浙贝母化学成分和药理作用的研究进展及其质量标志物预测分析

浙贝母是传统“浙八味”药材之一,位列“浙八味”药材之首,可以清热化痰止咳、解毒散结消痈。研究发现浙贝母主要含有生物碱类、黄酮类、萜类及皂苷类、糖类等化学成分,并含挥发性成分,具有镇咳祛痰、平喘、抗炎、抗菌、镇痛、抗氧化、抗癌、抗肿瘤等药理作用。本文在对浙贝母化学成分和药理作用研究总结的基础上,依据质量标志物(quality marker,Q-marker)相关概念,在植物亲缘学及化学成分特有性、化学成分可测性、传统药性、传统药效、不同配方配伍、不同干燥方法、不同产区、入血成分等方面,对浙贝母Q-marker进行预测分析,初步预测贝母素甲、贝母素乙等生物碱类成分,皂苷类,挥发性成分,黄酮类,萜类等成分可作为浙贝母的主要Q-marker。

土贝母及其有效成分抗乳腺癌作用机制研究进展

乳腺癌是我国女性最常见的恶性肿瘤之一,发病率位居女性恶性肿瘤之首。手术切除、化学治疗、靶向治疗、放射治疗、免疫治疗是乳腺癌的主要治疗手段,但均存在一定的不良反应。中医药作为乳腺癌综合治疗的重要组成部分,为患者提供了更多选择。近年来的研究表明,中药土贝母及其有效成分在乳腺癌治疗中展现出巨大潜力,不仅能抑制乳腺癌的生长、增殖,还能对抗乳腺癌的迁移、侵袭,有望提升患者的生存率和生活质量。文章总结了土贝母相关的主要活性成分,并通过对土贝母及其有效成分抗乳腺癌作用机制相关文献进行梳理,从促进细胞自噬、诱导细胞凋亡、调控细胞周期、抑制细胞增殖、抑制细胞迁移和侵袭等角度对其抗乳腺癌作用机制进行综述;此外,文章还将土贝母鲜品提取物以及6种含有土贝母的中药复方制剂对乳腺癌的抑制作用进行总结,为土贝母的临床用药和抗乳腺癌新药研发提供依据。

超声辅助低共熔溶剂法提取太白贝母总黄酮及其抗氧化活性研究

采用超声辅助低共熔溶剂法提取太白贝母总黄酮,以太白贝母总黄酮提取率为考察指标,通过单因素实验和响应面法对提取工艺进行了优化,并通过DPPH自由基清除实验和ABTS自由基清除实验研究了其抗氧化活性。结果表明,在超声功率为69 W、料液比为1∶18(g∶mL)、超声温度为79℃、超声时间为27 min的最优工艺条件下,太白贝母总黄酮提取率可以达到17.7004%,与预测值相差极小;太白贝母总黄酮是一种强抗氧化剂,对DPPH自由基、ABTS自由基具有较强的清除能力,在浓度为16 mg·mL^(-1)时,清除率分别达到82.15%、90.42%,与VC无明显差异。超声辅助低共熔溶剂法操作简便、提取率高,适用于太白贝母总黄酮的提取。该研究为太白贝母药材资源的开发利用提供了参考。

贝母素乙调节RhoA/ROCK信号通路对膝骨关节炎大鼠软骨损伤的影响

目的 探讨贝母素乙调节Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关的卷曲螺旋激酶(ROCK)信号通路对膝骨关节炎(knee osteoarthritis, KOA)大鼠软骨损伤的影响。方法 以碘乙酸钠(MIA)法制备KOA大鼠模型,随机分为模型组、贝母素乙(3.5 mg/kg)组、贝母素乙(3.5 mg/kg)+LPA(RhoA激活剂,1 mg/kg)组,每组10只,另选10只大鼠为对照组。机械刺激法和热辐射法检测大鼠膝关节疼痛症状;检测大鼠关节肿胀度、膝关节宽度并以步态评分评测其关节功能;透射电镜检测大鼠膝关节软骨细胞超微结构;TUNEL染色检测大鼠关节软骨细胞凋亡比;酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠血清和关节液促炎因子白细胞介素(IL)-18、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)水平;免疫印迹检测各组大鼠关节软骨组织凋亡(Cleaved caspase-3、Bax)和RhoA/ROCK通路相关蛋白表达。结果 贝母素乙可降低KOA大鼠关节肿胀度、膝关节宽度、步态评分、软骨细胞凋亡比、血清及关节液IL-18、MCP-1水平、软骨组织Cleaved caspase-3、Bax、RhoA、ROCK1、ROCK1蛋白表达,升高机械痛阈值、热痛阈值(P<0.05);LPA可减弱贝母素乙对KOA大鼠关节软骨损伤的改善作用。结论 贝母素乙可通过抑制RhoA/ROCK信号激活而抑制KOA大鼠关节炎症反应和关节软骨细胞凋亡,减轻软骨损伤。

