NQAD和ELSD在黄氏响声丸中贝母素甲和贝母素乙含量测定的对比研究

目的:采用纳克级水凝粒子激光计数检测器(nano quantity analyte detector,NQAD)测定黄氏响声丸中贝母素甲和贝母素乙的含量,并对NQAD和蒸发光散射检测器(evaporative light scattering detector,ELSD)的性能进行比较。方法:以CAPCELL PAK MGⅢC18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)为固定相,流动相为乙腈-水-二乙胺(65∶35∶0.03),流速为1.0 mL·min^(-1),柱温为25℃。结果:NQAD测得贝母素甲在2.450~1.470μg·mL^(-1)范围内其进样量与峰面积有良好的线性关系,相关系数为0.9993,检出限为14.70 ng,加样回收率为99.50%(n=9);贝母素乙在3.657~1.170μg·mL^(-1)范围内其进样量与峰面积有良好的线性关系,相关系数为0.9991,检出限为21.94 ng,加样回收率为100.5%(n=9)。ELSD检测贝母素甲和贝母素乙的检出限分别为24.50及36.57 ng;经双对数拟合线性范围分别为4.900~490.0、7.314~585.1μg·mL^(-1)。结论:与ELSD相比,NQAD测定贝母素甲及贝母素乙具有较高的准确度、精密度和灵敏度,动态线性范围更宽,可以直接通过线性回归进行含量计算,无需繁琐的双对数计算过程,数据处理更加高效,从而提升了分析方法的整体处理能力,能够更好满足黄氏响声丸中贝母素甲和贝母素乙的检测分析。

贝母素乙调节RhoA/ROCK信号通路对膝骨关节炎大鼠软骨损伤的影响

目的 探讨贝母素乙调节Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关的卷曲螺旋激酶(ROCK)信号通路对膝骨关节炎(knee osteoarthritis, KOA)大鼠软骨损伤的影响。方法 以碘乙酸钠(MIA)法制备KOA大鼠模型,随机分为模型组、贝母素乙(3.5 mg/kg)组、贝母素乙(3.5 mg/kg)+LPA(RhoA激活剂,1 mg/kg)组,每组10只,另选10只大鼠为对照组。机械刺激法和热辐射法检测大鼠膝关节疼痛症状;检测大鼠关节肿胀度、膝关节宽度并以步态评分评测其关节功能;透射电镜检测大鼠膝关节软骨细胞超微结构;TUNEL染色检测大鼠关节软骨细胞凋亡比;酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠血清和关节液促炎因子白细胞介素(IL)-18、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)水平;免疫印迹检测各组大鼠关节软骨组织凋亡(Cleaved caspase-3、Bax)和RhoA/ROCK通路相关蛋白表达。结果 贝母素乙可降低KOA大鼠关节肿胀度、膝关节宽度、步态评分、软骨细胞凋亡比、血清及关节液IL-18、MCP-1水平、软骨组织Cleaved caspase-3、Bax、RhoA、ROCK1、ROCK1蛋白表达,升高机械痛阈值、热痛阈值(P<0.05);LPA可减弱贝母素乙对KOA大鼠关节软骨损伤的改善作用。结论 贝母素乙可通过抑制RhoA/ROCK信号激活而抑制KOA大鼠关节炎症反应和关节软骨细胞凋亡,减轻软骨损伤。

