赖氨酰氧化酶样基因3在人皮肤成纤维细胞株中的表达

目的研究体外培养的人皮肤成纤维细胞株中赖氨酰氧化酶样基因3(lysyloxidase-likegene3,LOXL3)的表达模式。方法提取不同生长阶段的人皮肤成纤维细胞株的不同组分,用NorthernBlot和WesternBlot分别从mRNA和蛋白水平分析LOXL3表达,并以免疫荧光方法观察LOXL3的分布部位。结果 LOXL3mR-NA和蛋白含量在细胞汇合前低于细胞汇合期,汇合后最高,且LOXL3分布在整个细胞浆和细胞核。结论 LOXL3的表达量在细胞生长的不同阶段有所不同,可能与其功能有关。

赖氨酰氧化酶LOXL2稳定性的理论计算研究

赖氨酰氧化酶LOXL2是一种依赖于铜离子的胺氧化酶,催化胶原蛋白和弹性蛋白的赖氨酸残基侧链发生氧化脱氨,发挥着稳固细胞外基质的作用。而稳定性是蛋白质的一个重要特性,直接影响蛋白质的分子动态及其正常功能发挥,这与人类的健康和疾病密切相关。然而,关于LOXL2的稳定性目前鲜有报道,哪些位点对其稳定性有显著影响尚不清楚。本研究采用冷冻电镜和Alphafold2的数据,建立LOXL2的全长结构,通过分子动力学模拟得到其优化构象。再通过4种方法(mCSM,PremPS,DeepDDG和FoldX),计算所有位点的稳定性属性,筛选出对稳定性有显性影响的位点(定义为关键位点)。结果表明,95个关键位点对LOXL2的稳定性具有显著影响,在5个结构域上的分布数量依次为14、13、8、11和26,而结构域间的连接肽段上也有23个关键位点。在这些关键位点中,类型及数量分别为Leu(24个)、Val(20个)、Ile(12个)、Trp(11个)、Phe(11个)、Tyr(6个)、Cys(6个)、Met(4个)和Arg(1个)。其中大部分关键位点(88个)为疏水性质,这与蛋白质折叠的主要力量为疏水作用的情况是一致的,而Cys两两成对,构成二硫键,对LOXL2的结构及功能发挥重要作用。讨论中,我们将预测结果与实验值进行比较,并用自由能微扰方法,对部分关键位点进行比较,从多方面论证此项工作的可信度。此项研究,可为靶向LOXL2的疾病治疗研究,提供重要指导。

赖氨酰氧化酶在肺动脉高压中的相关性研究

肺动脉高压(pulmonary hypertension,PH)是一种严重的心血管疾病,发病机制非常复杂,其中包括血管收缩、细胞增殖、血小板聚集等多种因素。赖氨酰氧化酶蛋白家族(Lysyl Oxidase Family,LOS)是一类铜依赖的胺氧化酶,以细胞外蛋白,尤其是弹性蛋白及胶原蛋白为底物,可以催化外源性赖氨酸和内源性赖氨酸的氧化反应。近年来的研究表明,赖氨酰氧化酶在PH的发病机制中也发挥着重要的作用。本文就LOS在PH中的相关研究进行综述,指出LOS可能是PH预后不良的生物标志物。

长链非编码RNA赖氨酰氧化酶样蛋白1反义RNA在结直肠癌中的表达及对结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响

