超声激活血卟啉诱导H-22细胞凋亡的分子机制

目的从分子水平上探讨超声激活血卟啉诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制。方法接种H-22腹水瘤细胞于10只昆明系小白鼠腹腔1周后,随机取5只小鼠,抽取腹水细胞,分为对照组(CT)、血卟啉组(H)、超声组(U)和超声加血卟啉组(UH),H组和UH组加入血卟啉,每管4μl,使其终浓度为0.01mg/ml,U组和UH组分别置频率为1.8MHz、强度为2W/cm2的超声装置中声照处理1min,各实验组分别于声照后即时、1h、3h、5h取材,进行细胞涂片。以SP法进行免疫组织化学染色,检测细胞FAS/FASL的表达变化。采用χ2检验进行统计学处理。结果各组FAS的表达在处理3h后开始下降,FASL的表达在处理后1～3h均提高,表达变化有统计学意义(p<0.05)。处理5h后,FAS、FASL的表达水平开始下降。结论FAS/FASL系统参与了超声激活血卟啉引发的肿瘤细胞的凋亡诱导。

血卟啉在H-22肝癌荷瘤小鼠体内的分布

目的探讨声敏剂血卟啉衍生物在肿瘤组织中的富集情况，以便在给药后超声结合血卟啉治疗肿瘤时选择最佳的超声处理时间。方法H-22肝癌荷瘤小鼠尾静脉注射HpD后，不同时间点取材，采用荧光分光光度法测定不同组织提取液中HpD的荧光强度，研究HpD在不同组织中的分布以及代谢变化。结果给药后2h肿瘤组织以外的其他各组织内（血浆、肝、肾、皮肤、肌肉）血卟啉含量均达到其代谢过程的最高点，后逐渐下降；肿瘤组织中的HpD含量注射后不断上升，6h时达到顶峰，随后又开始下降，10～24h代谢比较缓慢，表现为肿瘤组织中对HpD的滞留作用，24h时肿瘤组织中的HpD含量高于其他各组织，48～72h趋于稳定在较低水平。结论提出了不同部位的肿瘤应选择各自适当的时间点进行超声处理。

三种肿瘤细胞对超声结合血卟啉敏感性的实验研究

实验采用频率为1．6MHz,强度为1W／cm2、3W／cm2、5W／cm2、7W／cm2的聚焦超声结合血卟啉分别对腹水型小鼠S180细胞(Sarcomal180,S180)、艾氏腹水瘤细胞(Ehrlich Ascites Tumor,EAT)及H-22肝癌细胞进行杀伤效应研究,利用台盼蓝拒染法检测处理后细胞存活率的变化。实验结果表明,不同类型的细胞对超声结合血卟啉的敏感性不同,声照条件相同时,三种细胞对 1．6MHz频率超声的敏感性依次为: S18>EAT>H-22,且对超声结合血卟啉敏感性明显大于单纯超声。无论是单纯超声组还是超声结合血卟啉组,三种细胞的存活率均随超声强度的增加而下降。

聚焦超声激活血卟啉对H-22肿瘤细胞的杀伤作用

目的研究声动力学疗法(SDT)杀伤肿瘤细胞的最佳声照处理时间点,探讨不同强度的聚焦超声激活血卟啉对H-22肝癌腹水瘤细胞的杀伤作用。方法采用荧光分光光度法测定血卟啉衍生物(HpD)在H-22肿瘤细胞内的富集时间,选择最佳声照处理时间点。采用频率为1.43 MHz,强度分别为1W/cm^2、2 W/cm^2和3 W/cm^2的聚焦超声结合血卟啉作用于H-22肿瘤细胞,于不同时间段取材,通过扫描电镜观察细胞表面的超微结构变化,并与单纯血卟啉或单纯超声处理后的细胞进行比较。结果加入HpD后45 min,肿瘤细胞内药物含量最高,作为最佳声照处理时间点。形态学观察显示:单纯血卟啉处理对H-22肿瘤细胞仅有轻微影响;单纯超声处理对细胞有一定的损伤作用,并且细胞受损程度随着超声强度的增大和取材时间的延迟而逐渐加重;超声结合血卟啉对细胞的协同杀伤效应在同等条件下显著高于单纯超声处理的细胞。结论SDT对H-22肿瘤细胞的损伤效应依赖于超声强度以及声敏剂在细胞内的含量,并且表现出一定的时间相关性变化。