贝母多糖提取纯化、结构表征及生物活性研究进展

贝母是一种具有数千年历史的药食两用的中药材,含有多种活性成分,如皂苷、生物碱、氨基酸、黄酮类和多糖。其中,贝母多糖具有抗氧化、抗炎、抗衰老、免疫调节等作用,在食品医药领域具有良好应用前景。文章综述了近年来国内外关于贝母多糖的研究现状,比较了贝母多糖不同提取纯化方法的优缺点,探讨贝母多糖结构与其生物活性的关系,分析贝母多糖研究的发展趋势及在畜禽养殖中的应用前景,为贝母多糖的研究和开发利用提供一定参考依据。

海藻酸钙固定化重组暗紫贝母PAL蛋白

利用IPTG诱导含暗紫贝母(Fritillaria unibracteata)苯丙氨酸解氨酶FuPAL-pET28a的重组大肠杆菌BL21菌株,经Ni2+亲和层析与质谱鉴定获得纯度较高的FuPAL重组蛋白。以海藻酸钙凝胶为固定化介质,包埋FuPAL重组蛋白。单因素考察试验与统计学分析结果表明,海藻酸钠质量分数、CaCl_(2)浓度、固定化时间、海藻酸钠与酶质量比影响固定化酶的活性,它们的最优条件分别为3.5%、1g/L、4 h与40 000:1。进一步采用L9(3~4)正交试验设计,确定影响因素的重要性从高到低依次为CaCl_(2)浓度、海藻酸钠质量分数、固定化时间、海藻酸钠与酶质量比,最佳的固定化条件是CaCl_(2)浓度为2 g/L,海藻酸钠质量分数为4%,固定化时间为3 h,海藻酸钠与酶质量比为40 000:1。在该优化工艺条件下,制备的固定化酶凝胶颗粒呈较好的圆整性和均一性,相对酶活力达到最高,为68.53%。该固定化方法具有试验成本低、工艺流程简单、反应条件温和的特点,应用前景较好,并为固定化FuPAL蛋白的制备优化提供了重要的理论基础。

新疆地区贝母产业研究现状及发展对策

针对新疆贝母产业发展中存在的问题,通过文献统计和实地调研等方法,对新疆贝母产业的现状和特点进行了分析和调查,总结了新疆贝母产业的发展历程和现状,分析了生产加工中存在的问题,探讨了发展对策,并提出相应的对策建议,以期为新疆贝母产业的健康可持续发展提供参考。

贝母素甲改善脂多糖联合烟雾诱导小鼠慢性阻塞性肺疾病的机制

目的探讨贝母素甲(PME)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)小鼠的作用和相关机制。方法将80只小鼠随机分为4组(每组20只):对照组、PME组、COPD组和治疗组。使用脂多糖联合烟雾诱导小鼠COPD动物模型。通过组织病理学、超微结构、小鼠肺组织湿/干重比值分析PME对COPD模型鼠结构的影响;ELISA和Western blotting分析PME对肺组织中炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6和IL-1β表达的影响;二氢乙锭(DHE)染色和Western blotting分析PME对肺组织中氧化应激反应的影响;Western blotting分析PME对核因子κB(NF-κB)通路以及核因子2相关因子2(Nrf2)通路相关蛋白表达的影响。结果与COPD组相比,PME治疗可明显减轻小鼠肺组织的损伤和减少炎症细胞数量,降低肺组织湿/干重比。与对照组相比,COPD组小鼠的肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6及IL-1β水平明显增加,经PME治疗后小鼠肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6及IL-1β水平明显降低。另外,与对照组相比,COPD组小鼠肺组织中TNF-α和IL-1β水平显著升高,经PME治疗后小鼠肺组织中TNF-α和IL-1β蛋白水平明显下降。免疫组织化学和Western blotting实验显示,与对照组相比,COPD组SOD2水平明显降低,而PME治疗后能够提高超氧化物歧化酶(SOD)蛋白水平。对肺组织丙二醛(MDA)含量分析发现,与COPD组比较,PME治疗后明显抑制COPD小鼠肺组织中MDA的产生。Western blotting结果显示,PME治疗后能够阻止肺组织中的NF-κB抑制蛋白(IκBα)磷酸化以及NF-κB p65向细胞核转移,PME处理后的小鼠肺组织中Nrf2及其主要下游靶点血红素加氧酶1(HO-1)的表达明显升高。结论PME能够抑制COPD小鼠体内的炎症和氧化应激反应,改善脂多糖联合烟雾诱导肺组织损伤,其机制可能与激活Nrf2通路和抑制NF-κB通路相关。

