超声靶向微泡破坏技术在肝细胞癌基因治疗中的应用研究进展

肝细胞癌(HCC)是常见的恶性肿瘤之一,基因治疗作为一种新型治疗手段,已经在HCC治疗中展现出巨大的潜力。近年来,超声靶向微泡破坏(UTMD)技术作为一种新型的基因递送技术,在HCC基因治疗中取得了一些重要的研究进展,从UTMD介导自杀基因、基因沉默、增加基因表达以及联合其他载体治疗等方面进行了深入研究,进而为HCC的诊断和治疗提供可靠的方法。因此,现对UTMD技术在HCC基因治疗中的应用进行综述。

微泡超声造影剂的研究进展

超声造影剂是一类能显著增强超声背向散射强度信号,提高超声成像质量的化学试剂。随着临床诊断需求不断提高,超声造影剂在超声诊断中扮演的角色也越来越重要。纳米级微泡超声造影剂的出现,为超声造影剂的发展注入了新的活力。而搭载了药物的靶向微泡造影剂,更是为治疗疾病提供了新的思路。对微泡造影剂及靶向微泡造影剂的材料、结构和应用原理进行综述。

微泡超声造影剂生物分析方法及药代动力学研究进展

微泡超声造影剂是一类能够显著增强医学超声检测信号的药物,常用于心脏、肝脏、肾脏等部位的超声检查。优化对比增强成像、提高诊断效率需要对体内微泡造影剂的药代动力学有全面了解。本文归纳总结了微泡超声造影剂常用生物分析方法及其药代动力学进展,系统阐释微泡超声造影剂在体内的吸收、分布、代谢和排泄过程,以期能够为微泡类药物的研究提供参考。

六氟化硫微泡造影剂用于超声引导经皮穿刺微波消融治疗子宫腺肌病中的作用研究

探究六氟化硫微泡造影剂用于超声引导经皮穿刺微波消融治疗子宫腺肌病中的作用。方法 本次研究的起始时间为2022年7月份,截止时间为2023年7月份,参与研究患者的数量为80名,分组方式为入院治疗先后顺序,组别:参照组以及实验组,每组40例患者,参照组:超声引导经皮穿刺微波消融治疗;实验组提供在参照组患者的治疗基础上加用六氟化硫微泡造影剂,对两组患者整体治疗所花费的时间;出现团块时间、消融效果,患者的子宫体积大小、腺肌病灶的大小、患者的月经量情况、整个经期持续的时间,期间出现并发症的机率,明确患者的生活质量。结果 在治疗效果上,实验组患者的临床症状明显更优,患者的生活质量呈现上升的趋势,出现并发症的机率呈现下降的趋势,p<0.05,而患者的月经持续时间、子宫体积、腺病灶体积以及月经量评分差异不大,p>0.05。结论 为子宫腺病患者提供六氟化硫微泡造影剂进行治疗,可以提高了患者治疗效果,降低患者出现并发症的机率,提高患者的生活质量。

动态对比增强MRA联合超声微泡造影在下肢动脉硬化闭塞症中的诊断价值

目的探讨动态对比增强磁共振血管造影(magnetic resonance angiography,MRA)联合超声微泡造影在下肢动脉硬化闭塞症中的诊断价值。方法方便选取2021年6月—2022年6月齐齐哈尔医学院附属第二医院收治的72例疑似下肢动脉硬化闭塞症患者设为研究对象,以临床综合诊断结果为金标准,明确动态对比增强MRA、超声微泡造影以及MRA联合超声微泡造影在下肢动脉硬化闭塞症发生心脑血管疾病中的诊断价值。结果以临床综合诊断为金标准,72例下肢动脉硬化闭塞症患者中,MRA联合超声微泡造影诊断灵敏度、特异度高于动态对比增强MRA,差异有统计学意义(χ^(2)=4.336、4.247,P均<0.05);MRA联合超声微泡造影诊断灵敏度、特异度高于超声微泡造影,差异有统计学意义(χ^(2)=5.263、6.844,P均<0.05);动态对比增强MRA诊断灵敏度、特异度与超声微泡造影比较,差异无统计学意义(χ^(2)=0.051、0.419,P均>0.05)。下肢动脉硬化闭塞症发生心脑血管疾病中动态对比增强MRA(AUC=0.793)、超声微泡造影(AUC=0.823)、MRA联合超声微泡造影(AUC=0.898)对下肢动脉硬化闭塞症发生心脑血管疾病有预测价值(P均<0.05)。结论动态对比增强MRA联合超声微泡造影诊断下肢动脉硬化闭塞症的符合率较高,对早期明确下肢动脉硬化闭塞症患者病情及发病部位具有积极意义。