贝母素甲改善脂多糖联合烟雾诱导小鼠慢性阻塞性肺疾病的机制

目的探讨贝母素甲(PME)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)小鼠的作用和相关机制。方法将80只小鼠随机分为4组(每组20只):对照组、PME组、COPD组和治疗组。使用脂多糖联合烟雾诱导小鼠COPD动物模型。通过组织病理学、超微结构、小鼠肺组织湿/干重比值分析PME对COPD模型鼠结构的影响;ELISA和Western blotting分析PME对肺组织中炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6和IL-1β表达的影响;二氢乙锭(DHE)染色和Western blotting分析PME对肺组织中氧化应激反应的影响;Western blotting分析PME对核因子κB(NF-κB)通路以及核因子2相关因子2(Nrf2)通路相关蛋白表达的影响。结果与COPD组相比,PME治疗可明显减轻小鼠肺组织的损伤和减少炎症细胞数量,降低肺组织湿/干重比。与对照组相比,COPD组小鼠的肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6及IL-1β水平明显增加,经PME治疗后小鼠肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6及IL-1β水平明显降低。另外,与对照组相比,COPD组小鼠肺组织中TNF-α和IL-1β水平显著升高,经PME治疗后小鼠肺组织中TNF-α和IL-1β蛋白水平明显下降。免疫组织化学和Western blotting实验显示,与对照组相比,COPD组SOD2水平明显降低,而PME治疗后能够提高超氧化物歧化酶(SOD)蛋白水平。对肺组织丙二醛(MDA)含量分析发现,与COPD组比较,PME治疗后明显抑制COPD小鼠肺组织中MDA的产生。Western blotting结果显示,PME治疗后能够阻止肺组织中的NF-κB抑制蛋白(IκBα)磷酸化以及NF-κB p65向细胞核转移,PME处理后的小鼠肺组织中Nrf2及其主要下游靶点血红素加氧酶1(HO-1)的表达明显升高。结论PME能够抑制COPD小鼠体内的炎症和氧化应激反应,改善脂多糖联合烟雾诱导肺组织损伤,其机制可能与激活Nrf2通路和抑制NF-κB通路相关。

HPLC-ELSD测定溃疡灵胶囊中贝母素甲、贝母素乙的含量

建立HPLC-ELSD测定溃疡灵胶囊中贝母素甲、贝母素乙含量的方法;并对市售9批溃疡灵胶囊样品进行分析。色谱柱:Phenomenex luna C_(18)(2)100A(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%二乙胺溶液(65∶35),流速:0.8 mL/min,柱温:25℃;ELSD参数:漂移管温度为100℃,载气流量2.5 L/min。结果表明贝母素甲和贝母素乙分别在0.5010~5.010μg(r=0.9998)、0.5220~5.220μg(r=0.9996)范围内呈良好线性关系,平均回收率分别为99.5%(RSD为1.78%)、100.2%(RSD为2.08%)。此法操作简便、结果准确、重复性好,可用于提升溃疡灵胶囊的质量标准。

基于网络药理学和细胞实验探讨贝母素乙抗结肠癌的作用机制

目的基于网络药理学、分子对接技术和Label-free DIA定量磷酸化蛋白组揭示贝母素乙抗结肠癌的潜在作用机制。方法①利用SwissTargetPrediction、TargetNet和Pharmmapper数据库获取贝母素乙的作用靶点,利用DisGeNET、GeneCards和OMIM数据库获取结肠癌的作用靶点,然后通过Venny2.1.0在线平台得到贝母素乙和结肠癌的交集靶点。接着运用String数据库和Cytoscape 3.8.2软件绘制交集靶点的PPI网络图并得到贝母素乙抗结肠癌的主要靶点,通过David数据库和微生信可视化云平台进行GO分析和KEGG分析。②采用MOE(Molecular operating environment)软件对贝母素乙与主要靶点进行分子对接验证。③利用Label-free DIA定量磷酸化蛋白组方法对贝母素乙处理的DT组(DT1-DT3)和对照组(NC1-NC3)的6个样本进行检测和生物学功能分析。结果①贝母素乙与结肠癌交集靶点共275个,分子对接显示贝母素乙与AKT1、EGFR、HSP90AA1和SRC的蛋白结构均能稳定对接并存在相互作用:贝母素乙与AKT1蛋白的氨基酸残基主要通过氢键发生相互作用;与EGFR、HSP90AA1和SRC蛋白的氨基酸残基主要通过离子键和氢键产生相互作用。②磷酸化蛋白组学分析显示:相对于NC组,有880个磷酸化修饰位点在DT组中显著上调(包括AKT1的S124、S126位点和EGFR的T648、S643位点),有425个磷酸化修饰位点在DT组中显著下调(包括HSP90AA1的T317位点)。③对比网络药理学和磷酸化蛋白组学分析结果发现:贝母素乙抗结肠癌的主要靶点为AKT1、EGFR和HSP90AA1,其通过调控AMPK signaling pathway、mTOR signaling pathway和Choline metabolism in cancer等17条通路促进结肠癌细胞凋亡。结论本研究揭示了贝母素乙治疗结肠癌具有多靶点、多通路的潜在机制,为后续的研究提供了一定的方向与参考。

