亡,为引起该豹纹鳃棘鲈溃疡病的病原菌。采用形态学、生理生化特性鉴定,结果表明菌株1031与弧菌属的基本特征相符,分别基于16SrDNA序列及热激蛋白60基因(hsp60)序列构建的系统发育树将菌株1031与哈维氏弧菌聚为一支,置信度均为97%,以1031为模板特异性扩增哈维氏弧菌toxR基因,也得到了预期382bp的核酸片段。综合以上结果,最终确定此次豹纹鳃棘鲈体表溃疡症的病原为哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)。药敏结果显示,该菌株仅对氟苯尼考、庆大霉素(120μg)、菌必治敏感,对诺氟沙星、恩诺沙星、阿奇霉素、强力霉素等均不敏感。

盐度对豹纹鳃棘鲈幼鱼摄食生长及体成分的影响

在实验室条件下进行了不同盐度对豹纹鳃棘鲈Plectropomus leopardus幼鱼摄食生长及体成分影响的试验。试验设5个盐度(15、20、25、30和35)处理组,每组设3个平行,各随机放12尾体质量为(25.63±1.36)g的试验鱼,饲养试验在室内有循环设备的水槽(800 mm×500 mm×450 mm,水体为140L)中进行,日饱食投喂商品饲料两次(8:00、16:00),试验共进行42 d。结果表明:将豹纹鳃棘鲈幼鱼从盐度为30的海水中直接移入盐度为15、20、25、35的水中时,在各个盐度下96 h后的存活率均为100%;经盐度驯化后饲养42 d的各组鱼的成活率平均为96.7%;饲养试验结束时,盐度为15的组豹纹鳃棘鲈幼鱼增重率、特定生长率、摄食率和饲料转化效率均最高,盐度为30的组幼鱼各项摄食生长指标均最低;盐度为15和30的组幼鱼肌肉粗蛋白质含量较高,极显著高于其他各组(P<0.01),但这两组幼鱼的粗脂肪含量较低,各试验组水分含量无显著差异(P>0.05)。本研究表明,豹纹鳃棘鲈幼鱼在盐度为15时摄食生长最快,肌肉品质也最好。

主要营养素源对工业化养殖豹纹鳃棘鲈生长、体色和消化吸收的影响

本试验旨在探究工业化海水养殖条件下饲料中主要营养素源对豹纹鳃棘鲈（ Plectropo-mus leopardus）生长、体色和消化吸收的影响。采用2×2×2三因素试验设计，2个营养素因素：蛋白质水平-46％蛋白质（P46）、50％蛋白质（P50），脂肪水平——8％脂肪（L8）、10％脂肪（ L10）；1个营养源因素：蛋白质源色素——植物性蛋白质源色素（VPP）、动物性蛋白质源色素（APP），共形成8种试验饲料（1＃～8＃处理），分别饲喂初始体重为（64.2±1.1） g的豹纹鳃棘鲈幼鱼，每个处理3个重复，每个重复30尾鱼。正试期94 d。结果表明：1）4＃处理（P46、L10与APP的组合）试验鱼的增重率较2＃（P46、L8与APP的组合）、3＃（P46、L10与VPP的组合）、5＃（P50、L8与VPP的组合）、6＃（ P50、L8与APP的组合）、8＃处理（P50、L10与APP的组合）显著或极显著升高（ P＜0.05或P＜0.01），饲料系数则较2＃、7＃处理（ P50、L50与VPP的组合）显著或极显著降低（ P＜0.05或P＜0.01）。2）6＃处理试验鱼皮肤中胡萝卜素含量较3＃、4＃、8＃处理显著或极显著升高（P＜0.05或P＜0.01）；试验鱼皮肤中胡萝卜素与黑色素含量在不同处理下出现增减同步的现象。3）比较而言，7＃处理试验鱼具有最高的脂肪酶和胃蛋白酶活性以及较高的淀粉酶和胰蛋白酶活性；6＃处理试验鱼具有最高的碱性磷酸酶和Na^＋， K^＋-ATP酶活性，并显著或极显著高于1＃～3＃处理（P＜0.05或P＜0.01）。总之，饲料主要营养素源的变化和互作影响着试验鱼的生长、体色及消化吸收，初步确定P50、L8与APP的组合是兼顾豹纹鳃棘鲈生长、体色和消化吸收的优良组合。