基于叶绿体基因ITS1、rpl20-rps12、rbcl序列的平贝母种质资源遗传多样性分析

平贝母作为我国传统的药材,具有极高的药用价值,为了分析东北地区平贝母的遗传多样性,对27份平贝母材料进行了叶绿体序列分析。根据叶绿体DNA序列差异,选用并设计具有代表性的3对叶绿体基因(ITS1、rpl20-rps12、rbcl)引物,结果发现:3对引物扩增的序列长度分别为191 bp、783 bp、165 bp,同时引物rpl20-rps12区域的单倍型多态性最高,其中核酸差异平均数、核酸多态性、单倍型多态性分别为2.06838、0.00264、0.670。单倍型数目为5,形成9个单倍型。结果表明,黑龙江地区平贝母可能存在栽培种扩散,因此应该丰富平贝母的遗传背景,为新种质资源的开发和利用奠定基础。

PCR-RFLP法鉴别浙贝母及其混淆品湖北贝母

目的建立PCR-RFLP法鉴别浙贝母及其混淆品湖北贝母。方法对比两者叶绿体ycfl基因,选择湖北贝母的特异性酶切位点EcoRI设计引物,优化反应条件,并进行方法学考察。结果退火温度58℃、循环数35时,湖北贝母或掺有湖北贝母的浙贝母经特异性引物扩增后能被EcoRI酶酶切,200~400bp处检出2条单一DNA条带,而浙贝母无此条带,检出限达3%。结论该方法方便快捷、灵敏度高,可用于浙贝母、湖北贝母及前者掺混后者的快速检测,为浙贝母质量控制提供参考。

对照提取物在浙贝母配方颗粒质量分析中的应用研究

目的 以浙贝母对照提取物(水提)和湖北贝母对照提物(水提)为参照,对12个不同厂家的22批浙贝母配方颗粒进行质量分析。方法 以乙酸乙酯-甲醇-三乙胺-水(17∶1∶1∶0.5)为展开剂进行高效薄层色谱(HPTLC)指纹图谱分析;采用Agilent Eclipse XDB-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.03%二乙胺溶液,梯度洗脱,柱温25℃,蒸发光检测器,进行高效液相色谱(HPLC)指纹图谱分析。根据浙贝母配方颗粒标准含量测定项下方法测定含量。结果 HPTLC和HPLC分析结果表明,22批标识为浙贝母配方颗粒的样品存在明显差异,其中有3家生产企业的4批浙贝母配方颗粒检出湖北贝母指纹图谱特征,其余18批浙贝母配方颗粒样品贝母素甲和贝母素乙的总量为0.291~3.179 mg·g^(-1),差异较大。结论 目前市售的浙贝母配方颗粒样品质量差异较大,经标准化制备的对照提取物(水提)对分析浙贝母配方颗粒的质量比对照药材具有更好的适用性。

名贵中药川贝母的植物来源之一太白贝母的研究进展

名贵中药川贝母的植物来源之一——太白贝母入药部位为地下的鳞茎,具有较高的药用价值。本文主要从太白贝母的本草考证、加工方法、提取技术、活性成分、药理作用、鉴定技术及栽培技术等方面进行了综述,对太白贝母的临床研究及综合开发利用具有一定的指导意义。

