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利用原子力显微术在纳米尺度上检测植物细胞质膜完整性
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作者 苏晓 高永伟 +1 位作者 林金星 李晓娟 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期68-74,共7页
目的:探究原子力显微镜检测植物细胞质膜的损伤程度及其定量分析的方法。方法:采用酶解法制备拟南芥原生质体,原生质体经MβCD(Methyl-β-cyclodextrin)处理造成质膜损伤后,利用原子力显微镜进行成像,最后通过NanoScope Analysis软件进... 目的:探究原子力显微镜检测植物细胞质膜的损伤程度及其定量分析的方法。方法:采用酶解法制备拟南芥原生质体,原生质体经MβCD(Methyl-β-cyclodextrin)处理造成质膜损伤后,利用原子力显微镜进行成像,最后通过NanoScope Analysis软件进行成像分析,对粗糙度Ra(平均粗糙度)、Rq(均方根粗糙度)和Rmax(最高数据点和最低数据点之间的最大垂直距离)值以及从孔隙周围的长轴和短轴上测量获得孔隙的直径和深度进行了系统的测算。结果:与对照组对比,经MβCD处理的样品表面出现大量的孔隙,且粗糙度Ra、Rq和Rmax值均显著高于对照组。结论:原子力显微镜可以检测拟南芥细胞质膜的损伤,并对损伤程度进行定量分析,为探究质膜完整性提供了一个可行的新思路。 展开更多
关键词 原子力显微镜 植物质膜 质膜完整性
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溶脲脲原体感染对男性不育患者精子质膜完整性的影响 被引量:16
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作者 夏欣一 安丽梅 +6 位作者 李卫巍 李科 邵永 商学军 姚兵 崔英霞 黄宇烽 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1069-1072,共4页
目的:应用荧光染料SYBR-14/碘化丙锭(PI)双标法流式细胞术检测溶脲脲原体(Uu)感染对男性不育患者精子质膜完整性的影响。方法:收集63例男性精液标本,分为Uu感染组(n=32)和正常对照组(n=31)。通过计算机辅助精液分析系统进行精液常规分析... 目的:应用荧光染料SYBR-14/碘化丙锭(PI)双标法流式细胞术检测溶脲脲原体(Uu)感染对男性不育患者精子质膜完整性的影响。方法:收集63例男性精液标本,分为Uu感染组(n=32)和正常对照组(n=31)。通过计算机辅助精液分析系统进行精液常规分析,培养法进行Uu检测。精液标本经PBS洗涤处理后用荧光染料SYBR-14/PI双染后上流式细胞仪分析,用发绿色荧光精子百分率(SYBR-14+/PI-%)表示质膜完整精子的比例,检测精子质膜完整性。结果:Uu感染组精子质膜完整性[(45.14±10.69)%versus(72.68±9.91)%]和(a+b)级精子百分率[(23.29±8.81)%versus(46.32±9.54)%]均显著低于正常对照组(P<0.01),两组间精液量、pH值、精子浓度差异无显著性(P>0.05)。结论:Uu感染引起精子质膜完整性下降,可能是导致男性不育的重要原因之一。 展开更多
关键词 溶脲脲原体 SYBR-14/PI双染法 精子 质膜完整性 流式细胞术
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SYBR-14/PI双染法流式细胞术检测精子质膜完整性的研究 被引量:9
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作者 周鑫 夏欣一 +5 位作者 曹奇 康宁 范晓博 邵永 李瑛 黄宇烽 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期589-593,共5页
目的:探讨应用荧光染料SYBR-14/碘化丙啶(SYBR-14/PI)双色标记法进行流式细胞术检测精子质膜完整性的可行性及其临床意义。方法:收集208例男性精液标本,按WHO精液分析标准分为正常组(n=31)与异常组(n=177)。通过计算机辅助精液分析系统... 目的:探讨应用荧光染料SYBR-14/碘化丙啶(SYBR-14/PI)双色标记法进行流式细胞术检测精子质膜完整性的可行性及其临床意义。方法:收集208例男性精液标本,按WHO精液分析标准分为正常组(n=31)与异常组(n=177)。通过计算机辅助精液分析系统进行精液常规分析。精液标本洗涤处理后经SYBR-14/PI双染后上流式细胞仪(FCM)分析,用发绿色荧光精子百分率(SYBR-14+/PI-%)表示质膜完整精子(PMI)的比例。