贝母素乙通过诱导G0/G1期阻滞抑制结肠癌细胞的增殖

目的:探讨贝母素乙对结肠癌HCT116细胞增殖的抑制作用及其分子机制。方法:利用不同浓度的贝母素乙处理人结肠癌细胞HCT116和正常结肠上皮细胞CCD841 CON,通过CCK-8法和结晶紫染色法检测贝母素乙对HCT116和CCD841 CON细胞增殖活力的影响,流式细胞术和WB法检测贝母素乙对HCT116细胞周期及其细胞周期相关蛋白表达的影响。构建HCT116移植瘤裸鼠模型和AOM/DSS结肠癌小鼠模型,观察贝母素乙对小鼠模型肿瘤生长和OS的影响,免疫组化法和WB法检测对移植瘤或肿瘤组织中细胞周期相关蛋白CDK4、CDK6和cyclin D1表达的影响。结果:贝母素乙可显著抑制结肠癌HCT116细胞的增殖能力(P<0.01),诱导HCT116细胞周期G0/G1期阻滞(P<0.01),降低CDK4、CDK6和cyclin D1的蛋白表达水平(均P<0.01)。荷瘤小鼠实验结果显示,贝母素乙(0.75 mg/kg)显著抑制HCT116细胞移植瘤的生长并延长荷瘤裸鼠的OS(P<0.05或P<0.01),降低AOM/DSS模型小鼠的体质量、延长OS、减少癌变肠组织的肿瘤个数和肿瘤体积,下调肿瘤组织中CDK4、CDK6和cyclin D1的蛋白表达(P<0.01或P<0.05)。结论:贝母素乙通过下调CDK4、CDK6和cyclin D1的表达水平,引起细胞周期G0/G1期阻滞,从而抑制结肠癌HCT116细胞的增殖。

贝母素乙通过下调CDK2/CDK4/CDK6和cyclin D1表达抑制人结肠腺癌SW480细胞活力

目的:探究贝母素乙(peiminine)对人结肠腺癌细胞(SW480)活力、迁移和侵袭的抑制作用并探讨其抑制SW480增殖的作用机制。方法:用不同剂量的贝母素乙处理人结肠腺癌细胞SW480和人正常结肠上皮细胞CCD-841CoN,通过CCK-8实验确定贝母素乙抑制SW480活力的最适剂量和最佳作用时间;划痕和Transwell实验检测贝母素乙对SW480迁移与侵袭能力的影响;流式细胞术和Western blot检测贝母素乙对SW480细胞周期及细胞周期相关蛋白表达的影响;构建SW480移植瘤裸鼠模型,在体内分析贝母素乙对SW480活力及细胞周期相关蛋白表达的影响。结果:与对照组相比,当贝母素乙作用浓度为110 mg/L时能够显著抑制SW480细胞活力、迁移和侵袭能力(P<0.01),并诱导SW480细胞周期G1期阻滞,周期相关蛋白细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、CDK4、CDK6、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、p-Rb/Rb、E2F1、E2F3和E2F4的表达水平受到显著抑制(P<0.05);在体内,贝母素乙抑制SW480移植瘤的活力、延长荷瘤裸鼠的生存周期,影响肿瘤组织中CDK2、CDK4、CDK6和cyclin D1的表达。结论:贝母素乙通过下调CDK2、CDK4、CDK6和cyclin D1的表达,引起SW480细胞的G1期阻滞,进而抑制人结肠腺癌细胞SW480增殖。

