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Wilson病ATP7B基因铜离子结合区缺失突变体构建及功能研究
被引量:
3
1
作者
任廷文
梁秀龄
+1 位作者
石铸
王莹
《中山大学学报(医学科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第3期261-264,i005,共5页
【目的】构建ATP7B基因铜离子结合区缺失突变体,研究其在Tx小鼠肝细胞中的表达及功能。【方法】利用长片断PCR和质粒重组技术构建不同铜离子结合区的缺失体,脂质体介导转染Tx小鼠肝脏细胞,然后进行高铜、低铜孵育,观察ATP7B突变蛋白在...
【目的】构建ATP7B基因铜离子结合区缺失突变体,研究其在Tx小鼠肝细胞中的表达及功能。【方法】利用长片断PCR和质粒重组技术构建不同铜离子结合区的缺失体,脂质体介导转染Tx小鼠肝脏细胞,然后进行高铜、低铜孵育,观察ATP7B突变蛋白在细胞内的定向移动及对铜离子转运功能的影响。【结果】ATP7B基因1-4铜离子结合区逐个缺失后,ATP7B蛋白定向移动减慢至消失;5-6铜离子结合区缺失,细胞铜转运功能停滞。【结论】ATP7B基因6个铜离子结合区功能不同,其中1-4结合区主要根据铜浓度诱导ATP7B蛋白细胞内定向移动,而5-6结合区则直接参与铜离子细胞外转运。
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关键词
WILSON病
ATP7B基因
铜离子结合区
基因缺失
质粒重组技术
长片断PCR
技术
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职称材料
题名
Wilson病ATP7B基因铜离子结合区缺失突变体构建及功能研究
被引量:
3
1
作者
任廷文
梁秀龄
石铸
王莹
机构
中山大学附属第一医院神经科
出处
《中山大学学报(医学科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第3期261-264,i005,共5页
基金
中山医科大学"211工程"基金
卫生部临床学科基金(2001321)
文摘
【目的】构建ATP7B基因铜离子结合区缺失突变体,研究其在Tx小鼠肝细胞中的表达及功能。【方法】利用长片断PCR和质粒重组技术构建不同铜离子结合区的缺失体,脂质体介导转染Tx小鼠肝脏细胞,然后进行高铜、低铜孵育,观察ATP7B突变蛋白在细胞内的定向移动及对铜离子转运功能的影响。【结果】ATP7B基因1-4铜离子结合区逐个缺失后,ATP7B蛋白定向移动减慢至消失;5-6铜离子结合区缺失,细胞铜转运功能停滞。【结论】ATP7B基因6个铜离子结合区功能不同,其中1-4结合区主要根据铜浓度诱导ATP7B蛋白细胞内定向移动,而5-6结合区则直接参与铜离子细胞外转运。
关键词
WILSON病
ATP7B基因
铜离子结合区
基因缺失
质粒重组技术
长片断PCR
技术
Keywords
ATP7B gene
copper-binding domains
mouse
分类号
R742.4 [医药卫生—神经病学与精神病学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Wilson病ATP7B基因铜离子结合区缺失突变体构建及功能研究
任廷文
梁秀龄
石铸
王莹
《中山大学学报(医学科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2003
3
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