制首乌总多糖对贫血小鼠造血祖细胞增殖的影响

目的观察制首乌总多糖(PPS)对放化疗所致骨髓抑制贫血小鼠造血祖细胞增殖的影响。方法建立骨髓抑制贫血小鼠模型,采用造血祖细胞培养技术,观察PPS体内ip给药和细胞培养直接用药对造血祖细胞增殖和骨髓有核细胞(BMC)数目的影响。结果体内用药能显著增加BMC数目,提高BFU-E、CFU-E和CFU-Meg集落数产率(P<0.01),能增加CFU-GM集落数产率(P<0.05);在一定浓度下,体外直接用药,能增加CFU-Meg集落数产率(P<0.01)。结论PPS能通过间接作用促进红系和粒系祖细胞的增殖,能通过间接和直接作用刺激巨核系祖细胞的增殖。

熟地和制首乌多糖对贫血小鼠骨髓有核细胞数和细胞周期的影响

目的:观察熟地多糖(RPS)和制首乌多糖(PPS)对骨髓抑制贫血小鼠外周血象、骨髓有核细胞(BMC)数和细胞周期的影响。方法:用60Co辐射和腹腔注射环磷酰胺(Cy)及氯霉素(Ch),建立骨髓抑制贫血小鼠模型,分别提取熟地和制首乌多糖,腹腔注射RPS(20mg/kg)和PPS(25mg/kg),观察对外周血象、BMC数的影响,并用流式细胞仪分析细胞周期。结果:RPS和PPS均能一定程度促进外周血象的恢复,明显提高骨髓抑制贫血小鼠BMC数量(P<0.01);流式细胞术分析表明,G0/G1期细胞比例明显减少(RPS:P<0.01,PPS:P<0.05),S期细胞比例明显增加(RPS:P<0.01,PPS:P<0.01)。结论:RPS、PPS能促进骨髓抑制贫血小鼠骨髓抑制的恢复,促进骨髓有核细胞进入增值周期。

促造血干细胞增殖与血红蛋白合成营养组合物对再生障碍性贫血小鼠骨髓造血功能的影响

再生障碍性贫血（aplastic amemia,AA）是一种获得性骨髓造血功能衰竭,外周血全血细胞减少为特征的疾病.其发病机制与骨髓造血干细胞、造血微环境损伤以及免疫性造血抑制有关[1].本研究结合医学营养学的相关理论,进一步探讨促进造血干细胞增殖与血红蛋白合成营养组合物对AA小鼠骨髓造血功能的恢复作用,为AA的临床治疗提供新的思路.

几种骨髓抑制性贫血小鼠模型的比较研究

目的:辐射法和化学法均能使骨髓造血机能得到抑制,但其机理不同。目前常用的骨髓抑制贫血小鼠造模方式很多。通过对单纯照射、单纯环磷酰胺注射、照射加环磷酰胺注射复合造模3种造模方式进行了比较,认为复合造模(60Co2Gy+cy 50 mg)是一种理想的骨髓全面抑制造模方式。

失血性贫血小鼠恢复过程中骨髓基质金属蛋白酶变化

目的:观察失血性贫血小鼠恢复过程中骨髓基质金属蛋白酶-2和-9(MMP-2,MMP-9)的变化,并探讨其在造血调控中的作用.方法:采用全自动血细胞分析仪、免疫组化和酶谱电泳法分别检测失血性贫血小鼠恢复过程中外周血RBC和Hb数量、骨髓细胞MMP-2和MMP-9表达以及骨髓造血微环境MMP-2和MMP-9的活性变化.结果:(1)与正常对照组相比外周血RBC和Hb数量失血后第1d急剧下降.随着恢复时间的延长,二者数目逐渐上升,到第9d已接近正常对照组水平.(2)在正常对照组检测到了较弱的MMP-2和MMP-9的表达.与正常对照组相比,失血后1d组、3d、5d和7d组小鼠骨髓细胞中MMP-2和MMP-9表达明显增加,MMP-2和MMP-9表达分别于失血后5d和3d达到峰值.与1d组相比,3d组小鼠骨髓细胞中MMP-2和MMP-9表达以及5d组小鼠骨髓细胞中MMP-2表达明显增加.(3)正常对照组中检测到proMMP-2,proMMP-9和MMP-9 3条酶带,MMP-9的活性最强.失血后1d,proMMP-2,proMMP-9和MMP-9的活性均急剧升高.随着恢复时间的延长,3者的活性逐渐降低,到第9d时恢复到接近正常对照组水平.结论:失血性贫血小鼠可能通过骨髓细胞中MMPs表达增加以及骨髓造血微环境中MMPs活性升高来促进骨髓造血功能增强,使外周血RBC和Hb的数量恢复到正常水平.

