超声波处理对苹果花粉介导转基因的影响

为了探讨花粉介导转基因过程中附加超声波处理对苹果品种丹霞和嘎拉花粉的影响,对苹果花粉处理的缓冲液和超声波的各参数进行了选择,设置了不同的缓冲液pH值、蔗糖浓度;超声波处理功率、时间、次数等.结果表明:适合苹果花粉处理的缓冲液蔗糖浓度为10%,pH值为5.4;超声波处理功率、时间、次数等各参数对苹果花粉的萌发率和破碎率有显著影响.

超声波处理花粉介导‘黄花’梨遗传转化体系的建立

【目的】建立超声波处理‘黄花’梨花粉介导插入外源基因的技术体系。【方法】以‘黄花’梨花粉为试材,检测不同蔗糖溶液中梨花粉破损率;通过中心组合设计方法,对超声波处理功率、处理时间、间隙时间、处理次数4个因子进行优化;利用含荧光蛋白基因的表达载体pCAMBIA 1304检测转化效率。【结果】梨花粉的适宜等渗溶液为15g.L-1蔗糖溶液。超声波处理的梨花粉受体最佳参数为：超声波处理功率160~170 W,处理时间6~7 s,间隙时间7 s,处理次数7次。采用加入含GFP（green fluorescent protein）基因的pCAMBIA 1304表达载体质粒检测优化的超声波处理组合,梨花粉外源基因的插入效率为3%。【结论】研究确定了超声波处理‘黄花’梨花粉遗传转化体系。

超声波辅助花粉介导转基因方法的研究进展

超声波辅助花粉介导植物转基因方法是拥有国内自主知识产权的植物转化手段,该方法在玉米、油菜、花生等作物上的转化研究均取得积极进展。为较详尽了解国内外应用该方法进行植物转化研究的现状,针对该方法与其他植物转化方法比较所体现出的优势以及存在的问题进行了总结,以期为相关研究者提供一些参考资料,并为该方法的进一步改进完善提供依据。

超声波辅助花粉介导法获得转BtCry1Ac基因玉米的研究

为了进一步分析玉米基因功能及基因转化,并为玉米抗虫提供种质资源,利用超声波辅助花粉介导法,将抗虫基因Cry1Ac导入玉米优良自交系昌7-2中,获得大量的转基因植株。结果表明:转基因植株经过草铵膦抗性筛选、PCR检测、BT蛋白试纸条检测和室内抗虫性鉴定等分析,最后获得高抗玉米螟的转BtCry1Ac基因株系9个。培育出了高抗玉米螟的种质资源材料,同时也建立了超声波辅助花粉介导转化玉米的高效转化体系,该方法是简捷、快速有效、无基因型限制的植物转化方法。

植物非组培遗传转化方法研究的进展

在许多植物中 ,转化效率低一直是制约分子育种和基因功能研究的障碍。目前 ,在拟南芥等模式植物的研究中 ,非组培方法已成为遗传转化的主要手段 ,这些方法在其它植物中也有广阔的应用前景。本文介绍了几种较为成功的非组培遗传转化方法的应用情况和技术原理 ,并对下一步研究工作提出了建议。

一个新的重组酶系统在转基因植物外源基因删除中的应用

为了解决转基因植物可能带来的生物安全性问题,设计了一个新的位点特异性重组酶系统pLFHFGN,该系统中重组酶FLP基因由热激蛋白Hsp18.2基因的启动子控制,所有外源基因(包括重组酶基因FLP、GUS报告基因和NPTII筛选标记基因)都置于两个融合识别位点loxFRT之间.将上述重组酶系统通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导转化烟草,获得的再生植株分别通过GUS组织染色和PCR分析等方法进行鉴定.然后在37℃下热激处理转基因植株,利用GUS组织染色检测重组酶系统在转基因植株T1代幼苗中删除外源基因的效率,结果显示,该系统删除效率达到了48.2%～84.9%,说明通过重组酶系统pLFHFGN能够有效地删除转基因植物中的外源基因,这为解决转基因植物潜在的安全性问题提供了一条新的途径.

植物遗传转化方法及其在棉花品质改良育种中的应用

农杆菌介导法、花粉管通道法和基因枪法是植物遗传转化的主要方法,这些转化方法在植物基因工程育种和基因改良中起到了重要作用。这些遗传转化方法目前已经广泛应用于棉花抗虫、抗病和品质改良育种实践,并获得了抗虫、抗病等性状良好的转基因植株,有些已经进入商品化生产,取得了显著的经济效益和社会效益。本文重点综述了这3种应用较广的遗传转化方法及其在棉花抗虫、抗病和品质改良育种中的应用,并讨论了我国转基因棉花研究的进展。

植物遗传转化的替代方法及研究进展

农杆菌介导法和基因枪法是两种目前应用最广泛和最可靠的植物遗传转化方法。由于其存在一些不足,因此,需要探索可替代它们的其他植物遗传转化方法以弥补农杆菌介导法和基因枪法的缺点,使其更加适用于特定目标植物的转化事件中,转化效率也随之提高。对这些可替代的遗传转化方法进行概述,并简要介绍各种方法的优缺点及其在农作物转化中的应用情况。

转水稻NibT基因玉米植株的获得及抗病性研究

以玉米（Zea maysL.）自交系金黄96B为受体材料,供体为质粒pWM101并携带有水稻矮缩病病毒复制酶基因Nib的提前终止突变体基因NibT,采用超声波处理花粉介导植物基因转化方法将NibT-基因导入受体,经PCR检测和Southern杂交分析证实获得转基因植株,进而对T1－T3代转基因植株（株系）进行分子分析、田间抗病鉴定和农艺性状调查.逐代分子检测分析结果证明,目的基因可稳定遗传.抗病鉴定结果证明转基因植株（株系）各代抗病水平基本一致,抗病性比对照提高3级.农艺性状调查分析表明,与对照比较,转基因植株株高增加7－18cm、穗位高增高0－13 cm、穗长增加0.7－2.1 cm、穗粒数多8－35粒、百粒重增加1.1－2.6 g,转基因株系与阴性对照间、各代转基因株系相互间都差异显著（P〈0.05）;调查还发现转基因植株的株高和穗位高随着世代的增加,与对照间的差异逐代减少.研究也说明,超声波处理花粉介导植物基因转化方法是一种简捷、快速和有效的植物转化工具.

低能离子束介导转基因技术

遗传转化是基因工程的一个重要研究方向。目前，已经应用于植物转基因的方法有10种以上，常用的有农杆菌介导法、基因枪法、PEG法、花粉管通道法等。这些转基因方法各有优缺点。为了使转化技术更加完善和成热，科学家们一直在不断探索，寻求方便、高效的转化方法。

外源基因在绿豆、赤豆叶肉原生质体中的表达

目前,高等植物遗传工程的飞速发展已经使将外源基因直接引入植物细胞或原生质体中成为可能。豆科植物因为其特有的固氮功能,一直是国内外植物生理学家热衷研究的对象。近些年来,许多科研工作者都在致力于建立一些有效的转化系统(如用PEG法、电击、

农杆菌介导的浸花法（Floral—dip）存在的问题及对策

随着植物基因工程研究技术的不断深入，绝大多数具有重要经济意义的农作物品种的遗传转化方法都已建立。1998年Bechtold最早采用真空渗透法将农杆菌菌液转化拟南芥即将开花的植株，得到大量T—DNA插入突变植株，该法将早期植物花穗浸入含农杆菌菌液的液体培养基，真空处理后恢复常压，使农杆菌菌液渗入到植物组织内部从而达到遗传转化的目的。