基于YOLOv5的平贝母检测装置试验研究

目前,平贝母表土剥离机在工作过程中存在刮土调节慢,导致平贝母损伤高的问题,要想实现表土剥离机智能调节刮土,第一步在于实现其智能识别。该文以YOLOv5系列为基础模型,在骨干段加入SENet注意力机制替换其C3进行结合,并将改进后的模型部署到Jetson Nano开发板中,搭建平贝母检测系统,通过正交试验验证该文改进模型移植的可行性,试验结果表明,平贝母检测的准确度最高可达86.61%。研究结果可为下一步平贝母表土剥离机实现智能刮土提供理论参考。

川贝母及其市场常见易混品的传统鉴别

目的 将川贝母及其市场常见易混品进行鉴别区分,从而更好地对市场上川贝母药材的质量进行监控。方法 采用传统的性状鉴别与显微鉴别方法。结果 川贝母、伊贝母、平贝母、浙贝母、湖北贝母性状之间具有一定的差异,如表面颜色、外部鳞叶、气味,通过显微实验观察到的淀粉粒的形状、边缘形态,脐点大小、明显程度,层纹的明显程度以及螺纹或螺纹—环纹导管的大小,可将川贝母类与常见不同种类的贝母进行初步鉴别。结论 采用传统的性状、显微鉴别手段可对川贝母及其市场常见易混品进行粗略区分,初步减少川贝母市场药用混乱情况。

浙贝母提取液在大鼠尿液、粪便中的原型成分及代谢产物分析

目的 分析浙贝母提取液在大鼠尿液、粪便中的原型成分及代谢产物。方法 UPLC-Q-TOF-MS分析采用Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.7μm);流动相0.1%甲酸-乙腈,梯度洗脱;体积流量0.4 mL/min;柱温30℃;电喷雾离子源;正负离子扫描。结果 在大鼠尿液中共检测出化学成分28种,其中原型成分19种,代谢产物9种;在大鼠粪便中共检测出化学成分53种,其中原型成分37种,代谢产物16种,去除重复后,共检测出化学成分66种,其中原型成分45种,代谢产物21种;粪便、尿液中共有原型成分24种,粪便中独有成分15种,尿液中独有成分6种;粪便、尿液中共有代谢成分6种,粪便中独有成分11种,尿液中独有成分4种。浙贝母主要活性成分贝母素甲、贝母素乙代谢途径包括Ι相代谢(羟基化、氧化脱氢、还原加氢)、Ⅱ相代谢(硫酸化)。结论 该方法快速准确,简单可行,可用于解析浙贝母体内过程,阐明其药效物质基础。

HPLC-ELSD测定溃疡灵胶囊中贝母素甲、贝母素乙的含量

建立HPLC-ELSD测定溃疡灵胶囊中贝母素甲、贝母素乙含量的方法;并对市售9批溃疡灵胶囊样品进行分析。色谱柱:Phenomenex luna C_(18)(2)100A(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%二乙胺溶液(65∶35),流速:0.8 mL/min,柱温:25℃;ELSD参数:漂移管温度为100℃,载气流量2.5 L/min。结果表明贝母素甲和贝母素乙分别在0.5010~5.010μg(r=0.9998)、0.5220~5.220μg(r=0.9996)范围内呈良好线性关系,平均回收率分别为99.5%(RSD为1.78%)、100.2%(RSD为2.08%)。此法操作简便、结果准确、重复性好,可用于提升溃疡灵胶囊的质量标准。

不同干燥方法对土贝母理化指标的影响

为了探究不同干燥方法对土贝母药材外观性状及内在质量的影响,为土贝母干燥方法的优化提供一定的理论基础。本试验采用自然晒干、热风干燥、冷冻干燥三种方法对新鲜土贝母样品进行干燥;对干燥后样品的形状大小、颜色、质地、气味进行观察并记录;测定折干率和出膏率;并用分光光度法测定土贝母皂苷甲的含量。结果表明:三种不同干燥方法处理的土贝母样品,外观性状及内在质量均存在显著差异。冷冻干燥处理的土贝母样品外观性状与自然干燥和热风干燥差异较大;冷冻干燥方法处理的样品中土贝母皂苷甲含量显著高于其他两种干燥方法,含量达3.18%;冷冻干燥方法处理的样品折干率显著高于其他两种干燥方法,折干率达54.53%;热风干燥方法处理的样品出膏率显著高于其他两种干燥方法,出膏率达36.79%。结论:折干率和土贝母皂苷甲含量:冷冻干燥>热风干燥>自然晒干,出膏率:热风干燥>冷冻干燥>自然晒干。本试验为土贝母干燥方法提供一定的依据。

