半夏炮制过程中毒性凝集素蛋白的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)受灵敏度和重复性的影响,对完整蛋白的定量分析存在困难。本研究采用纤维素纳米晶体(CNC)辅助MALDI-TOF MS,结合内标法定量分析半夏炮制过程中半夏凝集素(PTL),通过优化CNC辅助样本制备的时长和比例,以麦胚凝集素(TVL)为内标,直接分析不同炮制程度半夏各炮制品及其浸泡上清液中PTL含量。结果表明,CNC辅助MALDI样本制备有效提升了MALDI-TOF MS定量分析的线性和重复性。随着炮制时间的延长,姜半夏、清半夏和法半夏炮制品的PTL含量逐渐下降,浸泡上清液中PTL含量逐渐上升。其中,由于pH值的改变,法半夏炮制品浸泡上清液中PTL含量呈先上升后下降的趋势。此外,将该方法应用于不同饮片生产企业的多批次半夏炮制品饮片中,均未检出PTL。该方法操作简便,可有效分析半夏炮制过程中PTL含量的变化,为研究半夏炮制过程对PTL的影响提供了参考。

联合液相色谱-质谱分析和网络药理学探讨益肾清利方治疗特发性膜性肾病的作用机制

目的联合液相色谱-质谱(Liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)分析和网络药理学探讨益肾清利方治疗特发性膜性肾病(idiopathic membranous nephropathy,IMN)的潜在靶点。方法通过BATMAN-TCM数据库和LC-MS定性分析确定益肾清利方药物活性成分,通过网络药理学的方法预测益肾清利方治疗特发性膜性肾病的生物过程及机制通路,并对筛选出的核心靶点进行分子对接及体外实验验证。结果益肾清利方共筛选出15个活性成分,其作用靶点与特发性膜性肾病疾病靶点取交集后得到72个核心基因。GO富集分析结果显示包含凋亡信号通路的调控、白细胞迁移、肽基酪氨酸磷酸化等的参与;KEGG通路富集分析结果显示益肾清利方治疗特发性膜性肾病涉及TNF、PI3K/AKT、MAPK等细胞凋亡相关信号通路。体外实验表明,益肾清利方可通过调控PI3K/AKT通路减少足细胞凋亡。结论益肾清利方通过多靶点、多通路治疗特发性膜性肾病,对C5b-9诱导的足细胞亚溶破模型有抗凋亡作用,其作用机制可能与TNF、PI3K/AKT、MAPK信号通路有关。

液相色谱质谱分析技术在水质分析中应用研究

液相色谱质谱分析技术(LC-MS)结合了液相色谱(LC)高效分离和质谱(MS)的高灵敏度和高选择性的特点,具有分离能力强、灵敏度高、应用范围广、自动化程度高和分析速度快等优势,已经成为水质检测分析领域的一种重要方法,被广泛应用于水中农药残留、有机物和酚类化合物等污染物的检测与分析。该方法可以用于及时了解饮用水水质状况,为保障人类健康和饮水安全提供有力支持。本文详细介绍了液相色谱质谱分析技术,并阐述了其在水质分析中的应用。

气相色谱质谱分析法测试半挥发性有机化合物的分析

半挥发性有机物(SVOCS)属于一类分散于有机溶液内,具备气相色谱/质谱分析功能的化学物质。一个全球性的挑战就是水质,半挥发性有机物在的生活环境中广泛存在,其浓度相对较低,并且种类众多。半挥发性的有毒物质在水资源里,不只是威胁到的身体健康,同时还给水生动植物带来了巨大的威胁。所以,选择使用气相色谱质谱分析法来检测半挥发性有机化合物,期待这一方法能够给相关专业人士带来借鉴。