结果:正常组与异常组SYBR-14+/PI-与SYBR-14-/PI+精子百分率均存在统计学差异(P均<0.05)。正常组精子SYBR-14+/PI-%为(55.66±20.64)%,显著高于异常组[(39.71±19.21)%,P=0.000]。208例标本中,SYBR-14+/PI-%与精子活动率呈显著正相关(r=0.408,P=0.000),与(a+b)级精子百分率呈显著正相关(r=0.398,P=0.000),与d级精子百分率呈显著负相关(r=-0.413,P=0.000);SYBR-14-/PI+%与精子活动率呈显著负相关(r=-0.380,P=0.000),与(a+b)级精子百分率呈显著负相关(r=-0.397,P=0.000),与d级精子百分率呈显著正相关(r=0.385,P=0.000);SYBR-14+/PI+%与精子活动率呈正相关(r=0.172,P=0.013),与(a+b)级精子百分率呈正相关(r=0.177,P=0.011),与d级精子百分率呈负相关(r=-0.164,P=0.018)。结论:应用流式细胞术SYBR-14/PI双染法检测精子质膜完整性具有可行性,可用于评估男性生育力。 展开更多
关键词 SYBR-14/PI双染法 精子 质膜完整性 流式细胞术
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流式细胞术检测精索静脉曲张患者精子质膜完整性的研究 被引量:5
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作者 安丽梅 马洁桦 +3 位作者 李卫巍 夏欣一 黄宇烽 王文兵 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期984-988,共5页
目的:应用荧光染料SYBR-14/PI双色标记法进行流式细胞术检测精索静脉曲张患者精子质膜的完整性并探讨其临床意义。方法:随机收集120例男性精液标本,其中90例左侧精索静脉曲张患者分为3组:VC1组(精索静脉曲张Ⅰ度,n=30)、VC2组(精索静脉... 目的:应用荧光染料SYBR-14/PI双色标记法进行流式细胞术检测精索静脉曲张患者精子质膜的完整性并探讨其临床意义。方法:随机收集120例男性精液标本,其中90例左侧精索静脉曲张患者分为3组:VC1组(精索静脉曲张Ⅰ度,n=30)、VC2组(精索静脉曲张Ⅱ度,n=30)和VC3组(精索静脉曲张Ⅲ度,n=30),正常生育男性为正常对照组(n=30)。通过计算机辅助精液分析系统进行精液常规分析。精液标本经PBS洗涤处理后用荧光染料SYBR-14/碘化丙锭(PI)双染后上流式细胞仪分析,用发绿色荧光精子百分率(SYBR-14+/PI-%)表示质膜完整精子(PMI)的比例,检测精子质膜完整性,并预见精子的受精能力。结果:精索静脉曲张各组患者与正常对照组之间SYBR-14+/PI-%、SYBR-14-/PI+%均存在统计学差异(P<0.01)。精索静脉曲张患者(VC1、VC2、VC3)代表精子质膜完整性指标(SYBR-14+/PI-%)的百分率分别是:[(54.85±3.78)%]、[(45.37±4.12)%]、[(35.14±4.91)%],均显著低于正常对照组[(70.79±6.71)%],其活力顺序为VC3<VC2<VC1<对照组;120例精液标本的相关性分析表明:SYBR-14+/PI-%与精子活动率呈显著正相关(r=0.965,P<0.01),与(a+b)级精子百分率呈显著正相关(r=0.874,P<0.01),与d级精子百分率呈显著负相关(r=-0.965,P<0.01),而与pH、精液量和液化时间无显著性差异(P>0.05)。结论:应用流式细胞术SYBR-14/PI双染法能快速、准确地检测精子质膜完整性,精索静脉曲张引起精子质膜完整性下降,可能是导致男性不育的重要原因之一。 展开更多
关键词 精索静脉曲张 精子 SYBR-14/PI双染法 质膜完整性 流式细胞术
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流式细胞术检测吸烟对精子质膜完整性的影响 被引量:4
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作者 李卫巍 李娜 +4 位作者 吴秋月 夏欣一 崔英霞 黄宇烽 姚勤 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2012年第12期1093-1096,共4页