豹纹鳃棘鲈室外大型水泥池的人工育苗技术

为了探索利用室外大型水泥池进行豹纹鳃棘鲈(Plectropomus leopardus)人工育苗的技术模式,通过在室外大型水泥池顶部加盖遮光太阳板半封闭顶棚,对育苗水体进行控光、控温和防雨,进行该鱼人工育苗过程中水处理技术、饵料培育技术和育苗方法的研究。2010年3～7月,累计放卵5批次,共培育出全长2.5～3.0 cm的鱼苗21.9×104ind,受精卵平均孵化率达81.4%,育苗平均成活率达5.59%;初孵仔鱼平均全长1.6mm,在早期发育阶段每经历一次饵料转变,都会带来仔稚幼鱼的快速增长;该鱼摄食时间主要集中在白天,随着个体生长发育,饵料出现顺序依次为原生动物、轮虫、桡足类、蒙古裸腹蚤。研究表明,豹纹鳃棘鲈室外大型水泥池人工育苗模式克服了池塘育苗受自然环境影响大和室内水泥池育苗水体小、开口饵料匮乏的缺点,育苗成功率和出苗率比较稳定。

豹纹鳃棘鲈仔鱼饥饿实验和不可逆点研究

采用实验生态学方法研究了饥饿对豹纹鳃棘鲈(Plectropomus leopardus)仔鱼形态发育、生长和成活的影响,并测定了饥饿仔鱼的初次摄食率和不可逆点(PNR)。结果显示,水温23~24℃下豹纹鳃棘鲈仔鱼2.5 DPH(孵化后天数)开口摄食,3.0 DPH卵黄囊和油球消失,混合营养期仅0.5 d,容易遭受饥饿胁迫。饥饿仔鱼最高初次摄食率为65%,出现在3.5 DPH;PNR发生在4.5~5.0 DPH,仔鱼具有初次摄食能力的时间仅2.0~2.5 d。对照组和饥饿组仔鱼在3.5 DPH前全长无明显差异(P>0.05),之后饥饿组仔鱼出现生理性萎缩,全长开始与对照组差异显著(P<0.05)。饥饿组仔鱼在内源性营养消耗完毕后出现了一系列因饥饿所导致的形态发育特征,并于6.5 DPH全部死亡,因此豹纹鳃棘鲈仔鱼最佳投喂时间为2.5~3.5 DPH。

光色对豹纹鳃棘鲈幼鱼摄食、生长和存活的影响

为探究光色对鱼类摄食、生长和存活的影响,作者在模块化小型循环水养殖系统中,以豹纹鳃棘鲈(Plectropomus leopardus)幼鱼(体长21.2 cm±1.22 cm,体质量112.46 g±2.632 g)为对象,设置5种光色环境(红、黄、绿、白和黑暗),进行了4个月的循环水养殖实验。结果表明:绿光下豹纹鳃棘鲈幼鱼摄食率高、饵料转化率高、饵料系数低,但不同光色下豹纹鳃棘鲈幼鱼的摄食不存在显著性差异(P>0.05);幼鱼的体长增长,绿光组和红光组大,且与其余3组间差异显著(P<0.05);幼鱼的体质量增长,绿光组最大,红光组和黑暗组次之,白光组和黄光组最小,且三者间差异显著(P<0.05);各组幼鱼的肥满度并没有显著性差异(P>0.05);除白光组幼鱼存活率(只有50%)最低外,其余各组幼鱼存活率均在80%以上,其中绿光组最高,为88.33%。可见,在循环水养殖生产中,绿光环境有利于豹纹鳃棘鲈幼鱼的摄食、生长和存活。

光环境因子对豹纹鳃棘鲈幼鱼栖息特性的影响

以豹纹鳃棘鲈[全长(17.5±0.6)cm、体质量(205.2±1.7)g]为研究对象,分别采用光梯度法和正交试验法,在小型循环水养殖系统中一个特制的养殖水槽和一组常规的养殖水槽内探究了豹纹鳃棘鲈幼鱼对白、蓝、绿、黄和红5种光环境的喜好性和三原色(红色A1、绿色A2、蓝色A3)及光周期(16L︰8D,B1;12L︰12D,B2;8L︰16D,B3)和光照度(1000lx,C1;1500lx,C2;2000lx,C3)对豹纹鳃棘鲈幼鱼栖息的影响。结果表明,光色和光照度对幼鱼幼鱼的栖息习性均有显著影响,在试验设定的光色和光照度范围内,同光色照射下,随着光照度的升高,幼鱼对光照度的敏感性越来越低,在不同光照度下的分布率差异不显著(P>0.05);同强度光照射下,光波长越大,幼鱼分布率越高,随着光照度的升高,幼鱼对光波长的敏感度逐渐降低,但在不同光色下的分布率显著差异(P<0.05)。正交试验结果,光色对豹纹鳃棘鲈幼鱼的栖息有显著影响(P<0.05),光周期和光照度对豹纹鳃棘鲈栖息影响不显著(P>0.05);极差分析结果,豹纹鳃棘鲈幼鱼最适宜栖息的光照环境是绿色光;光周期16L∶8D;光照度1500lx;影响豹纹鳃棘鲈幼鱼栖息的主要光照因子是光色,其次是光照度和光照周期。

