质谱智能选择反应监测用于蛋白质绝对定量中母子离子对确证的方法研究

质谱选择反应监测(SRM)技术在蛋白质绝对定量分析中的应用越来越广泛,其成功应用的关键是肽段母子离子对的正确选择与确证。触发采集二级图谱是目前常用的母子离子对确认方法,但分析效率有待于提高。质谱智能选择反应监测(iSRM)是新近发展的高通量分析方法。为了考察该方法用于通量化母子离子对确证时的效果,选用牛血清白蛋白(BSA)和酵母蛋白提取物作为样品进行分析。结果表明,该方法具有更高的分析灵敏度,可以对低至1 fmol BSA样品中的母子离子对进行确证,而且相对于触发采集二级图谱方法而言,具有更高的分析通量,为规模化母子离子对选择与确证提供了一种新的策略。

依赖色谱保留时间的智能化选择反应监测质谱方法的建立及其初步应用

建立了依赖色谱保留时间的智能化选择反应监测质谱方法,并与非依赖色谱保留时间的智能化选择反应监测质谱分析方法对不同体系(牛血清白蛋白酶切物、6种标准蛋白质混合物酶切物、腾冲嗜热菌蛋白提取液酶切物)的分析结果进行了系统比较。结果表明,引入色谱保留时间后的智能化选择反应监测质谱方法能够显著提高肽段及蛋白质的鉴定量,并且在复杂体系(如腾冲嗜热菌蛋白提取液酶切物)中效果尤为明显,鉴定到的肽段及蛋白质的覆盖率可分别达到目标肽段和蛋白质数量的89.62%和92.41%,并且灵敏度高、重复性好,能够实现对质荷比相同但保留时间有差异的肽段的准确鉴定。该方法将在复杂生物样本目标蛋白质组高通量、高灵敏度的鉴定、验证和确认中发挥独特作用。

高分辨质谱和数据挖掘揭示污泥厌氧发酵过程溶解性有机物的反应特性

尽管厌氧发酵技术已经具有近百年的发展和应用历史,其仍是近年广受关注的低碳排放资源化技术之一。但厌氧发酵技术的效率低和生物反应过程易受抑制影响是限制该技术发展的主要瓶颈,其中,开发针对厌氧发酵生物反应过程的智能监测特别是非稳定运行状态下早期预警技术,是实现厌氧发酵技术升级和提升生物转化效率的重要方向。

分散固相萃取-气相色谱-串联质谱法测定蔬菜中107种农药的残留量

采用分散固相萃取-气相色谱-串联质谱(QuEChERS-GC-MS/MS)建立了蔬菜中107种农药残留量的分析方法。样品由含1%冰醋酸的正己烷饱和乙腈提取、分散固相萃取法净化,采用气相色谱-串联质谱方法在分时段选择反应监测模式下进行测定,外标法定量。所有农药在0.05～1mg/L范围内线性关系均良好;所有农药的方法定量限(LOQ)均低于10μg/kg;在10μg/kg的添加水平下,大蒜、青刀豆、萝卜和菠菜4种基质中绝大多数农药的平均回收率处于60%～130%之间,相对标准偏差(RSD)不大于15.3%。该方法不仅能用于多种蔬菜基质中107种农药残留的检测,而且还能较好地解决本底成分相当复杂的大蒜基质极易出现的干扰问题。

气相色谱／离子阱串联质谱法检测大气中的多溴二苯醚

运用气相色谱-离子阱质谱（ion trap mass spectrometry，ITMS）建立了大气中8种多溴二苯醚的二级质谱（MS／MS）检测方法。优化后的MS／MS方法对7种三溴至七溴二苯醚（BDE28、-47、-99、-100、-153、-154、-183）和十溴二苯醚（BDE209）的仪器检出限分别为0．04～0．23pg和9．38pg；方法检出限为6．0～27．1pg／m^3和211．6pg／m^3；6点标准曲线相关系数（r）为0．9980～0．9999。方法对8种目标物的加标回收率为79．1％～101．0％，相对标准偏差（RSD）为4．3％～14．3％（n=6）。对6份南京实际大气样品的检测结果表明：离子阱质谱的选择反应监测（selected reaction monitoring，SRM）技术能有效的降低背景干扰。优化后的MS／MS方法对目标化合物有较高的灵敏度，可应用于大气中痕量多溴二苯醚的定量检测。

液相色谱-电喷雾离子阱质谱联用分析河豚毒素

应用C18反相色谱柱和HILIC亲水作用色谱柱,建立了河豚毒素（TTX）的液相色谱-电喷雾离子阱质谱联用分析方法。应用反相色谱法,在选择离子监测（SIM）模式下,对TTX的分析具有良好的线性响应（r=0.9992）,方法检出限（S/N=3）为120pg,相对标准偏差（RSD）低于10%;应用亲水色谱法,在SIM和选择反应监测（SRM）模式下同样具有良好的线性响应（r=0.9996和r=0.9998）,检出限（S/N=3）分别为15pg和3.75pg,在SIM模式下RSD低于10%,在SRM模式下RSD处于10%~20%之间。亲水作用色谱柱大大提高了方法的灵敏度,由于SIM模式具有较高的精密度,建议应用HILIC色谱柱的SIM模式定量分析TTX。

