赤灵芝的营养成分、生物活性及其应用研究进展

赤灵芝具有抗肿瘤、抗氧化、提高免疫力等功效。文章概括了近年来赤灵芝中主要营养成分及其生物活性的最新研究进展,总结了赤灵芝在医疗保健等领域的综合利用现状,分析了存在的问题,并展望了赤灵芝的未来发展方向。

树灵芝(Ganoderma sessile,SCAU-My1)菌丝体液态发酵条件优化以及菌丝体复合材料制备

该研究以树灵芝(Ganoderma sessile,SCAU-My1)为发酵菌株,采用菌丝体液态发酵制备种子,参考食用菌栽培技术进行菌丝体复合材料(mycelium-base composites,MBCs)制备。分别以麻秆和玉米秸秆为主要原料,接种上述菌丝体液态种后,固态发酵培养5 d,从而制备可生物降解的MBCs。首先,对树灵芝的菌丝体液态发酵种子培养基及培养条件进行了优化,研究碳源、氮源、发酵温度等因素对菌丝体生物量的影响。结果表明,最佳制种培养基配方为:玉米淀粉25 g/L、黄豆粉14 g/L、KH_(2)PO_(4)3 g/L、7H_(2)0·MgSO_(4)3 g/L;最佳培养条件为:发酵温度28℃,初始pH 5.5,接种量5%,装瓶量150 mL/500 mL,转速为180 r/min。在此条件下,种子液菌丝体生物量达18.73 g/L,较优化前的13.90 g/L,提高了34.7%。制备的MBCs在形变发生50%时,玉米秸秆-菌丝体复合材料(C-MBCs)压缩应力为聚乙烯(expanded polystyrene,EPS)材料的5.4倍,为麻秆-菌丝体复合材料(H-MBCs)的0.6倍;在热重分析中,经过600℃热处理C-MBCs质量剩余约39%,H-MBCs质量剩余约33%,而EPS材料质量仅剩1.08%,说明玉米秸秆或麻秆制成的MBCs承重能力、热稳定性均优于EPS材料。此结果可为菌丝体复合材料替代发泡塑料作为缓冲包装材料提供有意义的参考。

赤灵芝多糖对ETEC所致肠炎的影响及机制研究

目的研究赤灵芝多糖(ganoderma lucidum polysaccharides,GLP)对产肠毒素型大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)诱导小鼠肠炎的作用效果及机制。方法选用24只6~8周龄雄性SPF级昆明小鼠,利用ETEC菌液腹腔注射诱导建立小鼠肠炎模型。采用随机数字表法分为为正常组、ETEC感染组、ETEC感染+高剂量GLP组,ETEC感染+低剂量GLP组,每组6只。采用HE染色观察小鼠小肠组织病理变化,采用免疫印迹法检测各组小鼠小肠组织中C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、肿瘤坏死因子(tumour necrosis factor,TNF)-α和白细胞介素(interleukin,IL)-6蛋白的表达情况。检测各组小鼠小肠组织中Toll-样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)、核因子κB p65亚基(nuclear factor-κB p65,NF-κB p65)、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor88,MyD88)mRNA的表达水平,探查GLP通过TLR4核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路对ETEC诱导的小鼠肠道炎症的调控作用。结果与正常组比较,ETEC感染组小鼠出现精神萎靡,食欲减弱,小肠绒毛破损,组织中可发现大量的炎性浸润,疾病活动指数(disease activity index,DAI)呈上升趋势(P<0.05),小鼠小肠组织中TLR4、NF-κB p65、MyD88 mRNA的相对表达量和CRP、TNF-α、IL-6的蛋白表达水平增高(P<0.01)。与ETEC感染组比较,ETEC感染+不同剂量组中小鼠精神状态和食欲有所改善,小鼠小肠组织中TLR4、NF-κBp65、MyD88的mRNA相对表达量均降低(P<0.01)。ETEC感染+高剂量组中小鼠小肠组织CRP、TNF-α、IL-6蛋白表达水平降低(P<0.01),ETEC感染+低剂量组降低程度差异无统计学意义(P>0.05)。与ETEC感染+低剂量组比较,ETEC感染+高剂量组小鼠小肠组织TLR4、MyD88 mRNA的相对表达量和IL-6蛋白表达水平均降低(P<0.05)。结论GLP可有效缓解ETEC诱导的小鼠肠道的炎症,且可能通过调控TLR4/NF-κB信号通路发挥抗炎作用,其作用效果可能与浓度呈正比。

