748例遗传性代谢病高危儿童串联质谱筛查研究

目的探讨串联质谱技术在遗传性代谢病高危儿筛查中的价值。方法采集临床疑似遗传性代谢病高危儿童滤纸血片,用衍生法进行前处理后进样,用API3200串联质谱仪分析样本中氨基酸和酰基肉碱谱及浓度。结果在748例高危儿童中检出氨基酸代谢病(AAD)、有机酸代谢紊乱(OAD)和脂肪酸氧化缺陷病(FAOD)29种共95例,检出率12.70%.其中AAD占56.84%(54/95),OAD20.00%(19/95),FAOD23.16%(22/92)。检出较多的代谢异常为瓜氨酸代谢异常(高瓜氨酸血症、Citrin缺陷病、低瓜氨酸血症等)、持续性高苯丙氨酸血症(经典型苯丙酮尿症、高苯丙氨酸血症和四氢生物蝶呤缺乏症等)、枫糖尿病、丙酰肉碱代谢异常(甲基丙二酸血症或丙酸血症等)、中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症、肉碱转运障碍等。结论应用串联质谱技术可定性和定量分析体内代谢物质浓度水平和代谢关系的异常变化,对氨基酸代谢病、有机酸代谢紊乱和脂肪酸氧化缺陷病等30余种遗传性代谢病进行高危筛查或临床检测。

婴幼儿遗传代谢性疾病的临床、影像学特点及串联质谱筛查

先天性代谢缺陷病（IEM）或称遗传代谢性疾病（IMD）是由于基因突变导致机体生化物质在合成、代谢、转运和储存等方面出现异常的总称。IMD可发生于各个年龄阶段，以新生儿和婴幼儿期多见^[1]，常造成脑部损伤。随着生化及影像学的发展，对IMD的认识进一步加深，现将其临床、影像学特点及串联质谱（MS/MS）筛查情况综述如下。1临床特点虽然IMD临床表现不典型，但是新生儿期发病者多有如下特点：①病情重，进展快，病死率高。

护理干预对串联质谱筛查遗传代谢病高危儿家属心理健康的影响

目的探讨护理干预对接受串联质谱筛查遗传代谢病高危儿家属心理健康的影响。方法48例接受串联质谱筛查遗传代谢病高危儿家属随机等分为对照组和干预组,对照组按常规进行健康教育,干预组采用形式多样的护理干预给予干预对象心理支持,于干预前后对家属进行焦虑程度(SAS)、抑郁程度(SDS)评分并分析结果。结果高危儿家属接受护理干预后焦虑程度、抑郁程度评分增长值低于对照组(p<0.05)。结论高危儿接受串联质谱筛查可影响家属的心理健康,护理干预可缓解该损害。

珠海地区新生儿遗传代谢病串联质谱筛查正常参考区间建立的临床研究

目的 研究建立珠海地区正常新生儿干血斑样本中11种氨基酸和31种肉碱含量的参考区间,为新生儿遗传代谢病串联质谱筛查的结果解读提供理论依据。方法 20364例新生儿干血斑样本,采用串联质谱技术对其11种氨基酸和31种肉碱含量进行检测,按纳入标准选取18542例新生儿筛查数据,以百分位数法(P_(0.5)~P_(99.5))统计参考区间;采用摘要独立样本t检验比较珠海地区串联质谱检测结果与中国临床机构检测结果的差异;Wilcoxon秩和检验比较珠海地区串联质谱参考区间与上海新华医院的差异。结果 20364例新生儿初筛阳性687例,召回621例,确诊遗传代谢病7例,其中原发性肉碱缺乏症2例, citrin蛋白缺乏症、高甲硫氨酸血症、甲基丙二酸血症、中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症和极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症各1例。氨基酸代谢病、有机酸代谢病、脂肪酸氧化障碍的发病率分别为0.010%(1/10182)、0.005%(1/20364)和0.020%(1/5091),总发病率为0.034%(1/2909)。18542例新生儿11种氨基酸检测结果与中国临床机构检测结果比较,差异均有统计学意义(P<0.001);18542例新生儿31种肉碱中除异戊烯酰肉碱(C5:1)、己酰肉碱(C6)、辛酰肉碱(C8)、癸二烯酰肉碱(C10:2)、肉豆蔻二烯酰肉碱(C14:2)、3-羟基棕榈酰肉碱(C16OH)、3-羟基棕榈烯酰肉碱(C16:1OH)、3-羟基十八碳酰肉碱(C18OH)、3-羟基十八碳烯酰肉碱(C18:1OH)等指标外,其余肉碱检测结果与中国临床机构检测结果比较,差异均有统计学意义(P<0.001)。珠海地区新生儿丙氨酸(Ala)、甘氨酸(Gly)、亮氨酸(Leu)、鸟氨酸(Orn)、苯丙氨酸(Phe)、酪氨酸(Tyr)、缬氨酸(Val)、游离肉碱(C0)、己二酰肉碱(C6DC)参考区间下限与新华医院新生儿比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 珠海地区新生儿遗传代谢病串联质谱筛查11种氨基酸和31种肉碱参考区间的建立,为本地区新生儿遗传代谢病串联质谱筛查的结果解读提供了理论依据。

