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密码修饰可增强沙眼衣原体MOMP DNA质粒免疫小鼠的免疫应答
1
作者
郑燕
赵蔚明
+7 位作者
王红
周亚滨
栾怡
齐眉
程轶喆
唐伟
于晗
杨熙
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第1期92-96,共5页
目的探讨密码修饰对沙眼衣原体主要外膜蛋白(MOMP)基因表达和DNA质粒免疫的影响。方法根据人类密码子使用偏好对鼠肺炎沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis mouse pneumoni-tis)MOMP基因进行优化修饰,设计合成人源化MOMP基因(HuMOMP)。构...
目的探讨密码修饰对沙眼衣原体主要外膜蛋白(MOMP)基因表达和DNA质粒免疫的影响。方法根据人类密码子使用偏好对鼠肺炎沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis mouse pneumoni-tis)MOMP基因进行优化修饰,设计合成人源化MOMP基因(HuMOMP)。构建以pcDNA3为载体的含HuMOMP及含野生型MOMP基因(WtMOMP)的真核表达质粒。瞬时转染COS-1细胞,Western blot方法比较HuMOMP基因及WtMOMP基因在哺乳动物细胞中的蛋白表达水平。DNA质粒肌内免疫BALB/c小鼠,检测小鼠血清特异性抗体、DTH和淋巴细胞增殖反应,比较优化密码MOMP基因和野生型MOMP基因DNA质粒免疫的免疫效果。结果人工合成HuMOMP基因,成功构建重组真核表达质粒pcDNA3-HuMOMP及pcDNA3-WtMOMP。转染细胞Western blot结果显示,HuMOMP基因的蛋白表达水平明显高于WtMOMP基因。ELISA结果表明,HuMOMP DNA质粒免疫组小鼠血清特异性IgG抗体有所升高;细胞免疫检测结果显示,HuMOMP DNA质粒免疫组小鼠足垫肿胀程度增强、淋巴细胞增殖实验刺激指数(SI)增高,两者与WtMOMP DNA质粒免疫组相比P<0.05,差异均有统计学意义。结论人源化密码修饰能够增强沙眼衣原体MOMP基因在哺乳动物细胞中的蛋白表达及DNA质粒免疫小鼠的免疫反应,这对于新型衣原体DNA疫苗的研究具有重要意义。
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关键词
沙眼衣原体
MOMP
密码子
蛋白表达
dna
质粒
免疫
原文传递
鸡Stra8基因真核表达载体构建及亚细胞定位的研究
被引量:
2
2
作者
王丹
张振韬
+7 位作者
施青青
黄晓梅
朱才业
郑蒙蒙
李伟
徐剑蓉
王克华
李碧春
《中国家禽》
北大核心
2013年第8期10-13,共4页
试验旨在克隆苏禽黄鸡视黄酸激活基因8(Stra8)的cDNA序列,构建pEGFP-C1-Stra8载体并制备鸡Stra8抗体。通过RT-PCR克隆苏禽黄鸡Stra8基因cDNA,构建pEGFP-C1-Stra8和pcDNA3.1(+)-Stra8重组质粒,分别转染NIH-3T3细胞和免疫小鼠制备抗体,间...