超声微泡造影剂携带pcDNA-STC1转染人宫颈癌细胞HeLa的研究

目的 观察超声微泡造影剂携带pcDNA-STC1转染人宫颈癌细胞HeLa后增殖、转移、侵袭,血管生成以及PI3K/AKT信号通路变化。方法 利用GEPIA数据库分析宫颈癌组织STC1的表达水平、患者的预后生存期。选择2019年1-10月在我院诊治的宫颈癌患者80例作为研究对象,收集癌组织和癌旁组织,qRT-PCR检测STC1 m RNA的表达,并分析STC1 mRNA表达与患者临床病理因素的关系;HeLa细胞分组:空白对照组:HeLa细胞正常培养,不做任何处理。阴性对照组(HeLa-pcDNA-NC):5%微泡浓度+2μg空载质粒+无血清DMEM培养基。实验组(HeLa-pcDNA-STC1):5%微泡浓度+2μg pcDNA-STC1质粒+无血清DMEM培养基。MTT法及癌细胞单克隆形成数目检测细胞增殖能力;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell小室实验检测细胞侵袭能力;Matrigel体外成管实验检测细胞的血管生成能力;Western blot法检测p-PI3K、p-AKT、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)/基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素2(Ang2)的表达。结果 GEPIA数据库显示宫颈癌组织STC1的表达水平低于正常组织,且预后生存期与STC1的表达水平呈负相关;与癌旁正常宫颈组织相比,宫颈癌组织和STC1 mRNA下调,且miR-574-5p水平与STC1水平呈负相关,与肿瘤分化程度、FIGO分期、淋巴结转移有明显的相关性,与空白对照组和阴性对照组相比,实验组48 h、72 h、96 h OD值降低,细胞克隆数极少,迁移率降低,细胞侵袭数减少,血管生成能力下降,MMP-2、MMP-9、VEGF、Ang2、p-PI3K、p-AKT蛋白表达下调(P <0.05)。结论 超声微泡造影剂携带pcDNA-STC1转染能够明显抑制人宫颈癌细胞HeLa增殖、转移、侵袭和血管生成,其作用机制可能是通过抑制PI3K/AKT信号通路实现的。

不同途径注射质粒微泡对超声微泡破碎技术介导EGFP基因在兔骨缺损处转染的影响

目的探讨超声微泡破碎技术介导增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因在兔骨缺损处转染时,不同途径注射质粒微泡混悬液对转染效率及局部组织的影响。方法3月龄新西兰大白兔10只,制备右尺骨骨缺损模型,按照随机数字表法分为静脉组和断端间组(n=5)。静脉组和断端间组造模后第10天分别经耳缘静脉或骨缺损断端间向兔体内注射携带EGFP基因的质粒微泡混悬液(0.3 ml/kg)。在超声频率1 MHz,超声强度1.0 W/cm^(2),占空比20%条件下,对两组骨缺损部位超声辐照1 min,进行EGFP基因转染。在基因转染后1周时处死兔,于骨缺损处获取标本制作切片,荧光染色观察各组EGFP表达情况。采用病理图像分析软件分析计算平均光密度。HE染色观察断端间软组织病理特点。结果静脉组和断端间组均观察到绿色荧光蛋白表达。断端间组平均光密度高于静脉组,差异有统计学意义(0.0345±0.0028 vs 0.0004±0.0001,P<0.05)。表达绿色荧光蛋白的细胞主要为骨骼肌细胞,各组未见细胞坏死征象。结论超声微泡破碎技术介导EGFP基因在兔骨缺损处转染时,其效率受不同途径注射质粒微泡混悬液的影响,骨缺损断端间直接注射优于静脉注射。