茯贞膏对贫血小鼠造血功能影响的研究

目的:探讨茯贞膏对贫血小鼠造血功能的影响。方法:选取128只BALB/c小鼠作为本次实验的研究对象,首先适应性喂养小鼠1周,然后运用物理辐射方法将小鼠进行环磷酰胺致贫血造模,造模工程结束后,将128只BALB/c小鼠按照随机数表法平均分为观察组与对照组,观察组64只小鼠,对照组64只小鼠。对两组小鼠采取不同的给药方式,给予观察组小鼠茯贞膏灌位给药,每日给药9 g/kg,9日为1个周期,连续给药1个周期;对照组给予生理盐水灌胃给药,服用剂量与观察组相同,给药周期为9 d。对两组小鼠治疗9 d后血象、骨髓有核细胞计数和脾脏指数变化情况等相关指标进行比较分析。结果:观察组小鼠治疗后RBC数值为(9.6±1.5)×10^(12)/L,对照组RBC数值仅为(7.9±1.8)×10^(12)/L,观察组RBC数值明显高于对照组数值,二者差异明显,具有统计学意义(P<0.05);观察组小鼠治疗后WBC数值为(19.7±1.3)×10~9/L,对照组WBC数值为(6.1±1.9)×10^(12)/L,对照组明显高于观察组,二者有明显差异,具有统计学意义(P<0.05);观察组小鼠治疗后HB数值为(199.5±5.6)g/L,明显高于对照组的(159.1±4.8)g/L,二者差异明显,具有统计学意义(P<0.05);观察组小鼠治疗后PLT数值为(488.2±11.4)×10~9/L,对照组小鼠治疗后PLT数值为(375.2±12.6)×10~9/L,观察组小鼠治疗后PLT数值明显高于对照组小鼠,有显著差异,具有统计学意义(P<0.05)。观察组患者治疗后骨髓有核细胞数(8.6±1.5)×10~9/L,对照组患者治疗后骨髓有核细胞数(17.9±1.8)×10~9/L,观察组明显高于对照组,二者差异明显,具有统计学意义(P<0.05)。观察组患者治疗后脾脏指数为(9.7±1.3)mg/g,对照组患者为(4.1±1.9)mg/g,观察组明显高于对照组,二者差异明显,具有统计学意义(P<0.05)。观察组小鼠各T细胞分泌细胞因子IFN-r分泌量为(17.9±1.8)pg/mL;TNF-a分泌量为(32.5±3.5)pg/mL;IL-4分泌量为(5.59±0.89)pg/mL;IL-6分泌量为(16.1±1.9)pg/mL。对照组小鼠IFN-r分泌量为(7.6±1.5)pg/mL;TNF-a分泌量为(21.5±2.5)pg/mL;IL-4分泌量为(4.48±0.23)pg/mL;IL-6分泌量为(7.7±1.3)pg/mL,观察组小鼠T细胞分泌的细胞因子各项指标均高于对照组小鼠,二者差异明显,具有统计学意义(P<0.05)。结论:茯贞膏能够显著改善贫血小鼠血象,对提高小鼠造血功能有积极影响,可试行二期临床。

补肾生血解毒方对再生障碍性贫血小鼠造血干细胞增殖的影响

目的探讨补肾生血解毒方对理化复合因素致骨髓抑制小鼠造血微环境中造血干细胞增殖的影响。方法 BALB/C小鼠随机分为空白组,模型组,中药治疗小、中、大剂量组,以^(60)Co-γ射线复合环磷酰胺致小鼠骨髓造血抑制为动物模型,补肾生血解毒方(龟板胶、鹿角胶、人参、枸杞子、黄芪、当归、黄连)干预,中药小、中、大剂量组每天分别给予相当于生药量6.14、12.29、24.57 g/kg。流式细胞仪检测小鼠骨髓细胞中CD45^+CD117^+细胞的数量,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测外周血血清中干细胞因子(SCF)含量的差异,RT-PCR检测骨髓细胞中干细胞因子受体(c-kit)基因表达的改变。结果该方可以显著增加小鼠骨髓细胞中CD45^+CD117^+造血干细胞数量,与模型组相比差异有显著性(P<0.01);外周血血清中SCF含量显著高于空白组和模型组(P<0.01),空白组和模型组之间无明显差异(P>0.05);各组小鼠骨髓细胞中c-kit基因表达无显著性差异(P>0.05),中药治疗组与模型组相比有升高趋势。结论补肾生血解毒方治疗再障可能与提高SCF活性和诱导造血干细胞增殖、分化有关,这也是该方疗效的主要作用机制之一。