目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)赖氨酰氧化酶样蛋白1反义RNA(LOXL1-AS1)在结直肠癌中的表达及对结直肠癌细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响和可能的作用机制。方法 选取2016年1月至2018年12月在河南省人民医院行结直肠癌根治术的56例病人新鲜癌组织,采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测结直肠癌组织样本及结直肠癌细胞系SW480、SW620、HCT116和Lovo细胞中lncRNA LOXL1-AS1的表达水平,以配对癌旁组织及人正常结直肠黏膜细胞FHC作正常对照;构建靶向LOXL1-AS1序列的小干扰RNA(si-LOXL1-AS1)并转染SW480和Lovo细胞,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、平板克隆实验、划痕实验和Transwell小室法检测沉默lncRNA LOXL1-AS1表达对结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。采用蛋白质印迹法(Western blotting)检测沉默LOXL1-AS1表达后磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路相关蛋白及上皮-间质转化(EMT)相关蛋白的表达情况。结果 LOXL1-AS1在结直肠癌组织中的相对表达水平显著高于癌旁组织(1.37±0.05比0.87±0.05,P<0.05),其表达水平与肿瘤分化程度、TNM分期、肝转移和MSI状态显著相关(均P<0.05);LOXL1-AS1在结直肠癌细胞系(SW480、SW620、HCT116、Lovo)中的表达水平显著高于FHC细胞(1.93±0.10、1.32±0.04、1.50±0.07、1.78±0.09比1.10±0.07,P<0.05),沉默lncRNA LOXL1-AS1表达可抑制SW480细胞和Lovo细胞的增殖、侵袭及迁移能力,E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达含量升高,N-钙黏蛋白(N-cadherin)、磷酸化脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)表达含量降低(均P<0.05)。结论 LOXL1-AS1在结直肠癌组织中高表达并与临床病理特征相关,沉默LOXL1-AS1可显著降低结直肠癌细胞的增殖、侵袭及迁移能力,该机制可能与PI3K/Akt信号通路及EMT途径有关。

赖氨酰氧化酶样基因-3在体外培养的人主动脉平滑肌细胞的表达

目的研究赖氨酰氧化酶样基因-3(Lysyl Oxidase-Like Gene 3,LOXL3)在体外培养的人主动脉平滑肌细胞(Hu-man Aortic Smooth Muscle Cell,HAoSMC)的表达模式。方法提取不同生长阶段的人主动脉平滑肌细胞的不同组分,用Northern Blot、Western Blot从mRNA和蛋白水平分析LOXL3表达,并与赖氨酰氧化酶样基因-2(Lysyl Oxidase-Like Gene 2,LOXL2)比较。结果LOXL3 mRNA和蛋白含量在细胞汇合前高于细胞汇合期和汇合后,且LOXL3蛋白在细胞外基质和细胞的不可溶组分中含量较高,而LOXL2则在细胞培养液中表达较高。结论LOXL3的表达量在细胞生长的不同阶段有所不同,人主动脉平滑肌细胞的LOXL3和LOXL2分布不同,可能与其功能有关。

赖氨酰氧化酶样蛋白1在日本血吸虫感染小鼠肝脏中的动态表达

目的观察赖氨酰氧化酶(LOX)家族中的赖氨酰氧化酶样蛋白1(LOXL1)及相关胶原蛋白在日本血吸虫感染小鼠肝脏中的动态表达,探讨其在日本血吸虫肝纤维化形成中的作用。方法采用日本血吸虫感染的小鼠肝纤维化模型,于感染后第6、9、12周剖杀小鼠,收集其血清和肝脏标本;以HE和天狼星红两种染色方法分别观察并评价小鼠肝脏纤维化的进展程度;同时检测小鼠血清转氨酶水平。以免疫印迹(Western blot)和荧光定量PCR(qPCR)方法分别检测肝组织LOXL1、Ⅰ型胶原蛋白(Col1)及α-肌动蛋白(α-SMA)的表达并分析其含量的变化;并对血清中的可溶性和不可溶性胶原进行测定,以判断胶原交联情况。结果HE和天狼星红染色结果显示,随感染时间延长,小鼠肝纤维化也随之进展,在感染第9周肝纤维化程度最为严重,随后进入慢性肝纤维化期,纤维化程度减轻。Western blot和qPCR结果显示,LOXL1和其他纤维化指标表达情况类似,均在感染第9周时表达量明显上调;可溶性胶原含量在感染第9周时达峰值后下降,而不可溶性胶原含量则持续上升。结论LOXL1与血吸虫肝脏纤维化过程中纤维交联存在相关关系,可能在肝纤维化进程中起到促进作用。