目的:应用荧光染料SYBR-14/PI双色标记法进行流式细胞术检测不育患者精子质膜完整性,分析吸烟对精子质膜完整性的影响并探讨其临床意义。方法:收集202例男性精液标本,其中132例为本院就诊男性不育患者,分为大烟量组(n=68)与小烟量组(n=6... 目的:应用荧光染料SYBR-14/PI双色标记法进行流式细胞术检测不育患者精子质膜完整性,分析吸烟对精子质膜完整性的影响并探讨其临床意义。方法:收集202例男性精液标本,其中132例为本院就诊男性不育患者,分为大烟量组(n=68)与小烟量组(n=64),正常生育男性为正常对照组(n=70)。通过计算机辅助精液分析系统进行精液常规分析。精液标本经PBS洗涤处理后用荧光染料SYBR-14/碘化丙锭(PI)双染后上流式细胞仪分析,用SYBR-14+/PI-(绿)表示质膜完整精子(PMI);SYBR-14-/PI+(红)表示质膜破损而坏死的精子;SYBR-14+/PI+(绿,红)表示正处于由活到死过度状态的精子。检测精子质膜完整性,并对精子质膜完整性与部分精液参数做相关性分析。结果:大烟量组与小烟量组质膜破损的坏死精子(SYBR-14-/PI+%)、过渡态的精子(SYBR-14+/PI-%)与正常对照组存在显著差异(P<0.01或0.05)。大烟量组SYBR-14+/PI-%明显低于小烟量组,SYBR-14-/PI+%明显高于小烟量组。所有202例标本SYBR14+/PI-%与精子活动率呈显著正相关(r=0.938,P=0.000)。结论:应用流式细胞术SYBR-14/PI双染法能快速、准确地检测精子质膜完整性。吸烟会导致精子质膜完整性下降,引起精子活力下降,可能是导致男性不育的重要原因之一。 展开更多
关键词 吸烟 精子 质膜完整性 流式细胞术
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低温保存对绵羊精子质膜完整性的影响 被引量:5
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作者 徐振军 刘黎明 +3 位作者 刘冰 赵冰 张红霞 黄亚斐 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第3期48-50,共3页
为了探讨低温保存对绵羊精子质膜完整性的影响,研究采用低渗肿胀-伊红拒染(HOS-EY)法检测低温保存前后绵羊精子头膜和尾膜的完整性。试验设计了5个HOS-EY低渗染液浓度梯度组合(110,130,150,170,190 mOsm),按精子尾部肿胀与否和头部着色... 为了探讨低温保存对绵羊精子质膜完整性的影响,研究采用低渗肿胀-伊红拒染(HOS-EY)法检测低温保存前后绵羊精子头膜和尾膜的完整性。试验设计了5个HOS-EY低渗染液浓度梯度组合(110,130,150,170,190 mOsm),按精子尾部肿胀与否和头部着色与否分为4种类型进行统计。结果表明:低温保存后,绵羊精子头膜、尾膜均完整的Ⅳ型精子发生率和头膜、尾膜均损伤的Ⅰ型精子发生率与鲜精相比分别极显著减少和增多(P<0.01),说明低温保存过程对精子质膜完整性有极显著影响;在低温保存过程中头膜损伤-尾膜完整的Ⅱ型精子发生率极显著增多(P<0.01),而头膜完整-尾膜损伤的Ⅲ型精子发生率显著减少(P<0.05),说明精子头膜或尾膜的损伤是独立发生的,且头膜比尾膜更易损伤。5种低渗液中,150 mOsm染液检测效果最好。 展开更多
关键词 低温保存 绵羊精子 质膜完整性
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不同降温速率对奶绵羊冻后精子质膜和线粒体膜完整性的影响 被引量:4
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作者 乌日汉 郑重 +7 位作者 王俊琴 窦英杰 张功 张立果 程磊 武云喜 李光鹏 张立 《内蒙古大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2019年第6期654-659,共6页
冻精的生产和应用可充分保存和利用优秀种畜的遗传资源并加快品种改良进程.然而,目前绵羊的冻精技术体系还不完善.戴瑞羊(DairyMeade)是国内引进的新型乳用绵羊品种,为建立适用于戴瑞羊的细管冻精生产方案,本研究选用3只18月龄的戴瑞种... 冻精的生产和应用可充分保存和利用优秀种畜的遗传资源并加快品种改良进程.然而,目前绵羊的冻精技术体系还不完善.戴瑞羊(DairyMeade)是国内引进的新型乳用绵羊品种,为建立适用于戴瑞羊的细管冻精生产方案,本研究选用3只18月龄的戴瑞种公羊(N1、N2、N3),在冷冻曲线的-10℃^-100℃危险温区内设置8个降温速率(30℃/min^100℃/min,间隔10℃/min),利用程序化冷冻仪生产细管冻精,并比较了冻后精子的质膜完整率、线粒体膜完整率和IVF后的胚胎卵裂率.结果显示:1、N1羊60℃/min、70℃/min和80℃/min三个降温速率下冻后精子质膜完整率无显著差异,但显著高于其他5个降温速率组(P<0.05);N2与N3羊60℃/min降温速率下的冻后精子质膜完整率与80℃/min组差异不显著,但显著高于其他6个降温速率组(P<0.05);2、三只羊60℃/min降温速率下冻后精子的线粒体膜完整率与70℃/min降温速率组无显著差异,但显著高于其他6个降温速率组(P<0.05);3、60℃/min组冻后精子体外受精后的胚胎卵裂率最高.结果表明,在-10℃^-100℃降温区间内60℃/min的降温速率可获得质量较好的戴瑞羊细管冻精.本研究为戴瑞奶绵羊冻精程序的优化提供了理论依据. 展开更多