不同菠萝叶渣添加量对赤灵芝发酵基质营养成分及体外抗氧化活性研究

【目的】揭示不同菠萝叶渣添加量对赤灵芝发酵基质营养成分和体外抗氧化活性的影响,为菠萝叶渣的开发利用提供了新的基础数据支撑。【方法】采用全自动氨基酸分析仪、OPLA-DA结合S-plot等仪器和方法分析发酵基质中粗纤维、多糖、总萜、水解氨基酸和游离氨基酸等营养成分,以及赤灵芝发酵基质水提物的羟基自由基清除能力差异、DPPH自由基清除能力和总抗氧化能力等体外抗氧化活性的变化规律进行分析。【结果】菠萝叶渣胁迫下促进赤灵芝发酵基质中粗纤维降解、释放多糖含量;对赖氨酸和甘氨酸代谢路径具有显著的调节作用含量;游离氨基酸中肌氨酸、a-氨基己二酸呈现出增加的趋势,其他氨基酸整体上呈现出下降的趋势。其中天冬氨酸和苏氨酸等8种游离氨基酸含量差异显著,且不同菠萝叶渣添加量下,存在特异性氨基酸成分;菠萝叶渣有助于提高赤灵芝发酵基质水提物的羟基自由基清除能力和总抗氧化能力,降低DPPH自由基清除能力。【结论】不同菠萝叶渣添加量对赤灵芝发酵基质粗纤维、氨基酸组成以及相关代谢路径具有不同的调节作用。

灵芝提取物通过PBX3/MAPK通路对胶质瘤细胞恶性生物学行为的作用机制研究

目的探究灵芝提取物(GLE)是否可通过前B细胞白血病同源盒基因3(PBX3)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路影响U251人胶质瘤细胞恶性生物学行为。方法2022年1月至2023年1月进行该研究。含不同浓度GLE培养液(0、50、100、200 mg/L GLE)培养U251细胞48 h,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法、流式细胞术、平板克隆实验、细胞划痕试验及迁移和侵袭(Transwell)实验来评估细胞的存活率、凋亡情况、集落形成能力、迁移与侵袭特性;实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测PBX3、细胞外信号调节酶(ERK)mRNA表达水平;蛋白质印迹法检测PBX3、原癌基因c-RAF(Raf-1)、磷酸化Raf-1(p-Raf-1)、信号通路细胞外信号调节酶1/2(ERK1/2)、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白表达情况。结果0、50、100、200 mg/L GLE下U251细胞存活率分别为100%、(86.62±4.26)%、(67.68±3.49)%、(50.84±3.39)%、(40.13±3.25)%,差异有统计学意义(P<0.05);0、50、100、200 mg/L GLE下U251细胞凋亡率、集落形成数、划痕愈合率、侵袭细胞数、PBX3、ERK mRNA及PBX3、p-Raf-1、p-ERK1/2蛋白相对表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);随着GLE浓度的增加,U251细胞存活率、划痕愈合率、PBX3与ERK mRNA相对表达水平及RAS、PBX3、p-Raf-1、p-MEK1/2、p-ERK1/2蛋白相对表达水平均降低,集落形成数及侵袭细胞数均减少,细胞凋亡率升高;GLE作用效果呈剂量性依赖(P<0.05)。结论GLE可抑制胶质瘤细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭等恶性生物学特性,并诱导其凋亡,其作用机制可能与阻断PBX3/MAPK通路的激活相关。

