赤芍总苷药理作用研究进展

赤芍具有清热凉血、散瘀止痛的功效,广泛应用于临床,并于2002年列入可药食同源中药名录。现代研究发现,赤芍总苷系赤芍的主要活性成分,是鸟笼状蒎烷结构的单萜类化合物以及内酯结构的单萜类化合物的总称。10余年来,赤芍总苷不断有新的药理作用发现被报道,但未见系统地总结分析。因此,文章通过归纳国内外相关文献,综述了赤芍总苷自2010年至今被报道的抗肿瘤、抗心脑血管疾病、保肝、抗衰老、改善血流动力学和血液流变学、抗凝、抗血栓以及增强免疫、抗抑郁、抗慢性阻塞性肺疾病、抗溃疡病、抗盆腔炎、舒血管、保护脊髓损伤、保护血管内皮、治疗扁平苔藓及改善糖尿病肾病肾纤维化等药理作用,并提出研究不足与展望,以期为赤芍总苷深入地研究和开发应用提供参考。

川赤芍总苷及其主成分芍药苷对痤疮相关炎症的抑制作用研究

研究了川赤芍总苷及其主成分芍药苷对痤疮相关炎症的抑制作用。通过制备并基于高效液相色谱分析川赤芍总苷主活性成分含量;建立痤疮丙酸杆菌(Cropionibacterium acnes,C.acnes)诱导THP-1细胞炎症模型;采用CCK8法检测细胞相对活力,ELISA法快速检测细胞IL-1β、IL-8的分泌量,并用Western blot法验证。结果表明:在100μg/mL质量浓度下川赤芍根提取物能显著抑制C.acnes刺激引起的炎症因子IL-1β、IL-8(p<0.01)。从川赤芍根提取物中提取的川赤芍总苷,在相同浓度下对炎症因子IL-1β抑制率提高了20%。川赤芍总苷中芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷含量分别为0.64%,26.3%,1.17%。其中芍药苷的含量最高,且对C.acnes刺激引起的炎症因子IL-1β抑制效果显著(p<0.01)。此外,芍药苷还能降低C.acnes刺激引起的活性氧和乳酸脱氢酶。综上所述,川赤芍总苷及其主成分芍药苷对改善C.acnes引起的皮肤炎症具有潜在的治疗价值。

赤芍总苷对脑出血大鼠神经功能损伤的改善及对脑组织中Treg/Th17比例的影响

目的:探索赤芍总苷对脑出血大鼠神经功能损伤的改善及对脑组织中调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)比例的影响。方法:使用神经功能损伤评估和脑组织苏木精-伊红(HE)染色法评估赤芍总苷对脑出血大鼠神经功能损伤的改善作用;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测脑组织中白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-10(IL-10)和转化生长因子β(TGF-β)的含量,使用流式细胞术检测脑组织中Treg/Th17细胞的变化。结果:空白组及造模后3 d、7 d赤芍总苷高剂量组和赤芍总苷中剂量组大鼠神经功能损伤评分均明显低于脑出血组,且差异均有统计学意义(P<0.05);造模后6 h、1 d和2 d赤芍总苷高剂量组和赤芍总苷中剂量组及各时间段赤芍总苷低剂量组大鼠神经功能损伤评分与脑出血组相比差异均无统计学意义(P>0.05)。与脑出血组比较,空白组、赤芍总苷高剂量组和赤芍总苷中剂量组脑组织中IL-17含量、单个脑组织细胞液中Th17比例和Th17/Treg比值明显降低,而IL-10、TGF-β含量和单个脑组织细胞液中Treg比例明显升高,且差异均有统计学意义(P<0.05);而赤芍总苷低剂量组IL-17、IL-10和TGF-β的含量及Th17比例、Treg比例及Th17/Treg比值与脑出血组相比差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:赤芍总苷对脑出血大鼠神经功能损伤具有改善作用,也可以通过调节Th17/Treg细胞的分化和细胞因子的分泌而改善脑出血症状。

