负向调节因子重编程诱导大鼠骨髓间充质干细胞向胰岛内分泌细胞分化的研究

目的重编程诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向胰岛内分泌细胞分化并探讨其可能的分化机制。方法原代培养的大鼠骨髓MSCs经分离、培养至第3代后,用负向调节因子Rest/Nrsf、Shh慢病毒干扰载体转染并培养10 d,通过实时定量RTPCR和免疫荧光检测胰岛细胞分化相关基因的表达。结果 MSCs慢病毒转染后,胰岛素、胰高血糖素及生长抑素的表达明显升高,并表达胰岛内分泌细胞分化的相关基因。结论通过转染shRest/Nrsf、shShh慢病毒载体能够诱导大鼠MSCs向胰岛内分泌细胞分化,EGFR、ERK1、MMP以及PI3K等参与这一分化过程。

同种输血对细胞免疫的负向调节及其预防

输血疗法在临床上广泛应用,挽救了无数病人的生命,促进了外科、器官移植等技术的发展。然而,同种输血的负面效应也屡有报道。本文简要综述输血与免疫功能的变化,输血与癌症复发,输血与术后感染率增加及其发生机理等,并对严格输血指征,自体输血、应用替代方法等来预防同种输血引起细胞免疫负向调节措施作一简要介绍。

骨形态发生蛋白信号通路的负向调节

骨形态发生蛋白(BMP)是多功能的生长因子,具有调节细胞的增殖和分化以及促进骨、软骨和牙组织生成的作用。下面通过细胞外对抗物、细胞内BMP抑制因子和负调节转录因子等内容就BMP信号通路的负向调节研究进展作一综述。

人体免疫负向调节在肺癌患者的相关性研究

人体免疫系统（immune system）由中枢免疫器官和外周免疫器官两大部分构成,这些免疫器官、组织和免疫细胞[如淋巴细胞、树突状细胞、自然杀伤（NK）细胞、单核/巨噬细胞、粒细胞、肥大细胞等]及免疫分子（如免疫球蛋白、补体、各种膜分子及细胞因子等）是免疫功能的物质基础。作用除免疫防御（immne defense）和免疫自身稳定（immune homeostasis）外,还具有免疫监视（immune surveillance）功能。

同种输血对细胞免疫的负向调节

随着输血医学的迅速发展,人们逐渐认识到输血对免疫功能的影响。现就同种输血引起的细胞免疫功能减低,癌症的复发,感染率的增加综述如下: 1 输血对体液免疫和细胞免疫的影响 早在70年代就有学者发现输血有益于肾移植患者的生存。

肾素血管紧张素系统(RAS)两条轴相互负向调节与大鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)肝损伤的关系研究

探讨了肾素血管紧张素系统(renin angiotensin system,RAS)两条轴对大鼠非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)肝脏损伤的相互负向调节作用。30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和用药组。除正常对照组外,其余2组饲喂高脂饲料,用药组另外给伐他汀50 mg/kg·d。3周后,宰杀大鼠,测定血清中甘油三酯(TG)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的含量;测定肝组织匀浆羟自由基(·OH)、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)酶活性;ELISA法测定组织匀浆中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血管紧张素1-7(Ang1-7)及白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;Western blot分析肝组织血管紧张素转化酶(ACE)、血管紧张素转化酶2(ACE2)、血管紧张素Ⅱ受体1亚型(AT1R)、Mas受体(MasR)蛋白水平。结果:与正常对照组相比,模型组大鼠血清TG、AST和ALT含量以及·OH和NOS活性均显著升高(P<0.05), T-AOC、SOD活性显著降低(P<0.05);IL-1β和TNF-α含量极显著升高(P<0.01);ACE、ACE2的蛋白表达水平与ACE/ACE2的比值均显著升高(P<0.05),AngⅡ、Ang1-7含量与AT1R表达升高(P<0.05),MasR表达有升高趋势(P>0.05)。结论:高脂饲料连续饲喂3周可诱导大鼠发生NAFLD,肝脏局部RAS两条轴均处于激活状态,ACE介导AngⅡ-AT1R经典轴促进肝损伤,而ACE2介导Ang1-7-MasR轴抵抗肝损伤;ACE2负性调节RAS作用,对大鼠NAFLD时肝脏氧化应激及炎性损伤有一定保护作用。

