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一株双歧杆菌质粒聚合酶基因的PCR扩增和鉴定
被引量:
5
1
作者
朱忠生
王立生
+6 位作者
曾位森
郑跃杰
罗深秋
李迎雪
姜泊
潘令嘉
周殿元
《中国微生态学杂志》
CAS
CSCD
2007年第4期321-323,共3页
目的PCR扩增人双歧杆菌天然质粒的聚合酶基因。方法用改良型MRS双歧杆菌选择培养基,从人新鲜粪便分离长双歧杆菌,PCR扩增长双歧杆菌质粒聚合酶(Bifidobacterium plasmid polymerase,BPP)基因,对BPP基因检测阳性的PCR产物通过序列分析,...
目的PCR扩增人双歧杆菌天然质粒的聚合酶基因。方法用改良型MRS双歧杆菌选择培养基,从人新鲜粪便分离长双歧杆菌,PCR扩增长双歧杆菌质粒聚合酶(Bifidobacterium plasmid polymerase,BPP)基因,对BPP基因检测阳性的PCR产物通过序列分析,进行鉴定。结果人长双歧杆菌天然质粒的聚合酶基因PCR扩增后,经1.0%琼脂糖凝胶电泳,测得BPP基因的相对分子质量约为1.9 kb。通过BLAST序列比对分析与GenBank中相应基因同源性为96%。结论成功克隆了1株双歧杆菌天然质粒的聚合酶基因,为构建与双歧杆菌宿主质粒相适应的载体奠定了基础。
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关键词
双歧杆菌
质粒聚合酶
PCR
下载PDF
职称材料
双歧杆菌质粒聚合酶基因对质粒载体稳定性的影响
被引量:
1
2
作者
荀安营
王立生
+5 位作者
李娜
朱忠生
李迎雪
龙若庭
曾位森
朱惠明
《中国微生态学杂志》
CAS
CSCD
2009年第2期104-105,共2页
目的探讨双歧杆菌天然质粒的聚合酶基因(Bifidobacterium plasmid polymerase,BPP)对人工构建的大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭质粒载体(shuttle vector)在长双歧杆菌中稳定性的影响。方法首先电转化质粒pBADs-A和pBADs-BPP至长双歧杆菌,培养...
目的探讨双歧杆菌天然质粒的聚合酶基因(Bifidobacterium plasmid polymerase,BPP)对人工构建的大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭质粒载体(shuttle vector)在长双歧杆菌中稳定性的影响。方法首先电转化质粒pBADs-A和pBADs-BPP至长双歧杆菌,培养鉴定后,接种含质粒pBADs-A和pBADs-BPP的双歧杆菌于AMP-和AMP+的MRS培养液中。厌氧培养后,将样品涂布于AMP+的MRS固体培养板上计数菌落数。结果相同条件下质粒pBADs-BPP组菌落数高于质粒pBADs-A组(P<0.05)。结论BPP可以增加质粒载体的稳定性。
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关键词
双歧杆菌
质粒聚合酶
基因
质粒
载体
稳定性
原文传递
双歧杆菌质粒聚合酶基因表达系统的构建及其鉴定
3
作者
朱忠生
王立生
+2 位作者
曾位森
张定国
付丹
《中国微生态学杂志》
CAS
CSCD
2013年第11期1255-1258,共4页
目的构建可以在双歧杆菌表达外源性基因的系统。方法 PCR扩增双歧杆菌质粒聚合酶基因(BPP)并连接至质粒pBS-T以形成重组质粒pBS-BPP。PCR扩增双歧杆菌内源性阿拉伯糖苷酶的启动子及分泌性信号肽DNA序列(ara)并连接至质粒pBAD-A以形成重...
目的构建可以在双歧杆菌表达外源性基因的系统。方法 PCR扩增双歧杆菌质粒聚合酶基因(BPP)并连接至质粒pBS-T以形成重组质粒pBS-BPP。PCR扩增双歧杆菌内源性阿拉伯糖苷酶的启动子及分泌性信号肽DNA序列(ara)并连接至质粒pBAD-A以形成重组质粒pBAD-ara,然后将增强绿色荧光蛋白(eGFP)基因连接至质粒pBAD-ara以形成重组质粒pBAD-ara-GFP。采用基因重组技术重组含有ara、BPP、eGFP基因序列并可将外源性基因分泌表达于菌体外及锚定表达于细胞壁的质粒pBS-BPP-ara-GFP,激光共聚焦显微镜下观察含有pBS-BPP-ara-GFP质粒及对照质粒的E.coli,验证eGFP定位表达情况。结果所构建的表达系统可以在E.coli中表达eGFP基因。结论通过基因重组方法成功构建了双歧杆菌表达系统,其可将外源基因分泌表达于菌体外。
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关键词
双歧杆菌
双歧杆菌
质粒聚合酶
基因(BPP)
ARA
eGFP外源性基因表达系统
原文传递
题名
一株双歧杆菌质粒聚合酶基因的PCR扩增和鉴定
被引量:
5
1
作者
朱忠生
王立生
曾位森
郑跃杰
罗深秋
李迎雪
姜泊
潘令嘉
周殿元
机构
中国医科大学深圳市儿童医院内科
暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院消化科
