原生质体融合选育赖氨酸高产菌种的研究

北京棒杆菌1134衍生株与枯草芽孢杆菌151衍生株的原生质体融合得到了一株可以甜菜糖蜜为原料,在摇床与小罐发酵均能稳定产赖氨酸6.50%以上的高产菌株——Q4413。Q4413菌落形态类似于1134株,而菌体形态区别于双亲,呈较短的杆状,无鞭毛,但有较稀疏的纤毛。生理生化研究表明:Q4413耐盐性、蔗糖发酵、石蕊牛奶试验产碱状况酷似151株,而与1134株略有差异;运动性、糊精、柠檬酸盐利用、MR 试验、酪素水解、明胶水解、石蕊牛奶还原,又酷似于1134株而区别于151株;Q4413的最适生长温度、pH 值居双亲之间;Q4413为原养型加三重抗性[Rif^r,AEC^r Nal^r];其细胞 DNA 含量与GC 比测定结果均居双亲之中,而且生物量测定结果也均与双亲有一定的差异。

赖氨酸高产短小芽孢杆菌诱变选育及关键酶基因的分析

实验从产细胞蛋白菌株短小芽孢杆菌出发,分别对其进行紫外诱变和亚硝基胍诱变,利用6.0mg/mL的赖氨酸结构类似物AEC进行抗性筛选和HPLC氨基酸检测筛选出一株赖氨酸产量有较大提高的突变株N9,其发酵液中,赖氨酸含量达到50.83mg/mL,比原始菌株提高了46.11%。通过克隆测序对其赖氨酸合成途径中的关键酶天冬氨酸激酶进行生物信息学分析,发现第783～826位碱基的移码突变造成了261～276位氨基酸的替换,以及374位氨基酸由谷氨酸变为缬氨酸。

高产赖氨酸菌的选育与应用

赖氨酸是人体和哺乳动物的必需氨基酸,必须从食物中补充。赖氨酸具有重要的营养生理功能,在医药、食品和饲料工业中应用广泛。本文综述赖氨酸的生理功能、应用与生产、赖氨酸在细菌中的生物合成与调控、高产赖氨酸生产菌株的育种方法及应用。目前高产L-赖氨酸的菌株选育技术主要包括诱变技术、基因重组和基因敲除技术等。改良现有菌种和发掘、筛选新的菌种,利用微生物发酵法大量生产L-赖氨酸,具有广阔的市场前景。