糙叶败酱中獐牙菜苷的高速逆流色谱分离及其抗肿瘤活性研究

目的:采用高速逆流色谱法(HSCCC)对糙叶败酱中的环烯醚萜类化合物獐牙菜苷进行分离纯化,并对其体外抗肿瘤活性进行初步评价。方法:HSCCC的溶剂体系为正丁醇-乙酸乙酯-水(5∶2∶5),上相为固定相,下相为流动相,正进正转,分离温度25℃、转速850 r/min、流动相流速2.0 mL/min、进样浓度10 mg/mL、进样量15 mL、检测波长240 nm,并采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测糙叶败酱对5种不同肿瘤细胞的增殖抑制作用。结果:从糙叶败酱中分离得到了纯度大于92%的獐牙菜苷。獐牙菜苷对人源肝癌细胞HepG2、结肠癌细胞SW480、肺癌细胞A549、人慢性髓原白血病细胞K562和宫颈癌Hela细胞这5种肿瘤细胞的增殖均有较强的抑制作用,且呈现明显的剂量依赖关系和时间依赖关系。结论:本研究为应用HSCCC高效分离纯化糙叶败酱中獐牙菜苷提供了技术支持,也为其抗肿瘤活性研究提供了思路。

糙叶败酱碱的分离与结构鉴定

目的 研究糙叶败酱 (PatriniascabraBunge)根中的化学成分。方法 用硅胶柱色谱技术进行分离纯化 ,根据理化性质和光谱数据进行结构鉴定。结果 从其脂溶性部位分离得到了 4个化合物 ,分别鉴定为十六烷酸 α 单甘油酯 (I)、齐墩果酸 (II)、槲皮素 (III)、N 苯甲酰基苯丙氨酸 2 乙酰胺基苯丙醇酯 (IV)。结论 所得化合物均为首次从该植物中分得 ,IV为一个新的生物碱 ,命名为糙叶败酱碱 (patriscabratine)。

糙叶败酱中木脂素成分的研究

目的 研究糙叶败酱Patrinia scabra中的木脂素类化学成分。方法 应用柱色谱和HPL C法分离纯化,通过光谱(IR、MS、1 H- NMR、1 3C- NMR、DEPT、HMQC和HMBC)鉴定其化学结构。结果 分离并鉴定了4个木脂素类化合物:松脂醇- 4 ,4′-二- O-β- D -葡萄糖苷( )、罗汉松脂酚- 4 ,4′-二- O-β- D -葡萄糖苷( )、落叶松脂醇- 4′- O-β-D-葡萄糖苷( )、落叶松脂醇- 4 - O- β- D-葡萄糖苷( )。结论 化合物 ～ 均为首次从该属植物中分得,并首次给出化合物 的核磁共振数据。

糙叶败酱活性成分的研究

采用硅胶柱层析技术从中药糙叶败酱(Patrinia scabra Bunge)的根中分离得到了5个化合物,经理化常数测定和波谱分析,鉴定其分别为落叶松脂醇(Ⅰ)、丁香树脂醇(Ⅱ)、东莨菪内酯(Ⅲ)、槲皮素(Ⅳ)、阿魏酸(Ⅴ)。所有化合物均首次从该植物中分得。

糙叶败酱中环烯醚萜苷元对小鼠免疫功能的影响

目的:观察糙叶败酱中环烯醚萜苷元对小鼠免疫功能的影响,探讨其抗肿瘤作用的可能机制。方法:用糙叶败酱中总环烯醚萜苷元灌胃小鼠,观察总环烯醚萜苷元对小鼠免疫功能的调节作用。结果:糙叶败酱中总环烯醚萜苷元能显著提高小鼠胸腺指数和脾指数及ConA诱导的脾淋巴细胞增殖,促进小鼠的血清溶血素水平,提高小鼠NK细胞活性及腹腔巨噬细胞的吞噬活性。结论:糙叶败酱中总环烯醚萜苷元能明显提高小鼠机体的免疫功能,可能是其抑制肿瘤生长的机制之一。

糙叶败酱总皂甙的提取纯化和含量测定

目的:研究超声波提取糙叶败酱总皂甙的提取工艺。方法:将正交试验法与超声波提取相结合,研究糙叶败酱总皂甙的最佳提取工艺。结果:糙叶败酱总皂甙的最佳提取工艺为:乙醇浓度65%,超声提取时间40 min,超声提取温度55℃,超声功率210W。结论:超声波提取糙叶败酱总皂甙是一种简单、快捷、高效的提取方法。

