不同段木基质、初加工方法及提取方法对赤芝三种灵芝酸含量的影响

以不同的段木基质栽培赤芝LZ01,以不同的初加工和提取方法处理赤芝LZ02,再采用HPLC法对不同处理下获得的子实体样品中灵芝酸A、灵芝酸B、灵芝酸C的含量进行测定。比较3种段木基质栽培发现,白栎木材栽培时赤芝LZ01子实体中灵芝酸A含量最高且3种灵芝酸总含量最高,黄栎木材栽培时灵芝酸C含量最高,3种木材栽培方式下的赤芝LZ01子实体均基本不含灵芝酸B。比较不同初加工处理方式发现,赤芝LZ02新鲜子实体中灵芝酸A的含量最高且3种灵芝酸总含量最高,晒干处理下灵芝酸B、灵芝酸C的含量最高。比较不同提取方法发现,水浴回流提取法下赤芝LZ02子实体中灵芝酸A、灵芝酸B、灵芝酸C的含量均为最高。

不同来源赤芝活性成分分析及质量评价

分别采用高效液相色谱仪、荧光分光光度计、紫外-可见分光光度计测定13批不同来源赤芝(Ganoderma lucidum)子实体的多糖、总三萜中甾醇、灵芝酸C_(2)、灵芝酸B、灵芝酸A、灵芝酸E、灵芝酮三醇、灵芝萜烯二醇以及硒的含量,并基于熵权逼近理想解排序法(technique for order preference by similarity to an idealsolution,TOPSIS)对上述测定指标进行数据分析,综合评价产品质量。结果表明,基于液相色谱分析建立的6种三萜化合物含量测定方法具有较高的灵敏度与准确度;熵权TOPSIS评价模型快速、灵敏、有效,与主成分分析评价模型结论基本一致,能全面、客观地评价赤芝药材质量,可为赤芝品质分析与综合评价提供参考。

武夷山赤芝GL8栽培子实体鉴定及其孢子粉成分检测

通过形态鉴定及ITS序列比对证实武夷山GL8栽培子实体为赤芝正品,在其ITS2区域中发现单碱基突变和插入位点。扫描电镜观察到原木栽培采收得到的GL8孢子粉纯度高,呈完整而饱满的椭圆形,而在破壁样品中可见其孢壁结构均已崩裂、破损。检测结果表明,破壁孢子粉中17种氨基酸总量可达13.04 g·100^(-1)·g^(-1),其中甲硫氨酸含量占比高达56.21%~57.64%;其粗脂肪含量高达32.1~32.4 g·100^(-1)·g^(-1),主要成分为以不饱和脂肪酸为主,包括油酸(C18∶1,61.4%)、亚油酸(C18∶2,13.3%)、棕榈酸(C16∶0,14.6%)和硬脂酸(C18∶0,4.2%)。通过临界CO_(2)流体萃取、采用气相色谱-质谱联用和高效液色谱分析,可以进一步确定孢子油中脂肪酸组分及是否存在齐墩果酸、熊果酸。

赤芝子实体新三萜化合物的结构鉴定

目的 对赤芝子实体的化学成分进行研究。方法 利用各种色谱技术进行分离 ,采用1 HNMR ,1 3 CNMR ,1 H 1 HCOSY ,HMQC和HMBC谱进行结构鉴定。结果 从赤芝子实体中分离得到 3个化合物 ,分别鉴定为 :lucidenicacidA (1) ,3β ,7β dihydroxy 4,4,14α trimethyl 11,15 dioxo 5α chol 8 en 2 4 oicacid (2 )和lucidenicacidC (3)。 结论 化合物 2为新化合物 ,命名为赤芝酸LM1 (lucidenicacidLM1 )。

赤芝中新颖杂萜-三萜杂聚体的分离纯化及其改善C2C12细胞胰岛素抵抗作用

目的赤芝(Ganoderma lucidum)在民间被用于糖尿病治疗,但缺乏数据支撑,需探索其化学成分及其是否具有抗糖尿病作用以利于临床推广。方法采用多种分离技术,如MCI gel CHP 20P、RP-18、Sephadex LH-20、硅胶柱色谱、制备薄层色谱(Preparative Thin-Layer Chromatography,PTLC)和高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)等,对云南产赤芝的低极性成分进行研究,利用一维(One Dimensional,1D)和二维(Two Dimensional,2D)核磁共振波谱(Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy,NMR)等方法鉴定化合物结构,在C2C12细胞胰岛素抵抗体外模型中研究其活性。结果从云南2个产地赤芝中分离鉴定8个杂萜-三萜杂聚体类新化合物,ganolucinins D-K(1-8),其中化合物7和8可上调胰岛素受体底物1(Insulin Receptor Substrate 1,IRS1)和蛋白激酶B(Protein Kinase B,PKB/Akt)磷酸化,8可促进C2C12细胞葡萄糖摄取。结论赤芝中可能存在一系列杂萜-三萜杂聚体类化合物,其中化合物8具有改善胰岛素抵抗潜力,可能是灵芝抗糖尿病的药效物质之一。

