岭南有毒中草药精准识别质谱数据库及快速检测方法的建立

目的:建立岭南有毒中草药特征性化学成分的精准识别质谱数据库及快速检测方法。方法:采用超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS),色谱柱为Poroshell 120 SB-C18(100 mm×2.1 mm,2.7µm),以0.1%甲酸水溶液(含5 mmol·L^(–1)甲酸铵,A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱(0~1 min,10%B;1~12 min,10%~70%B;12~22 min,98%B),流速为0.3 mL·min^(–1),柱温为35℃,以三重四极杆串联质谱仪检测,离子源为电喷雾离子源(ESI),正离子模式,根据毒性成分的离子对信息、保留时间、检出限建立高通量定性定量数据库。结果:采用所建立的岭南有毒中草药精准识别质谱数据库及快速检测方法,开展毒性中草药中毒应急检验,检出钩吻、洋金花、雪上一枝蒿等毒性中草药的特征毒性成分,对粉末、药酒等不同状态、不同剂型的样本均适用。结论:所建立的分析方法快速、灵敏,筛查数据库数据准确,适合中药及中成药中毒性成分的定性定量检测,可为进一步开展中药材风险评估和药物警戒提供支撑。

天然染料质谱数据库的建立与应用

为提高纺织品文物中天然染料鉴定的准确性和便捷性,利用高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)技术对68种天然染料化合物标准品进行分析,收集化合物分子质量、碎片离子及丰度、检测离子模式、保留时间等信息,建立了基于美国国家标准技术研究院质谱数据库的天然染料质谱数据库。通过设置合理的检索条件,确定质谱库检索最佳参数,对代表性蒽醌类(茜素)、黄酮类(槲皮素、木犀草素)、生物碱类(小檗碱)化合物进行了分子碎裂机制解析。应用自建的质谱数据库成功实现了2件古代纺织品文物中天然染料的快速鉴定,质谱数据库检索结果显示其含有茜素、茜紫素、木犀草素、小檗碱、巴马汀等染料化合物,且在文物样品的检索过程中,质谱数据库正向检索匹配度与反向检索匹配度均大于800,匹配率均在95%以上。利用质谱数据库检索技术鉴定天然染料具有可行性,为纺织品文物中天然染料的研究工作提供了新思路。

化妆品中52种禁用抗组胺类药物高分辨质谱数据库建立与应用

基于质谱数据库,建立了超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨质谱仪(UHPLC-Orbitrap HRMS)快速筛查化妆品中52种禁用抗组胺类药物的方法。选定52种常见的抗组胺类药物,以乙腈超声提取,采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm×1.8μm)分离,以乙腈和2 mmol/L甲酸铵(含体积分数0.05%甲酸)水溶液为流动相,梯度洗脱,在电喷雾电离源正离子模式(HESI+)下,以全扫描/数据依赖二级质谱扫描(Full MS/dd-MS2)的模式进行分析,得到各组分保留时间、母离子精确质量数、碎片离子精确质量数等,将采集到的标准物质相关数据导入至Tracefinder软件,建立了52种禁用抗组胺类成分的高分辨质谱数据库。共筛选100批次市售化妆品,其中4批次检出依巴斯汀。该方法检测速度快、筛查定性结果准确,适用于市售化妆品中抗过敏类药物的快速筛查。

质谱数据库法快速筛查壮阳类中成药和保健品中12种非法添加化学成分

采用三重四极杆质谱和四极杆飞行时间质谱两台仪器建立了具有一定通用性的壮阳类中成药和保健品中12种非法添加化学成分的质谱数据库,并建立了壮阳类中成药和保健品的快速筛查方法。依托质谱数据库中结构类似物的特征碎片离子,能把检测的范围覆盖到经结构修饰改造的类似物。在无对照品的情况下利用质谱数据库的数据资源依然可以对大量的样品进行初步筛查。

质谱数据库KDD预处理算法

本文针对谱图数据库的特性 ,在利用数据库知识发现 (KDD)技术对谱图数据库进行数据预处理过程中 ,对质谱匹配算法、MultiAdaBoost聚类分析算法和Beynon表审核等方面进行了研究 ,使我们对质谱库有了更进一步的认识 。

