超分支滚环扩增技术快速检测结核分枝杆菌感染的临床应用价值

目的建立超分支滚环扩增技术(HRCA)对结核分枝杆菌的快速检测平台。方法对60例肺结核病人,38例非结核对照组和20例健康人的痰标本进行检测;同时对鸟分枝杆菌等非结核分枝杆菌检测以评价该平台的特异性。结果 HR-CA对H37Rv IS6110基因的检测灵敏度达到740 aM,检测H37Rv菌悬液的灵敏度为200 cfu/ml。鸟分枝杆菌等非结核分枝杆菌的检测结果均为阴性。60例肺结核病人检测灵敏度(73.33%,44/60)与定量PCR相近(78.33%,47/60),显著高于涂片法(41.67%,25/60),差异具有统计学意义。结论超分支滚环扩增技术是一种简单实用,结果可靠和具有较强临床应用前景的结核菌检测技术。

超分支滚环扩增技术快速检测结核分枝杆菌感染的临床应用价值

目的建立超分支滚环扩增技术（HRCA）对结核分枝杆菌的快速检测平台。方法对60例肺结核病人，38例非结核对照组和20例健康人的痰标本进行检测；同时对鸟分枝杆菌等非结核分枝杆菌检测以评价该平台的特异性。结果HRCA对H37RvIS6110基因的检测灵敏度达到740aM，检测H37Rv菌悬液的灵敏度为200cfu／ml。鸟分枝杆菌等非结核分枝杆菌的检测结果均为阴性。60例肺结核病人检测灵敏度（73．33％，44／60）与定量PCR相近（78．33％，47／60），显著高于涂片法（41．67％，25／60），差异具有统计学意义。结论超分支滚环扩增技术是一种简单实用，结果可靠和具有较强临床应用前景的结核菌检测技术。

利用超分支滚环扩增技术检测miR-21

目的利用超分支滚环扩增(hyper-rolling cycle amplification,HRCA)技术建立一种检测microRNA的方法。方法以miR-21为研究对象,设计特异的逆转录引物及锁式探针。通过对不同浓度的模板及不同的microRNA进行检测来研究本方法的灵敏度和特异性。结果通过对反应条件进行优化,100 nmol/L的锁式探针在Taq DNA连接酶作用下46℃连接30 min,Bst DNA聚合酶作用下60℃反应50 min,可实现靶序列最大效率的扩增。该方法特异性好,最低检测浓度为10 pmol/L。结论 HRCA技术灵敏度高、特异性好,无需特殊昂贵的仪器,且简单易操作,能够应用于microRNA检测。