不同试剂盒提取质粒中内毒素水平的比较

目的比较几种不同质粒提取试剂盒提取质粒中内毒素水平。方法选用6种市售商业化试剂盒:QIAGEN质粒小提试剂盒Plasmid Mini Kit(12123),QIAGNE无内毒素质粒大提试剂盒EndoFree PlasmidMaxi Kit(12362),康为世纪高纯质粒中提试剂盒(CW0502),A厂家无内毒素质粒中提试剂盒,B厂家无内毒素质粒小提试剂盒,C厂家无内毒素质粒小提试剂盒(BSC01S2D)。分别提取质粒DNA,应用鲎试剂显色基质法和凝胶法检测所提质粒中内毒素水平。结果6种试剂盒提取质粒得率、A260/A280及A260/A230值均较好,但内毒素水平各不相同,其中各厂家标明无内毒素试剂盒提取质粒中内毒素水平相对较低,QIAGEN无内毒素质料大提试剂盒提取的质粒中内毒素小于0. 125 EU/μg。结论6种质粒提取试剂盒使用时应根据实际情况进行选择。

四种去内毒素试剂盒提取质粒中内毒素水平的比较

目的比较四种去内毒素质粒提取试剂盒所提质粒中内毒素的水平。方法本实验选用了四种商业化去内毒素试剂盒进行质粒提取,然后用鲎试剂凝胶法和动态浊度法对所提质粒DNA进行内毒素检测。结果四种试剂盒所提取的质粒得率、A260/A280、A260/A230均符合要求,内毒素水平均小于0.1EU/μg。其中,C试剂盒所提取的质粒中内毒素含量最低。结论四种去内毒素质粒提取试剂盒在质粒得率、内毒素含量、价格方面有一定的差异。其中C试剂盒所提质粒得的率最高,内毒素含量最低,但价格也最贵;B试剂盒性价比最高,使用时应根据实际情况综合考虑。