紫外诱变赤灵芝原生质体选育高产有机锗菌株的研究

对赤灵芝原生质体制备、再生及紫外诱变育种、筛选有机锗高产菌株进行研究。结果表明:赤灵芝原生质体制备与再生的最佳条件为菌龄96h,复合酶液浓度为2%溶壁酶、1%蜗牛酶和1%纤维素酶,温度31℃,时间2h,获得赤灵芝原生质体产量为4.33×106个/ml,再生率达0.00275%。原生质体最佳紫外诱变条件为:15W紫外灯,距离30cm,照射30s,致死率为66.7%。最终选育出3株高产有机锗诱变株,有机锗含量分别比出发菌株提高了113.58%、105.87%、103.86%。

氯化锂诱变赤灵芝原生质体选育高产三萜类菌株

采用化学诱变剂氯化锂诱变赤灵芝原生质体,对高产三萜类菌株进行筛选。结果表明:经0.3%氯化锂诱变后,原生质体致死率为72.8%,胞内、胞外三萜类产量达到最高,分别为55.33mg/g和14.88×10-2mg/mL,比原菌株分别提高了461.72%和136.57%。第2代、第3代诱变菌株比原菌株胞内三萜类产量分别提高了483.05%和496.04%,胞外三萜类产量分别提高了158.66%和171.38%,诱变菌株遗传稳定性良好。

黑灵芝与赤灵芝提取物的抗氧化作用比较

分别用DPPH法、邻苯三酚自氧化法测定了赤灵芝和黑灵芝提取物的抗氧化作用。结果表明:不同溶剂灵芝提取物对DPPH自由基均有清除作用,对邻苯三酚自氧化也均有抑制作用。不同溶剂提取物的抗氧化活性强弱为:95%乙醇>丙酮>去离子水>氯仿,提取物用量与抗氧化性成正相关,而黑灵芝的抗氧化作用相对赤灵芝要强。同BHT和抗坏血酸进行了比较,黑灵芝的丙酮提取物浓度达到1mg/ml时已超过10mg/mlBHT的抗氧化效果,相当于0.5mg/ml浓度抗坏血酸的抗氧化效果。

泰山赤灵芝液体培养条件优化及多糖含量测定

本文探讨了泰山赤灵芝(Ganodermalucidum)液体培养中碳源、氮源、pH对灵芝多糖积累的影响。结果表明,培养基最适碳源、氮源、pH值分别为蔗糖、蛋白胨、5.0,其配方组成(质量分数,%)为:KH2PO40.1,MgSO4·7H2O0.05,(NH4)2SO40.2,蛋白胨0.3,蔗糖5,pH5.0,灵芝多糖含量可达11.77%,分别是子实体和孢子粉的2.5和2.2倍。

泰山赤灵芝肽多糖的化学研究

从泰山赤灵芝中分离得到７个肽多糖，对主要成分化学研究证明ＴＧＬＰ２分子量２０９×１０４，为β（１→３）（１→４）连接的甘露葡聚糖肽，ＴＧＬＰ３分子量４５×１０４，为β（１→３）（１→４）（１→６）甙键连接的葡聚糖肽，并有α甙键存在，ＴＧＬＰ６分子量３２×１０４，为β（１→３）（１→４）甙键相连的葡聚糖肽，ＴＧＬＰ７分子量１０×１０４，为β（１→３）（１→４）（１→６）糖甙键的半乳聚糖肽。

赤灵芝及其孢子粉提取物缓解小鼠肝脏CCl_4损伤的研究

用赤灵芝及其孢子粉混合提取后的流浸膏,以一定剂量每日灌胃处理组小鼠,用蒸馏水灌胃空白组和模型组,29天后,一次性给予除空白组外的各组小鼠一定剂量的CCl4,24 h后测定血清中ALT和AST的含量,同时取左侧肝脏进行组织病理学检查.结果显示:模型组小鼠的ALT、AST含量比空白组显著升高,低、中、高剂量组小鼠的ALT和AST含量较模型组低,差异显著或极显著.与模型组比较,各剂量组小鼠肝细胞损伤的各种病变有所减轻,气球变性、肝细胞坏死和总分等三项指标差异有统计学意义.表明赤灵芝及其孢子粉的提取物对小鼠CCl4肝损伤具有缓解的作用.