72种生物碱高分辨质谱数据库建立与应用

目的建立常见生物碱的高分辨质谱数据库并应用于中毒样品的自动筛查。方法将生物碱标准品溶液以流动注射方式直接导入四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱仪,或经高效液相色谱分离后进行质谱分析,得到准分子离子峰的精确质量数和合适的碰撞能量,采用HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),以甲醇和5 mmol/L乙酸铵-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,电喷雾电离源正离子模式(HESI^+)和tSIM-ddMS^2模式下分析,采集生物碱的二级质谱信息,并将此质谱数据用于实际样品的自动筛查。结果获得了72种生物碱的精确分子量、保留时间、碰撞能量、碎片离子等信息并建立了质谱库,通过Full mass模式进样,仪器自动检索可快速锁定实际样品中含有的多种生物碱。结论该方法操作简便、灵敏度高,可满足中毒样品中生物碱快速自动筛查的要求。

数据库和人工智能在质谱检索中的应用

本系统把人工智能和质谱解析过程有机地集成起来 ,建立质谱数据库 ,利用多种化学计量学算法对复杂数据进行解析 ,并采用新的质谱匹配算法 ,有效地降低解析过程的复杂性和提高了解决实际问题的能力 .

利用数据库知识发现(KDD)技术构建新型质谱解析专家系统

通过在数据预处理，知识获取，知识库管理等模块中利用中断控制器和启发控制器把KDD有机集成起来，融合成一种新的专家系统结构，从而使系统能从海量数据库信息中提取蕴涵的知识来对知识库进行补充和核对。利用系统提供的KDD算法对NIST62质谱库进行分析，结果表明该系统具有较普通专家系统更强的解决实际问题的能力。

农药/鼠药色谱-质谱数据库的构建

据统计,我国使用的农药中有机磷类大约占70%,其中剧毒、高毒又占70%。由于有机磷农药的高效性和持久性,其不规范使用造成了很大的安全隐患,特别是蔬菜和果品更为严重,中毒事件时有发生。急性有机磷农药中毒是我国最常见的急性中毒之一,居农药中毒首位,中毒后病势凶险,病人可在短期内迅速死亡。2006年河北省共发生1 622例农药中毒事件,死亡64例;2007年-2011年济南市共发生3621例农药中毒事件，死亡488例；2008年-2012年浙江省湖州市共发生2945例农药中毒事件，死亡115例；

基于UPLC-Q-Exactive技术结合OTCML数据库快速分析沙棘的功效成分

为探讨沙棘果茎叶功效成分的整体差异。实验应用超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱高分辨质谱联用技术(UPLC-Q-Exactive)结合中药成分高分辨质谱数据库(OTCML),对沙棘果茎叶的化学成分进行了快速鉴定与比较分析。色谱柱为HypersilGOLDaQ色谱柱(2.1mm×100mm,1.9μm),流动相为0.1%甲酸乙腈(A)-0.1%甲酸水(B)梯度洗脱,流速为0.3mL/min,高分辨质谱采用电喷雾离子源(ESI)正、负离子同时扫描模式。基于OTCML中所包含的1200余种中药化合物对照品的保留时间,分子离子、二级碎片离子谱图信息和文献数据进行结构鉴定。结果共鉴定出沙棘中102个功效成分,包括苷类18个,黄酮类21个,萜类18个,苯丙素类13个,生物碱类6个,挥发成分14个,多酚12个;其中有17个化合物是在沙棘中首次发现,对沙棘果茎叶比较表明这些功效成分在不同部位分布有明显差异。该方法为今后充分开发利用沙棘资源提供了基础数据,也为沙棘相关产品的质量控制和药效物质基础研究奠定了基础。

