兰州市大气PM_(10)对质粒DNA的损伤

使用质粒DNA评价法研究了2005年12月～2006年10月兰州市区、郊区大气中PM10对质粒DNA的氧化性损伤，并初步探讨了其损伤原因．结果表明，PM10对质粒DNA的氧化性损伤具有冬、夏季相对较高，春、秋季相对较低的特征．市区冬、春、夏、秋季大气PM10全样的TD20平均值分别为17,625，56，260μg／mL，水溶部分的TD20平均值分别为62，840，193，403μg／mL．沙尘暴期间和降雨数天后，PM10对质粒DNA的氧化性损伤相对较小，其全样和水溶部分的TD20值均大于1000μg/mL．PM10全样和水溶部分的TD20值均与样品中12种水溶性微量元素总含量呈明显的负相关关系，表明PM10对质粒DNA的氧化性损伤能力主要来自其水溶性微量元素．

乌鲁木齐大气PM_(2.5)对质粒DNA的损伤研究

2012年1月-2012年12月采集乌鲁木齐大气 PM 2.5样品,使用质粒 DNA评价法研究了不同季节 PM 2.5的氧化能力,并进行氧化性毒性与相应气象因素和质量浓度之间的相关性研究.结果表明,乌鲁木齐大气 PM 2.5的质量浓度具有冬季最高,春季和秋季次之,夏季最低的季节性变化特征；PM 2.5全样和水溶部分氧化能力的季节差异较大,对质粒 DNA 的氧化性损伤具有冬季最大,春季和夏季之次,秋季最低.冬、春、夏、秋季大气 PM 2.5全样的 TD 30（PM 2.5对质粒 DNA 造成破坏达到30%所需要的颗粒物的剂量）平均值分别为440,491,503,515μg/mL,水溶部分分别为474,721,666,600μg/mL.绝大部分PM 2.5样品全样的TD 30值均小于水溶部分样,表明全样的毒性大于相应的水溶部分样.全样TD 30值与平均温度显著（P＆lt;0.05）正相关,表明寒冷的天气/季节可能造成PM 2.5的高毒性.水溶样 TD 30值与风速显著（P＆lt;0.01）正相关,与相对湿度显著负相关.这表明,高的风速和低的相对湿度可能跟较低和较高的PM 2.5的毒性有关.PM 2.5氧化性损伤能力的大小与其质量浓度之间的相关性不明显,表明仅以颗粒物的质量浓度来评价大气颗粒物氧化性损伤能力大小的方法并不能真实地反映其对人体健康的危害程度,起决定作用的还是颗粒物的化学组成及其表面吸附的有害成分.

极干旱区大气PM_(2.5)对质粒DNA的氧化性损伤研究

近年来和田经济迅速发展及城市人口快速增长,汽车尾气、工业废气等各类污染物的城区排放量也在不断增加,加重了和田市大气污染。为评估和田市城区风速、沙尘天气对大气PM_(2.5)毒性的影响,于2014年1月、4月、7月、10—11月采集大气PM_(2.5)样品,应用质粒DNA评价法研究其PM_(2.5)的氧化性损伤能力。结果表明,采样期间,和田市城区大气PM_(2.5)质量浓度的变化范围为70~2489μg·m^(-3),PM_(2.5)质量浓度有随风速增大而增大的趋势。应用TD30(造成30%DNA损伤率所需的颗粒物剂量,μg·mL^(-1))值指示颗粒物氧化性损伤能力,结果表明,TD30越高,颗粒物氧化性损伤能力越弱,全样和水溶部分TD30值的变化范围分别为444~27480μg·mL^(-1)和481~20434μg·m L^(-1);不论是全样还是水溶部分,其对质粒DNA的氧化性损伤均表现出随风速减小而增大的变化趋势;沙尘和非沙尘期间全样TD30的平均值分别为9464μg·mL^(-1)和8008μg·mL^(-1),而水溶部分分别为5494μg·mL^(-1)和7822μg·mL^(-1),即沙尘期间采集的颗粒物对体外DNA的氧化性损伤小于非沙尘期间采集的样品,且非沙尘期间采集的样品的全样损伤大于相应的水溶部分样,而沙尘状况下体外DNA的氧化性损伤可能主要来源于水溶成分。全样和水溶部分的TD30平均值与PM_(2.5)平均质量浓度之间存在明显的正相关趋势,说明颗粒物的质量浓度对DNA氧化损伤起着一定的作用。