赖氨酰氧化酶样蛋白2在肝细胞癌发生发展中的作用研究进展

赖氨酰氧化酶样蛋白2(lysyl oxidase-like 2,LOXL2)是赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)家族成员之一,可催化细胞外基质中胶原蛋白与弹性蛋白共价交联,在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中过表达可促进肝癌细胞生长、肿瘤侵袭及转移。近年来,越来越多的证据表明LOXL2在HCC的发生、发展中发挥着关键作用,较高水平的LOXL2是影响HCC患者预后的独立因素,提示其有作为治疗靶点的巨大潜力。

赖氨酰氧化酶(LOX)和赖氨酰氧化酶样蛋白2(LOXL2) 在细胞核内转录调控中的作用研究综述

赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)蛋白家族由LOX和4种LOX样蛋白(lysyl oxidase like 1~4,LOXL 1~4)组成,其作用主要是氧化位于赖氨酸ε位的氨基以生成醛基.通常来说,它们被认为是以细胞外蛋白质,尤其是弹性蛋白和胶原蛋白为主要底物.然而,最近研究结果表明LOX和LOXL2也可以在细胞核内基因转录调控中发挥关键的作用.值得一提的是,这两种蛋白质的细胞核定位和它们的底物可以是核内组蛋白的事实已被阐明,提示它们在组蛋白修饰等表观遗传学领域发挥作用.重点综述和探讨LOX蛋白和LOXL2蛋白这2个LOX家族成员在细胞核内的基因转录调控作用.

赖氨酰氧化酶样蛋白2对晚期胆道癌患者预后及化疗敏感度的预测价值

目的探讨赖氨酰氧化酶样蛋白2(Lysyl oxidase-like protein 2,LOXL2)对晚期胆道癌患者预后及化疗敏感度的预测价值。方法回顾性分析海军军医大学第三附属医院46例晚期胆道癌患者的临床资料。46例病例均采用了实时定量聚合酶链式反应(Quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测患者癌组织和癌旁组织中LOXL2的mRNA表达,根据LOXL2的mRNA表达中位数将患者分为高表达组和低表达组,采用受试者工作特征(Receiver operating characteristic,ROC)曲线分析LOXL2 mRNA在诊断晚期胆道癌化疗敏感性中的价值;采用生存曲线比较LOXL2 mRNA高表达组和低表达组患者生存率;采用Cox回归分析影响胆道癌患者生存的独立风险因素。结果与癌旁组织比较,晚期胆道癌患者癌组织中LOXL2 mRNA的表达增强(t=14.16,P<0.001)。ROC曲线分析结果显示LOXL2 mRNA能够作为诊断晚期胆道癌化疗敏感性的指标(AUC=0.828,P=0.0001)。生存分析结果显示LOXL2 mRNA高表达组患者的总体生存率显著低于低表达组(P=0.032)。Cox回归分析结果显示,CEA、CA19-9以及LOXL2 mRNA水平是影响胆道癌患者化疗后生存的独立风险因素(P=0.005,P=0.041,P=0.012)。结论LOXL2 mRNA是影响患者生存的独立风险因素,且可以作为预测晚期胆道癌患者化疗预后的指标。

赖氨酰氧化酶基因在上消化道癌组织内的表达及临床意义

背景与目的:赖氨酰氧化酶(lysyloxidase,LO)是近来发现的肿瘤候选抑癌基因,国外研究发现其表达与乳腺及前列腺癌的复发转移有关,但有关该基因与上消化道癌复发、转移之间关系的研究至今未见报道。本研究的目的在于探讨LO基因在食管、贲门及胃三种上消化道恶性肿瘤转移中的作用。方法:应用RT-PCR的方法检测食管癌,贲门癌,胃癌组织及其相应癌旁正常组织内LO基因的表达情况。结果:研究表明LO基因在以上三种癌组织表达率分别为42.1%(16/38)、42.9%(9/21)及28.0%(7/25);伴有淋巴结转移的癌组织LO表达率均低于不伴淋巴结转移的组织(P<0.05);肿瘤浸润至深肌层以下者LO表达率降低(P>0.05)。该基因的表达与肿瘤组织学分型、浸润方式、肿瘤大小及淋巴结转移个数等无关(P>0.05)。结论:本研究实验表明LO基因表达率降低与上消化道肿瘤转移存在相关性,提示该基因可能在抑制肿瘤转移中起重要作用。