超声靶向微泡破坏技术介导基因转染在乳腺癌治疗中的研究进展

乳腺癌全球发病率逐年上升,严重威胁女性健康。近年来,随着生物技术的快速发展,基因治疗在乳腺癌中的研究日益增多。超声靶向微泡破坏作为一种潜在的基因或药物递送系统,既可作为载体,又可增加生物屏障的通透性,从而提高肿瘤的治疗效果,已广泛应用于乳腺癌基因治疗研究。考虑到常规基因载体的固有缺陷,研究者倾向将其与超声靶向微泡破坏技术联合应用以提高基因转染的安全性和有效性。本文对超声靶向微泡破坏技术及其与常规基因载体联合介导基因转染治疗乳腺癌的研究进展做一综述。

超声联合阳离子微泡造影剂体外增强基因转染

目的探讨超声介导自制阳离子微泡破坏、增强基因转染的效果,并与普通脂质微泡对比,寻找一种更可靠、完善的基因载体工具。方法采用水浴机械震荡法,加入DC-胆固醇制备阳离子微泡,观察其物理特性并检测其体外载基因能力。将微泡和质粒DNA加入人脐静脉血管内皮细胞后分为6组,观测不同微泡浓度对细胞存活率的影响,应用荧光显微镜观察增强型绿色荧光蛋白的表达,流式细胞仪检测基因转染率,MTT法分析细胞存活率。结果自制阳离子微泡形态规整、分散度好,最大载基因率为39.7%。超声联合阳离子微泡能够增强基因转染,与普通脂质微泡组相比差异有统计学意义;随着微泡浓度增加,细胞损伤增大。结论采用自制阳离子微泡可在体外实现较高效率的基因转染。

低频超声联合微泡造影剂增强脂质体介导pEGFP-N1基因转染体外前列腺癌细胞

目的探讨低频超声联合微泡造影剂增强脂质体介导增强型绿色荧光蛋白质粒(pEGFP-N1)转染前列腺癌细胞的可行性,并对超声微泡浓度参数进行优化。方法将前列腺癌PC-3细胞悬液分为空白对照组、超声组、微泡组、微泡+超声组、脂质体组、脂质体+微泡组、脂质体+超声组、脂质体+微泡+超声组,其中脂质体+微泡+超声组根据微泡体积浓度不同分为(0、10%、20%、30%、40%和50%)6个亚组。经超声辐照,24h后用荧光显微镜观察细胞中基因表达情况,并用流式细胞仪检测转染率。结果脂质体+微泡+超声组基因转染效率最高,与其他组比较差异均有统计学意义(P均<0.05);在脂质体+微泡+超声亚组中,微泡浓度为20%亚组基因转染率最高。结论低频超声联合微泡能有效增强脂质体介导pEGFP-N1基因在体外前列腺癌细胞中的转染率,20%是体外基因转染前列腺癌细胞的最佳微泡浓度。

超声联合微泡造影剂携p53基因转染宫颈癌HeLa细胞的实验研究

目的探讨超声联合微泡造影剂介导野生型p53(wtp53)基因转染宫颈癌HeLa细胞的可行性、效率性及作用效果。方法以前期实验所筛选的超声辐照参数(300kHz,0.5W/cm2,30s)为实验条件,将HeLa细胞分为质粒组(A组)、质粒+超声组(B组)、质粒+超声+微泡组(C组)、质粒+脂质体组(D组)、空白对照组(E组),分别进行处理。转染24～48h后,收集各组细胞,荧光显微镜观察细胞基因转染效率、RT-PCR检测p53mRNA表达,流式细胞仪检测细胞周期,MTT检测细胞增殖抑制情况。结果荧光显微镜下见C、D组均有较多绿色荧光蛋白表达的细胞(转染率分别为14.15%和10.86%),B组仅有极少的荧光细胞(0.81%);A组和E组无荧光表达;RT-PCR结果显示,C组和D组均可见特异性p53电泳条带,C组的电泳条带的光密度比值高于D组(P<0.05);流式细胞仪测细胞周期显示,转染野生型p53基因能使细胞周期出现明显的G1期阻滞,C、D组与E组相比差异有显著性(P<0.05);MTT测定结果显示C组细胞生长明显受抑,且随时间的延长,抑制程度逐渐增强。结论适当浓度的微泡和优化的超声辐照条件可增强基因转染效率,野生型p53基因能使HeLa细胞产生G1期阻滞,抑制宫颈癌细胞生长。

