北京发现同时产DHA-1质粒AmpC型及CTX-M型超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌

目的 研究大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌同时产超广谱β- 内酰胺酶(ESBL)及质粒型AmpC酶菌株的比率及其基因型。方法 收集北京两家教学医院2 0 0 1—2 0 0 2年产ESBL且对头孢西叮耐药的5 9株大肠埃希菌和2 1株肺炎克雷伯菌,采用等电聚焦电泳测定β内酰胺酶的等电点;接合试验证实酶基因有无可转移性,并用碱裂解法提取质粒;采用多重聚合酶链式反应(multiplexpolymerasechainreaction ,MPCR)及序列分析确定质粒AmpC酶的基因型。脉冲场凝胶电泳(pulsedfieldgelelectro phoresis,PFGE)确定耐药菌株的亲缘关系。结果 北京两家医院ESBL中质粒型AmpC酶的发生率,大肠埃希菌分别为0和2 % ,肺炎克雷伯菌则分别为9.7%和17.1%。1株大肠埃希菌及9株肺炎克雷伯菌产生DHA -1型质粒AmpC酶,同时也产CTX -3型(6株)或CTX- M- 14 (1株)或SHV -12 (3株)型ESBL。10株中,3株肺炎克雷伯菌可将头孢西叮耐药性传给受体菌。这10株菌均至少携带1个约33～36kb的大质粒,未发现质粒的传播。PFGE发现这10株菌来自不同的克隆株。结论 北京地区发现同时产DHA -1质粒AmpC型及CTX- M型ESBL的肺炎克雷伯菌,它们来自不同的克隆。

武汉市儿童医院临床分离大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌中产质粒介导AmpC酶和ESBLs的研究

目的研究武汉市儿童医院临床分离高产质粒AmpC酶和超超广谱β内酰胺酶(SSBL)肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌的分子流行病学特征。方法收集我院2005年8月—2006年8月住院患儿临床分离的头孢西丁中介或耐药的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌161株。采用三维试验检测AmpC酶,表型确认试验检测ESBLs,质粒转化试验定位耐药基因;采用PCR技术扩增质粒AmpC与CTX-M基因;使用限制性片段长度多态性(RFLP)技术确定CTX-M基因簇的特征;利用基因测序确定AmpC酶及CTX-M的基因亚型。结果DHA-1型和ACT-1型为主要的质粒AmpC酶基因型,发现1种新的ACT型质粒AmpC酶,其与ACT-1的同源性仅为84%。CTX-M-14型和CTX-M-3型为主要的ESBLs基因型。最常见的大肠埃希菌SSBL基因组合为CTX-M-14+DHA-1+ACT-1型,肺炎克雷伯菌的为CTX-M-3+DHA-1+ACT-1。结论我院临床分离的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中,产SSBL菌株所占比例显著高于单产质粒AmpC酶菌株;CTX-M-14/CTX-M-3+DHA-1+ACT-1是大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中最常见的SSBL基因型。

全国10所教学医院产ESBLs和质粒AmpC酶大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的研究

目的研究全国10所教学医院临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中同时产ESBLs及质粒型AmpC酶菌株的比率及其基因型特点,比较不同地区间的差别。方法收集来自中国不同地区的10所教学医院2003年度产ESBLs的大肠埃希菌90株和肺炎克雷伯菌61株,用等电聚焦电泳测定β内酰胺酶的等电点;接合试验证实酶基因有无可转移性;采用多重聚合酶链反应(MPCR)及序列分析确定质粒AmpC酶的基因型。结果武汉、南京、济南等地产ESBLs大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌所占比率相近,均在50%左右;北京产ESBLs大肠埃希菌所占比率低于肺炎克雷伯菌;其他各城市产ESBLs大肠埃希菌所占比率均略高于肺炎克雷伯菌。在产ESBLs菌株中24.4%大肠埃希菌和19.4%肺炎克雷伯菌对头孢西丁耐药。除沈阳无对头孢西丁耐药菌株外,其他医院均存在对头孢西丁耐药株。产ESBLs菌株基因型主要为CTX—M型,其中以CTX-M-9组最为常见,其次为CTX-M-1组。在同时产ESBLs和AmpC的菌株中,肺炎克雷伯菌多于大肠埃希菌,且均为CTX-M/ DHA-1型(多为CTX-M-9/DHA-1型)。3株同时产ESBLs和AmpC肺炎克雷伯菌的接合子PCR结果与其供体菌完全相同。结论参与本研究的各所教学医院产ESBLs菌株基因型主要为CTX-M-9组,在同时产ESBLs和AmpC酶的菌株中,肺炎克雷伯菌多于大肠埃希菌,多为CTX-M-9/DHA-1型,该酶可通过质粒传播。