赖氨酰氧化酶样蛋白3在人类恶性肿瘤发生、发展中的研究进展

赖氨酰氧化酶样蛋白3 (lysyl oxidase like 3,LOXL3)属于LOX蛋白家族成员之一,是一种铜依赖性胺氧化酶,负责细胞外基质中胶原蛋白和弹性蛋白的交联。LOX蛋白家族还包括LOX、LOXL1、LOXL2和LOXL4。LOXL3基因存在两种转录本变体,分别为LOXL3-sv1和LOXL3-sv2,在人体正常组织中差异表达。LOXL3定位于胃癌细胞胞核,与胃癌的侵袭和预后不良相关。LOXL3蛋白在恶性肿瘤发生、发展中通过诱导上皮-间充质转化,促进肿瘤侵袭和转移;LOXL3与维持DNA稳定性和有丝分裂的蛋白质相互作用,促进肿瘤进展和持续增殖。该文现就LOXL3蛋白的结构、功能及其在人类恶性肿瘤发生、发展中的作用进行综述,以期为恶性肿瘤的临床诊断、治疗和筛选预后标志物,提供理论基础和参考依据。

赖氨酰氧化酶样蛋白2在头颈部鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨赖氨酰氧化酶样蛋白2(lysyl oxidase-like 2,LOXL2)在头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)中的表达及与肿瘤转移、预后间的关系。方法:免疫组化检测LOXL2在157例HNSCC患者中的蛋白表达情况,并分析其表达与临床病理特征、转移时间(time to metastasis,TTM)及总生存时间(overall survival,OS)的关系。结果:LOXL2阳性表达患者中位TTM为27.3个月,5年OS为26.1%;而LOXL2阴性表达患者中位TTM为38.6个月,5年OS为47.8%。LOXL2的表达增加与HNSCC中淋巴转移呈正相关(P<0.05)。结论:HNSCC组织中LOXL2高表达患者更容易发生早期转移,预后更差。LOXL2可能成为一种新的判断头颈部鳞状细胞癌恶性程度和预后的分子标志。

结直肠癌患者外周血赖氨酰氧化酶基因多态性及其临床意义

目的探讨外周血赖氨酰氧化酶（LOX）基因rs2278226位点多态性与结直肠癌患者肿瘤转移的关系。方法选取2012年1月-2015年6月间在河北省人民医院住院治疗的164例转移结直肠癌患者（转移组）、218例无转移结直肠癌患者（无转移组），并选择同期进行体格检查的健康者340名（对照组），检测其血清肿瘤标志物癌胚抗原（CEA）、CA199、CA50和外周血L0x的水平。采用离心柱法提取各样本基因组DNA，PCR技术扩增目的基因后应用DNA直接测序技术检测3组患者外周血LOX基因rs2278226位点的多态性。采用Logistic回归分析LOX基因rs2278226多态位点与结直肠癌转移间的关系。结果转移组和无转移组的血清CEA、CA199、CA50和LOX水平均显著高于对照组（P值均〈0．05）。转移组的血清CEA、CA199、CA50和LOX水平均显著高于无转移组（P值均〈0．05）。PCR产物纯化后双向测序结果显示，LOX基因rs2278226位点存在两种单核苷酸多态性C和G，共有3种基因型：CC（突变纯合子）、CG（突变杂合子）、GG（非突变基因型）。转移组和无转移组的CG、CC基因型频率均显著高于对照组（P值均〈0．05），转移组的CC基因型频率显著高于无转移组（P〈0．05）。转移组和无转移组的C等位基因频率均显著高于对照组（P值均〈0．05），转移组的C等位基因频率显著高于无转移组（P〈0．05）。Logistic回归分析显示，CC基因型是结直肠癌转移的独立危险因素（OR=2．951，95％CI为1．198～4．687，P〈0．05）。结论结直肠癌患者LOX基因rs2278226位点多态性与肿瘤转移有关。