关键词 奶绵羊 冷冻精液 降温速率 质膜完整性 线粒体膜完整性
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盐胁迫下不同抗性小麦幼苗生理生化特性及转录组分析
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作者 李双 王爱英 +3 位作者 焦浈 池青 孙昊 焦涛 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期20-32,共13页
为探究不同抗盐性小麦对盐胁迫的响应差异,选用‘百农889’和‘中国春’小麦品种,利用200 mmol·L^(-1)NaCl溶液处理离体叶片和小麦幼苗,对盐胁迫后小麦幼苗叶片的生理、生化特征进行分析,并基于转录组数据分析差异基因表达及可变... 为探究不同抗盐性小麦对盐胁迫的响应差异,选用‘百农889’和‘中国春’小麦品种,利用200 mmol·L^(-1)NaCl溶液处理离体叶片和小麦幼苗,对盐胁迫后小麦幼苗叶片的生理、生化特征进行分析,并基于转录组数据分析差异基因表达及可变剪切事件。结果表明,盐胁迫下,‘百农889’离体叶片的失绿程度较‘中国春’轻微;伊文思蓝染色后,‘中国春’离体叶片的蓝色着色范围更大,且细胞相对活性显著降低;‘中国春’幼苗表现出明显的萎蔫、倒伏,‘百农889’幼苗的形态与对照组无明显差异;2个品种的相对电解质渗漏率都有所增加,但‘中国春’幼苗的相对电解质渗漏率增幅更大;‘中国春’的净光合速率(net photosynthetic rate,Pn)和气孔导度(stomatal conductance,Gs)受到显著抑制,‘百农889’的净光合速率和气孔导度与对照比无明显变化。转录组测序结果分析表明,与‘中国春’相比‘,百农889’中上调差异表达基因2299个,下调差异表达基因2527个;对差异表达基因的GO(gene ontology)富集分析发现,与叶绿体、光合作用和质膜相关的功能基因被显著富集;KEGG(Kyoto encyclopedia of genes and genomes)富集分析发现,与植物激素信号转导和植物次生代谢物相关的通路被显著富集。盐胁迫下,‘中国春’表现出更多的可变剪切事件,且主要富集在RNA转运和内质网蛋白加工等通路中。因此,小麦可以通过调控与叶绿素、质膜、次生代谢物以及光合作用相关基因的表达来抵抗盐胁迫,可变剪切事件的发生也说明小麦可以通过调控基因互作网络来应对盐胁迫。 展开更多
关键词 小麦 盐胁迫 形态指标 光合作用 质膜完整性 叶绿素 转录组测序
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肝素处理山羊精子体外获能的研究 被引量:13
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作者 周佳勃 吴延光 +5 位作者 刘丽清 罗明玖 常仲乐 谭秀文 刘娜 谭景和 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期252-256,共5页
系统研究了作用浓度、时间和温度以及输卵管上皮细胞和卵丘细胞对肝素处理山羊精子体外获能后的精子活力、质膜完整性、顶体完整率、获能比例及受精和卵裂的影响 ,为改善山羊精子体外获能效果和研究获能机理提供了必要的数据。主要实验... 系统研究了作用浓度、时间和温度以及输卵管上皮细胞和卵丘细胞对肝素处理山羊精子体外获能后的精子活力、质膜完整性、顶体完整率、获能比例及受精和卵裂的影响 ,为改善山羊精子体外获能效果和研究获能机理提供了必要的数据。主要实验结果如下 :1 在获能液中添加 5、10、2 5、50和 10 0 μg mL肝素处理 45min时 ,添加 50和10 0 μg mL肝素精子获能比率最高 (分别为 55%和 56% ) ,但添加 10 0 μg mL肝素处理后顶体完整率明显 (P <0 0 5)低于对照组。说明山羊精子获能的最佳肝素浓度为 50 μg mL。 2 随肝素作用时间 (0 ,10 ,2 0 ,3 0 ,45,60和 12 0min)的延长 ,获能精子比例逐渐提高。其中 ,肝素处理 45~ 12 0min各组的获能精子比例差异不显著 (P >0 0 5) ,处理12 0min组的精子活力和质膜完整率显著低于其它各组。说明 50 μg mL肝素处理精子获能的最佳时间是 45~ 60min。 3 在 42℃和 3 8 5℃下处理时 ,获能精子比例显著高于 15℃和 3 7℃ ,但 42℃处理后精子活力和顶体完整率显著低于其它温度。因此 ,3 8 5℃为山羊精子获能的最佳温度。 4 与输卵管上皮细胞共培养获能精子比例显著高于对照组和卵丘细胞组 ,但精子活力、质膜完整率和顶体完整率差异不显著。输卵管上皮组的受精率 (91 3 % )和卵? 展开更多
关键词 肝素 山羊 精子 体外获能 体外受精 质膜完整性 顶体完整 卵裂