煤矿区城市可吸入颗粒物基于DNA损伤的毒理学

采集2008年煤矿区城市平顶山PM10样品,使用质粒DNA评价法(PlasmidDNAassay)研究了夏季和冬季PM10的毒性。结果表明,不同时间和地点采集的PM10对质粒DNA的损伤差别很大,它们的TD50值(引起50%DNA损伤所需要的颗粒物剂量,以μg/mL表示)相差近10倍;单位质量颗粒物对DNA损伤率顺序:市区冬季>郊区冬季>背景点夏季>郊区夏季>市区夏季;同季节市区和郊区PM10对质粒DNA损伤率差别不大,但不同季节的PM10对质粒DNA损伤率则相差较大,且冬季PM10损伤明显大于夏季;冬季PM10对DNA损伤较大的原因可能与冬季燃煤空气中重金属元素增加有关。通过对颗粒物全样和水溶部分DNA损伤的评价得出,夏季市区和郊区PM10的氧化性损伤能力与颗粒物中的水溶和不溶部分都有较大关系,冬季市区、郊区和夏季背景点PM10的氧化性损伤能力主要来源于颗粒物中的水溶组分。

室内PM_(10)对DNA氧化性损伤及其与微量元素组成关系

使用质粒DNA评价法(plasmid DNA assay)和电感偶合等离子体质谱(ICP-MS)研究了北 京市室内外PM10(可吸入颗粒物)的生物活性及与微量元素的关系.选择了4组样品分别代表吸烟 室内(1),非吸烟室内(2)和相应室外(1)进行质粒DNA评价研究.结果表明,室内PM10对超螺旋 DNA的氧化性损伤高于室外;吸烟室内PM10的TD50(引起50％DNA损伤所需的颗粒物剂量)低 达100 μg·mL-1,对DNA氧化性损伤最大,说明吸烟室内PM10的生物活性最大.结合微量元素 分析发现,吸烟室内PM10的水溶性Zn与TD50负相关性较其他元素强,说明水溶性Zn可能对 DNA的氧化性损伤起重要作用.Fe元素虽然被认为是最具生物活性的元素之一,但是在所分析样 品中Fe元素多是以不可溶状态存在,因此对DNA损伤较弱.

DNA加合物在化学致癌危险性评价中的应用

ＤＮＡ加合物在化学致癌危险性评价中的应用朱家琦（中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所，北京１０００５０）研究环境中化学物质对人体致癌危险程度是毒理学领域中的重要课题。大多数化学致癌物进入体内后，经代谢活化、生成亲电子的活性中间物，它能与生物大分子，...

贵州主要城市PM_(2.5)的氧化性损伤评价

对贵州省主要城市(贵阳、安顺、遵义、都匀)按季节进行PM_(2.5)样品的采集,应用质粒DNA评价法研究了贵州省主要城市PM_(2.5)氧化性损伤能力,并与PM_(2.5)质量浓度、微量元素含量做相关性分析。结果表明,PM_(2.5)全样TD_(20)值均小于其相应的水溶样TD_(20)值;四个城市PM_(2.5)氧化性损伤能力均表现为冬季>秋季>春、夏季;城区PM_(2.5)氧化性损伤能力强于背景区;研究区内PM_(2.5)样品的氧化性损伤能力表现为都匀市最强,安顺市最弱;PM_(2.5)全样和水溶样的TD_(20)值与质量浓度之间无明显相关关系;PM_(2.5)水溶样的TD_(20)值与相应的12种微量元素的浓度总和呈负相关关系(P<0.05);全样Al、Mn、Cd、Pb的含量与PM_(2.5)全样TD_(20)值呈明显负相关关系,水溶样Cd、Pb、Cu的含量与PM_(2.5)水溶样TD_(20)值呈明显负相关关系,表明研究区PM_(2.5)氧化性损伤可能与样品中水溶性元素Cd、Pb、Cu等的含量有关。