遗传代谢病高危患儿175例串联质谱筛查分析

目的探讨串联质谱检测筛查遗传代谢病高危患儿的应用价值。方法选择海口人民医院儿科就诊的遗传代谢病高危患儿175例,采用串联质谱技术检测患儿血液及尿液标本,根据串联质谱血液结果,结合临床表现、常规实验室检查及尿液串联质谱检查综合考虑,最终通过基因检测明确遗传代谢病的诊断。结果175例遗传代谢病高危患儿中,串联质谱检测结果异常27例(异常率15.43%)。其中确诊为遗传代谢病1例(确诊率0.57%),经基因检测为戊二酸血症Ⅰ型;其他代谢异常26例,包括氨基酸异常23例和酰基肉碱异常3例。结论串联质谱是筛查遗传代谢病的有效方法,但假阳性率较高;加强检测质量控制,结合临床表现及其他实验室检查指标可有效提高筛查效率。

遗传性代谢病高危儿童串联质谱筛查分析

目的:探讨遗传性代谢病高危儿童的串联质谱筛查结果。方法:选取我院康复科、消化内科和神经内科门诊于2016年7月至2016年12月间接收的常规筛查儿童1040例,采集足跟血液为标本,应用串联质谱仪对血液标本进行氨基酸谱、酰基肉碱谱浓度分析,回顾分析筛查结果。结果:1 040例标本中,16例检出为阳性,所占比例为1.54%,其中甲基丙二酸血症8例,异戊酸血症4例,希特林蛋白缺乏症4例。与最终病理分析结果一致。结论:串联质谱筛查可检测遗传性代谢病,而且准确率高,其对儿童遗传性代谢病的筛查有着重要意义。

11204例新生儿串联质谱筛查结果分析

目的通过采用串联质谱技术对我院新生儿进行多种遗传代谢病的筛查,探讨其应用价值,并了解我市串联质谱目标筛查疾病的发病情况。方法采集新生儿足跟血干血滤纸片,利用串联质谱筛查技术对新生儿进行氨基酸代谢、有机酸代谢和脂肪酸氧化代谢三类共26种遗传代谢病初筛,可疑阳性者召回采集尿液、血浆进行有机酸、氨基酸及基因突变的分析,并结合其临床表现进行确诊。结果 11 204例新生儿中筛查出可疑阳性295例,阳性率1/38;确诊5例患儿,男4例,女1例,发病率为1/2241。结论应用串联质谱技术进行新生儿疾病筛查,有利于新生儿遗传代谢病的早期发现及诊治,有效保障儿童健康提高出生人口素质。

高分辨质谱靶向筛查技术鉴别阿胶中杂皮源成分

建立了高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱靶向筛查鉴别阿胶中猪皮、骆驼皮、羊皮、牛皮、马皮、龟甲杂皮源成分的方法。阿胶、黄明胶、龟甲胶、新阿胶对照药材经胰蛋白酶酶解后,于Thermo Accucore aQ C18色谱柱(150 mm×2.1 mm,2.6μm)上分离,在电喷雾正离子扫描模式下,分别以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相梯度洗脱,进行一级质谱和二级质谱全扫描检测,采用Library View软件建立不同杂皮源特征肽的一级精确质量数据库和二级碎片质谱库。样品同法处理后上样分析,采用Peak View软件将样品高分辨数据与杂皮源特征肽数据库中的质谱图、精确分子离子质量数、碎片离子质量数、保留时间等相关参数进行靶向筛查鉴别分析。采用建立的方法对实际样品阿胶、阿胶糕、阿胶口服液、阿胶膏、阿胶浆筛查分析,发现有1批次阿胶口服液、1批次阿胶糕样品中筛查匹配的特征肽与杂皮源特征肽数据库中的牛皮-黄明胶特征肽碎片离子一致,推断该阿胶口服液和阿胶糕中可能加入牛皮;1批次阿胶样品中筛查匹配的特征肽与杂皮源特征肽数据库中的猪皮-新阿胶特征肽碎片离子一致,推断该阿胶样品中可能加入猪皮。该方法可实现无标准品情况下阿胶掺伪的定性筛查,具有高通量、准确、简便、快捷的特点,为阿胶品质监控提供技术支持。