响应面和粒子群-人工神经网络模型优化微波辅助提取赤芍总苷工艺

以赤芍(Paeoniae Radix Rubra)为原料,建立单因素-Box-Behnken试验,探究微波功率、提取时间、提取次数、乙醇浓度和液固比对赤芍总苷提取量的影响,并评价提取物的体外抗氧化活性。通过建立响应面模型和粒子群-人工神经网络模型对微波辅助提取赤芍总苷的工艺进行优化。结果表明:响应面模型和粒子群-人工神经网络模型的决定系数R2分别为0.9099和0.9925,表明粒子群-人工神经网络具有更好的预测能力。采用粒子群-人工神经网络模型优化提取工艺条件:乙醇浓度81%、液固比30 mL/g、提取时间22 s、提取5次、微波功率420 W,在此条件下,赤芍总苷的提取量为378.977±1.982 mg PE/g d.w.;赤芍苷提取物(100μg/mL)对DPPH自由基和ABTS+自由基的清除率分别为87.61%和80.74%,接近阳性对照。提取物还具有一定的还原能力。本研究结果为优化提取工艺提供了新的方法,也为赤芍有效成分作为添加剂的应用提供了理论基础。

基于RhoA/ROCK通路探讨赤芍总苷对心肌梗死大鼠心肌凋亡的影响

目的基于RhoA/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)通路探讨赤芍总苷(TPG)对心肌梗死(MI)大鼠心肌凋亡的影响。方法冠状动脉左前降支结扎法建立MI大鼠模型,模型成功24只随机分为MI组、TPG组、TPG+RhoA激活剂溶血磷脂酸(LPA)组,每组8只。观察大鼠一般情况;全自动生化分析仪检测心肌损伤指标肌酸激酶同工酶(CK)-MB、心肌肌钙蛋白(cTn)I、cTnT情况;苏木素-伊红(HE)染色观察心肌组织形态学情况;TUNEL、流式细胞术检测心肌组织细胞凋亡情况;免疫组化检测大鼠心肌组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)3蛋白表达水平;Western印迹检测大鼠心肌组织中RhoA、ROCK蛋白水平。结果MI组心肌组织中出现大量的心肌细胞坏死现象,细胞核固缩、溶解现象明显,炎症浸润、纤维化现象严重;TPG组优于MI组,TPG+LPA组症状介于MI组和TPG组之间。与MI组相比,TPG组血清中CK-MB、cTnI、cTnT水平,心肌组织TUNEL阳性细胞比例,细胞凋亡比例,caspase3蛋白阳性率,RhoA、ROCK蛋白水平明显降低(P<0.05);与TPG组相比,TPG+LPA组血清中CK-MB、cTnI、cTnT水平,心肌组织TUNEL阳性细胞比例,细胞凋亡比例,caspase3蛋白阳性率,RhoA、ROCK蛋白水平明显升高(P<0.05)。结论TPG通过抑制RhoA/ROCK通路实现对MI大鼠心肌凋亡的缓解。