豹纹鳃棘鲈病原鳗利斯顿氏菌的分离鉴定及生物学特性研究

从患病的豹纹鳃棘鲈(Plectropomus leopardus)的肾脏中分离到1株优势菌33002,人工感染试验证实其对豹纹鳃棘鲈有较强的致病性;采用形态学观察、生理生化特性分析及16SrRNA和gyrB基因序列系统发育树分析对菌株33002进行鉴定。结果显示,菌株33002为革兰氏阴性弧菌,生化特性与利斯顿氏菌属的鳗利斯顿氏菌(Listonella anguillarum)相近,基于gyrB基因序列的系统发育分析,菌株33002与鳗利斯顿氏菌聚为一支。对48种抗生素的药敏结果显示,菌株33002对红霉素、阿奇霉素等25种药物敏感,对恩诺沙星、杆菌肽等22种药物不敏感。

生态因子对豹纹鳃棘鲈受精卵孵化和仔鱼成活的影响

将豹纹鳃棘鲈(Plectropomus leopardus)受精卵在不同盐度(1%、1.4%、1.8%、2.2%、2.6%、3%、3.4%、3.8%、4.2%、4.6%)、不同温度(18、20、22、24、26、28、30、32、34、36℃)和不同光照度(0、1 000、2 000、3 000、4 000、5 000、6 000 lx)的条件下孵化,比较孵化率、畸形率、24 h和48 h存活率,探讨环境生态因子对孵化的影响。结果表明,豹纹鳃棘鲈受精卵孵化的适宜盐度范围是2.2%～4.2%,最适盐度范围是2.6%～3.4%;适宜温度范围是22～34℃,最适温度范围是26～28℃;适宜光照度范围是0～5 000 lx,最适光照度范围是0～3 000 lx。豹纹鳃棘鲈仔鱼在水温28.0℃、盐度3.25%条件下孵出后第4 d开始摄食,光照和黑暗摄食试验表明,光照是豹纹鳃棘鲈仔鱼开口摄食的必要因子,仔鱼在全暗的条件下无法摄食。

豹纹鳃棘鲈类结节症病原的分离鉴定

为查明养殖豹纹鳃棘鲈类结节症的病因,自患病豹纹鳃棘鲈内脏中分离到1株优势菌株061101,人工感染试验证实,该菌具有强毒力,能够引起被感染鱼内脏出现白色结节并死亡,为引起此次豹纹鳃棘鲈类结节症的病原菌。采用形态学、生化特性测定对菌株061101进行鉴定,同时采用细菌16S rRNA通用引物进行PCR扩增得到该菌的16S rRNA基因序列,测序后比对,构建系统发育树。试验结果表明,菌株061101与发光杆菌属中的美人鱼发光杆菌杀鱼亚种基本特征相符;基于16S rRNA基因序列构建的系统发育树将菌株061101与美人鱼发光杆菌杀鱼亚种聚为一支,置信度达100%。据此确定,此次豹纹鳃棘鲈类结节症的病原为美人鱼发光杆菌杀鱼亚种。药敏结果显示,该菌株仅对链霉素(300μg/片)、庆大霉素(120μg/片)敏感,对多黏菌素B、阿洛西林等中度敏感,对氟苯尼考、恩诺沙星、强力霉素等均耐药。

4月龄豹纹鳃棘鲈形态性状对体质量的影响分析

摸清豹纹鳃棘鲈(Plectropomus leopardus)形态性状与体质量的关系对其选育工作具有重要意义。以同一批次159尾4月龄豹纹鳃棘鲈为试验对象,测量并探寻其形态性状对体质量的影响效应。结果表明,豹纹鳃棘鲈吻长与体质量的相关性为显著水平(P<0.05),其余形态性状与体质量的相关性均为极显著水平(P<0.01);通径分析结果发现,体长、体高、体宽、头高和吻长是影响4月龄豹纹鳃棘鲈体质量的主要形态性状,其中体高主要是通过直接作用影响体质量,而体长、体宽和头高则主要通过体高间接影响体质量;体长、体高、体宽、头高和吻长性状对体质量的共同决定系数之和大于0.85,说明4月龄豹纹鳃棘鲈体质量主要受这5个性状影响。通过回归分析建立多元回归方程,剔除与体质量相关性不显著的形态性状,所得方程保留的形态指标与通径分析结果一致。