异叶败酱化学成分的研究

目的：对异叶败酱（ＰａｔｒｉｎｉａｈｅｔｅｒｏｐｈｙｌａＢｇｅ．）的化学成分进行研究。方法：利用溶剂提取和硅胶柱层析进行分离，根据化合物的理化性质和光谱数据鉴定其结构。结果：得到３个化合物，分别确定为齐墩果酸（ｏｌｅａｎｏｌｉｃａｃｉｄ，Ｉ），异叶败酱皂苷Ａ（ｏｌｅａｎｏｌｉｃａｃｉｄ３ＯβＤｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→４）αＬａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ，Ⅱ）和异叶败酱皂苷Ｂ（ｏｌｅａｎｏｌｉｃａｃｉｄ３ＯβＤｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→３）αＬｒｈａｍｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）αＬａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ，Ⅲ）。结论：３个化合物均为首次从该植物中分得。

糙叶败酱化学成分的研究

目的 研究糙叶败酱 Patrinia scabra的化学成分。方法 采用硅胶柱层析技术进行分离纯化 ,根据理化常数测定和波谱 (IR、MS、1 HNMR,1 3 CNMR、2 DNMR)技术进行结构鉴定。结果 从糙叶败酱根的脂溶性部位分离得到了 5个化合物 ,分别鉴定为 curvularin( )、山柰酚 ( )、5 ,7-二羟基黄酮 ( )、β-谷甾醇 ( )、胡萝卜苷 ( )。结论 所有化合物均为首次从该植物中分得 ,化合物 具有细胞毒作用。

糙叶败酱提取物抗肿瘤作用机制研究

目的观察糙叶败酱提取物诱导细胞凋亡过程中自由基和线粒体膜电位的变化。方法D-101大孔吸附树脂分离糙叶败酱水提物。糙叶败酱提取物作用于S_(180)荷瘤小鼠,观察生命延长率;透射电镜观察细胞凋亡情况,流式细胞仪检测细胞凋亡率,激光共聚焦显微镜检测细胞自由基水平和线粒体膜电位变化。结果糙叶败酱提取物可引起SⅢ细胞的凋亡。细胞线粒体膜电位降低.自由基水平升高。结论糙叶败酱提取物引起S_(180)细胞的凋亡,与含药血清对细胞内自由基水平和线粒体膜电位的影响有关。

异叶败酱化学成分的研究及体外细胞毒性检测

采用硅胶柱色谱法对异叶败酱(Patrinia heterophylla Bunge.)化学成分进行了研究.通过理化性质及波谱学方法对分离得到的化合物进行结构鉴定,并运用SRB法对分离的部分化合物进行体外细胞毒性测试.从该植物中分离鉴定了10个化合物,分别为:软木三萜酮(Ⅰ),齐墩果酸(Ⅱ),熊果酸(Ⅲ),常春藤皂甙元(Ⅳ),海棠果醇(Ⅴ),齐墩果酸-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(Ⅵ),β-香树精(Ⅶ),α-香树精(Ⅷ),β-谷甾醇(Ⅸ),胡萝卜苷(Ⅹ),除化合物Ⅱ之外,其余化合物都是首次从该植物中分离得到.SRB法结果表明:化合物Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅵ有较强的细胞毒性.

异叶败酱中三萜化合物常春藤皂苷元对人早幼粒白血病细胞HL-60的增殖抑制、周期阻滞及凋亡诱导作用

利用倒置显微镜观察法、台盼蓝排染法、Hoechst33258荧光染色法、DNAladder电泳以及流式细胞分析技术,检测了从甘肃产异叶败酱(Patrinia heterophyllaBunge.)中分离得到的三萜化合物常春藤皂苷元(HG)对人早幼粒白血病细胞HL-60的增殖抑制、周期阻滞及凋亡诱导作用.结果表明,常春藤皂苷元在较低浓度(10～40μmol·L-1)条件下,对HL-60细胞增殖具有良好的抑制作用;在较高浓度(40～50μmol·L-1)条件下,对HL-60细胞具有致死作用;同时,常春藤皂苷元对HL-60细胞的G1期阻滞和凋亡诱导作用极可能是其实现增殖抑制和致死作用的主要途径.

