超大孔离子交换制备色谱分离纯化高活性凝血因子Ⅷ

建立了一条从人血浆中分离高活性凝血因子Ⅷ(FⅧ)的纯化工艺。基于FⅧ和介质孔径的尺度比及其对蛋白质活性影响的分析,设计了以超大孔离子交换制备色谱为核心步骤的新型分离纯化工艺。分别进行超大孔离子交换色谱与传统离子交换色谱的条件优化,并对优化工艺所得产品进行了活性检测(底物显色法)和纯度检测(高效凝胶过滤和凝胶电泳)。结果表明,超大孔介质结构不但可以有效地保护蛋白质大分子结构,而且能够大幅度地提高制备色谱的传质速率,从而得到具有高凝血活性的FⅧ产品。FⅧ在超大孔制备色谱过程中的回收率(85%)比传统离子交换制备色谱高4～5倍,产品比活高达154 IU/mg。此外,还研究了超大孔介质的再生程序,采用5个柱体积的1 mol/L NaOH低流速清洗色谱柱,保证了色谱工艺的稳定性。本纯化工艺步骤简单,重现性好,易于放大生产。

制备型氨基酸离子交换色谱的动态特性

为描述氨基酸离子交换色谱的动态过程，考虑传质机理、非线性离子交换平衡关系以及各种形式的进料函数，提出了色谱的机理模型及其数值解法。理论预测的洗脱峰与实验现象比较吻合，证明该理论模型可以指导氨基酸离子交换色谱的优化和设计。

氨基酸制备色谱—Dpsc离子交换树脂柱分离发酵L-缬氨酸

从苯乙烯、甲基丙烯酸甲酯、二乙烯苯合成了具有磺酸、羧酸功能基团的新型Dpsc离子交换树脂,并对其表征了选择性、分离度、理论等板高度。用新型Dpsc离子交换树脂在制备规模从发酵缬氨酸液中分离制备了L-缬氨酸,应用0.2mo·L-1NH4Cl和0.5mol·L-1NH4OH,流速6.0mL·min-1,温度25℃,梯度洗脱,减少保留体积4/5。

一种极性离子交换毛细管色谱柱及其制备方法

摘要 本发明提供一种极性离子交换毛细管色谱柱及其制备方法：原料包括离子化合物单体，交联剂，引发剂，致孔剂；将离子化合物单体和交联剂在毛细管中进行聚合反应，加入致孔剂及引发剂，制备出极性离子交换毛细管色谱柱。本发明利用极性离子化合物单体聚合提供亲水作用的固定相，并采用新型极性交联剂，溶解离子化合物单体，解决了离子化合物单体和传统疏水的交联剂二甲基丙烯酸乙二酯单体互溶难的问题。

乙烷桥键介孔材料的制备及其在反相液相色谱中的应用

以1,2-二(三甲氧基硅基)-乙烷为硅源、聚氧乙烯-聚氧丙烯-聚氧乙烯三嵌段共聚物(EO20PO70EO20,P123)为模板剂、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)为共模板剂、乙醇为共溶剂,在酸性条件下合成了一种乙烷桥键有序介孔材料(PME)。研究表明,该PME具有高的比表面积(1 152m2/g)、高度有序的孔结构(二维六方相)、窄的孔径分布及表面光滑的球形形貌。将该PME不经化学改性直接用作反相高效液相色谱固定相,能够有效分离5种多环芳香族化合物(苯、萘、联苯、菲和芘)。

大孔吸附树脂结合半制备型高效液相色谱分离纯化栝楼果皮中的水溶性化学成分(英文)

本文使用大孔吸附树脂结合半制备型高效液相色谱,对栝楼果皮中的水溶性化学成分进行了分离纯化。栝楼果皮水溶性粗提物经大孔吸附树脂粗分为4个部分,每一部分分别使用半制备型高效液相色谱进一步纯化,最终得到3种核苷酸及6种碱基,其化学结构经紫外光谱及核磁共振鉴定为:胞嘧啶、尿嘧啶、次黄嘌呤、鸟嘌呤、黄嘌呤、腺嘌呤、鸟苷、6-异次黄嘌呤核苷及腺苷。本文对于栝楼果皮中水溶性化学成分进行了较为系统的研究,建立起来的分离纯化方法具有简单、快速、经济和易于放大的优点,适合于天然产物中强极性活性成分的大规模制备。