制首乌总多糖对骨髓抑制贫血小鼠脾脏促红细胞生成素受体和转录因子GATA-1 mRNA表达的影响

目的观察制首乌总多糖(PPS)对放、化疗所致骨髓抑制贫血小鼠脾脏促红细胞生成素受体(EpoR)及转录因子GATA-1 mRNA表达的影响,探讨PPS补血作用的分子机制。方法建立骨髓抑制贫血小鼠模型,提取PPS,经ip给药,观察其对骨髓抑制贫血小鼠外周血及脾脏EpoR和GATA-1 mRNA表达的影响。结果PPS能促进骨髓抑制贫血小鼠外周血象恢复,并明显上调脾脏EpoR和GATA-1 mRNA的表达。结论PPS能通过促进EpoR和GATA-1 mRNA的表达,从而促进骨髓抑制贫血小鼠造血功能的恢复。

鹿龙再生汤对重型再生障碍性贫血小鼠CD4^＋CD25^＋调节性T细胞内Foxp3表达的影响

多数再生障碍性贫血（AA）由活化或功能亢进的T淋巴细胞作用于造血干／祖细胞，导致造血细胞凋亡及骨髓造血功能衰竭，而调节性T细胞（Treg）在其发病过程中起重要作用。有研究发现下调Foxp3基因，小鼠体内Treg细胞数量下降，调节功能缺陷。相关研究也表明Akt及Stat3的磷酸化水平与Foxp3蛋白的表达存在密切联系。鹿龙再生汤是我国著名老中医朱良春先生治疗AA的经验方且效果良好，但未见其细胞和分子水平的研究。本研究我们通过分析中药鹿龙再生汤对SAA小鼠模型CD4^＋CD25^＋Treg细胞Foxp3表达的影响及Akt、Stat3磷酸化水平的变化，从分子水平探讨鹿龙再生汤治疗AA可能的作用机制。

仿刺参糖胺聚糖对骨髓抑制贫血小鼠外周血及骨髓细胞周期的影响

目的观察仿刺参糖胺聚糖(HGAG)对环磷酰胺诱导的骨髓抑制贫血小鼠外周血及骨髓细胞周期的影响。方法将40只雄性昆明种小鼠随机分为正常组、模型组、HGAG治疗组(1,5,15mg·kg-1),每组8只。除正常组外其余各组腹腔注射环磷酰胺100mg·kg-1制备贫血小鼠模型,每天1次连续3d,并于造模当日起,HGAG给药组腹腔注射不同浓度的HGAG,正常组和模型组腹腔注射生理盐水,每天1次连续7d。用全自动血细胞分析仪、白细胞计数法、流式细胞术分别检测HGAG对贫血小鼠外周血、骨髓有核细胞数和骨髓细胞周期的影响。结果 HGAG低、中、高剂量组能显著升高外周血白细胞(WBC)和血红蛋白(HGB),且高剂量组还能明显升高外周血红细胞(RBC)和血小板(PLT)数量。HGAG 3个剂量组能显著增加小鼠骨髓有核细胞数和脾脏指数,而且能够促进骨髓G0/G1期细胞向S期及S期细胞向G2/M期细胞的转化,显著升高增殖指数。结论 HGAG能够解除细胞周期阻滞,促进骨髓造血细胞的增殖,增加外周血细胞、骨髓有核细胞的数量和升高脾脏指数,从而促进骨髓抑制贫血小鼠造血功能的恢复。

阿胶补血膏药效学研究

目的 :对阿胶补血膏的药效学进行初步研究。方法 :给药后测定贫血小鼠红细胞和血红蛋白含量 ,正常小鼠耐缺氧时间和血清中溶血素含量 ,脾虚小鼠的游泳时间和耐高温时间。结果 :阿胶补血膏可明显升高失血性贫血小鼠的红细胞和血红蛋白 ;延长正常小鼠的耐缺氧时间 ,使小鼠血清中溶血素含量增加 ;提高“脾虚”模型小鼠的游泳时间和耐高温时间。结论 :阿胶补血膏具有抗疲劳、耐缺氧。

Effects of Weiganli on the Hemopoietic Function of the Myelosuppressed Anemic Mice

Objective: To study the effect of Weiganli (维肝力)on bone marrow hemopoiesis. Methods: The effects of Weiganli on the peripheral blood picture and the number of bone marrow nucleated cells (BMCs) were observed in myelosuppressed anemic model mice, and the effects of Weiganli on the growth of colony forming unit-granulocyte macrophage (CFU-GM), colony forming unit-erythroid (CFU-E), burst forming unit-erythroid (BFU-E), colony forming unit-megkaryocyte (CFU-Meg) were investigated by in vitro cell culture technique. The hemopoietic stem cells (HSCs, c-kit+) in bone marrow were double stained with fluorescent antibody PE-C-Kit and FITC-CD45, and the HSCs (c-kit+) were counted by flow cytometer with CD45/SSC (side scatter) gating. Results: Peripheral blood cell counts and the number of BMCs were significantly improved after Weiganli administration; and bone marrow hemopoietic stem/progenitor cells were significantly increased. Conclusion: Weiganli can effectively promote the recovery of hemopoietic function in the myelosuppressed anemic mice.