新生儿遗传代谢病串联质谱筛查影响因素和基因检测结果分析

目的 探讨该地区串联质谱技术筛查新生儿遗传代谢病的发生情况,并分析影响筛查指标的可能因素及新生儿遗传代谢病基因检测结果与疾病的关联性。方法 统计分析2018年1、2季度在自贡市妇幼保健院新生儿筛查中心采用串联质谱技术进行遗传代谢病筛查的6 038例新生儿的临床资料,记录串联质谱技术筛查的可疑阳性患者,统计发生率;将筛查结果正常的样本分别根据新生儿出生时孕周、出生体质量、采血时间及所在地区进行分组,比较各组新生儿各种氨基酸水平;对可疑阳性患儿进行目标序列捕获测序(遗传代谢病PANEL),根据测序结果查询OMIM、Dicepher等数据库分析基因检测结果与疾病的关联性。结果 本研究6 038例新生儿中串联质谱筛查可疑阳性占3.44%(208/6 038);剔除可疑阳性新生儿后,早产组与足月组新生儿体内精氨酸(ARG)、苯丙氨酸(PHE)及瓜氨酸(CIT)浓度比较,差异均无统计学意义(均P>0.05);出生体质量≤2 500 g组与>2 500 g组新生儿体内ARG、甘氨酸(GLY)、CIT、亮氨酸(LEU)、甲硫氨酸(MET)及PHE浓度比较,差异均无统计学意义(均P>0.05);采血时间3~7 d组与>7 d组新生儿体内PHE、酪氨酸(TYR)及脯氨酸(PRO)浓度比较,差异均无统计学意义(均P>0.05);内江地区与自贡地区新生儿体内丙氨酸(ALA)、缬氨酸(VAL)、GLY、LEU、TYR及PRO浓度比较,差异均无统计学意义(均P>0.05);除以上几种外,其余各种氨基酸浓度早产组与足月组比较、出生体质量≤2 500 g组与>2 500 g组比较、采血时间3~7 d组与>7 d组比较、内江地区与自贡地区比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);可疑阳性患儿测序结果确诊1例酪氨酸血症,1例短链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症(SCAD),1例甲基丙二酸血症,1例2-甲基丁酰甘氨酸尿症,4例3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症携带者,基因突变位点均在数据库中有明确报道。结论 串联质谱检测可早期发现新生儿遗传代谢病,但应根据新生儿胎龄、出生体质量、采血时间以及地区差异确定截断值,以降低假阳性率;高通量测序分析遗传代谢病相关基因不仅可以确诊疾病,还能预测相关疾病的发生,提早进行预防,降低发病率及死亡率。

孕产妇对新生儿遗传代谢病串联质谱筛查认知及支付意愿分析

目的了解孕产妇对新生儿遗传代谢病串联质谱筛查的认知现状及支付意愿,为扩展新生儿疾病筛查提供科学依据。方法 2019年6月,采用自行设计的问卷调查深圳市6家助产机构的720例孕产妇,调查内容包括:孕产妇基本信息、对新生儿遗传代谢病串联质谱筛查的认知和支付意愿状况。结果共回收720份有效问卷,回收有效率92. 31%。孕产妇对新生儿遗传代谢病串联质谱筛查的知晓率为54. 44%,从医院获取信息占90. 31%,认为有必要增加新生儿遗传代谢病串联质谱筛查占68. 33%,愿意让孩子参与筛查占81. 67%。孕产妇对新生儿遗传代谢病串联质谱筛查愿意支付金额的平均数为242元,最高愿意支付金额的平均数为656元,其支付意愿水平与家庭收入有关。结论孕产妇对新生儿遗传代谢病串联质谱筛查认知度不高,需给予多渠道健康教育,树立正确的筛查理念,提升其认知水平。提倡政府与家庭共同承担新生儿遗传代谢病串联质谱筛查费用,提高新生儿家长让孩子参与筛查的积极性。