胆囊癌差异蛋白质组学分析

目的运用蛋白质组学经典技术,双向凝胶电泳、质谱鉴定及生物信息学分析在胆囊癌组、正常胆囊对照组中寻找差异蛋白,发现和鉴定胆囊癌相关的肿瘤标志物及潜在的治疗靶点。方法标本分两组:胆囊癌组-胆囊癌组标本59例;正常对照组-胆囊癌癌旁组织标本59例。组织样品通过洗涤、裂解、离心收集总蛋白样本,分装冻存。经过第一向等点聚焦、第二向SDS-PAGE电泳,凝胶经考马斯亮蓝染色显色后,用Gs-800光密度仪获得凝胶图像。经PD-Quest凝胶图像分析软件进行分析后,找出有差异的蛋白点。通过蛋白指纹谱鉴定(PMF),基质辅助激光解吸附质谱技术(MALDI-TOF)获得差异蛋白碎片的二级质谱,利用Biotools软件采集肽碎片质荷比信息;利用Mascot搜索引擎对数据库进行检索,鉴定差异蛋白质的氨基酸序列,获得相应特异蛋白质信息。结果发现66个差异表达蛋白。其中在胆囊癌中上调表达蛋白21个,下调表达蛋白45个。21个差异蛋白得分大于56,在胆囊癌中上调表达的10个,下调表达的11个。主要包括膜联蛋白、膜突蛋白、热休克蛋白、波形蛋白、视黄醛脱氢酶1、半乳凝素等。结论上述蛋白可能在肿瘤的发生发展机制中起着重要的作用,是诊断、治疗的潜在靶点,值得后续进一步研究。

高分辨淌度质谱仪器和生物分子结构分析研究

过去几十年,离子淌度技术,特别是其与质谱的联用,已经发展为生物分子结构解析的一种主要手段。质谱可以获得生物分子的质量信息,淌度则可以进一步区分质谱无法区分的异构体或同重素。清华大学精密仪器系欧阳证教授和周晓煜副教授团队提出了一种离子云扫描技术进行离子淌度质谱分析,并于一台改造的小型质谱仪器系统上开展原理验证,实现了对糖、脂质、多肽、蛋白等多种生物分子的超高场离子淌度质谱分析,且测量非对映异构类型的淌度分辨率超过10000,比现有技术水平提升近2个数量级[1]。

质谱分析联合网络药理学探析固本方对三阴性乳腺癌的作用机制

【目的】基于质谱分析和网络药理学探析固本方(党参、黄芪、灵芝等组成)对三阴性乳腺癌的作用机制,并进行实验验证。【方法】采用液质联用质谱分析固本方冻干粉化学成分。运用中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)、PubChem数据库获得固本方化学成分的SMILE结构,SwissTargetPrediction数据库预测其潜在作用靶点,检索TTD、Drugbank、OMIM、京都基因与基因组百科全书(KEGG)、PharmGkb、GeneCard、DisGeNET等数据库得到疾病靶点,运用Venny 2.1数据库得到固本方与三阴性乳腺癌交集的靶点,利用STRING数据库构建交集靶点的蛋白-蛋白互作(PPI)网络,应用DAVID工具进行基因本体论(GO)和KEGG富集分析。以人乳腺癌MDA-MB-231细胞为研究对象,分别用固本方、卡培他滨干预,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测药物对细胞增殖能力的抑制率,Western Blot法检测细胞蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、磷酸化磷脂酰肌醇-3激酶(p-PI3K)蛋白表达水平。【结果】质谱分析结果显示,固本方主要化学成分为党参炔苷、灵芝酸B、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、柴胡皂苷A、芒柄花苷、澳洲茄碱、贝母素甲、毛蕊异黄酮、熊果酸、齐墩果酸、芒柄花素、紫杉醇。PIK3CA、PIK3R1、Akt1等为固本方治疗三阴性乳腺癌的潜在核心靶点,PI3K-Akt信号通路富集结果显著且靶点数最多。细胞实验结果显示,固本方呈时间和浓度依赖性抑制MDA-MB-231细胞的增殖,固本方下调MDA-MB-231细胞Akt、p-Akt、p-PI3K蛋白的表达。【结论】通过质谱分析获得固本方主要化学成分12种,PIK3CA、PIK3R1、Akt1等为固本方治疗三阴性乳腺癌的潜在核心靶点,PI3K/Akt信号通路发挥主要作用。固本方可抑制MDA-MB-231细胞增殖,并调控其PI3K/Akt通路。