赤芝子实体中灵芝酸类成分的研究

自赤芝［Ｇａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍ（Ｆｒ．）Ｋａｒｓｔ．］子实体的二氯甲烷提取物中分离得到一个新的四环三萜化合物，命名为灵芝酸ＤＭ（ｇａｎｏｄｅｒｉｃａｃｉｄＤＭ，Ｉ）。根据光谱（ＵＶ，ＩＲ，１ＨＮＭＲ，１３ＣＮＭＲ，ＭＳ２ＤＮＭＲ）分析，确定其结构为Ｉ式。同时还分离得到二个已知的灵芝酸类化合物，即灵芝酸Ａ（ｇａｎｏｄｅｒｉｃａｃｉｄＡ，Ｉ）和灵芝酸Ｃ（ｇａｎｏｄｅｒｉｃａｃｉｄＣ，ＩＩ）。

赤芝孢子的三萜和甾体类成分研究

目的:研究破壁赤芝(Ganoderma lucidum)孢子中的化学成分。方法:用硅胶柱色谱法及Sephadex LH-20柱色谱法进行分离纯化,依据理化性质和光谱数据鉴定化合物结构。结果:从破壁赤芝孢子的乙酸乙酯提取物中分离鉴定了8个化合物,分别被鉴定为:灵芝酸A(Ⅰ)、甲基灵芝酸A(Ⅱ)、甲基灵芝酸B(Ⅲ)、灵芝酸C2(Ⅳ)、灵芝酸G(Ⅴ)、麦角甾-7,22-二烯-3,β5,α6β-三醇(Ⅵ)、麦角甾醇过氧化物(Ⅶ)和麦角甾-7,22-二烯-3β-十五酸酯(Ⅷ)。结论:化合物Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ和Ⅷ为首次从赤芝孢子中分离得到。

赤芝子实体中三萜化学成分的研究

自赤芝［Ｇａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍ（Ｆｒ．）Ｋａｒｓｔ］的二氯甲烷溶解部分分离得到一个新的三萜内酯化合物，命名为灵芝内酯（ｇａｎｏｌａｃｔｏｎｅ）。根据光谱（ＵＶ，ＩＲ，１ＨＮＭＲ，１３ＣＮＭＲ，ＭＳ和２ＤＮＭＲ）解析，确定其结构为Ⅰ式。同时还从赤芝子实体中分到三个已知化合物，即灵芝醇Ａ（ｇａｎｏｄｅｒｉｏｌＡ，Ⅱ），灵芝醇Ｂ（ｇａｎｅｄｅｒｉｏｌＢ，Ⅲ）和灵芝三醇（ｇａｎｏｄｅｒｍａｔｒｉｏｌⅣ）。

赤芝中灵芝酸类生物活性成分含量的测定方法

为了研究不同地区栽培赤芝及野生赤芝中灵芝酸类成分含量的差异 ,建立了赤芝中灵芝酸类活性成分含量的反相高效液相色谱 ( RP-HPLC)测定方法。该方法采用 YWG-C1 8色谱柱 ( 2 50 mm× 4 .6 mm ID,1 0μm) ,甲醇 -水 -乙酸 ( 49.5∶ 4 9.5∶ 1 )为流动相 ,流速 1 .0 m L/ min,柱温为室温 ,检测波长 2 50 nm。结果 ,灵芝酸 A( ) ,灵芝酸 C( ) ,灵芝酸 D( ) ,灵芝酸 E( ) 4种成分的线性范围分别为 0 .0 98～ 3.1 38、0 .0 91～2 .91 3、0 .0 89～ 2 .850、0 .0 89～ 2 .850μg,方法灵敏、准确 ,重复性好 ,回收率分别为 93.93%、96 .83%、93.0 1 %、90 .4 0 %。栽培赤芝和野生赤芝子实体中 4种灵芝酸成分的总含量分别为 0 .799～ 3.555、1 .6 1 9～2 .36 0 mg/ g。

赤芝G2深层发酵优化模式的研究

以菌丝体生物量为主要指标,研究了发酵培养基中不同碳源、氮源、C/N比、无机元素等营养因子和接种量、装液量、初始pH、转速等非营养因素对赤芝G2菌丝生长的影响。研究结果表明,赤芝G2规模发酵最适培养基配方为:豆饼粉2%,玉米粉3%,KH2PO40.1%和Mg SO40.05%。发酵76h,菌丝体生物量最高(1.15g/100mL);发酵62h,胞内多糖含量最高(22.15%);发酵60h,胞外多糖含量最高(3.16%)。赤芝G2菌丝深层发酵的优化条件为:起始pH自然,种子液摇瓶装量40%,规模培养装液量20%,接种量10%,发酵培养时间76h。