贝母素乙通过调节Gas6/Axl信号通路对糖尿病大鼠心肌纤维化的影响

[目的]探讨贝母素乙(PMI)对糖尿病(DM)大鼠心肌纤维化及生长停滞特异性蛋白6(Gas6)/Axl信号通路的影响。[方法]构建DM大鼠模型,将48只造模成功大鼠随机分为DM组、贝母素乙低、高剂量组(PMI-L、PMI-H组)、贝母素乙高剂量+通路抑制剂R428组(PMI-H+R428组),各12只,另取12只正常大鼠作对照组(Control组);超声检查各组大鼠心功能指标;全自动血液分析仪检测各组大鼠空腹血糖(FBG)及血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)水平;苏木精-伊红(HE)染色及Masson染色分别观察各组大鼠心肌组织病理变化及纤维化程度;TUNEL染色检测心肌组织细胞凋亡情况;免疫组化检测胶原蛋白Ⅰ(COLⅠ)、胶原蛋白Ⅲ(COLⅢ)表达;蛋白免疫印迹法检测Gas6、p-Axl/Axl表达。[结果]DM组较Control组心肌纤维断裂,心肌细胞排列紊乱,细胞肥大,细胞核固缩深染,炎性细胞浸润明显,细胞减少,蓝色胶原纤维沉积增多,且排列紊乱,分布弥散,左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)和FBG、CK-MB、LDH水平及COLⅠ、COLⅢ表达升高,LVFS及Gas6、p-Axl/Axl表达降低(P<0.05);PMI-L、PMI-H组较DM组心肌纤维排列相对整齐,细胞形态相对正常,炎性细胞浸润减少,细胞增多,纤维化现象减少,蓝色胶原纤维沉积减少,且细胞排列相对整齐,LVEDD、LVESD和FBG、CK-MB、LDH水平及COLⅠ、COLⅢ表达降低,LVFS及Gas6、p-Axl/Axl表达升高(P<0.05);PMI-H+R248组较PMI-H组心肌组织病理损伤加重,炎性细胞浸润及心肌组织纤维化明显,蓝色胶原纤维沉积明显增多,LVEDD、LVESD和FBG、CK-MB、LDH水平及COLⅠ、COLⅢ表达升高,LVFS及Gas6、p-Axl/Axl表达降低(P<0.05)。[结论]贝母素乙可抑制DM大鼠心肌纤维化,其作用机制与激活GAS6/Axl信号通路有关。