色谱-三重四级杆质谱定量分析深度加氢脱硫柴油中的二苯并噻吩类化合物

利用选择反应监测模式（SRM）,建立了一种快速、灵敏的深度加氢脱硫柴油中二苯并噻吩类化合物（DBTs）的气相色谱-三重四级杆质谱（GC-QQQ-MS/MS）测定方法。以5种DBTs混合标样绘制标准曲线,对深度加氢柴油中的C0～C4烷基取代二苯并噻吩（（C0~C4）DBTs）进行定量。实验结果表明,采用该方法可以避免柴油中其他化合物的干扰,快速准确测定深度加氢脱硫柴油中（C0~C4）DBTs的含量,而且重现性好,相对标准偏差低于10%,方法的线性相关系数R2〉0.9996,检出限和定量限分别在0.0006~0.0017mg/L和0.002~0.006mg/L范围,回收率在98.23%~114.59%范围。该方法适用于深度加氢脱硫柴油中DBTs的测定。

高效液相色谱-三重四级杆质谱分析尿样中芥子气小分子代谢产物

采用高效液相色谱-三重四级杆质谱(HPLC-MS/MS),对尿样中芥子气的小分子代谢产物硫二甘醇(TDG)、1-甲基亚砜-2-[2-(甲基硫醚)-乙基砜]乙烷(R6)和1,1’-砜-双[2-(甲基亚砜)乙烷](R7),进行一级质谱和二级质谱分析检测,建立了快速、高效、检测限更低的选择反应质谱检测(SRM)分析方法。该方法成功应用于禁止化学武器组织(OPCW)第二次生物医学样品演练未知尿样的分析检测,准确筛查出所有尿样中的芥子气小分子代谢产物。

一种基于iSRM策略的蛋白质组质谱数据分析工具

由于重复性好、定量精度高,基于质谱的选择反应监测(SRM)技术在蛋白质定量分析中的应用越来越广泛。智能选择反应监测(iSRM)是一种新型的SRM实验策略。针对该策略产生的质谱数据,开发了一个肽段定量信息提取工具——iSQuant。该工具使用MATLAB脚本语言编写,简便易用。利用重复实验数据和标准实验数据对iSQuant的性能评估表明,iSQuant具有优越的可重复性能,定量结果和理论丰度线性度很高。

液相色谱-质谱法测定墨水中蓖麻油硫酸钠

建立了用液相色谱串联质谱对蓖麻油硫酸钠进行定性定量的分析方法。采用SR-CN型色谱柱（100 mm×4.6 mm,3.5μm）,以甲醇-水（1＋1）为流动相,流速500μL·min^-1。质谱测定中采用电喷雾电离源,负离子采集模式,定量离子对m/z377/297。该方法检出限为0.1 mg·L^-1,线性范围0.4-400 mg·L^-1。方法用于墨水中蓖麻油硫酸钠的定性定量分析。

气相色谱串联质谱法测定蔬菜、水果中30种农药残留

建立一种应用气相色谱串联质谱法对蔬菜、水果中多种农药残留进行分析测定的方法。样品采用QuEChERS方法进行前处理,用1%乙酸的乙腈溶液提取后,净化包(内含PSA、C18、GCB、MgSO_4)净化,应用全扫描模式(Full Scan)对30种农药进行定性,选择反应监测模式(SRM)定量,外标法计算结果。通过对样品前处理方法的优化,减小了本底值,使定量的准确度得到了提高,在0~0.20mg/kg线性范围内呈良好的线性关系,相关系数大于0.99,添加浓度为0.05~0.20mg/kg,回收率为74%~114%。本文研究为蔬菜水果中多种农药残留的分析测定提供了可靠依据。

3200 QTRAP串联四极杆线性离子阱质谱

特点1．传统串联四极杆质谱仪的所有功能：全扫描／子离子扫描功能／母离子扫描功能／多反应监测扫描MRM／中性丢失扫描功能／选择离子扫描SIR，2高灵敏的线性离子阱扫描功能：增强全扫描功能／时间延迟碎片扫描功能／增强子离子扫描功能（EPI）／多电荷扫描功能／三级质谱扫描功能。