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流式细胞术在精子功能检测中的应用 被引量:12
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作者 华咏 钱宪明 +4 位作者 陈炳官 杨建华 吴晓云 马亮 陈翠玲 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2006年第7期608-611,共4页
目的:研究流式细胞术在精子功能评价中的作用。方法:对104例男性不育患者和10例正常生育男性的精液标本进行精液量、精子密度、活动率、畸形率等精液常规分析(CASA法),对精子存活率、染色质结构和线粒体膜电位等进行流式细胞术分析,并... 目的:研究流式细胞术在精子功能评价中的作用。方法:对104例男性不育患者和10例正常生育男性的精液标本进行精液量、精子密度、活动率、畸形率等精液常规分析(CASA法),对精子存活率、染色质结构和线粒体膜电位等进行流式细胞术分析,并将检测结果通过SAS软件进行统计学分析。结果:成组U检验结果表明:不育患者的精子与正常生育男性精子相比除了具有密度低(U=2.51,P=0.014 3)、活动率差(U=3.44,P=0.001)、畸形率高(U=-5.88,P<0.000 1)等特点外,经流式细胞术测定精子结果表明不育男性的精子质膜完整率(U=4.72,P<0.000 1)、线粒体膜电位正常率(U=-2.53,P=0.030 9)和染色质完整率(αt:U=-3.82,P=0.000 3;SDαt:U=-3.98,P=0.000 1;COMPαt:U=-3.57,P=0.000 5)均显著低于正常生育男性。多元逐步回归分析结果表明:精子质膜完整性与精子活动率(t=1.66,P=0.101 6)、精子的线粒体膜电位与精子活动率(t=3.33,P=0.001 4)、精子染色质的完整性与精子活动率(t=3.24,P=0.001 9)均呈正相关,而精子的线粒体膜电位与精子颈、尾部的畸形率呈负相关(t=-3.44,P=0.001)。结论:流式细胞仪测定对精子质量评定意义显著,对男性不育的诊断和治疗也具有较高的参考价值。 展开更多
关键词 精子 流式细胞术 质膜完整性 染色质结构分析 线粒体膜电位
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不同稀释液对猪精液常温保存效果的影响 被引量:6
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作者 洪洁赟 刘玉 +4 位作者 莫金鑫 王立强 李青旺 侯丽鹏 胡建宏 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期10-14,共5页
为研究适宜于大白猪精液常温保存的稀释液配方,以精子活率、质膜完整率、顶体完整率和呼吸强度为测定指标,分析4种不同配方的稀释液常温下保存大白猪精液的效果。结果表明,经48h保存后,稀释液Ⅰ和Ⅱ保存的精子活率、质膜完整性和顶体完... 为研究适宜于大白猪精液常温保存的稀释液配方,以精子活率、质膜完整率、顶体完整率和呼吸强度为测定指标,分析4种不同配方的稀释液常温下保存大白猪精液的效果。结果表明,经48h保存后,稀释液Ⅰ和Ⅱ保存的精子活率、质膜完整性和顶体完整率分别达到54%、58%和88%,显著优于其他组(P<0.05)。经稀释液Ⅰ和Ⅱ保存的精子的呼吸强度分别为7.25min和8.25min,显著优于稀释液Ⅲ、Ⅳ和对照组(P<0.05),但稀释液Ⅰ和Ⅱ差异不显著(P>0.05)。因此,稀释液Ⅰ和Ⅱ是大白猪精液常温保存的适宜稀释液。 展开更多
关键词 常温保存稀释液 精子活率 质膜完整性 顶体完整性 呼吸强度
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β-氨基丁酸抑制草莓低温贮藏过程中灰霉病的效果及其机理 被引量:4
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作者 王雷 李华 +4 位作者 张华 王会 金鹏 赵燕 郑永华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第21期272-278,共7页