赖氨酰氧化酶样蛋白2在Col4α3/Alport小鼠中导致肾纤维化

赖氨酰氧化酶样蛋白2(lysyl oxidase like-2,LOXL2)是一种胺氧化酶,在细胞内和细胞外均具有重要功能。在细胞外,LOXL2促进胶原蛋白和弹性蛋白交联;而在细胞内,已报道LOXL2可修饰组蛋白H3,稳定SNAIL,并降低细胞极性。尽管LOXL2促进肝和肺纤维化,但目前我们对其在肾纤维化中的作用知之甚少。Cosgrove等探讨了LOXL2是否影响COL4A3^-/-Alport小鼠的肾脏疾病。他们用选择性LOXL2小分子抑制剂或溶剂处理这些小鼠,并评估肾小球硬化和纤维化、白蛋白尿、血尿素氮、寿命、促纤维化基因表达和肾小球基底膜的超微结构;还观察了肾小球基底膜中层粘连蛋白α2的沉积和肾小球毛细血管的系膜丝足侵入(mesangial filopodial invasion)。

赖氨酰氧化酶样蛋白-2的研究进展

赖氨酰氧化酶家族发挥着多种重要的生物学功能,并参与肿瘤的发生、发展,赖氨酰氧化酶样蛋白-2(Lysyl Oxidase-Like 2 protein,LOXL2)就是该家族的成员之一。本文对LOXL2的基因结构,组织表达的特异性及其与肿瘤发生发展的关系作一综述,以期加深对肿瘤侵袭转移机制的认识,并为肿瘤侵袭转移的干预提供新靶标。

赖氨酰氧化酶家族成员在肝癌中的研究进展

赖氨酰氧化酶(LOX)家族成员是铜依赖性胺氧化酶,特征是其催化活性有助于细胞外基质的交联重塑,而细胞外基质的交联重塑在肿瘤组织周围的血管生成中起着关键作用,并参与形成肿瘤微环境。越来越多的研究表明LOX家族成员在肝癌的发病机制和肿瘤微环境形成中发挥关键作用,具有作为治疗靶点的潜力。本文就LOX家族成员与肝癌的发生、发展关系及潜在靶向治疗作用进行综述。

赖氨酰氧化酶样蛋白2在卵巢上皮性癌组织中表达及意义

目的探讨赖氨酰氧化酶样蛋白2(LOXL2)在卵巢上皮性癌组织中表达及意义。方法选取2011-02~2013-02在我院择期行手术治疗的71例卵巢癌患者组织标本,同期,选取因卵巢良性肿瘤行手术治疗的正常卵巢组织35例作为对照组,免疫组化法检测卵巢癌患者和对照组组织标本中LOXL2蛋白表达,所有患者术后随访,末次随访日期2018年2月28日,失访3例,生存分析采用Kaplan-Meier法和Log-Rank法,多因素分析采用Cox比例风险回归模型。结果卵巢癌组织中LOXL2蛋白阳性表达率为78. 87%,对照组组织中则为28. 57%,差异有统计学意义(χ~2=25. 246,P <0. 001);卵巢癌组织中LOXL2蛋白表达在不同FIGO分期、不同分化程度、有无淋巴结转移和有无腹水间差异有统计学意义(P <0. 05); Kaplan-Meier生存分析结果显示,LOXL2蛋白阳性表达组患者平均生存时间(41. 42±4. 56)个月,而阴性表达组则为(72. 56±5. 99)个月,Log-Rank检验差异有统计学意义(χ~2=6. 945,P=0. 008); Cox比例风险回归模型结果显示,FIGO分期、淋巴结转移和LOXL2蛋白表达是影响卵巢癌患者预后的风险因素(P <0. 05)。结论卵巢癌组织中LOXL2蛋白表达升高,可作为评估患者预后的潜在指标。