贝母素乙调节FOXO3-FOXM1信号轴对卵巢癌生物学行为和化疗耐药性的影响

目的探讨贝母素乙(PMI)调节叉头框蛋白O3(FOXO3)-叉头框转录因子M1(FOXM1)信号轴对卵巢癌增殖、侵袭、迁移、凋亡和化疗耐药性的影响。方法以卵巢癌SKOV3细胞、SKOV3/顺铂(DDP)细胞为研究对象,MTT法检测DDP对SKOV3细胞、SKOV3/DDP细胞的增殖抑制情况以及PMI对SKOV3/DDP细胞的增殖抑制情况;将SKOV3/DDP细胞分为对照组(正常培养)、DDP组(20μg/mL DDP)、L-PMI组、M-PMI组、H-PMI组(20μg/mL DDP联合50、100、200μmol/L PMI)、甘珀酸(CBX)组(20μg/mL DDP和200μmol/L PMI联合50 ng/mL CBX)。平板克隆实验检测SKOV3/DDP细胞的增殖;Transwell TM实验检测SKOV3/DDP细胞的侵袭和迁移;流式细胞术检测SKOV3/DDP细胞的凋亡率;Western blot法检测SKOV3/DDP细胞增殖细胞核抗原(PCNA)、胱天蛋白酶3(caspase-3)、多药耐药相关蛋白5抗体(MRP5)、FOXO3、FOXM1蛋白表达量。结果SKOV3细胞和SKOV3/DDP细胞增殖抑制率在DDP干预下以浓度依赖性的方式显著增加,且SKOV3细胞的增殖抑制率高于SKOV3/DPP细胞。SKOV3/DDP细胞增殖抑制率在PMI干预下以浓度依赖性的方式显著增加。DDP组克隆细胞数、侵袭细胞数、迁移细胞数、PCNA、MRP5、FOXM1蛋白表达低于对照组,凋亡率、caspase-3、FOXO3蛋白表达高于对照组;与DDP组比较,L-PMI组、M-PMI组、H-PMI组的克隆细胞数、侵袭细胞数、迁移细胞数、PCNA、MRP5、FOXM1蛋白表达显著下降,凋亡率、caspase-3、FOXO3蛋白表达显著上升;CBX组克隆细胞数、侵袭细胞数、迁移细胞数、PCNA、MRP5、FOXM1蛋白表达显著高于H-PMI组,凋亡率、caspase-3、FOXO3蛋白表达显著低于H-PMI组。结论PMI可能是通过激活FOXO3,抑制FOXM1,进而抑制卵巢癌细胞的增殖、侵袭、迁移和化疗耐药。

基于近红外光谱的浙贝母中贝母素甲和贝母素乙含量快速检测方法的建立

目的:应用近红外光谱分析技术,建立快速检测浙贝母中贝母素甲和贝母素乙含量的新方法。方法:用HPLC-ELSD法测定贝母素甲和贝母素乙含量,采用偏最小二乘法(PLS),建立NIR光谱与HPLC-ELSD法测定值之间的多元校正模型,并预测浙贝母样品中贝母素甲和贝母素乙的总量。结果:所建立校正模型内部交叉验证的相关系数(R)为0.97870,校正均方差(RMSECV)为0.00876,内部验证均方差为0.00967;经外部验证,预测值与真实值的相关系数为0.9702。结论:说明模型对预测集样品具有一定的预测能力,基于近红外光谱技术快速检测浙贝母中贝母甲素和贝母乙素是可行的。

HPLC-MS法测定中药材浙贝母中贝母素甲、贝母素乙的含量

目的:建立高效液相色谱-质谱法定量测定中药材浙贝母中贝母素甲、贝母素乙的含量方法。方法:采用ZORBAX Eclipse XDB-C_(18)(150 mm×2.1 mm,5μm),以甲醇-10 mmol·L^(-1)醋酸铵溶液(40:60)为流动相,流速为0.2 ml·min^(-1),用质谱检测器检测。结果:贝母素甲乙的线性范围分别为0.94～28.13 mg·L^(-1)(r=0.997)和0.95～28.37 mg·L^(-1)(r=0.998 0),平均回收率分别为105.3%(RSD4.6%),106.4%(RSD4.8%)(n=6)。结论:方法灵敏、准确,非常适用于检测含量低,无紫外吸收的化学成分。

贝母素甲、贝母素乙对4T1乳腺癌细胞炎性微环境的干预调节作用

目的:研究贝母素甲、乙对4T1乳腺癌细胞的干预抑制及对其肿瘤炎性微环境的调节作用。方法:CCK-8检测贝母素甲、乙对4T1细胞抑制率;ELISA法检测炎性相关因子TGF-β、VEGF、MMP-9、MCP-1的分泌量;RT-PCR检测TGF-β、VEGF、MMP-9mRNA表达情况。结果:贝母素甲、乙对4T1乳腺癌细胞具有抑制作用;贝母素甲、乙可分别下调4T1细胞TGF-β,VEGF、MCP-1及MMP-9分泌量(P<0.05,P<0.01);贝母素甲、乙可降低4T1细胞TGF-β、VEGF等mRNA表达(P<0.05,P<0.01)。结论:贝母素甲、乙对4T1乳腺癌细胞具有显著抑制作用,可通过抑制炎性相关因子的释放调节微环境。

