反义Smad_4基因对贮脂细胞系CFSC生物学特性的影响

目的 探讨通过反义Smad4基因转移阻断转化生长因子 β1(TGF β1)的信号传导后对贮脂细胞部分生物学特性的影响。方法 分别构建、重组了含有反义Smad4基因序列的复制缺陷型腺病毒表达载体AdvATSmad4和空病毒表达载体Adv0。将两种复制缺陷型腺病毒扩增纯化 ,再分别转入贮脂细胞系CFSC内 ,测定它们生长曲线、3 H掺入率 (3 H TdR)、脯氨酸掺入等部分生物学特性的变化 ,并用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)、Western印迹和免疫组织化学等方法检测转基因细胞Smad4和细胞外基质的表达。结果 与正常对照组CFSC和转染Adv0的CFSC细胞相比较 ,转染AdvATSmad4的CFSC细胞内有反义Smad4表达 ,其生长曲线、3 H TdR、脯氨酸掺入等均有不同程度的降低 ,且其合成分泌Smad4和细胞外基质减少。结论 反义Smad4基因可以抑制贮脂细胞内源性Smad4的表达 ,抑制贮脂细胞的生长、繁殖和细胞外基质的产生 ,可作为抗肝纤维化基因治疗的选择之一。