赤芍总苷通过Nrf2/HO-1通路对糖尿病肾脏病大鼠肾纤维化的改善作用研究

目的:探讨赤芍总苷(TPG)对糖尿病肾脏病(DKD)大鼠肾纤维化的改善效果及可能作用机制。方法:从60只雄性Wistar大鼠中随机选择10只作为对照组,剩余50只大鼠利用尾静脉注射链脲佐菌素(55 mg/kg)诱导DKD大鼠模型。成功建模43只,随机选择40只并随机分为模型组、TPG低剂量组、TPG高剂量组及二甲双胍组,每组10只。各给药组分别灌胃给予相应药物,模型组和对照组灌胃给予等体积生理盐水,连续给药12周观察大鼠一般状态,计算肾脏指数(KI);采用ELISA法测量24 h尿白蛋白(Alb)含量;采用生化分析仪检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)水平;HE染色观察肾脏组织形态学变化;高碘酸-希夫(PAS)染色观察系膜基质、基底膜组织学变化;Masson染色观察胶原蛋白沉积情况;采用比色分析法检测大鼠肾组织中氧化应激因子丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性;采用Western blotting法检测总转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)、核Nrf2、血红素加氧酶1(HO-1)、平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤连蛋白(FN)的相对表达量。结果:成功构建DKD大鼠模型;模型组大鼠一般体征失常,肾组织出现明显病理变化,肾组织结构改变,炎症细胞浸润明显,肾小球系膜基质扩张、基底膜增厚,胶原蛋白过度沉积,肾纤维化严重。TPG低、高剂量组及二甲双胍组大鼠一般体征逐渐恢复正常,病理损伤逐渐好转,肾小球系膜基质范围减小、基底膜变薄,胶原蛋白沉积减弱,肾纤维化逐渐改善。模型组大鼠KI,24 h尿Alb含量,FBG、Scr、BUN,以及肾组织中MDA含量和α-SMA、FN蛋白相对表达量均高于对照组(P<0.05);肾组织中SOD活性、核Nrf2、HO-1蛋白相对表达量均低于对照组(P<0.05)。TPG低、高剂量组及二甲双胍组大鼠KI,24 h尿Alb含量,FBG、Scr、BUN,以及肾组织中MDA含量和α-SMA、FN蛋白相对表达量均低于模型组(P<0.05);肾组织中SOD活性、核Nrf2、HO-1蛋白相对表达量均高于模型组(P<0.05)。结论:TPG可改善DKD大鼠肾纤维化程度,其机制可能与激活Nrf2/HO-1通路有关。

赤芍总苷对实验性血栓形成的影响及其作用机制

目的研究赤芍总苷(TSP)对实验性血栓形成的影响及其作用机制。方法(1)采用体外血栓法,观察赤芍总苷对体外血栓长度和干、湿重的影响;(2)建立血瘀模型,观察赤芍总苷对血瘀大鼠血液黏度、红细胞比容、血小板聚集率和凝血时间的影响。结果(1)赤芍总苷20.0和40.0 mg.kg-1可缩短体外血栓长度(P<0.05,P<0.01),降低体外血栓湿重和干重(P<0.05,P<0.01);(2)赤芍总苷20.0和40.0 mg.kg-1可明显降低红细胞比容、血液黏度(P<0.05,P<0.01),降低血小板聚集率,延长凝血时间(P<0.05,P<0.01)。结论赤芍总苷具有抗血栓作用,其机制与保护血管内皮细胞损伤,降低血液黏度,改善血液流变性有关。

赤芍总苷对D-半乳糖衰老小鼠学习记忆及代谢产物的影响

目的 观察赤芍总苷对D 半乳糖所致衰老小鼠学习记忆及与神经介质调节相关酶及代谢产物的影响。方法 选用长期皮下注射D 半乳糖形成的衰老小鼠模型。结果 赤芍总苷对衰老小鼠的学习记忆障碍有显著的改善作用 ,穿梭试验中小鼠主动回避潜伏期和主动回避次数明显增加 ;水迷宫试验发现 ,赤芍总苷可有效提高小鼠的达岸正确率 ,减少小鼠的错误次数。赤芍总苷可显著降低衰老小鼠脑组织中单胺氧化酶 (MAO)水平 ,提高胆碱酯酶 (CHE)活性 ;并抑制脂质过氧化产物丙二醛 (MDA)含量的增加 ,提高脑组织超氧化物岐化酶 (SOD)水平。此外 ,赤芍总苷对衰老小鼠免疫功能低下及脑萎缩状态有显著的改善。

赤芍总苷对HepA肝癌小鼠肿瘤细胞凋亡的影响

目的探讨赤芍总苷对HepA肝癌小鼠肿瘤生长及肿瘤细胞凋亡的影响及其机制。方法60只健康昆明小鼠,随机分5组,分别为模型组,环磷酰胺(100mg/kg)组,赤芍总苷(240、120mg/kg)组,环磷酰胺(100mg/kg)+赤芍总苷(240mg/kg)组。复制小鼠HepA肝癌皮下移植模型后,第2天ig给药,连续给药7d,第8天处死,取肿瘤组织,计算抑瘤率,流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡率和分析细胞周期,以及免疫组化法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果赤芍总苷高、低剂量明显抑制HepA肝癌小鼠肿瘤的生长;肿瘤细胞凋亡指数增加;抑制肿瘤细胞G0/G1期比例,向S期细胞转化,凋亡率增高;下调肿瘤细胞中Bcl-2蛋白的表达,同时明显提高肿瘤细胞中Bax蛋白的表达。结论赤芍总苷对HepA肝癌小鼠肿瘤生长有明显抑制作用,并诱导肿瘤细胞凋亡,其主要机制与调节Bcl-2和Bax蛋白表达有关。