以‘红颜’草莓为实验材料,研究β-氨基丁酸(β-aminobutyric acid,BABA)对草莓果实采后贮藏在低温((5±1)℃)条件下灰霉病的抑制效果及相关机理。草莓果实经过20 mmol/L的BABA处理后接种灰葡萄孢霉(Botrytis cinerea)孢子,然后在(5... 以‘红颜’草莓为实验材料,研究β-氨基丁酸(β-aminobutyric acid,BABA)对草莓果实采后贮藏在低温((5±1)℃)条件下灰霉病的抑制效果及相关机理。草莓果实经过20 mmol/L的BABA处理后接种灰葡萄孢霉(Botrytis cinerea)孢子,然后在(5±1)℃的条件下贮藏12 d,结果发现BABA显著抑制了灰霉病的发生和病斑直径的扩展,与对照组相比,处理组几丁质酶(chitinase,CHI)和β-1,3-葡聚糖酶(β-1,3-glucanase,GLU)的活力分别提高了9.2%和54.9%,多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG)和纤维素酶(cellulose,Cel)的活力分别降低了29.3%和24.4%,同时,BABA提高了FaCHI和FaGLU基因的表达,抑制了FaPG和FaCel基因的表达;此外,体外实验的结果发现,BABA能够破坏灰葡萄孢霉孢子的质膜完整性,导致了孢子内部可溶性蛋白质和可溶性糖的泄漏。结果表明,BABA通过诱导抗病相关酶活力来提高抗病性、延缓果实软化并通过对病原菌的直接抑制作用减轻草莓果实采后灰霉病的发生。 展开更多
关键词 草莓 Β-氨基丁酸 灰葡萄孢霉 诱导抗性 基因表达 质膜完整性
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猪精液中精子质量的检测 被引量:4
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作者 徐立滨 霍立军 +1 位作者 于浩 高飞 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2005年第5期32-33,共2页
关键词 精液 精子质量 检测方法 染料 质膜完整性 线粒体活性 顶体完整性 获能状态
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IGF-Ι对绵羊冷冻精液质量的影响 被引量:1
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作者 林嘉鹏 唐淑红 +2 位作者 吴阳升 汪立芹 黄俊成 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期498-502,共5页
【目的】探讨冻精稀释液中添加类胰岛素生长因子-I(IGF-Ι)对绵羊冷冻精液质量的影响,明确最佳的IGF-Ι添加浓度,为提高绵羊冻精受精率和加速其品种改良奠定基础。【方法】以特克赛尔年轻种公羊的精液为试验材料,在冻精稀释液中添加不... 【目的】探讨冻精稀释液中添加类胰岛素生长因子-I(IGF-Ι)对绵羊冷冻精液质量的影响,明确最佳的IGF-Ι添加浓度,为提高绵羊冻精受精率和加速其品种改良奠定基础。【方法】以特克赛尔年轻种公羊的精液为试验材料,在冻精稀释液中添加不同浓度(0、50、100、150和250 ng/m L)的IGF-Ι,通过SYBR-14/PI双染法、低渗肿胀试验和吖啶橙(AO)染色法检测解冻精液在孵育0、1和2 h后的顶体完整性、质膜完整性和DNA完整性,并通过体外培养验证其体外受精效果。【结果】Ⅱ组(IGF-Ι添加浓度100 ng/m L)的冷冻精液解冻孵育0、1和2 h后,其精子顶体完整性呈逐渐下降趋势,但整体效果优于其他试验组;在精子质膜完整性和DNA完整性方面,也表现为Ⅱ组高于其他试验组,且孵育时间越短(1 h内),效果差异越明显,均显著高于对照组(P<0.05)。体外受精试验结果显示,5个试验组间的卵裂率和囊胚发育率均不存在显著差异(P>0.05),但以Ⅱ组的体外受精效果略优于其他试验组。【结论】绵羊冻精稀释液中添加IGF-I可有效增强精子活力,改善冻精存活率,维持顶体、质膜和DNA完整性,但要求绵羊冷冻精液须在解冻后1 h内完成相关操作。 展开更多
关键词 绵羊 冷冻精液 稀释液 IGF-Ι 顶体完整性 质膜完整性 DNA完整性
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流式细胞术在白细胞精子症精子质量评估中的应用 被引量:2
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作者 党小军 胡淑玲 李芒会 《现代检验医学杂志》 CAS 2011年第3期117-118,122,共3页
目的研究流式细胞术在白细胞精子症患者精子功能评估中的作用。方法选择73例白细胞精子症患者和10例正常生育男性的精液标本进行精液常规分析,对精子质膜完整性争线粒体膜电位进行漉式细胞术分析,并将结果通过SAS软件进行统计学处理... 目的研究流式细胞术在白细胞精子症患者精子功能评估中的作用。方法选择73例白细胞精子症患者和10例正常生育男性的精液标本进行精液常规分析,对精子质膜完整性争线粒体膜电位进行漉式细胞术分析,并将结果通过SAS软件进行统计学处理。结果白细胞精子症患者与正常生育男性相比精子除具有密度低(42.74±31.62,77.60±49.85,P〈0.001)、活动率差(41.72±20.83,70.75±22.46,P〈0.001)、畸形率高(35.64±13.95,8.76±1.92,P〈0.001)等特点外,经流式细胞术测定精子质膜完整率降低(50.17±20.23,96.73±18.15,P〈0.001),线粒体膜电位异常率升高(51.62±25.37,20.73±10.75,P〈0.001)。