赖氨酰氧化酶样-4与尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体在人宫颈癌细胞中的表达及意义

目的探讨赖氨酰氧化酶样基因-4(LOXL4)、尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及其受体(uPAR)在人宫颈癌细胞株中的表达。方法采用半定量RT-PCR方法检测人宫颈癌细胞株Hela、ME180、HCC94中LOXL4、uPA和uPAR mRNA的表达,同时运用Western blot技术检测各细胞中LOXL4蛋白的翻译情况。结果 LOXL4mRNA在三株人宫颈癌细胞株中表达差异有统计学意义(P<0.01),其中在Hela细胞株中表达浓度最高,ME180细胞株表达浓度次之,而HCC94细胞株表达浓度最低;而uPA、uPAR mRNA表达浓度水平在HCC94细胞中最高,明显高于Hela、ME180细胞的表达浓度水平(P<0.05)。结论 LOXL4、uPA、uPAR基因表达可能与宫颈癌细胞的侵袭和迁移有关。

β-连环蛋白、赖氨酰氧化酶样蛋白2在骨肉瘤组织中表达的相关性及生物学意义

目的探讨β-连环蛋白(β-catenin)、赖氨酰氧化酶样蛋白2(LOXL2)在骨肉瘤组织中表达的相关性及生物学意义。方法回顾性分析82例骨肉瘤患者资料,并以52例骨软骨瘤患者资料作为对照。采用Western blot法检测β-catenin、LOXL2的表达水平;比较β-catenin、LOXL2在不同临床病理特征骨肉瘤患者中的表达水平;比较不同β-catenin、LOXL2表达水平的骨肉瘤患者总生存情况;对骨肉瘤细胞株SAOS2中LOXL2靶向调控β-catenin的作用进行验证。结果①骨肉瘤组织中β-catenin、LOXL2的平均表达水平均明显高于骨软骨瘤组织(P<0.05),且骨肉瘤组织中β-catenin的表达水平与LOXL2的表达水平呈正相关。②随着肿瘤体积增大、Enneking分期增加、远处转移的发生,骨肉瘤组织中β-catenin、LOXL2的表达水平明显增加。③骨肉瘤患者总生存率β-catenin、LOXL2高表达组均明显低于低表达组(P<0.05)。④骨肉瘤细胞株SAOS2中LOXL2、β-catenin的表达水平及细胞增殖的A_(490 nm)水平、侵袭细胞的数目si-LOXL2组均明显低(少)于si-NC组(P<0.05)。结论骨肉瘤组织中β-catenin、LOXL2表达增加,与病理进展、预后不良有关;LOXL2在骨肉瘤组织中可能靶向调控β-catenin。

赖氨酰氧化酶样蛋白4在肾间质纤维化中的表达及意义

目的赖氨酰氧化酶样蛋白4(lysyl oxidase-like protein 4, LOXL4)是赖氨酰氧化酶(lysyloxidase, LOX)家族的最新成员,本研究旨在观察LOXL4在肾脏纤维化形成中的表达及意义。方法收集慢性肾脏病患者的肾活检标本,单侧输尿管结扎(unilateral ureteral ligation, UUO)大鼠;TGF-β1刺激大鼠肾成纤维细胞(NRK-49F)。通过q-PCR,Western印迹法和/或免疫组化等方法检测LOXL4的表达及作用。结果患者肾脏纤维化组织中LOXL4沉积显著高于正常肾组织(P<0.01);与Sham组相比,UUO组大鼠肾脏LOXL4、Col1(collgen 1)表达水平明显升高(P<0.01);TGF-β1显著促进LOXL4、Col1的表达(P<0.01);转染LOXL4过表达质粒后,NRK-49F胶原表达水平明显增多(P<0.01);下调LOXL4后,胶原表达水平明显下降(P<0.01)。结论在肾间质纤维化中LOXL4表达明显增加,其通过调控胶原纤维的表达而参与肾脏纤维化。