南方医科大学细胞生物学教研室
南方医科大学南方医院消化科
出处
《中国微生态学杂志》
CAS
CSCD
2007年第4期321-323,共3页
基金
广东省自然基金资助课题
编号:0400696105009077
文摘
目的PCR扩增人双歧杆菌天然质粒的聚合酶基因。方法用改良型MRS双歧杆菌选择培养基,从人新鲜粪便分离长双歧杆菌,PCR扩增长双歧杆菌质粒聚合酶(Bifidobacterium plasmid polymerase,BPP)基因,对BPP基因检测阳性的PCR产物通过序列分析,进行鉴定。结果人长双歧杆菌天然质粒的聚合酶基因PCR扩增后,经1.0%琼脂糖凝胶电泳,测得BPP基因的相对分子质量约为1.9 kb。通过BLAST序列比对分析与GenBank中相应基因同源性为96%。结论成功克隆了1株双歧杆菌天然质粒的聚合酶基因,为构建与双歧杆菌宿主质粒相适应的载体奠定了基础。
关键词
双歧杆菌
质粒聚合酶
PCR
Keywords
Bifidobacterium
Plasmid polymerase
PCR
分类号
R378.992 [医药卫生—病原生物学]
下载PDF
职称材料
题名
双歧杆菌质粒聚合酶基因对质粒载体稳定性的影响
被引量:
1
2
作者
荀安营
王立生
李娜
朱忠生
李迎雪
龙若庭
曾位森
朱惠明
机构
暨南大学第二临床医学院消化科
暨南大学第二临床医学院呼吸科
中国医科大学深圳市儿童医院内科
南方医科大学细胞生物学教研室
出处
《中国微生态学杂志》
CAS
CSCD
2009年第2期104-105,共2页
基金
广东省自然基金资助课题(0400696105009077)
文摘
目的探讨双歧杆菌天然质粒的聚合酶基因(Bifidobacterium plasmid polymerase,BPP)对人工构建的大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭质粒载体(shuttle vector)在长双歧杆菌中稳定性的影响。方法首先电转化质粒pBADs-A和pBADs-BPP至长双歧杆菌,培养鉴定后,接种含质粒pBADs-A和pBADs-BPP的双歧杆菌于AMP-和AMP+的MRS培养液中。厌氧培养后,将样品涂布于AMP+的MRS固体培养板上计数菌落数。结果相同条件下质粒pBADs-BPP组菌落数高于质粒pBADs-A组(P<0.05)。结论BPP可以增加质粒载体的稳定性。
关键词
双歧杆菌
质粒聚合酶
基因
质粒
载体
稳定性
Keywords
Bifutobacterium
Bifutobacterium plasmid polymerase
Plasmid vector
Stability
分类号
R378.992 [医药卫生—病原生物学]
原文传递
题名
双歧杆菌质粒聚合酶基因表达系统的构建及其鉴定
3
作者
朱忠生
王立生
曾位森
张定国
付丹
机构
深圳市儿童医院儿内科
暨南大学第二临床医学院消化科
南方医科大学细胞生物学教研室
出处
《中国微生态学杂志》
CAS
CSCD
2013年第11期1255-1258,共4页
基金
广东省自然基金资助课题(04006961
05009077)
文摘
目的构建可以在双歧杆菌表达外源性基因的系统。方法 PCR扩增双歧杆菌质粒聚合酶基因(BPP)并连接至质粒pBS-T以形成重组质粒pBS-BPP。PCR扩增双歧杆菌内源性阿拉伯糖苷酶的启动子及分泌性信号肽DNA序列(ara)并连接至质粒pBAD-A以形成重组质粒pBAD-ara,然后将增强绿色荧光蛋白(eGFP)基因连接至质粒pBAD-ara以形成重组质粒pBAD-ara-GFP。采用基因重组技术重组含有ara、BPP、eGFP基因序列并可将外源性基因分泌表达于菌体外及锚定表达于细胞壁的质粒pBS-BPP-ara-GFP,激光共聚焦显微镜下观察含有pBS-BPP-ara-GFP质粒及对照质粒的E.coli,验证eGFP定位表达情况。结果所构建的表达系统可以在E.coli中表达eGFP基因。结论通过基因重组方法成功构建了双歧杆菌表达系统,其可将外源基因分泌表达于菌体外。
关键词
双歧杆菌
双歧杆菌
质粒聚合酶
基因(BPP)
ARA
eGFP外源性基因表达系统
Keywords
Bifidobacterium
Bifidobacterium plasmid polyenzyme
ara eGFP exogenous gene expression system
分类号
R378.992 [医药卫生—病原生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
一株双歧杆菌质粒聚合酶基因的PCR扩增和鉴定
朱忠生
王立生
曾位森
郑跃杰
罗深秋
李迎雪
姜泊
潘令嘉
周殿元
《中国微生态学杂志》
CAS
CSCD
2007
5
下载PDF
职称材料
2
双歧杆菌质粒聚合酶基因对质粒载体稳定性的影响
荀安营
王立生
李娜
朱忠生
李迎雪
龙若庭
曾位森
朱惠明
《中国微生态学杂志》
CAS
CSCD
2009
1
原文传递
3
双歧杆菌质粒聚合酶基因表达系统的构建及其鉴定
朱忠生
王立生
曾位森
张定国
付丹
《中国微生态学杂志》
CAS
CSCD
2013
0
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