糙叶败酱化学成分及药理活性研究进展

糙叶败酱Patrinia scabra Bunge为败酱科败酱属Patrinia植物，异名鸡粪草（《本草原始》）、箭头风、臭罐子等，俗名脚汗草，多年生草本，高20～60cm，根茎粗短，根粗壮圆柱形，具特异臭气，分布于河北、山西及甘肃等地。

糙叶败酱化学成分研究

目的:研究糙叶败酱的化学成分。方法:利用硅胶及Sephadex LH-20凝胶柱色谱对其化学成分进行分离、纯化,根据理化性质及波谱数据进行结构鉴定。结果:从糙叶败酱石油醚和氯仿萃取部位分离得到7个化合物,分别为:白花败酱醇(Ⅰ)、黄花败酱醇(Ⅱ)、原儿茶酸(Ⅲ)、胡萝卜苷(Ⅳ)、油酸(Ⅴ)、β-谷甾醇(Ⅵ)、芥酸(Ⅶ)。结论:化合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ、Ⅶ为首次从该植物中分离得到。

糙叶败酱大孔吸附树脂提取物对荷瘤小鼠红细胞膜CD35和CD44s的影响

目的:观察糙叶败酱大孔吸附树脂提取物对荷瘤小鼠红细胞免疫功能的调节作用。方法:D101大孔吸附树脂分离糙叶败酱水提物,测定其组分;糙叶败酱提取物作用于荷瘤小鼠(S180),观察生命延长率,检测红细胞天然免疫活性和红细胞膜CD35、CD44 s数量。结果:糙叶败酱大孔吸附树脂提取物中多糖含量为8.4%,皂苷含量为48.4%,作用于荷瘤小鼠,生命延长率增加,红细胞天然免疫活性得到改善,CD35和CD44 s数量增加。结论:糙叶败酱大孔吸附树脂提取物有一定的红细胞免疫调节作用。

异叶败酱总苷片对人大肠癌HT-29细胞凋亡的影响

目的:研究异叶败酱总苷片对人大肠癌细胞凋亡的影响及作用机制。方法:建立人大肠癌HT-29裸鼠移植瘤模型,设立异叶败酱总苷片低、中、高剂量组和空白组、5-氟脲嘧啶(5-FU)+甲酰四氢叶酸钙(CF)对照组,给药8周后处死裸鼠,瘤体称重,末端原位标记染色法(TUEL)检测凋亡指数,分别行半胱天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、Bax和Bcl-2免疫组化染色,图象分析系统定量检测并比较该3种物质表达情况。结果:异叶败酱总苷片各组瘤重小于空白对照组,而凋亡指数均高于空白对照组和5-FU+CF组,其中高剂量组与空白对照组和5-FU+CF组比较差异有极显著性(P<0.01)。异叶败酱总苷片各组移植瘤caspase-3表达及Bax、Bcl-2表达的相对比率(Bax/Bcl-2)均高于空白对照组。结论:异叶败酱总苷片具有诱导人大肠癌HT-29裸鼠移植瘤细胞凋亡的作用,其机制可能与促进移植瘤caspase-3表达及增大Bax/Bcl-2表达比率有关。

糙叶败酱挥发油镇静作用的研究

本文观察了败酱科植物糙叶败酱(Patrinia scabra Bunge)根和根茎中制得的挥发油的镇静作用,井与黄花败酱挥发油做了比较。结果表明,此油灌胃给予数组小鼠,剂量0.45ml/kg,显示如下的作用:[1]能显著延长由于腹腔注射戊巴比妥钠(50mg/kg)引起的小鼠睡眠时间,但其作用强度弱于黄花败酱挥发油。(2)一次灌胃给予小鼠大剂量10.46g/kg的糙叶败酱挥发油,连续观察10天,动物外观正常,无一死亡,体重增加与对照组相似。

糙叶败酱大孔吸附树脂提取物对荷瘤小鼠红细胞免疫功能的影响

目的观察糙叶败酱大孔吸附树脂提取物对荷瘤小鼠红细胞免疫功能的调节作用。方法D101大孔吸附树脂分离糙叶败酱水提物,测定其多糖含量和皂甙含量;糙叶败酱提取物作用于荷瘤小鼠(S180),观察生命延长率,检测红细胞C3b受体花环率、红细胞免疫复合物花环率、红细胞肿瘤细胞花环率和红细胞膜CD35和CD44s数量。结果糙叶败酱大孔吸附树脂提取物中多糖含量为21.4%,皂甙含量为41.8%,作用于荷瘤小鼠,生命延长率增加,红细胞C3b受体花环率和红细胞肿瘤细胞花环率升高,红细胞免疫复合物花环率降低,红细胞天然免疫活性得到改善,同时红细胞膜CD35和CD44s数量增加,与模型组比较,差异有显著性(P<0.05或P<0.01)。结论糙叶败酱大孔吸附树脂提取物有一定的红细胞免疫调节作用。