中压制备色谱法分离黑果枸杞中2个矮牵牛素花色苷及其对胰脂肪酶的抑制活性

为了快速制备较高纯度的黑果枸杞花色苷,黑果枸杞花色苷粗提物首先用大孔树脂-中压制备色谱进行纯化,再用凝胶树脂-中压制备色谱分离获得2个花色苷单体,采用超高效液相色谱-串联质谱(ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)、核磁共振氢谱(1H nuclear magnetic resonance,1H NMR)对其结构进行鉴定,并对纯化物的胰脂肪酶抑制活性进行评价。结果表明:用D101大孔树脂-中压制备色谱对黑果枸杞花色苷进行纯化,所得纯化物中P1、P2的相对含量分别为18.22%和30.77%,继续采用Sephadex LH-20联合中压制备色谱分离纯化可得到相对含量分别为84.16%和81.48%的两个黑果枸杞花色苷组分P1和P2,经UPLC-MS/MS和1H NMR鉴定,2个花色苷化合物分别为矮牵牛素-3-O-芸香糖(反式-对香豆酰基)-葡萄糖苷-5-O-葡萄糖苷和矮牵牛素-3-O-芸香糖(反式-对香豆酰基)-5-O-葡萄糖苷。P1和P2具有较好的胰脂肪酶抑制活性,其IC50值分别为0.250 mg/mL和0.224 mg/mL,且远低于花色苷粗提物和大孔树脂纯化物。研究为黑果枸杞花色苷利用提供一定基础。

一种两性离子电色谱柱及其制备方法

摘要 本发明提供一种两性离子电色谱柱及其制备方法，原料由两性离子单体、交联剂、离子化合物单体、引发剂和致孔剂组成；将两性离子单体、交联剂和离子化合物单体在引发剂和致孔剂存在下于硅烷化的毛细管中进行聚合反应，制得两性离子电色谱柱。

正相液相制备色谱分离纯化三七叶甙中人参皂甙单体Rb_3

以三七叶甙粗提物为原料,采用大孔吸附树脂法和正相液相制备色谱法建立了分离纯化三七叶甙中人参皂甙单体Rb3的制备工艺.首先采用D-101B大孔吸附树脂对原料进行精制,得到Rb3含量为50%的三七叶甙精制物.进而通过正相液相制备色谱柱(φ80mm×1000mm)分离纯化三七叶甙精制物,通过考察流动相组成、流速和上样量等因素对分离效果的影响,确定了适宜的工艺操作条件:流动相为正丁醇-乙酸乙酯-水溶液[体积比为2:1:1(上层)],流速为35～40mL.min-1,上样量为10g.在该工艺条件下得到了人参皂甙单体Rb3,纯度达95%.本方法简便、分离效率高、重复性好,为人参皂甙类新药的开发奠定了基础.

RP-HPLC制备色谱法分离淡豆豉中高纯度异黄酮苷元

淡豆豉经大孔树脂柱色谱初步分离纯化,采用RP-HPLC制备色谱法,乙腈-水-冰醋酸(35∶65∶1,v/v/v)为流动相,流速3·0ml/min,检测波长260nm。结果表明,在30min内快速分离到大豆素、大豆黄素和染料木素,产物纯度均达到99%以上。

中压色谱快速制备红花中红花黄色素的含量测定

[目的]测定中压色谱快速法制备的红花中红花黄色素的含量。[方法]采用水提取和大孔吸附树脂柱色谱得到粗提物,以此粗提物直接进行中压制备色谱分离,经2步分离得到纯度较高的红花黄色素,然后采用紫外可见分光光度法测定红花黄色素的含量。[结果]5个主要色谱峰中峰面积最大的是HSYA,而保留时间分别为30.930(1号峰)、32.803(2号峰)、36.981(3号峰)和40.316 min(4号峰)的4个色谱峰紫外最大吸收都在240和403 nm左右,紫外光谱图与HSYA一致,根据文献推测为红花黄色素类成分;经测定红花黄色素含量为75.14%。[结论]首次采用中压色谱从红花大孔树脂粗提物中分离红花黄色素,该方法省时、简便、高效,值得推广应用。

中压制备与大孔树脂联用快速分离羟基红花黄色素A

用水超声法提取红花(Carthamus tinctorius L.)中红花黄色素A,提取液经D-101大孔吸附树脂色谱柱进行粗分,所得水及体积分数30%的乙醇洗脱物用中压制备色谱进行两次分离纯化,所得产物经高效液相色谱分析,羟基红花黄色素A纯度为95.968%。该方法省时、简便、高效,值得推广应用。

