AUTOF MS 1000质谱鉴定系统对临床实验室常见菌株鉴定能力的评估

目的评估Autof MS 1000质谱鉴定系统对临床实验室常见菌株的鉴定能力。方法参考CLSI M52标准对Autof MS 1000质谱鉴定系统进行评估。菌株鉴定的评估指标包括准确度和精密度。准确度评估以Bruker MALDI-TOF作为参比设备,以Autof MS 1000为待评估设备,选取231株能够涵盖实验室80%~90%的常见分离菌株及1株室间质评菌株作为检测标本,包括革兰氏阳性需氧菌77株,革兰氏阴性需氧菌95株,厌氧菌30株,酵母样真菌30株,待评估设备鉴定结果与参比设备鉴定结果一致时判断为相符,若结果不一致则以测序方法(细菌为16S RNA,真菌为ITS区测序)鉴定结果为准。精密度评估为选取12株室内质控菌株和临床分离菌株作为检测标本,在Autof MS 1000质谱鉴定系统上进行重复性测试,每株菌重复检测3次,判断其鉴定结果的一致性。以准确度大于90%、精密度大于95%为判断合格标准。结果232株临床实验室常见分离菌株鉴定结果准确度为100%;12株室内质控菌株和临床分离菌株重复性检测结果的精密度为100%。结论Autof MS 1000质谱鉴定系统对临床实验室常见菌株鉴定的准确度和精密度都很高,并且具有快速、低耗及易操作等优势,建议可在临床微生物实验室推广使用。

Autof MS 1000质谱鉴定系统对临床分离病原菌的鉴定能力评价

目的分析Autof MS 1000质谱鉴定系统和VITEK 2 Compact全自动微生物分析系统对临床分离病原菌鉴定的一致性和准确率,评价Autof MS 1000质谱鉴定系统对病原菌的鉴定能力。方法收集该院2020年9月至2021年5月分离自临床的非重复菌株共190株,分别采用Autof MS 1000质谱鉴定系统和VITEK 2 Compact全自动微生物分析系统两种细菌鉴定仪进行鉴定,鉴定结果不一致或未鉴定出结果的菌株以16SrDNA或真菌ITS区测序结果为准,分析比较两种仪器鉴定结果的一致性和准确率。结果190株临床分离株中,在种水平上鉴定一致的有166株(87.4%),不一致的有24株(12.6%)。鉴定结果不一致的菌株经16SrDNA或真菌ITS区测序确认,Autof MS 1000质谱鉴定系统准确率为70.8%(17/24),明显高于VITEK 2 Compact全自动微生物分析系统准确率[45.8%(11/24)],差异有统计学意义(P<0.05)。Autof MS 1000质谱鉴定系统鉴定总准确率为93.2%(177/190),略高于VITEK 2 Compact全自动微生物分析系统鉴定总准确率[90.0%(171/190)],但差异无统计学意义(P>0.05),其中Autof MS 1000质谱鉴定系统革兰阳性需氧菌鉴定准确率为94.8%(55/58),略高于革兰阴性需氧菌鉴定准确率(89.2%,83/93)。厌氧菌鉴定准确率为100.0%(6/6);酵母样真菌鉴定准确率为100.0%(33/33)。结论对于临床少见菌,Autof MS 1000质谱鉴定系统较VITEK 2 Compact全自动微生物分析系统具有更高的准确率,且快速、经济,适合用于临床分离病原菌的常规鉴定。

分离胶辅助VITEK-MS质谱仪快速鉴定血培养阳性菌的方法学研究

目的探讨用分离胶采血管联合基质辅助激光解析电离飞行时间质谱系统（VITEK-MS）快速鉴定血培养阳性菌的方法。方法收集2015年3~10月广州医科大学附属第一医院BacT/ALERT3D血培养仪报阳性,且直接涂片染色为革兰阴性菌的血培养标本50例,通过分离胶采血管直接从血培养瓶中提取细菌,采用VITEK-MS对细菌进行快速鉴定;同时用常规方法对细菌进行转种培养及鉴定,比较该方法的鉴定符合率。结果 50例血培养阳性的革兰阴性菌中,21例鉴定不出细菌名,29例鉴定出细菌名,阳性率58.0%,与常规鉴定方法阳性正确率为96.6%;分离胶联合VITEK-MS较常规法提前近24h。结论采用分离胶集菌联合VITKE-MS鉴定细菌的方法,对血培养阳性革兰阴性菌的鉴定符合率高,可以大大缩短鉴定的时间,方法快速、简便。

VITEK-MS系统直接鉴定体液培养阳性标本的研究

目的利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱系统(VITEK-MS)对体液培养阳性瓶进行直接鉴定,探索快速诊断临床致病菌的新策略。方法收集体液培养阳性瓶,不经琼脂平板培养,直接利用VITEK-MS进行鉴定,并与传统生化鉴定的方法进行比较分析。结果 50例体液培养阳性瓶中,传统细菌鉴定法检出47株阳性菌,3例阴性;而VITEK-MS直接鉴定法检出31株阳性菌,同样3例阴性。VITEK-MS直接鉴定法灵敏度达65.96%,特异度为100%,临床符合率为68%。鉴定时间从24小时缩短到2小时。结论利用VITEK-MS质谱系统直接鉴定体液培养阳性标本中的病原菌,能有效缩短细菌鉴定时间,准确快速地诊断临床致病菌。