白细胞精子症患者精液白细胞数与精子密度呈负相关(r=-0.65,P〈0.001),与精子活动率呈负相关(r=-0.78,P〈0.001),与精子质膜完整性呈负相关(r=-0.82,P〈0.001),与精子MMP异常率呈正相关(r=0.65,P〈0.001),同时精子质膜完整性与精子活动率呈正相关(r=0.67,P〈0.001),精子MMP异常率与精子畸形率呈正相关(r=0.71,P〈0.001)。结论流式细胞术在白细胞精子症患者精子质量评估中意义显著,对男性不育的诊断和治疗具有重要的参考价值。 展开更多
关键词 白细胞精子症 流式细胞术 质膜完整性 线粒体膜电位
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精子质量综合评估指标的建立 被引量:1
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作者 赵洪鑫 王会 +3 位作者 武俊青 袁瑶 吴晓芸 施惠娟 《中国卫生统计》 CSCD 北大核心 2012年第1期77-80,83,共5页
目的建立精子质量综合评估指标以辅助男性不育的诊断。方法对273例不育男性和35例已育志愿者用计算机精液分析系统进行常规精液检查,用荧光复染法进行质膜完整性检测,用化学发光法检测精液活性氧水平;对资料进行主成分分析和受试者工作... 目的建立精子质量综合评估指标以辅助男性不育的诊断。方法对273例不育男性和35例已育志愿者用计算机精液分析系统进行常规精液检查,用荧光复染法进行质膜完整性检测,用化学发光法检测精液活性氧水平;对资料进行主成分分析和受试者工作特征曲线分析;用多变量线性组合法建立联合预测因子。用建立的综合指标参考值模拟诊断另外100例不育男性和30例已育志愿者,计算预测的灵敏度和特异度。结果由主成分分析的结果建立精液质量得分(SQ);SQ诊断男性不育的ROC曲线下面积为81.5%,大于单一常规精液参数;用SQ与精液活性氧水平联合预测因子诊断男性不育,ROC曲线下面积为87.1%。在模拟预测中,SQ的灵敏度为72.00%,特异度为83.33%;联合预测因子的灵敏度为93.00%,特异度为73.33%。结论和单独常规精液参数比较,SQ辅助诊断男性不育的价值更高;在有条件检测精液活性氧的实验室,将SQ与活性氧水平用于联合诊断,准确性更高。 展开更多
关键词 精子质量 质膜完整性 活性氧 主成分分析 多变量线性组合 ROC曲线
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低密度脂蛋白对冻融后猪精子生物学功能的影响 被引量:1
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作者 徐妲 金一 +1 位作者 李洋 单世良 《畜牧与兽医》 北大核心 2009年第3期48-51,共4页
用3种不同的离心速度提取蛋黄中的低密度脂蛋白(LDL),然后在猪精液冷冻稀释液中添加不同含量的LDL;冻融后的猪精液进行体外受精,观测其体外受精的卵裂率,以探索不同离心速度离心获得的LDL对冻融后猪精子生物学功能的影响。结果表明:以10... 用3种不同的离心速度提取蛋黄中的低密度脂蛋白(LDL),然后在猪精液冷冻稀释液中添加不同含量的LDL;冻融后的猪精液进行体外受精,观测其体外受精的卵裂率,以探索不同离心速度离心获得的LDL对冻融后猪精子生物学功能的影响。结果表明:以10000 r/min离心速度离心的LDL,其解冻后猪精子的活率、顶体的完整率和质膜完整性显著高于8000 r/min和12000 r/min的(P<0.05),LDL的最佳添加量为9%(P<0.05)。冻融后体外受精的卵裂率达到46.35%,与对照组相比差异显著(P<0.05)。 展开更多
关键词 低密度脂蛋白 冷冻保护剂 精子活率 顶体完整 质膜完整性 卵裂率
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两种稀释剂不同稀释倍数对猪精液保存效果的研究 被引量:3
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作者 张丹 付永利 +7 位作者 唐佩娟 刘鑫 殷茵 于海霞 李泽清 张颖 李奎 通信作者:崔茂盛 《猪业科学》 2019年第6期106-108,共3页