13种多酚类异构体的超高效液相色谱-四级杆串联飞行时间质谱分析

建立了13种多酚类异构体的超高效液相色谱-四级杆串联飞行时间质谱(UPLC-QTOF-MS)分析方法。采用Kinetex 2.6μm Biphenyl色谱柱(2.1 mm×100 mm,100Å),以0.1%甲酸水溶液-甲醇/乙腈(V/V=30/70)为流动相,梯度洗脱,在负离子模式下全扫描采集;基于化合物一级精确质量数、同位素分布、二级全谱以及保留时间,对山奈酚、樱花素、绿原酸、橙皮甙及其异构体等13种多酚进行了分析。将建立的多酚类异构体筛查方法应用于桑叶茶和绿茶实际样品的分析,检测到绿原酸及其异构体和山奈酚-3-O-葡萄糖醛酸苷等7种组分。该方法可用于茶多酚等植物多酚类或有机合成多酚类化合物的快速筛查及定性定量分析。

社区护理干预对串联质谱筛选遗传代谢病高危儿家属心理健康的影响

目的探讨使用社区护理干预对串联质谱筛查遗传代谢病高危儿家属心理的调节作用。方法选择150例采用串联质谱筛查遗传代谢病高危儿家属,将其随机分成观察组75例与对照组75例,对照组按常规进行健康教育,干预组采用社区护理干预给予干预对象心理支持,于干预前后对家属进行焦虑程度(SAS)、抑郁程度(SDS)评分并分析结果。结果随着受教育程度的增加,焦虑程度越来越高(P<0.05);随着受教育程度的降低,抑郁程度越来越高(P<0.05);在干预后,干预组患者家属SDS评分与SAS评分分别为(41.3±6.2)与(36.9±11.6)分,均显著小于对照组的(49.9±7.8)与(46.7±9.2)分,差异有统计学意义(P<0.05)。结论高危儿接受串联质谱筛查可影响家属的心理健康,护理干预可缓解该损害。

2014-2018年温州地区新生儿遗传代谢疾病筛查情况分析

目的:评价2014-2018年温州地区新生儿遗传代谢病筛查工作质量,分析浙江省温州地区新生儿遗传代谢病流行情况,为制定出生缺陷防控政策提供依据。方法:通过对2014-2018年温州出生接受新生儿遗传代谢疾病筛查的新生儿采集足跟血,行荧光免疫法及串联质谱法筛查,对筛查结果及标本质量进行讨论。结果:温州新生儿遗传代谢疾病筛查5年筛查率达99.94%,串联质谱筛查率67.40%,可疑阳性召回率98.45%,血片不合格率0.07%,确诊遗传代谢疾病1066例,疾病检出率0.22%。结论:温州市新生儿疾病筛查率、血片质量均保持较高水平,推行串联质谱筛查是未来新生儿疾病筛查的工作方向。

简谈宁波地区极低出生体重儿串联质谱检查中氨基酸及游离肉碱切值的建立

分析本地区极低出生体重儿(very low birth weight,VLBW)和足月正常出生体重儿串联质谱检查中氨基酸和游离肉碱的差异,建立VLBW的筛查切值,降低假阳性率。方法:回顾性分析2019年1月~2021年12月于宁波市妇女儿童医院出生并进行遗传代谢病筛查、临床资料完整、未患遗传代谢病的所有352例VLBW数据,同时随机抽样选取同时期出生的400例足月正常出生体重儿作为正常对照组,比较两组间各氨基酸及游离肉碱值的差异,建立VLBW组各指标的切值,分析新旧切值间初筛阳性率的差异。结果:1.足月正常出生体重儿组初筛阳性率1.0%,VLBW组初筛阳性率14.77%,两组间所有11种氨基酸及游离肉碱比较差异均有统计学意义(均P<0.001)。2. 在VLBW组中采用各氨基酸及游离肉碱值的P0.5-P99.5作为新的参考区间进行评判,初筛阳性率从14.77%下降到1.42%,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:VLBW串联质谱筛查的氨基酸及游离肉碱与正常出生体重儿存在显著差异,建立其自身切值可提高筛查效能。

深化风险检验模式的实践与探索

为及早发现风险,更好地服务监管,本文总结了在化妆品检验工作中发现和识别风险的几种方式,提出循证检验方式并简述其特点。通过结合案例分析说明了循证检验具有发现风险点等优势,并探索性地提出对深化风险检验模式的三点建议,即增强风险管理意识、加强基础能力建设、优化检验方式组合等,以期为提升化妆品监管效能发挥更大作用。