HPLC-ELSD测定浙贝母中贝母素甲、贝母素乙的含量

目的建立HPLC-ELSD测定浙贝母中贝母素甲、贝母素乙含量的方法,并对市售17批样品进行考察,制定含量限度。方法色谱柱:Agilent Hypersil BDS-C18(4.0 mm×250 mm,5 μm);流动相:乙腈-水-二乙胺(70:30:0.03),流速:0.8 mL·min-1; ELSD参数:漂移管温度为85℃,载气流速为2.2 L·min-1。结果贝母素甲、贝母素乙线性范围分别为47.02-1 003.46.92- 1 001 mg·L-1,平均回收率分别为102.7%,98.7%,RSD分别为2.1%,2.5%(n=6)。通过市售17批样品中贝母素甲、贝母素乙含量的测定,制定了不同规格浙贝母的含量限度。结论此法简便,快捷,结果可靠,可用于浙贝母的质量评价,为2005年版药典中浙贝母质量标准的修订提供了依据。

高效液相色谱法测定浙贝母配方颗粒中贝母素甲和贝母素乙的含量

目的建立测定浙贝母配方颗粒中贝母素甲、贝母素乙含量的高效液相色谱法方法。方法采用DIKMA,Diamand-C_(18)(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-水-二乙胺(70∶30∶0.03)为流动相;以蒸发光散射检测器为检测器。理论板数按贝母素甲峰计算应不低于2 000。流动相流速为1 m L·min^(-1),柱温为30℃。结果贝母素甲进样量在1.141 7~6.850 2μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999 9),贝母素乙进样量在0.856 3~3.681 8μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999 8)。平均回收率分别为贝母素甲103.7%、贝母素乙100.0%,RSD分别为1.8%,2.4%。结论该方法准确度、重复性好,能较准确地评价浙贝母配方颗粒的质量。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定鹤蟾片中贝母素甲和贝母素乙的含量

目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法同时测定鹤蟾片中贝母素甲和贝母素乙的含量。方法:采用 HiQsil C_(18)(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,柱温为25℃,以乙腈-甲醇-二乙胺(60:40:0.05)为流动相,流速为0.8 mL·min^(-1);蒸发光散射检测器检测,漂移管温度为80℃,气体流速为2.0 L·min^(-1)。结果:在选定的色谱条件下,以峰面积的常用对数(Y)对进样量的常用对数(X)进行线性回归,贝母甲素和贝母乙素的回归方程分别为 Y=1.557X+1.666和 Y=1.700X+1.571,线性范围分别为0.29～2.80μg(r=0.9996)和0.34～3.40μg(r=0.9999);加样回收率(n=5)分别为99.2%和99.4%,RSD 分别为2.7%和3.1%。结论:本法简便、准确,重复性好,可用于该制剂的质量控制分析。

不同生长年限平贝母中贝母素甲和贝母素乙的含量测定

目的:比较一、二、三年生平贝母鳞茎中贝母素甲、贝母素乙的含量。方法:采用Agilent TC-C18(4.6×250mm,5μm)色谱柱,以甲醇-乙腈-0.5%醋酸溶液(8∶19∶73)为流动相,流速为0.6mL·min-1,蒸发光散射检测器检测。结果:三年生以内平贝母鳞茎中贝母素甲、贝母素乙含量随生长年限的增加而增加。结论:从贝母素甲、贝母素乙含量来看,三年生平贝母药材质量优于一、二年生平贝母药材。