应用超声微泡造影剂联合经尿道钬激光膀胱肿瘤切除术的效果及对患者生存时间的影响

目的:探讨应用超声微泡造影剂联合经尿道钬激光膀胱肿瘤切除术的效果及对患者生存时间的影响。方法:选取2016年5月至2017年5月我院收治的膀胱肿瘤患者142例,根据治疗方法不同分成两组,对照组应用经尿道钬激光膀胱肿瘤切除术进行治疗,研究组应用超声微泡造影剂联合经尿道钬激光膀胱肿瘤切除术进行治疗,对比两组患者治疗效果及预后。结果:治疗后,研究组患者的手术时长、术中出血量、住院时间、留置尿管的时间以及膀胱冲洗时间明显低于对照组(P <0. 05)。研究组术后3个月、6个月、1年生存率明显高于对照组(P <0. 05)。治疗后,研究组患者的闭孔神经反射、尿道狭窄、膀胱痉挛以及血钠水平降低等并发症发生情况明显少于对照组(P <0. 05)。结论:膀胱肿瘤患者采用超声微泡造影剂联合经尿道钬激光膀胱肿瘤切除术的治疗效果良好,术后复发率、并发症的发生率低,创伤小,明显延长了患者的生存时间,值得临床推广与应用。

低频超声联合载顺铂超声微泡造影剂对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨低频超声联合载顺铂超声微泡造影剂对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响及机制。方法体外培养人卵巢癌OVCAR-3细胞,随机分为对照组、超声组、顺铂组、超声联合顺铂组和超声联合顺铂微泡组。各组常规培养,顺铂组、超声联合顺铂组加入顺铂至终浓度为10μg/m L;超声联合顺铂微泡组加入载顺铂超声微泡造影剂至顺铂终浓度为10μg/m L;超声联合顺铂组、超声联合顺铂微泡组同时予低频超声处理3 min。超声组仅予低频超声处理3 min,对照组不予任何处理。培养24 h,采用CCK-8法检测各组细胞增殖能力;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;Western blotting法检测各组Bax、Bcl-2和Caspase-3的相对表达量。结果细胞增殖能力:超声联合顺铂微泡组<超声联合顺铂组<顺铂组<超声组<对照组,组间两两比较P均<0.05。细胞凋亡率:超声联合顺铂微泡组>超声联合顺铂组>顺铂组>超声组>对照组,组间两两比较P均<0.05。Bax、Caspase-3的相对表达量:超声联合顺铂微泡组>超声联合顺铂组>顺铂组>超声组>对照组;Bcl-2的相对表达量:超声联合顺铂微泡组<超声联合顺铂组<顺铂组<超声组<对照组;组间两两比较P均<0.05。结论低频超声联合载顺铂微泡造影剂可抑制卵巢癌细胞增殖,诱导其凋亡,其效果强于低频超声联合顺铂、单用低频超声或顺铂;其机制可能与提高细胞内Caspase-3、Bax表达,降低Bcl-2表达有关。

超声联合微泡造影剂介导FD500转入两种人前列腺癌细胞

目的初步探索超声联合造影剂SonoVue辐照PC3和LNcap细胞的适宜条件,并比较超声辐照对两种细胞膜通透性和存活率的影响。方法设不同的声强、辐照时间和造影剂浓度,采用1 MHz、连续声波于37℃水浴中分别辐照PC3和LNcap细胞。以流式细胞仪测量细胞发光率,以台盼蓝拒染法测算细胞存活率。结果两种细胞的适宜辐照条件均为声强0.9 W/cm2、辐照时间40 s、造影剂浓度20%。辐照声强为1.5 W/cm2、辐照时间20 s、SonoVue浓度为20%时,PC3细胞的发光率高于LNcap细胞;在其余辐照条件下,PC3细胞的发光率小于或者等于LNcap细胞。PC3细胞的存活率在所有的辐照条件下均高于LNcap细胞(P<0.05)。结论优化各项辐照参数可以安全有效地增加细胞膜的通透性。