赤芝、紫芝三萜类成分指纹图谱的优化与比较

对高效液相色谱的色谱条件进行优化，建立灵芝三萜类成分的指纹图谱分析方法，拟定赤芝、紫芝指纹图谱的共有模式，并将其初步应用于评价赤芝与紫芝的质量差异。优化后的流动相为乙腈-2％冰醋酸（梯度洗脱），检测波长为252nm，流速为1mL／min，柱温为35℃，14批赤芝、7批紫芝共标示出29个共有峰．鉴别了3个成分（灵芝酸A、C2，G），发现灵芝酸A的峰最强；赤芝与紫芝的共有峰相对比值较接近，但紫芝的单位生药峰面积只有赤芝的5％～10％左右，说明含灵芝制剂的质量评价应采用指纹图谱与含量测定相结合的方法．采用优化后的方法获得的灵芝三萜指纹图谱表明，赤芝三萜类成分较其它文献报道多，紫芝中三萜类成分能明显检出，说明该方法准确可靠，重复性好．

赤芝子实体化学成分的研究

目的研究赤芝子实体的化学成分。方法应用多种色谱方法进行分离和纯化,并用NMR和MS等波谱方法解析其化学结构。结果从赤芝子实体的醋酸乙酯提取物中分离得到7个化合物,分别被鉴定为麦角甾-7,22-二烯-3β-醇十五酸酯(ergosta-7,22-dien-3β-yl pentadecanoate,)、麦角甾醇棕榈酸酯(ergosteryl palmitate,)、麦角甾-7,22-二烯-3β-醇(ergosta-7,22-dien-3β-ol,)、麦角甾醇(ergosterol,)、灵芝酸C2(ganoderic acid C2,)、ganodermanontriol()及邻苯二甲酸二异丁酯[1,2-benzenedicarboxylic acid bis(1-methylpropyl)ester,]。结论化合物为新化合物,化合物为从本植物中首次分离得到。

短段木灵芝优质高产菌株“赤芝6号”研究

描述了“赤芝６号”主要栽培性状与商品性状。采用光学显微镜和扫描电镜观察了担孢子，结果表明：孢子多呈卵圆形，顶端平截或钝圆锥形，大小为６．５３～８．０４μｍ×９．５５～１２．５６μｍ，孢子表面明显可见一些微小的凹陷。采用扫描电镜观察了菌肉菌丝：其骨架菌丝的骨架干直径２．６～３．９５μｍ，分枝直径１．８～２．６μｍ；缠绕菌丝大多弯曲，直径１．１～１．５μｍ。利用聚丙烯酰胺梯度浓度凝胶电泳法分析比较了“赤芝６号”与福建其他灵芝菌株的酯酶同工酶，结果表明：“赤芝６号”有１５条酶带分布在凝胶浓度８．９％～２５．６％处，其酶谱特征与其他菌株明显区别。

硬孔灵芝和赤芝孢子油的脂肪酸、角鲨烯及麦角甾醇类的比较

采用超临界CO_2流体萃取技术分别从硬孔灵芝(Ganoderma duropora)和赤芝(G.lucidum)孢子粉中萃取分离孢子油,采用气相色谱(GC)法测定孢子油(萃取条件相同)的脂肪酸成分和角鲨烯含量,用气相色谱-质谱联用选择性离子检测(GC-MS/SIM)模式测定麦角甾醇类成分和总含量。结果表明:两种孢子油中脂肪酸成分组成相似,在不同分离条件(分离I和II)下获得的样品(分别标记分离I和II得到的硬孔灵芝样品为A和B,赤芝样品为C和D)均由油酸、亚油酸、硬脂酸和棕榈酸组成,4种脂肪酸在硬孔灵芝中占检出成分的95.1%～96.3%(质量分数),在赤芝中占97.0%～97.9%(质量分数),其中硬孔灵芝A和B中两种不饱和脂肪酸(油酸和亚油酸)的相对含量分别合计为71.2%和73.1%,略低于赤芝(C和D分别合计为76.8%和77.7%);两种孢子油中均检测出开链三萜——角鲨烯,其在硬孔灵芝孢子油A和B中含量分别为0.40mg/g和0.44mg/g,在赤芝孢子油C和D中分别为0.41mg/g和0.43mg/g;两种孢子油中也均检测出至少4种麦角甾醇类成分,组成相似,其中硬孔灵芝孢子油A和B中含量分别合计为1.9mg/g和2.9mg/g,与赤芝孢子油(C和D中分别为2.4mg/g和2.7mg/g)中相近。