40例肉碱缺乏症新生儿的生化和遗传学特征

目的:原发性肉碱缺乏症(primary carnitine deficiency,PCD)是一种罕见的可致新生儿死亡的脂肪酸代谢紊乱性疾病。本研究对新生儿足跟血行串联质谱分析筛查出的肉碱缺乏儿,进一步行血肉碱水平分析及SLC22A5基因检测,为PCD的早期诊断提供依据,同时探索血肉碱水平与SLC22A5基因型的关系。方法:收集新生儿血串联质谱筛查游离肉碱(free carnitine,C0)值<10μmol/L的40例患儿为研究对象,用Sanger测序方法对PCD的致病基因SLC22A5基因进行检测,分析肉碱水平、基因检测结果及两者的关系。结果:共检出SLC22A5基因变异15种(42个),包括11种致病或可能致病变异和4种意义不明变异。发现c.288del G(p.G96fs X33),c.744745ins TCG(p.M258L259ins S),c.752A>G(p.Y251C),c.495C>A(p.R165E),c.1298T>C(p.M433T)5种新突变。在40例串联质谱初筛肉碱缺乏的患儿中,14例被确诊为PCD,包括SLC22A5基因纯合突变2例,复合杂合突变12例;14例检出1个SLC22A5基因突变;12例未检出SLC22A5基因突变。确诊为PCD的患儿初筛C0值为(4.95±1.62)μmol/L,复查C0值为(3.90±1.33)μmol/L;未检出突变的患儿初筛C0值为(7.04±2.05)μmol/L,复查C0值为(8.02±2.87)μmol/L,确诊为PCD的患儿与未检出突变患儿的初筛及复查C0值差异均有统计学意义(均P<0.05);检出截短突变的患儿与未检出截短突变的患儿初筛C0值差异有统计学意义(P=0.022)。结论:发现的5种新突变丰富了SLC22A5基因突变谱;新生儿足跟血串联质谱初筛C0值<5μmol/L与SLC22A5基因纯合或复合杂合突变型具有更强的相关性;具有截短突变的患儿较不含截短突变患儿的C0值可能更低。

戊二酸血症Ⅰ型的异卵双胞胎的临床表型及新基因变异

目的 探讨1例经串联质谱新生儿筛查发现并确诊的戊二酸血症Ⅰ型双胞胎的临床表现和基因变异特点.方法 收集患儿的临床资料,采用定制的常见遗传代谢病基因包进行捕获测序和致病变异分析,用Sanger法对双胞胎及其父母进行测序验证.结果 男胎血片戊二酰基肉碱(C5DC+C6OH)初筛值为3.26 μmol/L,尿气相色谱质谱分析戊二酸547.51,颅脑B超检查示“室管膜下出血可能”,尚未出现严重的临床表现,诊断为予特殊奶粉喂养、加用左卡尼汀口服后生长发育情况良好.患儿GCDH基因存在两处杂合变异:c.109_110delCA和c.416C>G,其中c.416C>G为疑似致病变异,c.109_110delCA为未经报道的变异,分别来源于其父母.女胎存在一个c.416C>G位点杂合变异.结论 血串联质谱、尿气相色谱质谱分析结合影像学、基因检测可明确诊断戊二酸血症Ⅰ型,对于早期诊断和治疗本病具有重要的价值.

沈阳地区新生儿遗传性耳聋基因突变情况调查

目的通过耳聋相关基因突变率测试新生儿先天性听力损失(HL)的发生率。方法针对沈阳地区连续性新生儿的临床研究,使用PCR反应研究测试了538例出生后3天新生儿,包括四个基因的七个位点:GJB2(176 del 16,235del C,299 del AT),SLC26A4(IVS7-2 A>G,2168 A>G),MTRNR1(1555 A4G)和GJB3(538 C>T),同时记录婴儿出生一般状况。结果 538名新生儿,30例携带致病突变(5.576%)。GJB2(176del 16,235 del C,299 del AT),GJB3(538C>T),SLC26A4(IVS7-2A>G,2168 A>G)和MTRNR1(1555 A>G)突变率分别为0.186%,2.416%,0.558%,0.186%,1.673%,0.186%和0.372%。Logistic回归分析显示基因突变与婴儿性别,早产,双胎状态或出生体重无统计学意义。结论 GJB2(235 del C)突变是中国人群中最常见的耳聋相关突变,耳聋基因的遗传筛选将有助于提高新生儿先天性听力损失的筛出率。