黄芪总皂苷和赤芍总苷协同抗血小板作用研究

目的:观察黄芪总皂苷和赤芍总苷(1:3)(简称芪芍双苷)的抗血小板作用。方法:芪芍双苷按100、200、400mg/kg三种剂量给药,进行了血小板聚集试验,测定了大鼠血浆中血小板α颗粒胰蛋白-14O(GMP-14O)含量及血栓素A_2(TXA_2)/前列环素(PGI_2)水平。结果:芪芍双苷三种剂量均能抑制 ADP诱导的血小板聚集,明显降低GMP-140含量,显著降低TXA_2/PGI_2比值。结论:芪芍双苷具显著抗血小板作用。

赤芍总苷对小鼠学习记忆能力的改善作用

目的 观察赤芍总苷对小鼠学习记忆能力的影响。方法 选用东莨菪碱所致小鼠记忆获得 ,环己酰亚胺所致记忆巩固 ,乙醇所致记忆再现障碍模型及戊巴比妥钠所致空间分辨障碍模型。结果 赤芍总苷显著减少上述记忆障碍小鼠受刺激时间 ,延长平台停留期 ,减少错误次数 ,并调节反应潜伏期 ;对空间分辨障碍小鼠 ,赤芍总苷具有一定增加达岸成功率 ,减少错误次数及缩短达岸时间的作用。

赤芍总苷对大鼠血液流变学的影响

目的:研究赤芍总苷对血液流变学的影响。方法:用注射肾上腺素并附加冰浴的方法复制血瘀模型,观察赤芍总苷对大鼠血液流变性的作用。结果:赤芍总苷能降低血瘀大鼠的血液粘度、纤维蛋白原含量和红细胞聚集指数,减小红细胞压积。结论:赤芍总苷对血瘀大鼠血液流变学异常有明显改善作用。

赤芍总苷对局灶性脑梗死大鼠脑组织Notch信号通路的影响

目的探索赤芍总苷对局灶性脑梗死大鼠脑组织Notch信号通路的影响。方法制备脑卒中大鼠并分为5组(模型组、赤芍总苷低剂量组、赤芍总苷中剂量组、赤芍总苷高剂量组和尼莫地平组),另设假手术组大鼠为对照组,每组20只。所有组别连续给药20d。检测各组大鼠的体质量、脑含水量及脑梗死大小以及脑组织的NICD、Hes1和Hes5的蛋白和Hes1和Hes5mRNA表达。结果各组大鼠给药前的体质量差异无统计学意义(P>0.05),治疗后,与对照组相比,模型组体质量降低(P<0.05),NICD、Hes1和Hes5蛋白表达增高(P<0.05),Hes1和Hes5mRNA增高(P<0.05);与模型组相比,赤芍总苷各组及尼莫地平组体质量增高(P<0.05),NICD、Hes1和Hes5蛋白表达均有不同程度降低(P<0.05),Hes1和Hes5mRNA均有不同程度降低(P<0.05),且呈剂量依赖性趋势。结论赤芍总苷可通过抑制脑组织Notch信号通路以治疗大鼠局灶性脑梗死。

赤芍总苷对大鼠血小板功能的影响

为了研究赤芍总苷对血小板聚集功能的影响,采用比浊法观察赤芍总苷对大鼠血小板聚集功能的作用,用放射免疫法观察对大鼠TXB2/6-keto-PGF1α、ET水平的作用,并用硝酸还原酶法测定大鼠血清中NO的浓度。结果发现,赤芍总苷能降低ADP诱导的血小板最大聚集强度,降低大鼠血浆中TXB2的浓度,同时升高血浆中6-keto-PGF1α的水平,调节大鼠血清NO/ET的平衡。实验证明,赤芍总苷有明显降低大鼠血小板聚集的作用。