使用具有解卷积报告软件和新农药数据库的GC／MS筛选926种农药和内分泌干扰物

介绍一种最新扩展的质谱数据库,来代替安捷伦的保留时间锁定农药数据库和解卷积农药应用.新的数据库包括926种农药、内分泌干扰物质和相关化合物——比原来的数据库多了359种化合物,包括日本的"肯定列表(Positive List)"中用GC/MS分析的所有化合物.所有保留时间锁定的化合物,都可以在安捷伦的GC/MS保留时间锁定软件中精确重复.新的数据库可以作为标准的GC/MS数据库来确证化合物,或者结合安捷伦筛选软件在保留时间和质谱谱图匹配的基础上定性检测化合物.当这些数据库与安捷伦新版本的解卷积报告软件(部件号G1716AA版本A.03.00)结合使用时,可以得到最大的收益.本方法对所有926种农药和内分泌干扰物进行GC/MS筛选,大约只需要2min.解卷积帮助确证谱图中隐藏在共流出物中的农药.本文比较了新的数据库和较小的数据库,通过解卷积报告软件分析17个地表水样品.在新的数据库的协助下,解卷积报告软件找到了99种农药、代谢物、阻燃剂和相关污染物,而这些在以前的农药和内分泌干扰物保留时间所定数据库中是不包含的.

基于NIST数据库的农药残留裂解谱库的建立及应用

为了保障食品和中药材的质量安全,采用气相色谱-三重四级杆质谱建立200余种农药及有机污染物质谱裂解数据库及优化的MRM数据库,通过谱库检索技术可以实现食品和中药材中未知组分的非靶标筛查及定性。在对未知组分进行谱库检索后,通过GC-QQQ方法比较未知组分与标准图谱的保留时间、一级质谱的萃取离子流色谱图镜像匹配。采用本研究建立的谱库及未知物筛查方法可对实际样品中的未知污染物进行快速筛查及确认。

基于高分辨质谱大数据的芩苏胶囊化学成分分析及指纹图谱研究

目的采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)和质谱数据库对芩苏胶囊(QSC)化学成分进行定性分析,并建立HPLC指纹图谱。方法采用Agilent ZORBAX RRHD SB-C_(18)(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,体积流量为0.3 mL/min,柱温为25℃,检测波长为270 nm。UPLC-Q-TOF/MS正、负2种离子模式扫描对QSC化学成分定性分析;采用Waters Xbridge Shield RP_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.05%磷酸水溶液梯度洗脱,体积流量为0.8 mL/min,柱温为30℃,检测波长为270 nm,对10批QSC进行指纹图谱分析。结果从QSC中共检测到68个化学成分,鉴定出22个化学成分,指纹图谱确定了33个共有峰,10批QSC的指纹谱图相似度均大于0.990。结论定性分析了QSC的化学成分,建立了其指纹图谱,可为深入研究其物质基础和完善提升质量标准提供支持。

超高效液相色谱-四极杆-飞行时间高分辨质谱法快速筛查柠檬果实中的生物活性成分

基于前期实验室构建的生物活性成分质谱数据库,该文建立了同时筛查并准确鉴定类黄酮、香豆素、酚酸、生物碱及类柠檬苦素多类型生物活性成分的超高效液相色谱-四极杆-飞行时间高分辨质谱方法,可快速、准确筛查6种柠檬不同部位(果皮、果肉与果汁)的生物活性成分,结果表明,在6种柠檬样品中共鉴定出40种类黄酮、27种香豆素、9种酚酸、7种生物碱和3种类柠檬苦素。扁红柠檬、北京柠檬、柯尔提粗柠檬、尤力克柠檬、里斯本柠檬和美国粗柠檬分别筛查鉴定出72、71、70、66、64和63种生物活性成分。不同部位鉴定的生物活性成分数量呈以下规律:果皮≥果肉≥果汁。该方法经过实际样品验证,并可广泛适用于柑橘类水果中生物活性成分筛查分析鉴定。

串联质谱的蛋白质序列鉴定技术综述

蛋白质组学的主要目的是鉴定出生物体内的蛋白质的种类和数量。为达到这个目的,人们开发了多种蛋白质鉴定算法,包括数据库搜索方法、De Novo方法、PST(肽段序列标签)方法和质谱数据库方法。首先介绍了质谱仪中肽段断裂机理的研究,以及相关的质谱鉴定方法,然后综述了当前常用的蛋白质鉴定方法,分析了这些方法的优缺点,最后提出了自己的见解和展望。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱用于致病性弧菌鉴定

采用致病性弧菌标准菌株和分离菌株,在规定的培养条件和检测方法下进行MALDI-TOF-MS检测,同时进行方法的重复性、稳定性和特异性分析。新增加致病性弧菌菌株包括12种致病性弧菌,菌株来源广泛,构建的致病性弧菌MALDI-TOF-MS数据库信息量大、特异性强。结果表明,MALDI-TOF-MS方法可以快速、准确地鉴定致病性弧菌,可以用于致病性弧菌的日常检测鉴定。