蛋白质制备色谱的研究

研究了蛋白质纯化制备的二种运行模式 .其一 ,在色谱柱超载下纯化制备蛋白质模式 ,并成功地用离子交换色谱纯化制备了大豆中的胰蛋白酶 ,用反相液相色谱纯化了细胞色素C ;其二 ,用溶质 溶质顶替色谱纯化制备了核糖核酸酶 A 。

制备色谱法在纯化甜茶苷工艺中的应用

研究了从甜茶叶中纯化甜茶苷的制备工艺。首先用沸水从甜茶叶中提取甜茶苷,提取3次,每次1 h。再利用HP-20大孔吸附树脂对甜茶苷粗提物进行预纯化,以90%乙醇为洗脱液,洗脱6倍柱体积;浓缩去除乙醇后,用D-941阴离子交换树脂脱色,水洗并干燥得到甜茶苷粗产品,纯度为68.6%。最后甜茶苷粗产品经制备色谱纯化后,得到纯度为97.9%的甜茶苷,色谱条件为流动相V甲醇∶V水=70∶30,流速10 mL/min,上样量200 mg。

分子印迹聚合物的制备及孔结构研究

以N 叔丁氧羰酰 L 色氨酸和N 叔丁氧羰酰 L 酪氨酸为印迹分子 ,分别采用光引发聚合和热引发聚合制备了分子印迹聚合物 ,并对聚合物的手性识别能力进行了色谱评价 .结果表明 ,制备的分子印迹聚合物对印迹分子具有特异性的吸附作用 ,光引发聚合的N 叔丁氧羰酰 L 色氨酸的印迹聚合物对印迹分子的选择性因子达到 2 .318,热引发聚合的N 叔丁氧羰酰 L 酪氨酸对印迹分子的选择性因子为 1 373 进一步研究了分子印迹聚合物的孔结构 ,发现光引发聚合的分子印迹聚合物与空白聚合物的孔结构差别比热引发聚合的分子印迹聚合物与空白聚合物的差别更为明显 .对印迹分子洗脱前后的印迹聚合物的孔结构研究进一步表明 ,印迹分子存在于不同类型的孔中 .

新型联萘酚杂化介孔硅胶的制备及其性能研究

利用3-异氰基丙基三乙氧基硅烷（ICPTES）与联萘二酚合成联萘酚单硅酯,首次在酸性条件下利用联萘酚单硅酯与1,2-三乙氧基硅基乙烷（BTSE）作为共同硅源,以阳离子表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）和聚环氧乙烷-聚环氧丙烷-聚环氧乙烷三嵌段共聚物P123为共模板剂,合成出粒径3-5μm,平均孔径约5 nm的新型联萘酚杂化介孔硅胶。应用于联萘类衍生物的分离研究,结果显示该固定相机械强度较好,在15 min内对5种联萘类衍生物能够达到基线分离,并且对联萘类衍生物的分离性能优于商品化硅胶柱。

一种高效液相色谱手性固定相

一种高效液相色谱手性固定相，其特征在于：该手性固定相是以键合在介孔骨架中的（1R，2R）-环己二胺作为手性选择剂的，含（1R，2R）-环己二胺的有机-无机杂化介孔材料。本发明制备过程简单；手性官能团（1R，2R）-环己二胺是以共价键的方式键合在材料的骨架中，

一种高效制备河豚毒素（TTX）方法的研究

为了获得大量高纯度的河豚毒素TTX,利用 D201大孔树脂层析、超滤、离子交换层析、分子筛层析、反相制备液相色谱等方法,从假睛东方NC072(Fugu pseudommus)肝脏中分离纯化得到TTX晶体,得率为81.1%.获得的TTX晶体利用电喷雾电离质谱(ESI-MS)及核磁共振谱(NMR)进行结构验证,用高效液相色谱(HPLC)进行纯度分析定量,其纯度为99.5%.

微电渗流毛细管原位柱的制备及性能考察

采用二元致孔剂原位聚合的方法制备了一种新型微电渗流毛细管原位柱。与三元致孔剂制柱方法相比 ,具有制备过程简单、重复性好、能够方便地通过改变致孔剂配比来改变柱床的孔径和孔结构的特点。得到的毛细管柱内部结构均匀 ,通透性好。通过对改变不同致孔剂配比所制备的原位柱的孔结构特征及电渗流情况考察 ,及对柱长和柱径与电渗流的关系的探讨 ,发现制备的原位柱在较高 pH值和较高的有机改性剂浓度条件下 ,电渗流均能保持在较低值 。