糙叶败酱总木脂素对K562细胞体外生长的影响

目的:探讨糙叶败酱提取物总木脂素对K562细胞体外生长的影响及作用机制。方法:采用四甲基偶氮唑盐比色法(monotetrazolium test,MTT)测定糙叶败酱总木脂素对K562细胞生长的影响;采用电镜技术对其进行形态学观察;采用流式细胞仪对其进行DNA含量分析,检测经药物作用后的细胞凋亡率。结果:糙叶败酱总木脂素对K562细胞生长有明显的抑制作用,抑制作用随药物浓度增加及作用时间延长而有加强趋势,细胞经糙叶败酱总木脂素作用96h,IC5021.16μg/mL。电镜下观察到经糙叶败酱总木脂素作用48h后,一部分K562细胞体积变小,胞浆浓缩,胞核染色质聚集或边集,核碎裂,凋亡小体形成,呈典型的凋亡形态特征。流式细胞仪可检测到经糙叶败酱总木脂素诱导K562细胞48h后产生明显的亚二倍体峰,细胞凋亡率为10.1%。结论:糙叶败酱总木脂素可抑制K562细胞的生长,作用的机制与其诱导K562细胞凋亡有关。

糙叶败酱中环烯醚萜苷元成分抗结肠癌作用的实验研究

目的:研究糙叶败酱中环烯醚萜苷元成分体外抗小鼠结肠癌细胞株C26作用和对小鼠结肠癌(C26)移植性肿瘤的作用。方法:采用四唑盐(MTT)比色法研究糙叶败酱中环烯醚萜苷元PS-Ⅰ和BJ3401对小鼠结肠癌细胞株C26生长的影响;于F1小鼠皮下注射小鼠结肠癌细胞株(C26)建立小鼠结肠癌移植性肿瘤模型,观察糙叶败酱中总环烯醚萜苷元对结肠癌移植性肿瘤小鼠的影响。结果:环烯醚萜苷元PS-Ⅰ、BJ3401可显著抑制小鼠结肠癌细胞株C26的生长,并且具有一定的剂量依赖关系;总环烯醚萜苷元可显著减轻荷瘤鼠瘤重。结论:糙叶败酱中环烯醚萜苷元具有抗结肠癌的作用。

糙叶败酱大孔吸附树脂提取物对小鼠移植性肿瘤细胞间通讯和[Ca^(2+)]的影响

目的:探讨糙叶败酱大孔吸附树脂提取物(Patrinia scabra Bunge extract,PsBe)引起S180肉瘤细胞凋亡的相关机制。方法:建立S180腹水瘤动物模型,以环磷酰胺(CTX)0.01 g/kg作为阳性对照,分别给予PsBe 0.5、1.0、2.0 g/kg治疗,透射电镜和荧光显微镜观察肿瘤细胞凋亡的形态学变化,Annexin V-FITC/PI双标记法检测肿瘤细胞早期凋亡的数量变化,激光共聚焦显微镜检测肿瘤细胞DNA、RNA含量、细胞间通讯(GJIC)和细胞[Ca2+]的变化。结果:PsBe可降低肿瘤细胞的DNA、RNA含量,透射电镜和荧光显微镜观察可见肿瘤细胞出现凋亡的组织形态学改变;升高肿瘤细胞凋亡率、降低存活率,与模型组比较差异有显著性(P<0.01),但与CTX组比较,PsBe各剂量组肿瘤细胞活细胞比例升高、坏死率降低(P<0.01),仅PsBe 2.0 g/kg组肿瘤细胞凋亡率升高(P<0.01),即PsBe组肿瘤细胞以凋亡为主,CTX组肿瘤细胞则以坏死为主。同时,PsBe可改善细胞间通讯功能状况,荧光恢复率与模型组比较差异有显著性(P<0.01),可升高肿瘤细胞[Ca2+],与模型组比较差异有显著性(P<0.01)。结论:PsBe具有抗肿瘤、诱导S180细胞凋亡作用,其机制与恢复GJIC和细胞[Ca2+]升高有关。