化疗栓塞术联合微泡造影剂结合高强度聚焦超声治疗原发性肝癌患者血清FT_(3)、rT_(3)、VEGF水平变化及意义

目的探讨化疗栓塞术联合微泡造影剂结合高强度聚焦超声治疗原发性肝癌患者血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT_(3))、反三碘甲状腺原氨酸(rT_(3))、血管内皮生长因子(VEGF)水平变化及意义。方法选取2018年1月—2019年6月收治的原发性肝癌64例,根据患者治疗意愿非随机化分为对照组30例和观察组34例。对照组接受化疗栓塞术联合高强度聚焦超声治疗,观察组接受化疗栓塞术联合微泡造影剂结合高强度聚焦超声治疗。选取同期健康体检者30例设为健康组。比较肝癌组治疗前与健康组、观察组与对照组治疗前后血清FT_(3)、rT_(3)、VEGF水平,同时比较临床疗效、并发症及随访生存情况。结果观察组与对照组治疗总有效率比较差异无统计学意义(P>0.05)。肝癌组治疗前的血清FT_(3)水平低于健康组,血清rT_(3)、VEGF水平高于健康组(P<0.01)。与治疗前比较,观察组与对照组治疗后的血清FT_(3)水平明显升高,血清rT_(3)、VEGF水平明显降低(P<0.01)。观察组与对照组治疗后并发症发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组中位生存期为11.5(7.2~20.6)个月,死亡22例,存活12例;对照组中位生存期为8.1(5.5~19.7)个月,死亡24例,存活6例。两组累积生存率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论化疗栓塞术联合微泡造影剂结合高强度聚焦超声治疗原发性肝癌可延长生存期。血清FT_(3)、rT_(3)、VEGF水平变化与患者预后相关。

不同包膜材料的超声造影剂微泡的瞬态空化阈值研究

该文研究2种商用超声造影剂Optison和SonoVue微泡的空化声压阈值随微泡体积比浓度和激励超声脉冲宽度变化的规律。结果显示,①随着微泡浓度或激励超声脉冲宽度的增加,2种微泡的空化声压阈值均会降低;②相比Optison微泡,SonoVue微泡具有更薄的磷脂包膜和更高的单位体积空化核数目,因此具有更低的空化声压阈值和更强的空化强度。通过选择恰当的微泡特性参数和超声激励参数,可以有效调节和利用造影剂微泡的声空化效应,为超声医学成像和治疗的临床应用提供优化方案。

超声造影定量分析技术联合CD34分子表达对于甲状腺癌的诊断价值

目的:探讨与分析超声造影定量分析技术联合CD34分子表达对于甲状腺癌(thyroid carcinoma)的诊断价值。方法:研究对象共78例,均为2017年8月至2022年1l月来本院接受治疗的甲状腺结节病人,所有患者都给予超声造影定量分析,采用免疫组化法检测CD34分子表达水平并进行诊断价值分析。结果:在78例患者中,病理诊断为甲状腺良性结节患者46例(甲状腺良性肿瘤组)、甲状腺癌患者32例(甲状腺癌组)。甲状腺癌组的峰值强度(peak intensity,PI)、曲线下面积(area under curve,AUC)都明显高于甲状腺良性肿瘤组(P<0.05)。甲状腺癌组的CD34分子表达阳性率为75.00%,明显高于甲状腺良性肿瘤组的26.09%(P<0.05)。在78例患者中,超声造影定量分析技术联合CD34分子表达检测判断为甲状腺癌31例,甲状腺良性肿瘤47例,超声造影定量分析技术联合CD34分子表达检测诊断甲状腺癌的敏感性与特异性分别为96.88%(31/32)和100.00%(46/46)。结论:超声造影定量分析技术联合CD34分子表达对于甲状腺癌的诊断具有很高的价值,可有效反映病灶的血流特征与微血管密度,有很好的应用效果。