基于LC-MS/MS技术同时定量分析片仔癀中特征胰酶水解肽

目的:阐明片仔癀中的蛋白组,定量分析其中的特征胰酶水解肽,以提高片仔癀的质量控制水平。方法:优化总蛋白提取条件,采用二辛可宁酸(BCA)法测定总蛋白含量,利用鸟枪法蛋白组学表征片仔癀的蛋白组,并进一步选择含量较高、稳定性好、长度适宜的特征多肽作为目标分析物,采用在线能量分辨质谱法(online ER-MS)优化特征肽的离子对及最佳碰撞能,建立反相液相色谱-选择反应监测(RPLC-SRM)定量分析方法,测定11批片仔癀中目标多肽的含量。结果:利用UniProt数据库从片仔癀中共鉴定了来源于200个蛋白的343个肽段,以酶和骨架蛋白为主;筛选得到ALSSALHER、TLLEGEESR和VAPLGEEFR 3个特征肽,以其作为目标分析物进行定量分析,online ER-MS优化3个特征肽的定量参数离子对分别为m/z 492.3→799.4、517.3→819.4和509.3→637.3,碰撞能分别为25.0、24.4、28.6 eV。方法学验证符合定量要求,3个多肽类成分在各批片仔癀样品中均被检出(ALSSALHER:0.06~0.44μg·g^(–1);TLLEGEESR:0.08~0.26μg·g^(–1);VAPLGEEFR:0.27~1.09μg·g^(–1)),含量差异较小,其中特征肽VAPLGEEFR的含量较高。结论:建立的方法可靠,可为富含蛋白类成分的中药制剂的质量评价提供思路与方法。

选择反应监测技术在蛋白质组学研究中的应用

基于三重四极杆质谱仪的选择反应监测(SRM)技术是一种根据已有信息或理论信息靶向进行质谱信号采集的技术,具有高选择性、高重复性、高灵敏度、宽动态范围等特点,已被广泛应用于蛋白质组学研究,用于生物样本中蛋白质的绝对定量分析.本文对SRM技术的特点、发展过程、在蛋白质组学中的应用现状以及发展前景进行了概述.

氰戊菊酯残留的GC-MS/MS测定

实验比较了用气相色谱-质谱测定氰戊菊酯残留的三种模式:全扫描、选择离子监测、选择反应监测,结果表明选择反应监测的灵敏度和选择性最好,尤其适合于复杂基质样品的测定。

洋葱、茴香中12种农药残留量的检测

本研究在三重四极质谱的选择性反应监测技术（SRM）基础上建立了洋葱、茴香等复杂基质样品中农药残留的检测方法，通过SRM扫描排除基质的干扰，对螨剂和杀菌剂等12种农药进行了准确的定性、定量分析。

超高效液相色谱-串联质谱法快速检测保健食品中非法添加的6种减肥类化学成分的研究

目的:建立减肥类保健食品中非法添加的6种化学成分的快速检测方法。方法:采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS-MS),Acquity BEH-C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),流动相乙腈-0.1%甲酸进行梯度洗脱,电喷雾电离(ESI),选择性离子扫描(SIR)和多反应监测(MRM)模式,对25个减肥类保健食品进行6种化学成分非法添加的分析。结果:6份样品检出了非法添加成分盐酸西布曲明和酚酞。结论:该方法专属性强,灵敏度高,适用于减肥类保健食品中非法添加成分的筛选及确证工作。

固相萃取净化-气相色谱/串联质谱法测定茶叶中54种农药残留量

建立了固相萃取净化-气相色谱/串联质谱(SPE-GC-MS/MS)分析茶叶中54种农药残留的方法。样品用乙睛提取,提取液经石墨化炭黑/氨基固相萃取柱净化后,采用气相色谱-串联质谱方法在分时段选择反应监测模式下进行测定,外标法定量。当54种农药加标水平为10、50、100μg/kg时,回收率为60%～150%,方法的相对标准偏差小于16%;定量限(LOQ)均小于10μg/kg;在20～320μg/L范围内线性关系良好。方法已用于同时检测茶叶中农药多残留。

超高效液相色谱-质谱联用同时测定丹参中7种成分含量

目的:建立同时测定丹参中原儿茶醛,丹酚酸B,迷迭香酸,丹参酮Ⅰ,丹参酮ⅡA,隐丹参酮,二氢丹参酮7种成分含量的超高效液相色谱-质谱联用分析方法。方法:采用Hypersil Gold C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.9μm),以0.1%甲酸溶液-甲醇为流动相梯度洗脱,流速0.3 m L·min^(-1),柱温30℃。采用电喷雾离子源(ESI),正负离子交替扫描模式,选择反应离子检测(SRM)。结果:7种成分在1~460μg·L^(-1)有良好的线性关系,平均回收率83.41%~116.05%,检测限0.046~0.5μg·L^(-1),RSD均<4.7%。结论:该方法快捷、准确、重复性好、灵敏度高,可同时测定丹参药品中7种成分的含量,可用于丹参药材及其制剂的研究和质量控制。