北京西北城区一次重污染过程中PM_(10)的氧化损伤能力研究

为评估大气重污染期间北京市可吸入颗粒物(PM_(10))的毒性,采集2016年3月份一次大气重污染过程中北京市大气PM_(10)样品,应用质粒DNA损伤评价法来研究其氧化损伤能力。结果表明,雾霾期间PM_(10)对DNA的损伤率高于雾霾逐渐消退时期,远高于雾霾前期清洁天,颗粒物对DNA损伤率随剂量的增加而增加。雾霾前后PM_(10)水溶样品的平均TD_(20)值表现为雾霾前清洁天(788.01μg/mL)>雾霾消退后期(470.40μg/mL)>雾霾期间(55.78μg/mL),说明氧化能力雾霾期间>雾霾消退后期>雾霾前清洁天。另外通过雾霾前后数据对比得到,暴露毒性指数TI大小顺序为雾霾期间(13 245.06)>雾霾消退后期(1 658.87)>雾霾前清洁天(254.08),说明雾霾期间PM_(10)对人体危害更大。

人乳头瘤病毒(HPV)18型晚期蛋白L1 DNA疫苗的免疫原性及安全性

目的对HPV18型DNA疫苗的免疫原性和安全性进行初步评价。方法将HPV18L1基因与真核表达载体pcDNA3.1(+)连接,构建DNA疫苗质粒pcDNAL1。使用脂质体将重组质粒转染COS7细胞,用Westernblot检测体外瞬时表达的抗原。将重组质粒pcDNAL1肌肉注射BALBc小鼠(100μg只),加强免疫3次后分别采集血清,用ELISA法和Westernblot法检测抗体,实时荧光定量PCR法检测质粒的组织分布。采用ELISA法检测DNA疫苗免疫后抗核抗体和抗双链DNA抗体的效价。结果重组质粒可在真核细胞中有效地转录和表达HPV18L1蛋白。小鼠免疫后可检出较高滴度的抗HPV18L1抗体和特异条带。免疫后质粒主要分布在注射部位,且随着时间延长被清除;未检测到抗核抗体和抗双链DNA抗体。结论HPV18L1重组质粒可诱导小鼠产生特异的体液免疫反应,且该DNA疫苗是安全的,为进一步研制开发HPVDNA疫苗打下了基础。

城市大气可吸入颗粒物对质粒DNA的氧化性损伤

使用质粒DNA评价法(Plasmid DNA assay)研究了在北京市市区、郊区卫星城市南口镇和清洁对照点十三陵水库地区采集的PM10和PM2.5样品及部分源颗粒物的生物活性.结果表明,沙尘暴期间采集的颗粒物对DNA的生物活性小于非沙尘暴期间采集的样品.不同时间和地点采集的大气颗粒物样品对质粒DNA的损伤差别很大,它们的TM50(造成50％的DNA损伤所需的剂量)相差可高达一个数量级,其原因,可能是北京市大气颗粒物中矿物质量百分比的变化引起了生物活性较强的细颗粒物相对含量的改变.同PM10相比,大部分PM2.5样品的生物活性相对较大.最后,对比水溶和总体颗粒物质粒DNA评价的结果得出,大气颗粒物中的水溶组分是其生物活性的主要来源.

兰州市大气PM_(10)健康影响效应的可预报性探讨

使用质粒DNA评价法研究了兰州市大气PM10对质粒DNA的氧化性损伤能力及其与ρ(PM10)、采样期间的风速、相对湿度等气象要素之间的关系.结果表明:兰州市大部分PM10对质粒DNA的氧化性损伤能力与ρ(PM10)呈正相关.兰州市PM10全样对质粒DNA的氧化性损伤能力与采样期间的相对湿度和平均风速分别呈正相关和负相关,相关系数分别为0.531和-0.673.通过分析PM10对质粒DNA的氧化性损伤原因可知,PM10对人体健康的影响效应可用便于预报的ρ(PM10)、气象要素(相对湿度和风速等)等进行表征,即其可能具有可预报性.