超高效液相色谱-四极杆/轨道阱高分辨质谱法快速筛查功能性保健食品中19种特征性成分

目的建立超高效液相色谱-四极杆/轨道阱高分辨质谱法快速筛查功能性保健食品中19种特征性成分的分析方法。方法以甲醇为提取液,样品经超声、高速离心、过滤,通过XDB-C18色谱柱分离,以0.1%甲酸溶液(含0.02mol/L醋酸铵)和甲醇作为流动相梯度洗脱,选择正负离子实时切换和一级离子/自动触发二级离子扫描模式,利用保留时间、一级离子和二级离子信息建立质谱数据库,完成定性分析,利用一级分子离子峰完成定量测定。结果19种特征性成分的一级离子质荷比实测值与理论值相对偏差均小于等于8.10×10^(-6),19种特征性成分在其相应的线性范围内存在线性关系,相关系数均大于0.99,检出限为0.25~1.00mg/kg,加标回收率为72.33%~97.93%,精密度为1.09%~4.86%。结论该方法抗干扰能力强,准确度高,可用于保健食品中19种特征性成分的快速筛查,同时结合产品标签标识,鉴别其使用原料的真伪性。

大头陈脂溶性成分分析

目的:分析大头陈脂溶性成分。方法:利用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术对大头陈药材的脂溶性成分进行分析鉴定,并通过计算机对标准质谱谱库的检索进行化学成分定性。结果:从大头陈脂溶性成分中共检出41个组分,并鉴定了39种成分。结论:这些成分主要为脂肪酸类化合物,其中23种成分为首次在大头陈中鉴定出。

蛋及蛋制品中多药物残留快速检测技术研究

目的建立蛋及蛋制品中5类49种药物残留的QuEChERS方法并应用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(ultra performance liquid chromatography-quadrupole-time of flight-mass spectrometry,UPLC-Q-TOFMS)高分辨质谱数据库快速定性筛查确证及参考定量。方法采用5 mL 5%甲酸乙腈溶液提取,C18与PSA吸附剂净化的QuEChERS方法进行前处理,经Waters ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm)色谱柱分离,以5 mmol/L乙酸铵溶液(含0.1%甲酸)-乙腈为流动相,梯度洗脱,Q-TOF-MS电喷雾正、负离子模式检测,通过Waters Masslynx工作站的Chromalynx XS模块建立多种药物的精确质量数和全扫描碰撞诱导解离碎片离子高分辨质谱数据库。结果49种药物呈现良好的线性关系,相关系数均大于0.99,检出限(S/N=3)为0.2~10μg/kg,回收率结果在69.4%~121.5%之间。结论该方法简便、快速、灵敏,适用于蛋及蛋制品中多类药物残留的同时检测。

MALDI-TOF MS快速鉴定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的应用研究

目的探讨基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的快速鉴定价值。方法收集2020年7月至2021年9月蚌埠医学院第一附属医院临床分离的285株金黄色葡萄球菌(SA),并进行种属的确认。采用头孢西丁纸片扩散法和PCR法检测mecA基因筛选MRSA。根据建库要求,选取部分耐药和敏感菌株图谱,分别建立耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)的超级质谱数据库(SuperSpectra),获得两组的特征峰,并选择建库外的SA菌株进行验证,所得结果与纸片扩散法和PCR法比较,判断验证是否准确。结果MALDI-TOF MS技术确认285株菌株均为SA,采用纸片扩散法筛选MRSA和PCR法检测mecA基因,结果285株SA中有153株携带mecA基因的MRSA菌株和132株不携带mecA基因的MSSA菌株。通过比较发现质荷比为3036.0、3875.3 Da为MRSA的主要特征峰,而质荷比为5054.0 Da为MSSA的主要特征峰。选取除建库以外的SA进行验证,MRSA鉴定正确率为89.8%(79/88),MSSA正确率为87.5%(63/72)。结论MALDI-TOF MS可快速鉴别MRSA和MSSA,有助于提高临床快速鉴定耐药菌的能力。