程序升温大体积进样和解卷积气相色谱-质谱法测定蔬菜水果中32种农药残留量

建立了蔬菜、水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯等32种农药的气相色谱-质谱（GC-MS）检测方法。样品经乙腈提取,石墨碳黑串联丙氨基固相萃取柱净化,采用程序升温大体积进样,GC-MS全扫描模式采集,结合解卷积技术定性分析,内标法定量。分别对程序升温和大体积进样等条件进行了研究,并考察了方法选择性和耐用性。在最优条件下,32种农药的响应值与浓度呈良好的线性关系（r〉0.995）,各农药的方法检出限为2.0~5.0μg/kg,以菠菜、四季豆和黄瓜为代表基质,进行3个水平（0.010~0.50 mg/kg）的加标回收试验（n=6）,回收率为65.2%~120.3%,相对标准偏差（RSD）为4.1%~22.3%。该方法快速、灵敏、可靠、耐用,能满足蔬菜、水果中多类多残留痕量分析的要求。

蛇龙珠与卡曼娜葡萄酒主要呈香物质鉴定

利用自动质谱图解卷积和鉴定系统并结合标样和保留指数定性在蛇龙珠和卡曼娜葡萄酒中鉴定出116种挥发性风味物质,并根据定量结果和各物质的感官阈值对每种物质的香气活性值(OAV)进行计算,寻找出2种葡萄酒中的主要呈香物质并根据OAV值对这2种葡萄酒的香气轮廓进行了模拟计算。研究发现我国河西走廊的蛇龙珠葡萄酒和智利莫莱山谷的卡曼娜葡萄酒总体香气轮廓较为相似,蛇龙珠中的C6醇类、脂肪酸乙酯、脂肪酸、醛、萜烯、降异戊二烯和内酯类物质含量较高,而卡曼娜中的乙酸酯、高级醇和酮类物质含量较高。蛇龙珠的花香、焦糖味和橡木味相对较强,β-大马士酮、左旋-2,3-丁二醇、苯乙醛和己酸乙酯、己酸、异丁醇、异戊醇7种物质是2种葡萄酒共同的主要呈香物质。

气相色谱-质谱联用分析5种有机磷农药时氢气代替氦气作为载气的可行性考察

迄今为止,氦气几乎是气相色谱-质谱联用仪运行中唯一可选的载气。本文使用气相色谱-质谱联用仪考察了氢气和氦气分别作为载气时,对5种有机磷农药混合标准溶液的检测,以确定氢气代替氦气作为气相色谱-质谱联用仪载气用于有机磷农药分析的可行性。用工作站自带解卷积软件(自动质谱解卷积鉴定系统,AMDIS32),结合自建"有机农药质谱库"对结果进行了解析,而后用SPSS统计软件对数据进行了聚类分析。结果发现,以氢气为载气时虽然出峰稍快,但色谱峰分离度较低,解良度较低,且待测物信号不稳定,测定准确度较低,有些化合物甚至检测不到。因此以氢气为载气分析有机磷农药时应对测定准确度、信号稳定性、安全性等诸多因素进行慎重考虑。

4种纤维头对草莓香气成分的萃取效果

【目的】研究不同固相微萃取纤维头对草莓香气成分的萃取效果和质谱数据的自动鉴定方法,为草莓品质育种及其深加工提供一种简单、准确的研究方法。【方法】采用固相微萃取-气相色谱/质谱-自动质谱解卷积鉴定系统检测成熟草莓果实中的香气成分。【结果】在成熟草莓果实中共检测到97种香气成分,主要成分为酯类、醇类、酮类和萜烯类化合物,分别占已检出香气成分总数的42.3%、13.4%、10.3%和6.2%。草莓的特征香气成分至少有8种,根据贡献大小,依次为丁酸乙酯、己酸乙酯、沉香醇、呋喃酮、丁酸甲酯、己酸甲酯、2-庚酮和橙花叔醇。50/30μm DVB/CAR/PDMS纤维头的灵敏度最高、检出的物质最多,其余依次是100μm PDMS纤维头、85μm PA和7μm PDMS。4种固相微萃取纤维头对酯类物质均有较好的萃取效果,50/30μm DVB/CAR/PDMS纤维头对酮类、萜烯类、醇类和醛类物质的萃取效果明显高于其它纤维头。【结论】50/30μm DVB/CAR/PDMS纤维头较适用于草莓香气成分的萃取。自动质谱解卷积鉴定系统处理鉴定质谱数据具有灵敏度高、准确性好、速度快的特点,值得推广应用。

