负筛选混合法分离提纯脐血干细胞治疗失代偿期肝硬化中长期临床疗效研究

[目的]探讨负筛选混合法分离提纯脐血干细胞治疗失代偿期肝硬化的疗效和安全性。[方法]62例Child C级的肝硬化失代偿期患者为治疗组,无菌采脐血,用负筛选混合法分离纯化脐血干细胞,流式鉴定干细胞数1×107个/ml以上,活性95%以上,在数字减影血管造影(DSA)下经肝动脉灌注治疗。术后4周、12周、24周、1年、2年、3年定期随访,观察患者症状、体征、不良反应及相关实验室指标。同时选取同期行常规治疗的失代偿肝硬化患者作为对照组。[结果]治疗组术后12周乏力、纳差、腹胀等症状明显缓解,顽固性腹水有效控制;血清白蛋白(ALB)提高最早而明显,4周后开始呈持续升高趋势,总胆红素(TB)在治疗后逐步下降,至第12周时下降更为明显,与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05);3年随访,58例患者治疗后恢复至Child B级及以上。治疗组所有病例未发生与干细胞治疗相关的并发症及不良反应,疗效优于对照组(P<0.05)。[结论]负筛选混合法分离提纯脐血干细胞治疗失代偿期肝硬化患者安全、有效。

负性筛选策略与食管鳞癌循环肿瘤细胞检测

目的建立基于细胞学水平的循环肿瘤细胞负性筛选方法,检测食管鳞癌患者外周血循环肿瘤细胞。方法选用负性筛选策略,分步去除7.5ml食管鳞癌外周血样本中的红、白细胞,富集上皮来源的稀有细胞。比较3种免疫磁珠(Miltenyi、AVIVA和Xinzhi磁珠)去除白细胞、富集外周血循环肿瘤细胞的特点和效率。用经典的细胞化学染色鉴定循环肿瘤细胞。结果Miltenyi和AVIVA磁珠去除白细胞、富集肿瘤细胞效果较好。从富集后的食管鳞癌患者外周血稀有细胞中鉴定到形态各异的循环肿瘤细胞。结论负性筛选策略可以有效分离鉴定食管鳞癌患者外周血形态各异的循环肿瘤细胞。

负性富集食管鳞癌患者外周血中循环肿瘤细胞的检测及其意义

目的:负性富集并鉴定食管鳞癌患者外周血循环肿瘤细胞(CTCs)的数量及表型特征,探讨CTCs在食管鳞癌临床疗效评价和预后判断等方面的应用价值。方法:通过免疫磁珠偶联CD45抗体除去外周血白细胞,富集外周血CTCs的"负性策略",用荧光鉴定CTCs上皮标志及细胞核特征,用统计学方法分析CTCs数量改变与患者临床参数与治疗效果、预后的相关性。结果:59例食管鳞癌患者术前外周血CTCs的阳性率为79.7%(47/59),7.5ml外周血CTCs平均检出数目为7.83(0~72)个。其中淋巴结是否转移、肿瘤TNM分期、肿瘤浸润程度和分化程度、不同各组CTCs检出的差异,具有统计学意义(P<0.05)。采用多因素Cox回归分析,术前CTCs≥5及淋巴结转移是影响预后的显著因素。结论:免疫磁珠负性富集结合免疫荧光鉴定的方法可以有效地分离和鉴定食管癌外周血CTCs。初步研究提示,外周血中CTCs与食管鳞癌分期、进展及其预后相关。

脐血干细胞移植治疗失代偿期肝硬化效果观察

目的:探讨脐血干细胞移植治疗失代偿期肝硬化的效果。方法:30例Child C级失代偿期肝硬化患者经传统内科综合治疗,效果不佳。无菌采脐血,采用负筛选混合法分离、纯化脐血干细胞。对30例行术前检查除外恶性肿瘤、其他重要脏器功能衰竭等禁忌证后,在数字减影血管造影下经肝动脉灌注1×107个脐血干细胞。术后1周、2周、4周、8周、12周、半年、1 a定期随访,观察患者症状、体征及相关实验室指标改善情况和不良反应发生情况。结果:所有病例未发生与干细胞治疗相关的并发症及不良反应。术后1周开始,患者乏力、纳差、腹胀等症状逐渐改善,4周时明显缓解;血清白蛋白水平逐渐升高(F=306.080,P<0.001);21例伴顽固性腹水的患者腹水明显减少;术后1 a,15例肝功能恢复至Child A级,12例恢复至Child B级。结论:脐血干细胞移植治疗失代偿期肝硬化安全、有效。

人工免疫原理在入侵检测系统中的应用研究

介绍了生物免疫系统的免疫原理,并且分析了目前入侵检测系统(IDS)及其存在的问题。为了解决这些问题,提出了一个基于人工免疫原理的入侵检测模型,该模型使用负筛选算法产生检测规则集。最后通过一个实例检验了这个系统,该系统与其它入侵检测系统相比增加了可适应性、自治性、健壮性等特点。

论王小波对“反智倾向”的文学表现与文化批判

中国文化传统中存在着根深蒂固的"反智倾向",对之加以文学表现和文化批判,是王小波文学创作的重要主题。"反智倾向"着重表现在两个方面,一是剥夺"爱智者"的求知权利,一是对知识分子的求知活动设限,特别是"负筛选"和"向下拉齐"的策略对"智性"发展以及知识分子主体自由造成极为严重的消极后果,包括对知识的恶意误用、改写,混淆"分科之学"的价值功用、将科学"艺术化",迫使和诱使知识分子自我审查和自我禁锢,等等。王小波针对"反智倾向"的文学表现和文化批判,揭示了求知权利和能力在主体建构中不可或缺的价值。