试验旨在克隆苏禽黄鸡视黄酸激活基因8(Stra8)的cDNA序列,构建pEGFP-C1-Stra8载体并制备鸡Stra8抗体。通过RT-PCR克隆苏禽黄鸡Stra8基因cDNA,构建pEGFP-C1-Stra8和pcDNA3.1(+)-Stra8重组质粒,分别转染NIH-3T3细胞和免疫小鼠制备抗体,间接免疫荧光法检测抗体效价以及在细胞中的分布。结果显示,苏禽黄鸡Stra8基因cDNA全长645bp,共编码214个氨基酸,提交至GenBank获得登录号为JX204292.1;成功制备Stra8多克隆抗体,pEGFP-C1-Stra8融合蛋白在NIH-3T3细胞质中表达。该结果为深入探讨禽类Stra8生物学功能奠定了基础。
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关键词
Stra8基因
质粒dna免疫
多克隆抗体
亚细胞定位
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职称材料
题名
密码修饰可增强沙眼衣原体MOMP DNA质粒免疫小鼠的免疫应答
1
作者
郑燕
赵蔚明
王红
周亚滨
栾怡
齐眉
程轶喆
唐伟
于晗
杨熙
机构
山东大学医学院微生物学教研室
加拿大曼尼托巴大学医学微生物系
出处
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第1期92-96,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30271193
30310403165)
山东省自然科学基金资助项目(Y2002004)
文摘
目的探讨密码修饰对沙眼衣原体主要外膜蛋白(MOMP)基因表达和DNA质粒免疫的影响。方法根据人类密码子使用偏好对鼠肺炎沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis mouse pneumoni-tis)MOMP基因进行优化修饰,设计合成人源化MOMP基因(HuMOMP)。构建以pcDNA3为载体的含HuMOMP及含野生型MOMP基因(WtMOMP)的真核表达质粒。瞬时转染COS-1细胞,Western blot方法比较HuMOMP基因及WtMOMP基因在哺乳动物细胞中的蛋白表达水平。DNA质粒肌内免疫BALB/c小鼠,检测小鼠血清特异性抗体、DTH和淋巴细胞增殖反应,比较优化密码MOMP基因和野生型MOMP基因DNA质粒免疫的免疫效果。结果人工合成HuMOMP基因,成功构建重组真核表达质粒pcDNA3-HuMOMP及pcDNA3-WtMOMP。转染细胞Western blot结果显示,HuMOMP基因的蛋白表达水平明显高于WtMOMP基因。ELISA结果表明,HuMOMP DNA质粒免疫组小鼠血清特异性IgG抗体有所升高;细胞免疫检测结果显示,HuMOMP DNA质粒免疫组小鼠足垫肿胀程度增强、淋巴细胞增殖实验刺激指数(SI)增高,两者与WtMOMP DNA质粒免疫组相比P<0.05,差异均有统计学意义。结论人源化密码修饰能够增强沙眼衣原体MOMP基因在哺乳动物细胞中的蛋白表达及DNA质粒免疫小鼠的免疫反应,这对于新型衣原体DNA疫苗的研究具有重要意义。
关键词
沙眼衣原体
MOMP
密码子
蛋白表达
dna
质粒
免疫
Keywords
Chlamydia trachomatis
MOMP
Codon
Protein expression
dna
immunization
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
鸡Stra8基因真核表达载体构建及亚细胞定位的研究
被引量:
2
2
作者
王丹
张振韬
施青青
黄晓梅
朱才业
郑蒙蒙
李伟
徐剑蓉
王克华
李碧春
机构
扬州大学动物科学与技术学院
扬州市邗江区畜牧兽医站
中国农业科学院家禽研究所
出处
《中国家禽》
北大核心
2013年第8期10-13,共4页
基金
国家自然科学基金(31272429)
文摘
试验旨在克隆苏禽黄鸡视黄酸激活基因8(Stra8)的cDNA序列,构建pEGFP-C1-Stra8载体并制备鸡Stra8抗体。通过RT-PCR克隆苏禽黄鸡Stra8基因cDNA,构建pEGFP-C1-Stra8和pcDNA3.1(+)-Stra8重组质粒,分别转染NIH-3T3细胞和免疫小鼠制备抗体,间接免疫荧光法检测抗体效价以及在细胞中的分布。结果显示,苏禽黄鸡Stra8基因cDNA全长645bp,共编码214个氨基酸,提交至GenBank获得登录号为JX204292.1;成功制备Stra8多克隆抗体,pEGFP-C1-Stra8融合蛋白在NIH-3T3细胞质中表达。该结果为深入探讨禽类Stra8生物学功能奠定了基础。
关键词
Stra8基因
质粒dna免疫
多克隆抗体
亚细胞定位
Keywords
Stra8 gene
plasmid
dna
immunization
polyclonal antibody
sub-cellular localization
分类号
S572 [农业科学—烟草工业]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
密码修饰可增强沙眼衣原体MOMP DNA质粒免疫小鼠的免疫应答
郑燕
赵蔚明
王红
周亚滨
栾怡
齐眉
程轶喆
唐伟
于晗
杨熙
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006
0
原文传递
2
鸡Stra8基因真核表达载体构建及亚细胞定位的研究
王丹
张振韬
施青青
黄晓梅
朱才业
郑蒙蒙
李伟
徐剑蓉
王克华
李碧春
《中国家禽》
北大核心
2013
2
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