微泡超声造影剂辅助高强度聚焦超声治疗子宫腺肌症的有效性和安全性分析

目的分析微泡超声造影剂辅助高强度聚焦超声(HIFU)治疗子宫腺肌症的有效性和安全性。方法选取2020年7月至2021年7月宜春市妇幼保健院妇产科收治的80例子宫腺肌病患者作为研究对象,所有患者随机编号后按照奇偶数分为对照组与研究组,每组40例。两组均应用HIFU治疗,研究组在术前注射微泡超声造影剂辅助治疗。比较两组手术指标、临床指标、不良反应发生情况、女性性生活指数量表(FSFI)评分、Olson婚姻质量问卷(ENRIC)评分。结果研究组治疗时间、高能聚焦时间、出现团块灰度时间均短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组消融分数比较差异无统计学意义。治疗后,研究组子宫体积小于对照组,月经量少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组病灶体积、痛经程度评分比较差异无统计学意义。研究组治疗区域疼痛发生率为52.50%,低于对照组的80.00%,差异有统计学意义(P<0.05);两组臀部疼痛、神经疼痛、腿部疼痛、肛门坠胀、皮肤不适、下腹疼痛、阴道血性分泌物、发热、骶尾部疼痛、腹胀发生率比较差异无统计学意义。治疗后3个月,两组FSFI、ENRIC评分均高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05),但组间比较差异无统计学意义。结论微泡超声造影剂辅助HIFU治疗子宫腺肌症可缩短高能聚焦时间、出现团块灰度时间及治疗时间,改善患者临床症状,降低术中不良反应发生率,提高患者性生活及婚姻质量,值得临床推广应用。

高强度聚焦超声联合超声微泡造影剂在肝癌治疗中的研究进展

原发性肝癌是消化道常见的恶性肿瘤。在全世界范围内，原发性肝癌发病率占恶性肿瘤的第5位．致死率占第3位。据统计，每年大约有695900患者死于原发性肝癌[1]。由于其发病隐匿、恶性程度高、容易局部浸润、肝内转移和远处转移的特点，导致大部分患者就诊时已处于中晚期，失去了手术切除的最佳时机。即使勉强行姑息性减瘤术．术后的高复发和早转移也导致肝癌的远期治疗效果极差。因此，对于中晚期手术效果较差的肝癌，

超声微泡造影剂携增殖1阻断基因短发夹RNA抑制大鼠肝纤维化的研究

目的探讨超声辐照携载短发夹RNA干扰增殖1阻断(block of proliferation1,BOP1)基因的超声微泡造影剂治疗大鼠肝纤维化的可行性。方法成功构建大鼠肝纤维化模型,将40只肝纤维化大鼠随机分为携载质粒的超声微泡组(BOP1-shRNA+US/MB)、携载质粒的常规超声组(BOP1-shRNA+US)、单纯质粒组(BOP1-shRNA)及空白对照组(CON),每组10只。BOP1-shRNA+US/MB组及BOP1-shRNA+US组分别经股静脉注入1mL微泡溶液及1mL携载单纯质粒的生理盐水后,行肝区超声辐照。所有分组大鼠在干预21d后行磁共振扩散加权成像检查后麻醉脱颈处死,取肝脏组织行苏木精-伊红(HE)染色观察病理变化。应用Western blot法检测BOP1蛋白在大鼠肝脏组织中的表达,检验BOP1的沉默效果。结果 BOP1-shRNA+US/MB组的表观弥散系数(ADC)值高于其他3组,而指数表观弥散系数(EADC)值低于其他3个组(P<0.05)。HE染色示BOP1-shRNA+US/MB组肝脏细胞排列尚整齐,汇管区纤维组织增生,见少量炎性细胞浸润,小叶结构完整,其肝纤维化程度低于其他组。Western blot结果显示BOP1-shRNA+US/MB组大鼠肝脏组织的BOP1蛋白表达敲减成功。结论超声辐照携载BOP1基因短发夹RNA的微泡造影剂可成功治疗大鼠肝纤维化,可为肝纤维化的精准靶向治疗提供新的理论依据。