赤芍总苷诱导肿瘤细胞凋亡机制的研究

目的:采用赤芍总苷(TGC,从赤芍中提取的中药单体),作用于荷瘤小鼠,较系统对TGC诱导肿瘤细胞凋亡进行观察,为TGC的开发应用提供实验依据。方法:采用SABC免疫组化法检测bcl-2、p16及原位杂交法测定c-mycmRNA表达。结果:瘤鼠造模后,采用赤芍总苷作用,实验组与模型组bcl-2、c-myc阳性表达显著性差异,下调相关基因bcl-2蛋白和c-mycmRNA表达水平,上调相关基因p16蛋白表达水平。结论:赤芍总苷诱导肿瘤细胞凋亡,其机理可能与下调bcl-2和c-myc,上调p16基因蛋白mRNA表达水平密切相关。

赤芍总苷诱导K562细胞凋亡及对线粒体膜电位和Ca^2＋的影响

目的:赤芍总苷能诱导鼠HepA和S180细胞凋亡,但赤芍总苷能否抑制K562细胞增殖及其诱导K562细胞凋亡的机制尚不明确。观察赤芍总苷诱导人红白血病细胞株K562细胞凋亡及线粒体膜电位与Ca2+水平的变化,以探讨凋亡机制。方法:实验于2007-03-02/2007-10-20在北京中医药大学细胞生化实验室,国家重点实验完成。①实验材料:赤芍总苷由西安奥晶科技发展有限公司提供,批号:060417,纯度>95%。人红白血病K562细胞株购自上海中科院细胞库。②实验方法:取对数生长期的K562细胞,培养24h后加入50mg/L赤芍总苷进行干预,光镜下观察细胞形态。MTT显色法检测25,50,75,100,150,200,400mg/L赤芍总苷对K562细胞增殖的抑制作用,以仅加入无血清培养基培养的为对照。③实验评估:采用AnnexinV/PI双标记法检测凋亡效应,罗丹明123(Rh123)染色流式检测线粒体膜电位和荧光染料Fluo-3AM流式检测K562细胞内游离Ca2+浓度。结果:①50mg/L赤芍总苷作用K562细胞24h后,出现核固缩、核碎裂和凋亡小体等形态学改变。②与对照组相比,不同质量浓度赤芍总苷能明显抑制K562细胞的增殖(P<0.01),并具有量效关系,呈时间和剂量依赖性。③细胞线粒体经Rh123染色呈现明亮绿,不同质量浓度赤芍总苷干预组荧光强度均较对照组明显减弱,膜电位水平较高。④赤芍总苷可引起细胞线粒体膜电位下降。不同质量浓度赤芍总苷组细胞内游离Ca2+浓度均升高,线粒体膜电位下降,与对照组比较差异显著(P<0.01)。结论:赤芍总苷诱导K562细胞凋亡的可能机制是通过减低细胞内线粒体膜电位及提高游离Ca2+水平,从而导致细胞凋亡。

赤芍总苷对肺癌模型大鼠抑癌相关基因表达的影响

目的:研究赤芍总苷对肺癌模型大鼠抑癌相关基因表达的影响。方法:将90只大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组[环磷酰胺,50 mg/(kg·d)]和赤芍总苷低、中、高剂量组[50、100、200 mg/(kg·d)],每组15只。除正常组外,其余各组大鼠均采用左肺叶支气管内一次性灌注致癌碘油液复制肺癌模型,造模成功后,每周周一至周五各组大鼠于背iv相应药物,正常组和模型组iv等体积生理盐水,连续16周。采用逆转录-聚合酶链反应法测定大鼠肺组织中多药耐药相关蛋白(MRP)、人多药耐药基因(MDR1)和凋亡相关基因P21、P16 m RNA的表达;采用免疫组化法测定肺组织中抑癌基因P53蛋白的表达,计算其阳性率;观察肺组织病理变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠肺组织中MRP、MDR1、P21、P16 m RNA及P53蛋白表达(阳性率为66.67%)水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,阳性对照组和赤芍总苷低、中、高剂量组大鼠肺组织中MRP、MDR1、P21、P16 m RNA及P53蛋白表达(阳性率分别为46.67%、46.67%、40.00%、13.33%)水平降低并呈剂量依赖性,且赤芍总苷中、高剂量组比阳性对照组降低程度更显著(P<0.05);赤芍总苷各剂量组间比较,各指标差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:赤芍总苷可明显抑制肺癌模型大鼠MRP、MDR1、P21、P16基因及P53蛋白的表达。