人类免疫缺陷病毒-1型负向调节因子多肽特异性CD4＋T淋巴细胞克隆的建立和筛选

目的 建立和筛选慢性HIV感染者体内HIV-1型负向调节因子（Nef）多肽特异性CD4＋T淋巴细胞克隆.方法 采集5例无症状期HIV感染者PBMC,Bulk培养,用Nef蛋白C末端的Nef末端多肽刺激,双荧光流式细胞术分析细胞表面CD4分子和细胞内γ干扰素表达.有限稀释法进行Nef末端多肽特异性CD4＋T淋巴细胞克隆,酶联免疫斑点法（ELISPOT）筛选特异性克隆,挑选生长最好的细胞扩大培养,完成克隆.结果 1例H1V感染者的PBMC中存在特异性CD4＋T淋巴细胞,成功建立T淋巴细胞克隆.经ELISPOT法确认为Nef末端多肽特异性CD4＋T淋巴细胞克隆.人白细胞抗原（HLA）-DRB1分型检测,提示该多肽表位可能为HLA-DRB1＊ 0406限制性.结论 成功建立Nef末端多肽特异性CD4＋T淋巴细胞克隆,发现并鉴定了Nef末端表位及其HLA限制性.

协同刺激因子B7家族成员的抑制性受体与负向免疫调节

维持淋巴细胞的正常功能需要正负向协同刺激信号的同时参与。两种信号决定了T、B细胞对抗原特异性刺激的敏感性和应答方式。二者的平衡使机体在避免对自身抗原产生不适当反应的同时,又能对外来抗原显示足够强的应答能力。多年来有关协同信号的研究,对相关分子结构和功能的认识已大大深化,特别是其中的B7分子及其受体家族。该家族的负向调控作用是通过其抑制性受体来实现的。目前已发现3种抑制性受体:细胞毒性T细胞相关分子(CTLA-4)、程序性死亡分子(PD-1)和B、T细胞弱化因子(BTLA)。对其效应机制的研究,将对免疫调节以及自身免疫、肿瘤免疫和移植免疫产生深远影响。

中医药调节肿瘤免疫微环境研究进展

肿瘤的发生发展与肿瘤免疫微环境密切相关。在肿瘤的形成过程中,肿瘤免疫微环境不仅能够促进肿瘤的发生发展,也能够抑制肿瘤的发生发展。中医药对肿瘤免疫微环境中的细胞毒性T细胞、自然杀伤细胞、树突状细胞、IL-12有正向调节作用,对肿瘤免疫微环境中的调节性T细胞、肿瘤相关巨噬细胞、髓系来源的抑制性细胞、PD-1/PD-L1有负向调节作用。应重视中医药调节肿瘤免疫微环境的作用机制研究。

内皮素刺激下人RPE细胞的自分泌调节

目的检测内皮素(endothelin-1,ET-1)刺激人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞后ET-1的自分泌。方法用体外培养的RPE细胞,经10-11mol.L-1、10-9mol.L-1、10-7mol.L-1ET-1作用后,用免疫组织化学和原位杂交检测RPE细胞ET-1的表达和一氧化氮合酶1(nitric oxide synthase1,NOS1)的表达,并用LeicaQ750图像分析仪定量分析表达量;用放射免疫测定检测细胞调理液中ET-1和6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)含量。结果在未经ET-1作用的RPE中ET-1、ET-1 mRNA和NOS1仅见少量细胞微弱表达,3个浓度ET-1作用24h后,图像分析在不同浓度ET-1刺激后均检测出ET-1的表达增强,并有浓度依赖性(F=9.511,P<0.01),NOS1的表达也增强(F=16.113,P<0.01),两者有直线相关性(r=0.685,P<0.05)。在调理液的检测中,ET-1和6-Keto-PGF1α的含量均随着ET-1作用浓度的增加而增加,各作用浓度两者含量均有统计学差异(前者F=23.67,P<0.01;后者F=44.431,P<0.01);并且两者有直线相关性(r=0.85,P<0.01)。结论ET-1刺激RPE细胞表达并分泌ET-1,同时伴随的NOS1表达增加和6-Keto-PGF1α分泌增加可能是针对ET-1的负向调节作用。

转化生长因子β的活化调节

转化生长因子β（TGF-βs）是一类具有双向调节功能的生长因子，参与了多种疾病的发生与发展．在调节细胞的生长和分化中起重要作用。TGF-β以无活性pro-TGF-β形式产生，需活化才具生物学活性。其活化主要涉及两步。第一步：pro-TGF-β经过一系列复杂的加工形成latentTGF-β．此过程主要涉及到弗林蛋白酶（Furin）对pro-TGF-β的加工催化，以及Emilinl的负向调节。

