白花败酱草总黄酮对实验性急性肺损伤模型大鼠的肺保护作用及其机制

目的:探讨白花败酱草总黄酮(total flavoniods from Patrina villosa Juss,PJF)对实验性急性肺损伤(acute lung injury,ALI)模型大鼠的肺保护作用及其潜在机制。方法:用气管内滴注5 mg/kg脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)构建ALI大鼠模型。将60只雄性SD大鼠随机分为对照组、LPS组、LPS+低剂量(100 mg/kg)PJF组和LPS+高剂量(300 mg/kg)PJF组(后2组在ALI造模前1 h给予PJF灌胃),每组15只。造模后24 h,收集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)和肺组织。HE染色显示肺组织形态;干湿称重法测量肺组织的湿/干重比;伊文思蓝染色评估肺组织中上皮屏障的通透性;ELISA检测BALF中炎症因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)和IL-6含量,以及肺组织中氧化应激指标超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;免疫印迹法检测肺组织中C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)、葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)和X框结合蛋白1(X-box binding protein 1,XBP1)蛋白表达。结果:与对照组比较,LPS组大鼠肺组织呈现肺泡结构不清和大量炎症细胞浸润,ALI评分和肺组织的湿/干重比显著升高(P<0.05),BALF中IL-6、IL-1β和TNF-α水平,以及肺组织中MDA含量、MPO活性及CHOP、GRP78和XBP1蛋白表达水平显著升高(P<0.05),肺组织中SOD和GSH-Px活性显著降低(P<0.05)。与LPS组比较,PJF干预组肺组织形态改善,ALI评分和肺组织的湿/干重比显著下降(P<0.05),BALF中IL-6、IL-1β和TNF-α水平,以及肺组织中MDA含量、MPO活性及CHOP、GRP78和XBP1蛋白表达水平显著降低(P<0.05),肺组织中SOD和GSH-Px活性显著升高(P<0.05);且高剂量组的效果明显优于低剂量组。结论:PJF对ALI大鼠具有肺保护作用,其机制可能与抑制炎症反应、氧化应激和内质网应激有关。

基于Notch1/NF-κB信号轴探讨败酱草总黄酮对大鼠脑缺血耐受模型炎症级联反应的影响

目的:研究败酱草总黄酮对大鼠脑缺血耐受模型炎症级联反应的影响。方法:采用阻断大鼠双侧颈总动脉(CCA)10 min作为缺血预处理,再灌注120 h后,线栓阻塞法阻断左侧大脑中动脉2 h,再复灌22 h,建立大鼠脑缺血耐受模型。于第1次缺血预处理开始,连续灌药7 d。末次给药后,取脑部中间位置,观察脑组织梗死面积;ELISA法测定脑组织匀浆白介素-1(IL-1)、IL-10、肿瘤坏死因子-a(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9、低氧诱导因子(HIF-1)和热休克蛋白70(HSP70)含量;免疫组化法检测皮质区Notch信号受体1(Notch1)和核转录因子κB-p65(NF-κB p65)的蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组脑梗死面积,脑组织IL-1、TNF-α、MMP-2、MMP-9、TGF-β、HIF-1、HSP70含量及其脑皮质区Notch1、NF-κBp65蛋白表达均显著升高(P<0.01);与模型对照组比较,败酱草总黄酮200 mg/kg组能够明显降低脑梗死面积(P<0.05),败酱草总黄酮100、200 mg/kg组能明显降低IL-1、TNF-α、MMP-2、MMP-9含量(P<0.05),200 mg/kg组能显著升高TGF-β、IL-10、HIF-1、HSP70含量(P<0.05);败酱草总黄酮200 mg/kg组Notch1、NF-κBp65蛋白表达显著下调(P<0.01),败酱草总黄酮100 mg/kg组Notch1、NF-κBp65蛋白表达明显下调(P<0.05或P<0.01)。结论:败酱草总黄酮能调控脑缺血后体内促炎因子和抗炎因子的失衡状态,抑制炎症级联反应,减轻脑组织损伤,发挥脑保护作用。

基于抗氧化作用探讨败酱草总黄酮对脑缺血耐受模型的保护作用

目的:探究败酱草总黄酮对大鼠脑缺血耐受模型的保护作用。方法:采用阻断双侧颈总动脉10 min作为第一次缺血预处理,再灌流120 h后,第二次损伤运用线栓阻塞法阻断左侧大脑中动脉2 h,再灌流22 h,建立大鼠脑缺血耐受模型。大鼠短暂缺血预处理后,将其随机分为5组,每组15只,分别为:假手术对照组、模型对照组、金纳多40 mg/kg组、败酱草总黄酮200、100 mg/kg组。每天给药一次,连续7 d,除给药组外,其他组灌服等体积的0.5%CMC。第6 d给药1 h后,除正常对照组外,其余各组大鼠线栓阻塞法阻断左侧大脑中动脉2 h,再灌流22 h后,评估大鼠神经功能缺失,测定脑组织匀浆、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、脑源性神经营养因子(BDNF)水平、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF);HE染色观察脑组织皮质区病理形态学的变化。结果:与假手术对照组比较,模型对照组神经功能缺失评分、MDA含量明显升高,脑匀浆SOD活力、GSH-Px、CAT含量明显降低(P<0.05)。与模型对照组比,金纳多40 mg/kg组和败酱草总黄酮200 mg/kg组能够明显降低大鼠神经功能缺失评分和MDA水平(P<0.05),明显升高SOD活力、GSH-Px含量(P<0.05),金纳多40 mg/kg组和败酱草总黄酮200、100 mg/kg组能够显著升高BDNF和GDNF水平(P<0.01)。金纳多40 mg/kg组、败酱草总黄酮200 mg/kg组能够使梗死灶周围神经元细胞水肿减轻,对病理损伤具有显著的改善作用。结论:败酱草总黄酮对脑缺血耐受模型的保护作用可能是通过减少自由基的产生,减轻脂质过氧化反应,促进神经功能修复,改善行为能力和修复受损的神经元而发挥保护作用。