十几种贝母及其制剂中贝母素甲、乙及西贝碱的检验方法和品质的研究与进展

目的对十几种贝母及其制剂中有效成分贝母素甲、贝母素乙及西贝碱等的含量测定方法进行了归纳总结。方法主要包括高效液相色谱法、气相色谱法、质谱联用法、薄层扫描法、差热分析法、总生物碱测定法。结果与结论为贝母类药材品质评价,含贝母药材制剂的质量控制研究,及《中国药典》的质量标准制订提供参考依据。

HPLC-MS测定癃闭康泰片中贝母素甲、贝母素乙的含量

目的 建立癃闭康泰中贝母素甲、贝母素乙的高效液相色谱-质谱联用含量测定法。方法 癃闭康秦片经碱化，用氯仿-甲醇（4：1）提取生物碱有效部位，提取液浓缩，残渣用甲醇溶解后，进行高效液相色谱-质谱测定。色谱柱为Agilent Zorbax extend C18（2．1mm×100mm，5μm）；流动相为乙腈和10mmol·L^-1甲酸铵（pH8．0），梯度洗脱（0．15min：乙腈30％．55％；15．25min乙腈55％）；流速0．2mL·min^-1；柱温30℃。质谱条件为电喷雾电离源（ESI），以选择性正离子方式检测，贝母素甲和贝母素乙的选择性检测离子分别为m／z432．4和m／z430．4。结果 贝母素甲和贝母素乙的的线性范围均为0．01．10mg·L^-1，相关系数均大于0．999，检测限均为0．45μg·L^-1，方法回收率均大于95％，日内日间精密度（RSD）均小于5％。结论 本方法专属性强，灵敏度高，线性关系良好，操作简便，适用于癃闭康泰中贝母素甲、贝母素乙的含量测定。

高效液相色谱-蒸发光散射法测定黄氏响声含片中贝母素甲和贝母素乙含量

目的建立测定黄氏响声含片中贝母素甲和贝母素乙含量的高效液相色谱-蒸发光散射法。方法色谱柱为Phenomenex Gemini-NX C_(18)柱(150 mm×4. 6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(65∶35,V/V,含0. 35%二乙胺),流速为1. 0 mL/min,柱温为30℃,进样量为20μL,蒸发光散射器漂移管温度为70℃,载气流速为1. 4 L/min。结果贝母素甲和贝母素乙质量浓度线性范围分别为25. 32～202. 56μg/mL(r=0. 999 8)和25. 19～201. 48μg/mL(r=0. 999 9),定量限分别为189. 9 ng和251. 9 ng,检测限分别为79. 1 ng和75. 6 ng,精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于3%(n=6),平均回收率分别为100. 22%(RSD=2. 18%,n=6)和98. 96%(RSD=2. 42%,n=6)。结论该方法操作简便、准确,精密度、稳定性、重复性均良好,可用于测定黄氏响声含片中贝母素甲和贝母素乙的含量。

HPLC-ELSD法测定散结镇痛片中贝母素甲、贝母素乙

目的建立散结镇痛片中贝母素甲、贝母素乙的测定方法。方法采用HPLC-ELSD方法,以Thermo HypersilGold C18ODS色谱柱(5μm,4.6 mm×250 mm)为固定相;以乙腈-0.06%二乙胺溶液(70∶30)为流动相;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃。结果贝母素甲在170.2～3 404 ng、贝母素乙在123.2～2 464 ng范围内,进样量对数值与峰面积的对数值呈良好线性;平均回收率分别为100.08%(RSD为1.60%)、99.66%(RSD为1.83%)。3批样品中贝母素甲与贝母素乙的总含量分别为0.190 mg/片、0.179 mg/片、0.183 mg/片。结论本方法专属性、重现性好,可用于散结镇痛片中贝母素甲、贝母素乙的质量检测,暂定散结镇痛片中贝母素甲与贝母素乙的总含有量不得低于0.170 mg/片。