大肠埃希菌高产AmpC酶的研究进展

大肠埃希菌(E.coli)中的ampC基因与其他革兰阴性细菌不同,染色体上的ampC基因启动子与延胡索酸还原酶(frdABCD)操纵子中的frdD基因重叠,衰减子是延胡索酸还原酶操纵子的转录终止子,缺少ampC调节基因ampR,所以携带野生型基因的E.coliAmpC酶的产量非常低,临床意义不大。但近年来出现了高产AmpC酶的E.coli,对其进行研究发现,ampC基因启动子、衰减子或ampC编码区的突变,或从其他细菌获得强启动子或携带强启动子的序列插入,或从其他细菌获得调节基因ampR等都可能导致染色体型AmpC酶的高产。质粒型ampC基因在E.coli中的出现是AmpC酶高产的另一重要原因。

多黏菌素B和米诺环素对鲍曼不动杆菌的体外抗菌活性检验研究

目的 探究多黏菌素B和米诺环素对鲍曼不动杆菌的体外抗菌活性。方法 择取2021年1月至2023年1月本院80例鲍曼不动杆菌感染患者深入分析,均采用多黏菌素B、米诺环素检验鲍曼不动杆菌,分析体外抗菌活性。结果 鲍曼不动杆菌产酶类型有产金属β内酰胺酶(MBLs)、质粒型AmpC酶、诱导型AmpC酶。鲍曼不动杆菌产MBLs阳性例数为75例,阳性率为93.75%;产质粒型AmpC酶阳性例数为35例,阳性率为43.75%;产诱导型AmpC酶阳性例数为30例,阳性率为37.50%。多黏菌素B产MBLs型、产质粒型AmpC型、产诱导型AmpC酶鲍曼不动杆菌最低抑菌浓度(MIC)范围、MIC50、MIC90低于米诺环素,抑菌率较米诺环素高(P<0.05)。结论 在对鲍曼不动杆菌检测时,多黏菌素B与米诺环素相比,米诺环素活性更强。

武汉儿童医院住院患者质粒AmpC酶和超超广谱β-内酰胺酶分子流行病学研究

随着同时产ESBL和质粒型AmpC酶（超超广谱β-内酰胺酶，SSBL）的耐药菌株日益增多，导致菌株产生更强的耐药性，给感染控制带来很大困难。为了了解本院住院患儿大肠埃希菌（E.coli）及肺炎克雷伯菌（Kpn）高产质粒AmpC酶和SSBL的分子流行病学特征。

筛查大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌高产AmpC酶的三种方法比较

AmpC酶属于分子生物学分类中的C类酶及功能分类（Bush分类）中的Ⅰ类酶，能水解第一、二、三代头孢菌素及单酰胺类抗生素，且不受酶抑制剂抑制，外膜蛋白丢失的菌株甚至出现对碳青霉烯类抗生素耐药。虽然质粒型AmpC酶不及ESBL常见，但由其所致严重感染的病死率更高，危害更严重。Pai等报道，在产质粒型AmpC酶肺炎克雷伯菌血液感染患者中，

新基因型CMY-22、TEM-144β-内酰胺酶的检出及其序列分析和临床意义

大肠埃希菌是临床常见致病菌或机会致病菌。也是院内获得性感染的重要病原菌。其耐药性的变迁和多重耐药的出现，主要与耐药基因编码酶有关，其中以质粒介导的超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和AmpC酶最为重要。ES-BLs和质粒型AmpC酶自发现以来，迅速在世界范围内不同菌种中流行，以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为甚。