优化AMDIS软件建库自动筛选常见有机毒物

目的优化AMDIS软件,建立常见有机毒物的GC/MS自动筛选方法。方法建立信息型中文常见毒物的质谱库,优化分离条件并测定多种毒物的保留时间,优化检索条件并测定多种毒物的检测限。结果建立含2344种常见药毒物的中文质谱库;测定了162种药毒物的保留时间及检测限。结论优化的AMDIS自动筛选常见药毒物,快速、灵敏、可靠,完全满足可疑含毒检材中毒物排查的要求。

GC-MS结合化学计量学方法用于缬草挥发性成分的定性研究

目的：研究缬草挥发性成分。方法：采用：以《药典（一部）》附录XD甲的标准方法提取缬草挥发性成分，采用GC－MS结合化学计量学方法对缬草挥发性成分进行定性分析。色谱柱：5 HP－MS；载气：He；流速：1．0mL／min；进样量：1μL；分流比：1∶100。质谱条件：电子轰击（ EI）离子源，辅助线温度280℃，离子源温度230℃，四级杆温度150℃；质量扫描范围：m／z 50～550。采用Chemstation和Nist 08谱库检索。结果：共鉴定出30种成分，占总含量的94％。结论：共鉴定出成分，与传统定性分析方法相比，GC－MS结合化学计量学方法具有较高的灵敏度和准确度，有效增加鉴定的成分，可用于缬草挥发性成分的定性分析。

药对木香-乌药与其单味药挥发油化学成分GC-MS的比较分析

目的分析比较药对木香-乌药与其单味药的挥发油成分。方法采用水蒸气蒸馏法从药对及其木香、乌药中提取挥发油,利用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术进行分离检测,通过质谱自动解析鉴定系统(AMDIS)结合色谱保留指数辅助定性。结果从单味药木香、乌药及其药对挥发油中分别鉴定出72、79、99种化学成分;药对与单味药挥发油共有成分26种,为药对挥发油总含量的12.4%。结论已鉴定的药对主要成分多来自单味药木香,药对挥发油组分种类为单味药的综合结果。

调味面制品中蜡样芽胞杆菌污染状况调查分析

为了分析调味面制品中蜡样芽胞杆菌污染状况,根据GB 4789.14—2014《食品安全国家标准食品微生物学检验蜡样芽胞杆菌检验》(MPN计数法),并通过QuanID微生物质谱鉴定系统对蜡样芽胞杆菌的生化鉴定结果进行了验证。发现300批次调味面制品中共有28批次检出蜡样芽胞杆菌,检出率为9.33%。QuanID微生物质谱鉴定系统对蜡样芽胞杆菌的鉴定结果与国标法生化鉴定的结果保持一致。由此可以说明,调味面制品中存在蜡样芽胞杆菌污染,另外,Quan ID微生物质谱鉴定系统鉴定蜡样芽胞杆菌相对于国标生化鉴定具有较大优势,能够简化操作,缩短检测周期,节约成本等,为快速检测蜡样芽胞杆菌等致病菌提供了技术手段。

药品检验洁净室环境菌库的初步建立

目的:通过12个月采样收集实验室洁净室环境菌,并进行分离鉴定,初步建立本实验室洁净室环境菌数据库。方法:在洁净室A、B、C、D 4个不同环境级别的区域设立监控点采集沉降菌、浮游菌及对实验人员、设备材料采集表面微生物,采用MALDI-TOF-MS鉴定系统与VITEK2 compact鉴定系统相结合进行菌株分型及初步鉴定。结果:初步确定革兰阴性菌2株,革兰阳性菌130株,霉菌8株。结论:MALDI-TOF-MS鉴定系统和VITEK2 Compact全自动微生物生化仪相结合建立实验室洁净室环境菌库,具有操作简单,实验时间短,准确性高,便于推广的特点。

通草饮片的微生物污染状况考察

目的 检查44批通草中药饮片的微生物限度,分析其微生物污染现状,为通草饮片微生物的限度检查项和限值的制定提供参考。方法 按2015年版《中国药典》中方法,测定通草类中药饮片的需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数、耐热菌数、耐胆盐G-菌数并检查大肠埃希菌、沙门菌,采用飞行时间质谱微生物鉴定系统和全自动微生物鉴定及药敏分析系统对平板中分离得到的菌株进行鉴定。结果 44批通草类中药饮片的需氧菌总数的l g平均值为4.62,耐热菌数的l g平均值为2.13,有16批样品检出霉菌,耐胆盐G^-菌N〉10~4（占18.18%）,大肠埃希菌的检出率达9.09%,污染菌为30种。结论 需煎煮类饮片目前尚无微生物控制要求,通草中药饮片的卫生状况令人堪忧,应及时制定相关微生物的限度标准。

GC/MS/DRS自动筛选可疑检材中常见毒品

本文建立了种类齐全、共487种常见毒品的AMDIS质谱目标库;在这基础上利用GC/MS/DRS功能建立质谱自动筛选常见毒品方法,使毒品检验过程简单化、快速化,结果可靠,可有效减低毒品检验的劳动强度,在基层繁重的毒品检验工作中值得推广使用。