千山野生赤灵芝生物锗含量的测定

采用灰化法分解灵芝样品,用分光光度法测定灵芝生物锗的含量,方法简便,快捷,回收率在96.15%～98.96%。

泰山赤灵芝提取物对雏鸡免疫系统影响的研究

采用水提法从泰山赤灵芝中制备提取物 ,提取率为 3 .48% ,采用蒽酮法测定泰山赤灵芝提取物 ( Taishan Ganoderma lucidum Ex-tract,TGL E)中灵芝多糖含量为 2 0 %。本试验研究了 TGL E对京白 系雏鸡免疫器官发育、组织学变化、血液中白细胞总量、白细胞组成以及 T、B淋巴细胞组成的影响。结果表明 ,TGL E能够促进雏鸡免疫器官的生长发育及组织分化 ,血液中白细胞总量增加显著 ,白细胞组成比例发生明显变化 ,血液中 T淋巴细胞比例显著增加 ,同时 B淋巴细胞比例显著降低。

赤灵芝提取物对小鼠免疫功能系统的影响

目的旨在赤灵芝提取物对细胞、体液及非特异性免疫功能的影响。方法以520、260mg/kg赤灵芝提取物给昆明种雄性小鼠灌胃15d,分别进行ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验、足跖增厚法测定小鼠迟发型变态反应、半数溶血值(HC50)测定、抗体形成细胞(AFC)检测、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力和网状内皮系统吞噬碳廓清功能测定。结果赤灵芝提取物可明显增强小鼠脾淋巴细胞的转化能力(P<0.001,P<0.01,P<0.05)及体液免疫能力(P<0.01,P<0.05);明显抑制由SRBC引起的小鼠DTH反应(P<0.01,P<0.05);增强腹腔巨噬细胞吞噬功能(P<0.001);对碳廓清无明显影响。结论赤灵芝提取物具有免疫调节作用,可明显增强小鼠脾淋巴细胞的转化能力及体液免疫能力。

萌动激活赤灵芝孢子粉对小鼠脾细胞IL-2的分泌和脾淋巴细胞转化增殖的影响

目的 :探讨萌动激活赤灵芝孢子粉对小鼠脾细胞IL 2分泌和脾淋巴细胞转化增殖的影响。方法 :实验小鼠随机分成实验组 (低剂量组 4 g/kg/d :高剂量组 :8g/kg/d)和对照组 (与实验组用同体积的生理盐水 ) ,连续用药 1 0天。用3H—TdR掺入法进行检测。结果 :与对照组相比萌动激活赤灵芝孢子粉对小鼠脾细胞IL 2分泌有明显促进作用并能明显提高小鼠脾淋巴细胞转化增殖 ,并有一定的量效关系。结论 :萌动激活赤灵芝孢子粉对小鼠免疫功能有明显的促进作用 ,这可能与其促进细胞因子的分泌和淋巴细胞转化增殖有关。