腹壁脂肪组织、唇腺及骨髓3部位活检联合质谱分析技术诊断轻链型淀粉样变性的价值

目的:分析腹壁脂肪组织、唇腺及骨髓3部位联合活检在诊断轻链型淀粉样变性中的应用,探讨3种微创活检方法在不同器官累及患者中的应用价值及3部位联合活检对提高诊断阳性率的意义。方法:回顾性分析我院2017年01月至2022年09月期间诊断的61例具有梅奥分期数据的轻链型淀粉样变患者的临床资料,分析3部位微创活检的阳性率,器官累及情况与不同部位活检的结果,2018年01月后我中心对于任1部位刚果红阳性的病例加做激光显微切割联合质谱(LMD/MS)分析。结果:联合应用腹壁脂肪活检、唇腺活检及骨髓活检的40例患者,至少1个部位阳性的为36例(90%),对刚果红阳性部位加做LMD/MS阳性率为100%。结论:3部位微创活检可以明显提高轻链型淀粉样变性的确诊率,LMD/MS技术最终对淀粉样变性的类型起定性作用;建议临床对怀疑轻链型淀粉样变性的患者常规进行腹壁皮下脂肪组织、唇腺、骨髓3部位活检并通过LMD/MS进一步印证。

质谱技术在兽用治疗性蛋白药物表征和定量分析上的应用

治疗性蛋白药物已成为药物开发的一个重要分支,由于其具有良好的临床获益和安全性,现已成为肿瘤、自身免疫等疾病治疗的重点研发药物。通过体外细胞表达的治疗性蛋白药物通常具有高度复杂性,因此,在开发或生产过程中建立一系列质量分析和评价标准来保证药物的一致性和安全性尤为重要。质谱技术已被广泛用于小分子药物开发,具有灵敏度高、选择性和特异性良好、高通量等优点,该技术已逐步成为治疗性蛋白药物质量分析研究的重要工具,用于治疗性蛋白药物结构表征、翻译后修饰分析、定量分析、杂质分析及相互作用等研究。笔者综述了常用于蛋白质分析的质谱组成,包括常见电离方式、解离方式和质量分析仪;在此基础上,对利用质谱技术进行治疗性蛋白药物定性、翻译后修饰(糖基化、二硫键)研究的一般样品处理方法和质谱方法进行分析,并对利用质谱技术进行蛋白质定量分析方法开发、样品前处理和常用分析程序进行分析阐述;同时,笔者也对抗体药物偶联物(antibody-drug conjugate, ADC)表征、定量分析和其他质谱分析表征应用的一般方法进行总结。通过对上述内容研究分析,旨在为利用质谱技术加快兽用治疗性蛋白药物开发和研究提供参考和借鉴。

3种捕鸟蛛粗毒的HPLC和MALDI-TOF质谱分析

对我国南方3种个体大小形态相似,颜色分别为黑色,棕褐色及金黄色的捕鸟蛛的粗毒进行了反相高效液相色谱(HPLC)及基质辅助激光解吸电离飞行时间(MALDI TOF)质谱分析,测定了由反相高效液相色谱分离的每一个肽峰的质量,分析了3种蜘蛛粗毒反相色谱行为的相似与不同之处以及分离肽片段的质量分布范围.讨论了由反相高效液相色谱结合MALDI TOF质谱进行捕鸟蛛化学分类与种属鉴定的可能性.

HL-2A装置器壁处理质谱分析

为了对HL-2A装置升级改造后的器壁处理效果展开分析,使用四极质谱计对HL-2A装置壁处理过程中或壁处理前后的残余气体进行了质谱测量。利用粒子平衡方程和质谱图变化分析了直流辉光放电清洗过程中的气体成分变化。研究了HL-2A装置壁处理的性能并优化了He+D_(2)-GDC的氦氘比例参数。结果表明:HL-2A装置真空室烘烤除气后,残余气体中H2O所占百分比由烘烤前的92%降至56%,真空室真空度达到2.2×10^(-5)Pa;在不同阶段利用H2-GDC、He-GDC、He+D_(2)-GDC进行壁处理消除了真空室内部件升级改造对壁处理造成的不利影响,保障了HL-2A装置等离子体放电实验的开展。