阴霾天气PM_(10)的微观特征及生物活性研究

利用高分辨率场发射扫描电镜(FESEM)、图像分析技术(IA),对北京市2004年12月一次严重的阴霾天气条件下采集的PM10(指空气动力学直径小于10μm的颗粒物)的微观形貌、粒度分布、主要颗粒物类型进行了分析,并运用质粒DNA评价法对阴霾和非阴霾天气条件下的PM10样品的生物活性进行了对比研究。结果表明,阴霾天气时PM10样品中以粒度较小的烟尘及其集合体为主,且多呈湿状,含有较多的二次颗粒物,并发现了残余的有机液滴颗粒。质粒DNA实验的结果显示,阴霾天气PM10样品的水溶和全样样品的TD20值(造成20%DNA破坏时所需要的样品剂量)分别为93μg.ml-1和50μg.ml-1,而同一月份非阴霾天气条件下PM10样品的水溶和全样样品的TD20值分别为200μg.ml-1和160μg.ml-1,表明阴霾天气PM10样品比非阴霾天气样品具较强的生物活性,即对人体健康存在着潜在的危害。且无论是阴霾还是非阴霾天气条件下的PM10的全样样品均较水溶样品具更大的生物活性。

2014年APEC期间北京市PM_(10)和PM_(2.5)氧化性损伤能力研究

为评估APEC会议期间联防联控措施对北京市大气可吸入颗粒物毒性的影响,采集2014年APEC会议前后3个月北京市大气PM_(10)和PM_(2.5)样品,应用质粒DNA损伤评价法来研究其氧化性损伤能力.结果表明,APEC会议期间PM_(10)对DNA的损伤率高于PM_(2.5),颗粒物对DNA损伤率随剂量的增加而增加.本研究用TD30值来指示颗粒物氧化性损伤能力,TD30为引起30%的DNA损伤率所需要的颗粒物剂量(单位为μg·m L-1),TD30值越低,颗粒物氧化性损伤能力越强,APEC会议前后样品的TD30值表现为APEC期间(11月)>APEC前(10月)>APEC后(12月),说明氧化能力APEC后>APEC前>APEC期间.用PM_(10)质量浓度乘上其在250μg·m L-1剂量下的DNA损伤率得到颗粒物暴露毒性指数TI(toxic index),与往年具有代表性月份样品的数据对比,TI大小顺序为2004年>2014年>2008年,说明大气中颗粒物暴露毒性随着政策控制力度的加大而降低.

宣威肺癌高发区室内PM_(10)的生物活性研究

目的研究宣威肺癌高发地区室内可吸入颗粒物(PM10)的生物活性。方法采集宣威肺癌高发区虎头村和肺癌低发区宁家湾村冬季室内可吸入颗粒物样品,采用质粒DNA评价法(Plasmid DNA assay)评价PM10的生物活性,并利用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)对PM10的微量元素进行分析。结果虎头村室内PM10的生物活性高于对照组宁家湾村,结合微量元素分析发现,虎头村PM10的TD20值与锌(Zn)、铅(Pb)、镉(Cd)、砷(As)等水溶性微量元素的含量具有一定相关性,其中金属元素Zn和Pb与生物活性的相关性较其他元素强。结论在本试验条件下,水溶性过渡金属Zn、Pb等可能是导致虎头村室内PM10具有较高生物活性的重要因素。

兰州市大气PM_(10)的生物活性来源研究

为探讨兰州市大气可吸入颗粒物(PM10)的生物活性来源,使用质粒DNA评价法和电感耦合等离子质谱(ICP-MS)分别研究了兰州市市区和郊区不同季节PM10全样和水溶部分的生物活性和微量元素浓度.研究结果表明,兰州市不同季节、不同采样点PM10的生物活性差异较大,PM10全样和水溶部分的TD20最低值分别为10μg.mL-1和43μg.mL-1,最高值分别为980μg.mL-1和1150μg.mL-1.ICP-MS分析结果显示,PM10中全样和水溶性Zn元素的平均浓度最高,其次是Pb和Mn元素,且PM10中Zn、Cd和As等元素多以可溶状态存在,而Fe、Pb和V等元素则相反.PM10的TD20值与V、Cr、Mn、Co、Ni、Cu、Zn、As、Cd、Hg、Cs和Pb元素总浓度之间的相关性分析结果表明,兰州市PM10的生物活性主要来自水溶性微量元素.PM10全样和水溶部分的TD20值与单个水溶性Zn、Mn、Pb、Fe、V、Cu、Cr、Cd、Cs和Co元素之间具有显著的负相关性,表明这些水溶性元素可能是导致兰州市质粒DNA损伤的主要原因.