基于血水同治法刍议当归贝母苦参丸之异病同治

目的 基于血水同治法刍议当归贝母苦参丸之异病同治。方法 以血水同治法为理论依据,结合当归贝母苦参丸之组方原理,探讨其异病同治之临床应用。结果 当归贝母苦参丸为血水同治法代表方剂,为治疗妇女妊娠并发小便难之名方。现代中医学者基于其血水同治的组方思路,扩展其临床应用,如盆腔炎、前列腺炎、慢性便秘、溃疡性结肠炎,以及肿瘤类疾病。结论 当归贝母苦参丸之异病同治皆为其血水同治之配伍功效与多种疾病之病机吻合,临证之时应灵活加减。

不同产地太白贝母中11种核苷与碱基类成分分析及产地差异研究

目的对10批采自重庆、云南、陕西等5个省(市)的太白贝母样品中11种核苷和碱基类成分的含量进行测定,采用化学计量学分析法比较太白贝母中的核苷和碱基类成分的含量差异,对其质量进行综合评价,为规范化种植和产地优选提供参考。方法水超声提取太白贝母中的核苷和碱基类成分,采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)法测定样品中各成分含量,并采用主成分分析(Principal component analysis,PCA)、层次聚类分析(Hierarchical cluster analysis,HCA)对产地进行划分,偏最小二乘判别分析(Partial least squares discriminant analysis,PLS-DA)确定太白贝母中差异性的指标成分,比较指标性成分在不同产地样品间的含量差异。结果11种核苷和碱基类成分在不同产地太白贝母中存在显著差异;主成分分析和层次聚类分析可将样品聚为4类;PLS-DA鉴定出5个指标性成分,分别为尿嘧啶、胞嘧啶、尿苷、肌苷、腺苷,以重庆、湖北产地样品所含核苷和碱基成分相对较高,质量相对较优。结论该方法操作简单、重复性好、准确可靠,筛选出了鉴定不同产地太白贝母中的特征性核苷和碱基类成分,可用于初步阐明不同产地样品的差异性,并能够较好地反映太白贝母的品质,为太白贝母药材采购产地选择和质量控制提供参考。

新型土贝母苷甲脂质体的制备及其抗胰腺癌作用研究

目的 利用中药活性成分土贝母苷甲完全替代胆固醇作为脂质体膜材料,制备新型土贝母苷甲脂质体(Tub I-LPs),并研究其体内外抗肿瘤作用。方法 采用薄膜水化法制备脂质体。利用粒径仪考察粒径和电位,透射电镜观察形貌,并进行包封率及体外稳定性考察。使用小鼠全血比较土贝母苷甲单体(Tub I)、土贝母苷甲普通型胆固醇脂质体(C-Tub I-LPs)和Tub I-LPs的溶血性。使用CCK-8法检测Tub I-LPs对Panc 02细胞和MIA PaCa 02细胞的增殖抑制效果,利用流式细胞仪检测凋亡作用。倒置荧光显微镜和流式细胞仪分别定性和定量检测Panc 02细胞和MIA PaCa 02细胞对两种脂质体的细胞摄取能力。使用JC-1实验检测线粒体膜电位的变化。体内实验评估两种脂质体的抗肿瘤效果。使用HE染色评价制剂的安全性。结果 两种脂质体粒径分散均匀,呈近似球状,Tub I-LPs平均粒径为(112.8±0.2)nm,Zeta电位为(-2.6±0.2)m V。C-Tub I-LPs平均粒径为(185.2±0.2)nm,Zeta电位为(-3.1±0.2)m V。Tub I-LPs和C-Tub I-LPs的包封率分别为98.22%和48.39%,两者相比,稳定性相似,但Tub I-LPs溶血性明显降低,且其在细胞增殖抑制,致癌细胞凋亡方面作用更加显著。细胞摄取实验结果显示,肿瘤细胞对Tub I-LPs的摄取能力为C-LPs的3倍。Tub I-LPs引起肿瘤细胞线粒体膜电位下降更显著。C57原位胰腺癌模型证实Tub I-LPs抑制肿瘤作用更加显著。HE染色显示两种脂质体均无明显毒副作用。结论 使用土贝母苷甲作为膜材能显著增强其细胞摄取能力,并有效提高整体抗肿瘤效果,为进一步利用该膜材包裹抗肿瘤药物研究奠定了基础。