基于质谱分析的新精神活性物质代谢研究进展

近年来,新精神活性物质愈发泛滥,滋生了违法犯罪等社会问题,严重危害公众健康和社会安定。新精神活性物质在人体内代谢迅速,通过质谱方法检测其特征代谢物能够有效确定摄入情况。该文通过检索、整理和讨论相关文献,综述了近5年新精神活性物质体外、体内的代谢研究,总结了不同方法的适用性和优缺点,并与真实人体样本数据进行了比较。最后展望了代谢研究方法的发展趋势,以期为鉴定代谢产物,推断代谢途径与生物标志物等新精神活性物质代谢研究提供参考。

基于液相色谱-质谱分析冠心病稳定型心绞痛脾虚痰浊证代谢组学研究

目的基于血清代谢组学研究分析冠心病稳定型心绞痛脾虚痰浊证的差异代谢物和相关代谢通路。方法招募60例冠心病稳定型心绞痛脾虚痰浊证患者和60例同期健康志愿者,采用超高效液相色谱-质谱联用测定两组受试者的血清代谢组学,通过原始谱图和原始数据进行多元统计分析鉴定差异代谢物,进行KEGG代谢通路富集分析。结果冠心病稳定型心绞痛脾虚痰浊组总计60例患者参与研究,对照组总计60例健康志愿者参与研究,两组受试者的一般资料、生化指标均无统计学差异(P>0.05);共鉴定得到18个差异代谢物,其中苯乙醛、正磷酸盐、鸟嘌呤核苷、磷酸二乙酯、2-脱氧-D-葡萄糖酸盐、鸟嘌呤、5-(2-羟乙基)-4-甲基噻唑表达下调,牛黄胆酸、2-丙基戊二酸、8-氨基-7-氧代壬酸、L-酪氨酸、S-磺基-L-半胱氨酸、环己甲酸、紫质胆素原、(R)-3-羟基-2-丁酮、辛酰基葡糖苷酸、褪黑素、A-茄碱表达上调;涉及苯丙氨酸代谢、硫胺素代谢以及嘌呤代谢等代谢通路。结论差异代谢物在一定程度上从微观层面揭示了冠心病稳定型心绞痛脾虚痰浊证的代谢本质以及为冠心病稳定型心绞痛脾虚痰浊证患者临床早期预警提供线索。

芹菜不同品种生长时期挥发性有机物质成分分析

【目的】探究芹菜挥发性有机物质在不同品种及不同生长时期的变化规律和分布特征。【方法】选取了不同叶柄颜色的芹菜品种‘特级白芹王’‘津南实芹2号’和‘黄嫩西芹’为试验材料,利用顶空固相微萃取(HS-SPME)技术对芹菜挥发物进行提取,结合气相色谱-质谱仪(GC-MS)对挥发物质进行测定与比较分析。【结果】3个芹菜品种共鉴定出161种化合物,其中‘津南实芹2号’品种整体挥发物含量最高;‘特级白芹王’和‘津南实芹2号’品种在成熟期挥发性有机物含量最高,而‘黄嫩西芹’挥发性有机物含量最高的时期则为快速生长期,表明3个品种在不同时期间挥发物质种类和含量上存在差异。基于OPLS-DA模型发现,(-)-camphene、2,4-dimethoxyamphetamine、3-methylheptyl acetate、(+)-camphene分别在‘特级白芹王’成熟期、‘津南实芹2号’幼苗期、‘津南实芹2号’成熟期、‘黄嫩西芹’快速生长期含量较高,这些化合物可作为区分3个品种和发育时期的重要标志性化合物。【结论】利用HSSPME-GC-MS技术明确了不同时期芹菜品种间挥发性有机物的分布和变化规律,为后续利用不同种质资源的芹菜及开展香气品质的遗传改良提供参考。