为探讨课题组研制的猪精液17℃常温保存稀释剂在高倍稀释下对猪精子的保护效果,试验以BTS稀释剂为对照组,分别将原精进行1,3,5,10和15倍稀释,以精子有效存活时间内的活力、质膜完整性和顶体完整性为评价指标,研究课题组研制的稀释剂对... 为探讨课题组研制的猪精液17℃常温保存稀释剂在高倍稀释下对猪精子的保护效果,试验以BTS稀释剂为对照组,分别将原精进行1,3,5,10和15倍稀释,以精子有效存活时间内的活力、质膜完整性和顶体完整性为评价指标,研究课题组研制的稀释剂对高倍稀释的猪精液常温保存效果的影响。结果表明,配方组在5倍和10倍稀释时精液有效保存时间分别为8.77d和8.43d,在15倍稀释时配方组中精液有效保存时间明显下降,仅为4.56d。而对照组中,精液最长有效保存时间为3倍稀释下的3.1d;配方组采用10倍稀释,保存至第3天精子质膜完整率为82%,顶体完整率达87%,与对照组相比差异显著(P<0.05)。试验结论是课题组研制的稀释剂能够使猪精子耐受高倍稀释并具有较好的保护作用。 展开更多
关键词 稀释剂 保存时间 顶体完整性 质膜完整性 猪精液
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类芦根系抗氧化酶和植物螯合肽对Cd、Pb胁迫的应答 被引量:20
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作者 罗洁文 李莹 +2 位作者 苏烁烁 黄晓敏 周垂帆 《生态环境学报》 CSCD 北大核心 2016年第6期1047-1053,共7页
类芦(Neyraudiarey naudiana)是中国南方金属矿区最为常见的耐性植物,且能大量富集重金属,是修复重金属污染的潜能植物。为研究其对重金属胁迫的应答机制,采用营养液培养的方法研究了不同浓度(0、25、50、100μmol·L^(-1))Cd、Pb处... 类芦(Neyraudiarey naudiana)是中国南方金属矿区最为常见的耐性植物,且能大量富集重金属,是修复重金属污染的潜能植物。为研究其对重金属胁迫的应答机制,采用营养液培养的方法研究了不同浓度(0、25、50、100μmol·L^(-1))Cd、Pb处理24 h后,类芦根系氧化损伤、抗氧化酶活性和非蛋白巯基化合物含量的变化。结果表明,在Cd、Pb胁迫下,类芦根系H_2O_2和O_2^(·-)含量显著增加,且伴随有MDA含量的升高,当Cd、Pb浓度为100μmol·L^(-1)时,MDA分别达到6.72和16.12nmol·g^(-1),发生膜脂质过氧化,造成植物氧化损伤。Pb胁迫下,SOD,POD活性随着处理浓度的增加呈现先上升后下降的趋势;Cd胁迫下SOD活性变化趋势与Pb胁迫的相似,而POD活性呈下降趋势。根系非蛋白巯基化合物含量检测显示,Cd、Pb处理下,GSH和PCs均呈先增加后下降的趋势。综合分析得出,类芦根系对不同重金属的不同浓度胁迫响应不一,其能通过调节抗氧化酶活性和植物螯合肽等的合成水平,降低重金属的毒性及其对植物的伤害,从而维持自身的稳态。 展开更多
关键词 镉、铅 类芦 质膜完整性 抗氧化酶 植物螯合肽
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PEG-6000模拟干旱对不同抗性小麦品种光合和叶绿素荧光特性的影响 被引量:7
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作者 王爱英 李双 +2 位作者 焦浈 孙昊 焦涛 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2022年第4期49-56,共8页
【目的】为探究干旱胁迫下,百农889和中国春两个抗旱性小麦品种的光合作用和叶绿素荧光特性的差异。【方法】利用PEG-6000模拟干旱胁迫,对百农889和中国春离体叶片和幼苗进行处理,测定其表型、生物量、相对含水量、叶绿素含量、光合作... 【目的】为探究干旱胁迫下,百农889和中国春两个抗旱性小麦品种的光合作用和叶绿素荧光特性的差异。【方法】利用PEG-6000模拟干旱胁迫,对百农889和中国春离体叶片和幼苗进行处理,测定其表型、生物量、相对含水量、叶绿素含量、光合作用和叶绿素荧光指标。【结果】在干旱胁迫下,两品种小麦离体叶片叶色均变浅,叶绿素含量分别降低了19.74%和23.60%,但百农889的叶绿素含量比中国春高7.16%;干旱胁迫下两品种细胞质膜完整性均受到明显损伤,但百农889细胞质膜完整性受到的损伤更小;干旱胁迫下百农889和中国春小麦生物量降低了27.00%~54.80%,相对含水量分别下降了10.60%和15.20%,百农889净光合速率和叶绿素含量未发生明显变化,而中国春小麦净光合速率和叶绿素含量分别降低了31.06%和24.23%,百农889和中国春小麦叶片F_(v)/F_(m)、PhiPS2、ETR显著降低,NPQ明显升高;但百农889小麦叶片相对含水量、净光合速率、叶绿素含量、气孔导度、蒸腾速率、Fv/Fm、PhiPS2和ETR均显著高于中国春,NPQ显著低于中国春。【结论】在PEG-6000模拟干旱胁迫下,百农889比中国春受到的损伤轻,能够保持更高的相对含水量、叶绿素含量和光合作用强度,植株生长受到的抑制弱,抗旱性强。 展开更多
关键词 小麦 干旱胁迫 叶绿素 光合作用 叶绿素荧光参数 质膜完整性
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