赤芍总苷注射液对大鼠局灶性脑缺血的保护作用和脑血流量的影响

目的:观察赤芍总苷(TPG)注射液对大鼠局灶性脑缺血及脑缺血大鼠局部脑血流量的影响。方法:采用栓线阻断大脑中动脉闭塞法(MCAO)建立大鼠局灶性脑缺血模型,各组动物预先注射给药2 d,并于造模前0.5 h,造模后4 h、12 h再分别给药3次。造模24 h后进行行为学评分,脑组织含水量和脑梗塞面积百分比测定及进行病理学检查,并用激光多普勒血流仪检测MCAO大鼠脑血流量。结果:模型组动物较假手术组动物出现明显的缺血性神经损伤症状,脑血流量明显减少。50、100 mg/kg赤芍总苷注射液能改善脑缺血大鼠的行为学症状、减轻脑水肿、降低其脑梗塞面积和减轻缺血所致组织病理改变;100 mg/kg TPG可明显增加MCAO大鼠缺血部位的脑血流量。结论:赤芍总苷注射液对大鼠局灶性脑缺血有明显保护作用,增加脑血流量可能为治疗作用机理之一。

赤芍总苷对人黑色素瘤A375细胞迁移及侵袭活性的影响

目的观察赤芍总苷(total paeonyglucosides,TPG)对人黑色素瘤A375细胞迁移和侵袭能力的影响,探讨TPG抑制黑色素瘤细胞迁移和侵袭的相关机制。方法体外培养黑色素瘤细胞,分别加入5、15、20、25 mg/LTPG,细胞划痕实验测定迁移力;Transwell小室侵袭实验测定侵袭活性。RT-PCR和Western bolt方法检测黑色素瘤细胞MMP-2、MMP-9和TIMP-2 mRNA和蛋白的表达。结果 TPG能显著抑制黑色素瘤A375细胞的迁移和侵袭,与对照组比较,TPG组细胞MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白表达明显下降,TIMP-2 mRNA和蛋白表达显著上升(P<0.01)。结论 TPG可通过下调MMP-2、MMP-9,上调TIMP-2,调节MMP-TIMP平衡,发挥抑制黑色素瘤细胞迁移和侵袭的作用。

赤芍总苷抗血栓作用的研究

目的探讨赤芍总苷(TPG)静脉给药抗血栓作用以及其作用机制。方法通过动静脉旁路血栓形成实验,观察TPG对血栓形成的抑制作用;建立电刺激致大鼠血栓模型,观察TPG抗血栓作用以及对血液流变学指标、凝血-纤溶系统的影响;TPG静脉注射给药5d后,测定其对小鼠凝血时间的影响;以体外法观察TPG对ADP诱导家兔血小板聚集的影响。结果TPG25、50、100mg/kg能明显抑制大鼠动-静脉旁路血栓的形成,抑制率分别为32.59%、34.33%、24.88%;TPG25、50、100mg/kg能明显延长电刺激大鼠动脉血栓形成所需的时间,所需时间分别为648.2s、651.1s、746.4s,与对照组(540.2s)比较,差异有统计学意义(P<0.05);降低血粘度,延长凝血酶原时间和部分凝血活酶时间,降低血纤维蛋白原浓度;有效延长小鼠的凝血时间;显著抑制ADP诱导的血小板聚集(抑制率分别为23.4%、37.2%、44.9%)。结论TPG具有较好的抗血栓作用,其作用机制与其能降低血粘度,延长大鼠凝血酶原时间、部分凝血活酶时间以及降低血纤维蛋白原浓度,抑制血小板聚集有着密切的关系。