基于气相色谱指纹图谱结合多成分定量的养生酒质量评价分析

以劲牌养生酒为研究对象,采用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用技术分析劲牌养生酒的挥发性物质,建立指纹图谱并进行相似度评价,进一步通过特征峰的相对浓度定量结果对该酒的质量稳定性进行评价。结果表明,在劲牌养生酒中共指认出22个特征峰,包括D-柠檬烯、辛酸乙酯、癸酸乙酯、己酸乙酯、可巴烯、Δ-杜松烯、α-依兰油烯、γ-松油烯等。通过建立该酒的指纹图谱结合多成分的定量分析方法可实现劲牌养生酒中间品质量稳定性评价及其他品类露酒的区分与鉴别,且评价结果与感官品评结果保持一致,具有快捷、稳定、准确度高等优点,为劲牌养生酒的质量控制提供了新方法。

光谱分析在食品成分检测中的应用

光谱分析技术以其快速、无损、环保等特点,在食品成分检测中得到了广泛应用。本文综述了光谱分析技术在食品成分检测中的应用现状,分析了其面临的成分鉴定分辨率不足、基质效应干扰检测、数据处理复杂等挑战,并提出了相应的对策建议,包括提升仪器分辨率、应用基质校正技术、优化数据处理算法等。通过不断优化技术手段,光谱分析技术将在食品成分检测领域发挥更大的作用,为保障食品安全提供重要技术支撑。

质谱分析在变压器所用矿物绝缘油成分分析中的应用

变压器是变配电站的核心设备,其运行状况显著影响电网的安全与稳定.绝缘油是变压器中重要的工作介质,其在变压器运行中起到绝缘、散热等作用.矿物绝缘油是当前广泛使用的变压器绝缘油种类.绝缘油组分特性对变压器的工作性能影响很大.随着运行时间延长,绝缘油易出现氧化、老化,导致绝缘可靠性降低.准确分析绝缘油组分、早期发现绝缘油氧化、老化状况,对提高变压器运行安全水平有重要意义.质谱分析法在绝缘油组分特性分析、氧化产物及老化指示物分析中,展示了良好的应用潜力.综述了近年来质谱分析技术在绝缘油性能品质检测,氧化、老化产物检测及过程机理分析等方面的研究进展,提出了未来进一步提高绝缘油特性及故障分析准确度的建议.

适合于MALDI-TOF质谱分析蛋白质及亚基的SDS-PAGE技术

介绍适合于MALDI TOF质谱分析蛋白质及亚基的SDS PAGE技术,其主要特点是采用铜染色法在凝胶板上直接显色且采用有机溶剂萃取电泳纯的蛋白质和亚基,并用MALDI TOF质谱技术直接分析它们的分子量.本技术具有简便、快速和损失率小等优点,尤其适合于蛋白质组学、利用数据库分析蛋白质同源性和确定蛋白质种类等结构信息的研究,是一种较为理想的SDS PAGE和MALDI TOF质谱非在线联用分析技术.

生长抑素三硫化物的制备与质谱分析

采用生长抑素与硫代硫酸钠(Na_(2)S_(2)O_(3))反应生成生长抑素三硫化物,并使用高压制备液相色谱法将其纯化后冻干,利用高分辨质谱对其精确分子量、肽序列与三硫键连接位点进行检测。结果表明,当生长抑素与Na2S2O3摩尔比为1∶2时,60℃水浴下反应1 h,即可生成生长抑素三硫化物,对其纯化、脱盐、冻干后,最终获得纯度大于95%的目标物。通过质谱分析,其加合离子[M+2H]^(2+)的m/z为835.3539、[M+3H]^(3+)的m/z为557.2369,肽序列为A-G-C-K-N-F-F-W-K-T-F-T-S-C,三硫键连接位点为Cys(3)-Cys(14),均与理论结构一致。该研究可为生长抑素的质量研究提供依据。

基于光谱分析技术的航标灯质智能化检测研究

通过分析航标灯光信号特点,研究航标灯质检测面临的航标灯光信号的远程采集、航标灯光信号的稳定获取、背景光干扰的排除和航标灯光节奏、周期种类繁多等4个技术难点,提出了光谱分析等相应技术策略,制定了完整的智能化检测方法,并开发一套智能化检测设备对此方法进行了实践验证,可为完善航标灯光信号检测,特别是现场检测提供技术指导。