萌动激活赤灵芝孢子粉致畸、致突变和抗突变的实验研究

目的与方法 采用大鼠致畸胎、小鼠骨髓细胞染色体畸变 (CA)分析检测萌动激活赤灵芝孢子粉的致畸胎、致突变和抗突变性。结果 :①灵芝孢子粉小鼠骨髓细胞CA率与阴性对照组比较差别无显著性 (P >0 0 5 )。②灵芝孢子粉对孕鼠体重、胚胎早期发育、胚胎生长发育、以及胎鼠的骨骼发育和内脏器官发育均无不良影响。③灵芝孢子粉各剂量对 4 0mg/kg、5 0mg/kg环磷酰胺 (CP)诱发的小鼠骨髓细胞染色体畸变率有明显的抑制作用 (P <0 .0 5 ,P <0 0 1) ,抑制率分别为 5 6 2 %、34 1%、39 8%和 6 7 8%、5 9 9%、5 2 0 % ,对 5 0mg/kgCP诱发的CA抑制率在 5 2 .0 %以上 ,并有剂量反应关系。结论 :萌动激活赤灵芝孢子粉未见致畸胎和细胞染色体损伤作用 ,对化学物引起的染色体损伤具有一定的拮抗或保护作用。

赤灵芝菌种培养基的比较与筛选

为了筛选出适应性强的赤灵芝母种和原种新型培养基,选取以小麦为主料的培养基,通过对赤灵芝菌丝在不同培养基的生长状况、生长速度进行分析比较,确定人工栽培赤灵芝母种和原种的最佳培养基。赤灵芝母种培养基中加入小麦煮汁菌丝长势最强且明显,以麦粒为主料的原种培养基中菌丝生长最快。综合比较,以小麦为主料的培养基接种赤灵芝母种和原种更适合菌丝生长。同时在豫西气候条件下栽培,表现出较强的适应性,但其抗低温性能作用机理还需进一步试验研究。

泰山赤灵芝菌株生物学特性研究

研究不同营养和条件因子对泰山赤灵芝菌丝生长速度和生长势的影响。结果表明,泰山赤灵芝菌丝生长的适宜温度为25-30℃,适宜p H值为6-7,适宜碳源为蔗糖、葡萄糖和淀粉,适宜氮源为酵母膏、牛肉膏,适宜碳氮源浓度组合为蔗糖2%、葡萄糖0.5%、酵母膏0.1%、牛肉膏0.3%。

泰山赤灵芝中灵芝酸和灵芝酸A的测定

[目的]研究泰山赤灵芝中灵芝酸的检测方法并应用该方法测定灵芝酸A的含量。[方法]利用反相高效液相色谱和电喷雾质谱联用技术,通过研究已知的灵芝酸化合物的相对分子质量及结构特征,鉴定泰山赤灵芝中生物碱提取物中的灵芝酸类化合物,并通过灵芝酸A标准品的标准曲线测定其中灵芝酸A的含量。[结果]在泰山赤灵芝样本中检测到灵芝酸A、A1、B、C1、R、beta、delta、epsilon、gamma、zeta,灵芝酸A的含量为115.4μg/g。[结论]泰山赤灵芝含有较高的灵芝酸,液质联用仪对泰山赤灵芝天然产物结构的分析以及含量测定准确可靠。

泰山赤灵芝多糖缓解大鼠动脉粥样硬化的分子机制研究

目的:研究泰山赤灵芝多糖处理动脉粥样硬化大鼠前后血脂的变化和胸主动脉细胞差异表达的基因,了解泰山赤灵芝多糖治疗动脉粥样硬化的分子机制。方法:全自动生化分析仪测定泰山赤灵芝多糖处理动脉粥样硬化大鼠前后血清TG、TC、HDL-C含量的变化;通过差异显示逆转录PCR(DDRT-PCR)技术研究泰山赤灵芝多糖处理动脉粥样硬化大鼠前后胸主动脉细胞的基因表达差异,并用反向Northern证实差异显示基因片段。结果:泰山赤灵芝多糖处理动脉粥样硬化大鼠后,TG、TC含量均明显下降,而HDL-C和HDL-C/TC百分比明显升高;胸主动脉细胞出现一些表达上调和下调的基因片段。上调基因有细胞色素B561、ERP72、nitric oxide synthase 2和Gpx1;下调基因有胸腺素β4、FGFRI原癌基因伴随蛋白、FK506结合蛋白、ICAM-1、c-myc和TNF-α。结论:泰山赤灵芝多糖可减轻动脉粥样硬化风险,降低血脂。