食管鳞癌外周血循环肿瘤细胞检测及其临床意义

目的探讨食管鳞癌患者外周血循环肿瘤细胞数量与食管癌病理生理特征之间的相关性。方法采用负性筛选策略,用红细胞裂解液和Mitenyi免疫磁珠分步分别去除食管鳞癌患者外周血样本中红细胞和白细胞,富集上皮来源的稀有细胞,免疫荧光染色法鉴定循环肿瘤细胞。分析术前循环肿瘤细胞检出阳性水平与临床各病理生理参数的相关性。结果食管鳞癌患者外周血循环肿瘤细胞的检出阳性水平与患者肿瘤细胞分化程度、淋巴结转移状态(N分期)、p-TNM分期、原发性肿瘤侵犯程度(T分期)显著相关(P<0.05);与患者的年龄、肿瘤位置无密切相关(P>0.05)。结论食管鳞癌患者外周血循环肿瘤细胞的检出数量可以反映肿瘤的生物学恶化程度,可作为临床治疗及预后判断的重要参考指标。

外周血嗜碱粒细胞磁珠分选法分选及意义

目的探讨磁珠分选法(MACS)负性筛选方法获得高纯度嗜碱粒细胞用于速发型过敏反应的研究。方法以Ficoll密度梯度离心分离细胞。用活性抗体标记的免疫磁珠进行MACS分选,用激光共聚焦方法鉴定嗜碱粒细胞活性。结果 Ficoll密度离心后,获得嗜碱粒细胞的纯度为(12.6±3.87)%,MACS纯化后,其纯度可提高到(95.6±3.96)%,细胞活性为(98.6%±0.83)%。激光共聚焦证实,纯化后的嗜碱粒细胞活化后CD63表达增强,细胞功能完整。结论用MACS负性筛选方法可获得高纯度的嗜碱粒细胞,细胞功能完整,可用于速发型过敏反应的研究。

基于增强卷积神经网络的尺度不变人脸检测方法

针对非约束场景下小尺寸人脸检测困难的问题,提出了一种基于增强卷积神经网络的尺度不变人脸检测方法。首先,在SSD基础检测网络的两个浅层特征图上,通过协调聚合当前层特征图和前后两层特征图的特征信息,对当前层特征图的鉴别性和稳健性进行增强。然后,对两个增强特征图进行负样本筛选,通过增加分类的难度来降低由小尺寸锚框引起的人脸检测假正率上升。最后,为原始特征图和增强特征图设置了两种基于锚框尺寸的损失函数,并通过加权求和的方式对其进行融合。在FDDB和WIDER FACE数据集上的测试结果表明,文中所提方法比目前主流人脸检测方法具有更高的检测精度。

脐血干细胞治疗肝硬化顽固性肝性胸水1例

肝性胸水是肝硬化失代偿期出现的少见并发症，发病率约占肝硬化患者的5％～10％，多数继发于大量腹水，不伴或仅有少量腹水的病例不多。肝硬化患者对胸水耐受力差，1～2L胸水即可产生不适，临床表现胸闷、气促、咳嗽、呼吸困难，甚至出现低氧血症、呼吸衰竭。肝硬化患者并发肝性胸水是原发病病情危重的一个表现，提示预后不良，病死率高。肝性胸水发病机制不详，目前缺乏有效、安全的治疗方法。近年来，随着干细胞研究的兴起，已有干细胞治疗肝硬化取得效果的报道[1-2]。

微生物基因组精简优化的研究进展

微生物基因组精简优化是构建合成生物学底盘细胞的重要策略。文中从基因组精简的整体设计出发,归纳了微生物的必需基因及其确定方法,重点介绍了各种微生物基因组精简策略,分析了多种基因组精简菌株的特点,充分展示了基因组精简优化在构建合成生物学底盘细胞中的重要作用。

枯草芽孢杆菌无标记遗传操作技术研究进展

枯草芽孢杆菌是革兰氏阳性菌的模式生物,长期以来在代谢工程和工业微生物领域扮演重要角色。枯草芽孢杆菌无标记遗传操作技术对后基因组时代的基因功能研究和菌株生理特性的改造起着关键作用。综述枯草芽孢杆菌无标记遗传操作所使用的负筛选标记基因,总结目前主流的无标记遗传操作的策略,并提出枯草芽孢杆菌无标记遗传操作技术面临的主要问题和发展方向。

食管鳞癌外周血循环肿瘤细胞检测及临床意义

目的探讨食管鳞癌患者外周血循环肿瘤细胞数量与食管癌病理生理特征之间的关系。方法采取负性筛选策略，红细胞裂解液去除食管鳞癌外周血样本中的红细胞，Miltenyi免疫磁珠去除白细胞，富集上皮来源的稀有细胞，免疫荧光染色技术鉴定循环肿瘤细胞。结果食管鳞癌患者外周血循环肿瘤细胞的数量与患者性别、年龄、肿瘤位置均无显著相关性，与细胞分化程度、原发肿瘤侵犯程度、淋巴结转移状态、P—TNM分期有显著相关，相关系数分别为0．504、0．507、0．412、0．374。结论食管鳞癌患者外周血循环肿瘤细胞的数量可以反映肿瘤的进展程度，可作为判断食管鳞癌生物学行为恶化的指标。