赤芝孢子粉三萜化学成分研究

自赤芝(Ganoderma lucidum Karst)孢子粉酸性部分分离得到一个新的四环三萜化合物,命名为ganosporeric acid A(1),根据光谱(IR,~1HNMR,^(13)CNMR和MS)分析确定其结构为Ⅰ所示。同时还分到四个已知化合物:ganoderic acid B(Ⅱ),ganodefic acid C(Ⅲ),ganoderic acidE(Ⅳ),和ganodermanontriol(Ⅴ)。这些化合物均为首次从赤芝孢子粉中得到。

赤芝子实体化学成分研究和细胞毒活性测试

目的研究赤芝子实体石油醚部位的化学成分,寻找具有抗肿瘤活性的先导化合物。方法采用硅胶、Sephadex LH-20等柱色谱以及半制备高效液相色谱等手段分离纯化,并通过理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构;采用MTT法测试分离化合物对人宫颈癌细胞的细胞毒活性。结果从赤芝子实体石油醚部位分离得到9个化合物,分别鉴定为3,7-二羟基-12-乙酰氧基-11,15,23-三羰基羊毛甾-8,22-二烯-26-酸(12-acetoxy-3,7-dihydroxy-11,15,23-trioxolanost-8,22-dien-26-oic acid,1)、灵芝三醇M(ganoderitriol M,2)、亚油酸乙酯[(10E,13E)-ethyl octadeca-10,13-dienoate,3]、亚油酸[(10E,13E)-octadeca-10,13-dienoic acid,4]、二十四碳酸(tetracosanoic acid,5)、3β-羟基-5α,8α-过氧麦角甾-6,9,22-三烯(3β-hydroxy-5α,8α-epidioxyergosta-6,9,22-triene,6)、麦角甾-7,22-二烯-3-酮(ergosta-7,22-dien-3-one,7)、过氧麦角甾醇(ergosterol peroxide,8)和麦角甾醇(ergosterol,9)。结论化合物1的波谱数据为首次报道,化合物3、4、7为首次从赤芝中分离得到。化合物2显示出中等强度的癌细胞抑制活性,其IC50为12μmol·L-1。

赤芝菌体中三萜抑菌作用研究

目的检测赤芝发酵菌体中三萜对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌以及黑曲霉和青霉的体外抑菌活性。方法管碟法。结果赤芝菌体三萜化合物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的生长均具有显著抑制作用;对枯草芽孢杆菌、青霉和黑曲霉抑制作用较弱;该三萜样品对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉和青霉的最小抑菌浓度分别为25,25,50,100和50 mg/ml。结论赤芝发酵菌体中三萜对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和青霉有明显的抑制作用。

用二维核磁共振技术研究赤芝孢子内酯A和B的结构

通过~1H-~1H,~1H-^(13)C相关谱(COSY),~1H-^(13)C远程偶合相关谱(OOLOC)及NOE二维谱(NOESY)等新的二维核磁共振技术确定了两个新化合物赤芝孢子内酯A和B的结构。

赤芝中三萜类成分及其药理作用研究进展

目的论述赤芝中三萜类成分及其药理作用的研究现状。方法查阅相关文献,对赤芝三萜类成分研究所涉及的化学成分、药理作用及构效关系等进行分析。结果三萜类为赤芝的主要成分之一,已从赤芝中分离得到100多种三萜类成分。且其结构具有多样性,使赤芝具有较广泛的药理活性,主要包括抗肿瘤作用,调节免疫系统作用,调节心血管系统作用,保肝、解毒作用,抗衰老作用等等。结论应重视从质量标准上研究赤芝三萜类成分,探讨赤芝三萜类与其药理作用的构效关系。

赤芝子实体的化学成分研究(Ⅱ)

采用硅胶及凝胶柱色谱方法从赤芝（Ganoderma lucidum（Leyss.ex Fr.）Karst.）子实体的乙醇提取物中分离得到10个化合物,通过波谱数据及理化性质分别鉴定为赤芝萜醇A（lucidumol A,1）、麦角甾醇（ergosterol,2）、麦角甾醇棕榈酸酯（ergosteryl palmitate,3）、棕榈酸（palmitic acid,4）、β-谷甾醇（β-sitosterol,5）、硬脂酸（stearic acid,6）、油酸（oleic acid,7）、α-羟基-24-烷酸（α-hydroxytetracosanoic acid,8）、2-羟基-二十四烷酸乙酯（2-hydroxytetracosanoic ethyl ester,9）以及2-羟基-二十四烷酸甲酯（2-hydroxytetracosanoic methyl ester,10）。其中,化合物9~10首次从该属植物中分离得到,4~8首次从该植物中分离得到。