调节性B细胞与人类系统性红斑狼疮研究进展

一般来说,B淋巴细胞具有对体液免疫应答具有正向调节作用,因为它们最终能分化为浆细胞并产生抗原特异性抗体。然而,有一群特异的B细胞能够负向调节免疫应答,被命名为调节性B细胞[1]。有证据表明调节性B细胞在许多炎症和自身免疫小鼠模型中扮演重角色[1,2]。

中医药调节中晚期非小细胞肺癌免疫微环境的研究进展

目前,晚期非小细胞肺癌(advanced non-small cell lung cancer,NSCLC)对我国的国民健康造成严重威胁,其发病人数和死亡人数逐年上升,排名占恶性肿瘤的第一位。此时肿瘤患者的免疫微环境多处于紊乱状态,免疫细胞的正负调控水平失衡,致机体免疫受到抑制。而中医药能够对免疫细胞进行多靶点调控从而改善机体免疫状态,重新恢复机体的免疫调节功能。

肿瘤组织分泌细胞因子调节DC的成熟

树突状细胞（DC）是调节宿主免疫反应的关键中间环节,包括免疫激活也包括免疫耐受。同时,DC也被发现能够调节宿主的抗肿瘤免疫反应。因此,了解肿瘤细胞是如何激活宿主的DC并由此产生特异性的免疫反应对于理解这一过程至关重要。近年来,越来越多的证据表明在黑色素瘤患者体内检测到了抗肿瘤特异性免疫反应。

税收政策不确定性与债务融资成本——基于代理成本的中介作用

实证研究发现,税收政策不确定性对债务融资成本具有显著正向影响。作用机制检验发现,代理成本在税收政策不确定性与债务融资成本之间中发挥了部分中介作用。会计信息质量在税收政策不确定性与债务融资成本之间发挥了负向调节作用。债务融资是我国企业外源融资的重要来源。

人工改造野生大豆GsDREB2基因对植物耐盐和耐渗透胁迫能力的影响

DREB(dehydration responsive element binding protein)转录因子是一个干旱应答元件的结合蛋白,它能特异结合启动子中含有DRE/CRT顺式元件,激活逆境诱导基因的表达,调控植物对干旱、低温、高盐、高温等胁迫的耐逆性。大量研究表明DREB转录因子在信号传导、作用机理及基因表达方面存在复杂性。为了野生大豆来源GsDREB2基因能更有效地发挥功能,人工突变该基因的负向调节结构域(negative regulatory domain,NRD,140~204),经改造命名为GsDREB2-mNRD。在酵母中比较全长基因(FLDREB2)和GsDREB2-mNRD转录激活和与DRE元件结合的能力,并验证GsDREB2-mNRD核定位情况。分别将FLDREB2和GsDREB2-mNRD转化拟南芥,通过拟南芥幼苗期盐胁迫和渗透胁迫试验,比较GsDREB2-mNRD和FLDREB2在提高植物耐盐和渗透胁迫方面的差异。结果表明,GsDREB2基因内部存在着负向调节结构域(NRD),抑制了GsDREB2转录激活功能和DRE元件结合的特性;经改造的GsDREB2基因依然能定位在细胞核;超量表达GsDREB2-mNRD基因的拟南芥耐盐和渗透胁迫能力明显强于非转基因对照,也高于FLDREB2基因超表达的拟南芥;野生大豆来源的GsDREB2基因NRD结构域的缺失可增强该基因在植物耐盐、渗透胁迫等逆境胁迫下的功能。

治疗骨质疏松症靶向药物研究进展

骨质疏松症(Osteoporosis,OP)是世界性高发生率的、易于引发骨折为特征的代谢性疾病。其治疗药物主要有促骨合成药和抑制骨吸收药。随着对其发病机制研究的不断深入,多肽、激素、细胞因子等靶向药物成为研究的热点。本文阐述的促骨合成药有:PTH、钙敏感受体负向调节剂calcilytics、雷尼酸锶、PYK2抑制剂;抑制骨吸收药有OPG、Denosumab;抑制骨基质降解的组织蛋白K等新型药物。它们有的已经上市,有的处于临床研究中。

银屑病患者皮损间充质干细胞同源异型盒B族基因表达情况的研究

银屑病是一种以T细胞为主介导的、多种免疫细胞、炎症因子共同参与的慢性炎症性皮肤病。虽然其发病机制目前尚未完全明确,但其主要发病特点已得到公认。间充质干细胞（MSCs）是由中胚层分化而来的一类具有高度增殖、自我更新及多向分化潜能的成体干细胞。